甘草酸对酒精性肝损伤大鼠脏器的保护作用:18α-与18β-甘草酸配比的影响

探讨了不同配比的18α-与18β-甘草酸(Gly)对酒精性肝损伤大鼠重要脏器组织形态学的影响。健康雄性SD大鼠,随机分组,即正常对照组、模型对照组、阳性药物对照组(水飞蓟宾)、7个给药组(18α-Gly与18β-Gly不同配比组,浓度为10.83 mg/kg;配比为10:0,8:2,6:4,5:5,4:6,2:8,0:10)。给药4周后,摘取各组大鼠的肝脏、肾脏及脾脏等重要组织,称重,计算脏器指数,进行常规HE染色和油红O染色,光镜下观察不同给药组大鼠脏器的病理特征变化。结果显示,18α-Gly与18β-Gly最佳配比为2:8时能显著降低呼吸消化系统中的脏器指数,极显著降低运动系统中骨骼肌指数,明显升高脑指数;明显降低心脏指数和脾脏指数。配比为4:6和2:8时减轻肝细胞脂肪变性并降低肝脏内脂质堆积;配比小于或等于4:6时肾小球炎症减轻,毛细血管袢清晰,玻璃样变减少;配比为4:6时脾脏内界面红白髓分界清楚。综上,18α-Gly与18β-Gly改善酒精引起的脏器损伤的最佳配比为4:6和2:8。     

18α、18β-甘草酸单体抗酒精性肝损伤作用的比较研究

本文研究了18α、18β-甘草酸单体抗酒精性肝损伤作用。SD大鼠随机分为4组,分别为正常组,模型组,18α-甘草酸组,18β-甘草酸组。除正常组外,各组灌胃给予40%酒精,给药组分别灌胃给予18α-甘草酸和18β-甘草酸,每天给药一次,持续4周。于第4周,进行口服葡萄糖耐量实验(OGTT)。给药结束后,将所有大鼠麻醉处死,检测血清和肝脏中的生化指标,并进行肝组织病理学观察。与模型组相比,18α-甘草酸和18β-甘草酸单体对肝功能及抗氧化指标均有显著性改善作用;18β-甘草酸对糖、脂质、蛋白质的代谢具有显著性调控作用;病理切片结果显示,18α-甘草酸和18β-甘草酸均对肝细胞具有较好的保护作用。因此,18α-甘草酸和18β-甘草酸单体对酒精性肝损伤均有较好的保护作用,其中18β-甘草酸在调节糖、脂质及蛋白质代谢方面的作用优于18α-甘草酸。     

红米多酚对体外碳水化合物消化和吸收的影响

本研究对红米麸皮中多酚进行了提取,并通过筛选大孔树脂及对应洗脱剂浓度确定了纯化红米多酚的条件,鉴定了红米多酚的主要成分,探究了红米多酚对碳水化合物在小肠消化吸收过程中涉及的消化酶活性以及葡萄糖吸收的影响。结果表明,大孔树脂HPD400A对红米多酚具有较高的吸附率与解吸率,乙醇浓度70%可达到红米多酚解吸率0.97。红米多酚的主要成分为原花青素。红米多酚对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、麦芽糖酶、蔗糖酶活性均有抑制作用,红米多酚浓度越高,抑制作用越强。红米多酚对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、蔗糖酶、乳糖酶活性抑制的IC50分别为3.61μg/m L、2.81 mg/m L、5.48 mg/m L、6.55 mg/m L。红米多酚对离体小肠葡萄糖吸收同样存在抑制作用,红米多酚浓度越高,抑制作用越强,浓度为2.01 mg/m L时红米多酚对葡萄糖吸收的抑制率达72.32%。     

红松松球鳞片多酚对α淀粉酶和α葡萄糖苷酶的抑制作用

本文研究了红松松球鳞片多酚对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并采用Lineweaver-Burk双倒数法分析了其动力学性质。结果表明,红松松球鳞片多酚对α-葡萄糖苷酶的抑制作用略弱于阳性对照阿卡波糖,二者的半数抑制浓度分别为713.94μg/m L和623.73μg/m L;对α-淀粉酶的抑制作用明显不及阳性对照阿卡波糖,二者的半数抑制浓度分别为1902.91μg/m L和865.96μg/m L。动力学分析结果显示红松松球鳞片多酚对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用均为非竞争性抑制类型。     

鹿茸血酶解肽对脂多糖诱导的H9c2大鼠心肌细胞损伤的保护作用

为研究鹿茸血酶解肽对脂多糖(LPS)诱导H9c2大鼠心肌细胞损伤的保护作用,本研究利用LPS刺激H9c2细胞建立损伤模型。选用卡托普利为阳性对照药。MTT法测定不同浓度(25、50、100、200、400μg/m L)的鹿茸血酶解肽对H9c2细胞增殖抑制活性的影响;酶联免疫法测定细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量。并分析鹿茸血酶解肽的氨基酸组成。结果表明,与模型组比较,不同浓度(25、50、100、200、400μg/m L)的鹿茸血酶解肽均可显著抑制受损伤的H9c2增殖和TNF-α、IL-6、IL-1β的释放(p0.05),模型组的TNF-α、IL-6、IL-1β释放量分别为:531.05、185.41、70.03pg/m L,在200μg/m L质量浓度下,鹿茸血酶解肽对上述三种炎症因子释放的抑制作用最显著(p0.001),其释放量分别为:357.93、148.69、62.72pg/m L。对LPS诱导H9c2细胞损伤具有保护作用的鹿茸血酶解肽中富含赖氨酸,含量占总氨基酸组成的17.81%。以上结果说明鹿茸血酶解肽可以抑制受损伤的H9c2细胞增殖,同时减少炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β的释放,通过抑制炎症因子的分泌来发挥其对LPS诱导的H9c2细胞损伤的保护作用。     

桂花多酚对TNF-α诱导下HUVEC炎症反应保护作用的研究

通过建立体外肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)炎症损伤反应模型,研究桂花多酚纯化组分1、2、3对炎症细胞的活性(MTT)、活性氧(ROS)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和黄嘌呤氧化酶(XOD)活性影响;以10μg/L TNF-α诱导HUVEC产生炎症反应,加入6000μg/L、3000μg/L、300μg/L和30μg/L桂花多酚纯化组分1、2、3,研究桂花多酚纯化组分1、2、3的浓度及其组成对炎症细胞保护作用的影响。结果表明,当桂花多酚纯化组分2、3浓度为300~3000μg/L、组分1浓度为3000μg/L时,可显著提高由TNF-α诱导的HUVEC细胞活力和SOD酶活性(p0.05),显著抑制炎症细胞中活性氧(ROS)含量和XOD酶活性(p0.05),具有显著抗炎效果。     

鳕鱼蛋白酶解肽不同分子量组分抗炎活性的比较研究

本研究比较了鳕鱼蛋白酶解肽(Cop protein hydrolytic peptide,CPHP)不同分子量组分对细胞炎症因子释放的抑制作用。鳕鱼蛋白经复合蛋白酶酶解制备得到鳕鱼蛋白酶解肽(CPHP),并进一步超滤得到三个不同分子量组分CPHP1(5000 u)、CPHP2(3000 u)和CPHP3(3000~5000 u)。用LPS诱导RAW264.7细胞炎症因子释放为模型,分别采用Griess法和ELISA分析NO和TNF-α、IL-1β、IL-6等细胞炎症因子的含量。结果表明,CPHP不同分子量组分对LPS(500μg/m L)所致的RAW264.7细胞生长抑制均有显著保护作用(p0.05),其保护作用随CPHP不同分子量组分的浓度升高而逐渐增强;CPHP和CPHP1的保护作用强于CPHP2和CPHP3。CPHP不同分子量组分对LPS(1μg/m L)诱导RAW264.7细胞NO、IL-1β、IL-6和TNF-α等炎症因子释放均有显著的抑制作用(p0.05),其抑制作用随CPHP不同分子量组分的浓度升高而逐渐增强;CPHP和CPHP1的抑制作用强于CPHP2和CPHP3。总之,CPHP不同分子量组分对LPS所致的细胞生长抑制均有显著的保护作用(p0.05),对LPS诱导的细胞炎症因子的释放均有显著抑制作用(p0.05);CPHP和CPHP1的细胞保护作用和炎症因子释放抑制作用均强于CPHP2和CPHP3的。     

山莓叶中有效成分的分离鉴定及其生物活性研究

本文以山莓叶乙醇提取物为研究对象,通过溶剂萃取、硅胶柱层析、结晶等方法进行分离纯化。采用核磁共振(NMR),质谱(MS)、红外光谱法(IR)及与文献对比的方法对其分离的单体进行结构鉴定。利用刃天青96孔板微量稀释法、MTT法研究单体化合物的抑菌及抗肿瘤活性。研究结果表明:从山莓叶中分离纯化物经结构鉴定分别为:三萜化合物类2α、3β、23α-三羟基-12-烯-28-乌苏酸(1)和黄酮类化合物山奈酚-3-O-β-D-(6’’-对羟基桂皮酰基)-葡萄糖苷(2);抑菌实验表明化合物1对供试的大肠杆菌、痢疾志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌最低抑菌浓度分别为:15.6μg/m L、15.6μg/m L、31.25μg/m L、15.6μg/m L,化合物2的最低抑菌浓度分别为:31.25μg/m L、62.5μg/m L、62.5μg/m L、62.5μg/m L。化合物1对Hep G2、MCF-7、OVCAR3的半数抑制率(IC50)分别为:34.2μM、60.43μM、62.3μM。化合物1具有很好的抑菌和较好的抗肿瘤活性。而化合物2对Hep G2、MCF-7、OVCAR3细胞的抑制作用不明显。     

茉莉酸甲酯对烟草α-淀粉酶抑制剂的诱导作用

研究了不同浓度的茉莉酸甲酯(MeJA)对烟草α-淀粉酶抑制剂诱导的时间及浓度效应。在斜纹夜蛾取食不同浓度的MeJA诱抗处理的烟草叶片1～3d后,对中肠α-淀粉酶活性进行了检测。结果显示,0.01,0.1,1.0,4.0mmol/L和10.0mmol/L5种浓度的MeJA处理烟草后,烟叶α-淀粉酶抑制剂含量明显增加,而4.0mmo1/L MeJA诱抗处理48h时诱导烟草产生的α-淀粉酶抑制剂活性最强。离体检测结果表明,斜纹夜蛾取食MeJA处理的烟草叶片后,中肠α-淀粉酶活性降低。     

莲子红衣多酚对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

采用分光光度法测定了不同条件下莲子红衣多酚对α-葡萄糖苷酶活性抑制作用的影响,在单因素实验基础上运用L_9(3~4)正交法得到莲子红衣多酚对α-葡萄糖苷酶活性抑制作用的优化条件。研究结果显示,在pH值为6.8,质量浓度为1.50 g/L,反应时间为20 min时,莲子红衣多酚对α-葡萄糖苷酶活性的抑制率最高,可达67.99%±1.79%。莲子红衣多酚对α-葡萄糖苷酶的抑制作用类型为反竞争性抑制,抑制常数为0.24 g/L。     

大豆胚轴中大豆皂甙的提取及其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

从大豆胚轴提取总糖甙，以C18柱层析法和高效液相色谱法（HPLC）分离纯化各类大豆皂甙，并以比色法测定大豆皂苷单体对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。大豆皂苷具有很强的α-葡萄糖苷酶抑制作用。其中B类、E类和DDMP皂苷的抑制作用为最强，其半抑制浓度（IC50）值为10μmol/L～40μmol/L；A类皂苷的抑制作用则较弱。大豆皂苷是α-葡萄糖苷酶抑制剂，经常食用可能有助于延缓糖尿病患者餐后血糖的持续升高。     

纳豆菌糖肽对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用

为考察纳豆菌糖肽(BNGP)对正常状态及脂多糖(LPS)激活状态巨噬细胞的免疫调节作用,本文用不同浓度的BNGP单独处理或LPS和不同浓度的BNGP共同处理RAW264.7巨噬细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖作用,中性红吞噬试验检测吞噬能力,Griess试剂检测细胞培养上清液中NO含量,酶联免疫分析法(ELISA)检测细胞培养上清液中细胞因子(IL-1β、TNF-α)、促炎介质(PGE2)含量,Western Blot检测COX-2和i NOS蛋白表达水平。试验结果表明:BNGP在62.5~500μg/m L浓度范围内能提高正常状态的RAW264.7巨噬细胞的代谢活力,增加NO、IL-1β、TNF-α、PGE2的分泌量,提高COX-2和i NOS的表达量,高浓度(125μg/m L)能增强巨噬细胞的吞噬能力;当细胞处于LPS激活状态时,BNGP在62.5~500μg/m L浓度范围内能抑制IL-1β、TNF-α、PGE2的分泌,浓度为500μg/m L时可抑制NO的产生及i NOS的表达,高浓度(125μg/m L)则能下调COX-2的表达。     

丁香乙酸乙酯相抑制LDL中赖氨酸、色氨酸氧化修饰的研究

低密度脂蛋白(LDL)所含的色氨酸(Trp)、赖氨酸(Lys)发生氧化修饰是导致动脉粥样硬化(AS)形成的重要因素。为反映丁香乙酸乙酯相(EAFC)对LDL氧化过程中Trp、Lys修饰的抑制作用,本文首先对LDL氧化评价孵育体系中氧化剂Cu SO4及底物LDL浓度进行优化;进而以荧光为主要指标对这种抑制效果进行了评价。结果表明,选定CuSO_4浓度1.25、25μmol/L与LDL浓度500μg/m L为配比做后续实验。20μg/m L EAFC能抑制Trp降解导致的荧光淬灭,抑制作用显著高于1μg/m L阳性对照(2,6-二叔丁基对甲基苯酚,BHT)(p0.01)。3μg/m L EAFC能抑制高反应活性醛修饰Lys,10μg/m L EAFC能显著抑制Lys与4-HNE共价结合(p0.01)。15μg/m L EAFC能有效抑制Lys与MDA交联,抑制效果强于1μg/m L BHT。15μg/m L EAFC能显著抑制脂褐素形成(p0.01)。本文为后期解析EAFC抑制LDL氧化修饰作用方式、抑制氧化LDL与清道夫受体之间识别等作用机理提供参考。     

赤霉素对法麦制麦特性的影响

研究了一定浓度的硫酸锌配合不同浓度的赤霉素处理对麦芽生长代谢以及麦芽品质的影响.结果表明,当赤霉素处理浓度为0.10mg/L时,麦芽中有机锌含量最高可达150.9μg/g:赤霉素提高了绿麦芽的呼吸强度和各种酶活性;提高了成品麦芽的α-淀粉酶和β-淀粉酶活性;影响了麦芽中糖类和蛋白质的含量;赤霉素不同程度地提高了麦芽的酿造品质.     

清咽润喉双华李凉果的研制及功效评价

本文以双华李果胚为原料,采用响应面优化四种中草药(金银花、甘草、胖大海、薄荷)提取浓缩液的复配比,结合凉果传统加工工艺研发一种具有清咽润喉功效的双华李凉果,以脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞为模型,通过对炎症因子(TNF-α、IL-lβ、IL-6、PGE_2、NO)分泌的影响评价其清咽润喉效果。结果表明,四种中草药提取浓缩液的最佳复配浓度分别为:金银花56 mg/m L、甘草59 mg/m L、胖大海61 mg/m L、薄荷105 mg/m L。在炎症反应中,一定浓度的样品均能使炎症因子TNF-α、IL-lβ、IL-6、NO的分泌显著降低(p0.05),而对PGE_2的分泌没有显著性影响(p0.05);当浓度达到为50 mg/L时的抑制抑制作用最强,对TNF-α、IL-lβ、IL-6、NO的抑制率分别为54.42%、69.14%、38.50%、27.17%,说明研制的双华李凉果能够抑制炎症因子的分泌,具有清咽润喉功效。     

基于RAW264.7细胞模型的不同茶类抗炎功能特性

茶叶根据经典加工工艺不同分为红茶、绿茶、青(乌龙)茶、白茶、黄茶、黑茶。为探讨不同加工工艺形成的不同茶类的抗炎功能特性,本研究以云南大叶种绿茶、红茶、普洱黑茶、金观音乌龙茶、福鼎大白白茶、君山银针黄茶为材料。采用硝普化钠法和脂多糖诱导RAW264.7巨噬细胞为体外炎症模型评价抗炎活性。结果发现,绿茶、白茶及黄茶对一氧化氮(NO)的清除能力较强,半抑制浓度(IC50)值在99.27~104.83μg/m L范围内;在六种茶类中,黄茶对脂多糖诱导RAW264.7细胞产生炎症反应的抑制作用最强,其抑制NO产生的IC50值为398.13μg/m L,在浓度为500μg/m L时,其对肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)的抑制率分别为69.25%、87.68%;黄茶可在基因转录和翻译水平上,显著下调i NOS基因的转录和翻译。相关性分析表明,茶多酚含量与清除NO的IC50值、抑制细胞产生NO的IC50值、TNF-α以及IL-6产生量均呈显著负相关。表明六种茶类均具有抗炎活性,黄茶对促炎症因子(NO、TNF-α、IL-6)的抑制效果最佳,可通过下调i NOS基因的转录和翻译水平,减少NO产生,从而发挥抗炎功效。     

硫辛酸对高糖诱导小鼠RIN-m5F细胞保护作用的机制

探究α-硫辛酸(α-LA)对高糖诱导RIN-m5F细胞的保护机制。RIN-m5F细胞分为对照组(11 mmol/L葡萄糖)、葡萄糖损伤组(22 mmol/L或44 mmol/L葡萄糖)、α-LA干预组(上述3个葡萄糖浓度+200μmol/Lα-LA),分别检测细胞内活性氧自由基(ROS)、丙二醛(MDA)水平、总抗氧化能力(T-AOC)及超氧化物歧化酶(SOD)活性;BAX、BCL-2、GSK-3βm RNA表达水平;细胞线粒体膜电位及蛋白印迹法检测GSK-3β和p-Ser9 GSK-3β蛋白质水平。结果表明,与糖损伤组相比,200μmmol/Lα-LA显著降低胞内ROS水平,分别降低30%和83%;增强细胞SOD活性及T-AOC能力,降低MDA积累;上调抗凋亡因子BCL-2 m RNA表达水平,下调促凋亡蛋白质BAX m RNA表达水平,提高细胞线粒体膜电位。此外,α-LA能够下调GSK-3βm RNA表达水平,提高p-Ser9 GSK-3β蛋白质水平,表明α-LA对高糖诱导RIN-m5F细胞的抗氧化和抗凋亡保护作用与调节GSK-3β有关。     

大黄抑制食源性致病菌的活性成分研究

研究了大黄对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果,初筛的结果显示大黄醇提物对这3种菌均有较强的抑菌作用,并发现其中抑菌作用最强的物质分布在大黄氯仿段萃取物中。利用UPLC-MS-MS分析大黄氯仿段萃取物,发现大黄氯仿段萃取物的主要成分分别是大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素甲醚和大黄酚。在这五种化合物中,大黄酸对大肠杆菌和沙门氏菌具有最强的抑菌效果,对大肠杆菌和沙门氏菌的最小抑菌浓度分别为125μg/m L和250μg/m L,最小杀菌浓度分别为250μg/m L和500μg/m L,大黄素对于金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌效果,最小抑菌浓度和最小杀菌浓度分别为62.5μg/m L和125μg/m L。     

高效液相色谱法测定酪蛋白组分

以Sino Chrom 300A C8柱为分离柱,对高效液相色谱法测定酪蛋白组分进行了研究。结果表明,以水(含0.1%TFA)和乙腈(含0.1%TFA)分别为流动A相和B相,采用3号梯度洗脱程序,在流速1m L/min、柱压12.3MPa、柱温40℃、检测波长214nm、自动进样4μL条件下,αs-CN、κ-CN、β-CN被有效分离,峰面积稳定性好,加样回收率高;当αsCN、κ-CN、β-CN的浓度分别为3.75g/L、3.85g/L和1.3g/L时,峰面积与进样量呈良好的线性关系。     

苍耳叶提取物对猕猴桃溃疡菌的抑制作用研究

以猕猴桃溃疡菌为研究对象,考察了苍耳叶提取物对该菌的抑制作用及抑菌机理。试验结果表明,苍耳叶的乙醇提取物对猕猴桃溃疡菌的抑菌活性最强,其最低抑菌浓度(MIC)为50μg/m L;浓度高于100μg/m L时,对溃疡菌细胞壁的完整性造成破坏,引起猕猴桃溃疡菌菌内分子如糖、蛋白质、核酸外泄,从而达到抑菌、杀菌的作用。