恒场电泳检测DNA双链断裂及其应用

应用普通恒场琼脂糖凝胶电泳检测受γ射线照射后小鼠胸腺细胞ＤＮＡ双链断裂。在一定条件下，该法可以获得与脉冲凝胶电泳相似的结果。用此法观察了离体照射小鼠胸腺细胞ＤＮＡｄｓｂ修复作用，发现该法可以检测到ＤＮＡ“梯状”带，可做为一研究细胞凋亡的新方法。     

电离辐射致DNA双链断裂研究方法及统计模型

DNA既是生命物质中信息的载体,也是辐射生物效应最主要的靶分子.电离辐射通过射线的直接作用和间接作用引起DNA分子的多类型损伤,其中DNA双链断裂(Double-strand breaks,DSB)是辐射引起的各种生物效应中最重要的原初损伤之一,成为辐射生物学研究的重点.目前DSB研究的主要方法包括拉曼光谱技术、原子力显微镜、单细胞凝胶电泳、脉冲场凝胶电泳、γH2AX分析技术、早熟染色体凝集等,研究DSB的统计模型包括随机断裂模型、Moment法、Tsallis熵模型、平均分子量法,在此均得到总结,最后探讨了DSB辐照热点的研究前景.     

加速12C6+离子照射诱发人肝癌细胞SMMC-7721的DNA双链断裂

重离子为高传能线密度(LET)辐射,在引起肿瘤细胞失活上有更大的相对生物学效应。DNA的双链断裂在细胞辐射损伤中是极其重要的,其最终导致细胞的失活。本实验研究检测细胞DNA的双链断裂(DSB),以探讨细胞失活的机理。用脉冲场凝胶电泳方法结合溴乙锭染色的荧光扫描技术,定量测定^12C^6 锈导人肝癌细胞SMMC-7721 DNA的DSB剂量效应关系。结果发现,DNA片段释放百分比随吸收剂量的增加而增加。     

辐射诱导IEC-6细胞GSK3β信号转导途径的激活与细胞凋亡的关系研究

探讨了辐射诱导IEC-6细胞GSK3β信号转导途径的激活与细胞凋亡的关系，以及调控GSK3β信号转导途径对γ辐射诱导IEC-6细胞凋亡的保护作用。分别用RT-PCR检测GSK3β和caspase-3mRNA表达，Western-blot法检测GSK3β蛋白质磷酸化水平，放射活性法检测GSK-3β蛋白酶活性，caspase-3分光法检测caspase-3酶活性，Hoechst 33342荧光染色法检测细胞凋亡，琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段化。发现6Gyγ射线照射可导致IEC-6细胞GSK3β基因表达上调，蛋白磷酸化水平降低，激酶活性增高；同时可使GSK3β介导的下游蛋白激酶caspase-3基因表达上调及酶活性增强；GSK3β和caspase-3特异性抑制剂预处理IEC-6细胞可使γ辐射诱导的IEC-6细胞凋亡细胞百分率降低，染色体DNA片段化消失。研究结果表明γ辐射可通过激活GSK3β从而进一步激活细胞凋亡相关蛋白激酶分子caspase-3，最终导致IEC-6细胞凋亡。抑制GSK3β和caspase-3激活可减轻6Gyγ辐射导致的IEC-6细胞凋亡，实验证实了GSK3β与caspase-3在γ辐射致肠上皮IEC-6细胞株损伤过程中的重要作用。     

CpG-ODN对辐射所致人小肠隐窝上皮细胞微核形成的影响

研究了CpG—ODN（CpG oligonucleotides）对非免疫细胞人小肠隐窝上皮细胞（HIEC）照射后微核变化的影响。采用MTT法检测不同浓度的CpG—ODN对HIEC的细胞毒性,检测CpG—ODN预处理后的HIEC细胞在不同剂量辐射后微核率和微核细胞率的变化。结果表明,CpG—ODN在0．00—1．25μmol／L浓度范围内对细胞的存活率没有显著影响,CpG—ODN能显著降低微核率和微核细胞率。实验结果提示CpG—ODN对HIEC有较小的毒性且能减少细胞辐照后的微核形成,具有一定的辐射保护作用。     

白藜芦醇对肺癌A549细胞的放射增敏作用及其机制研究

摘要采用MTT法检测不同浓度白藜芦醇对肺癌A549细胞的毒性;克隆形成实验测定白藜芦醇对A549细胞增殖抑制作用;碱性单细胞凝胶电泳实验（彗星实验）检测细胞DNA受损情况;采用Westernblot法检测白藜芦醇与辐射联合作用对抑制凋亡蛋白Survivin的影响。结果表明,白藜芦醇对肺癌A549细胞的抑制作用随着白藜芦醇浓度升高及时间延长而增加：白藜芦醇与辐射联合作用可以明显增加辐射所致A549细胞的DNA损伤（p〈0．05）,并降低克隆形成率及抑制凋亡蛋白Survivin的表达。表明白藜芦醇对A549细胞具有放射增敏作用,且放射增敏作用可能是通过抑制Survivin蛋白的表达实现的。     

枯草芽孢杆菌耐辐射菌株对紫外线的耐受性及其机理初探

为探讨枯草芽孢杆菌对紫外线的耐受性，以枯草芽孢杆菌耐辐射菌株及其来源菌株枯草芽孢杆菌黑色变种为研究材料，以不同剂量紫外线辐照处理。采用平板计数法比较两种菌株的存活率，通过脉冲场凝胶电泳分析两种菌的DNA双链断裂（Double strand breaks，DSBs）o发现，对数期耐辐射菌株对紫外线的耐受性明显大于原菌株，耐辐射菌株DSBs水平小于对应的原菌样品。耐辐射菌株对紫外线的耐受性较强，其DNA双链断裂程度与辐照剂量及辐照样品密切相关。     

氚水β射线照射对大鼠胚胎脑细胞增殖的影响

采用流式细胞术、MTT方法、细胞色素C还原法、逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)及脉冲电场凝胶电泳方法(PFGE),分别检测大鼠受0～3.7×106Bq/mL氚水(HTO)作用后神经元细胞的凋亡、增殖抑制、超氧阴离子(O2-)释放、p53基因表达与DNA断裂损伤,观察氚水β射线照射对体外培养大鼠胚胎脑细胞的损伤效应。结果显示,随着氚水放射性浓度的增大,神经元细胞的凋亡率、增殖抑制率与p53mRNA表达量均增大,DNA断裂损伤程度随之加重,而O2-释放量随之减少。这说明氚水β辐射能使神经元细胞DNA双链断裂、促进其p53基因表达引发细胞凋亡及减少O2-释放来抑制增殖。     

SOD对γ射线辐照枯草芽孢杆菌的保护效应研究

为了考查外源SOD对γ射线辐照微生物的保护效应,选用不同剂量γ射线辐照外源SOD处理过的枯草芽孢杆菌营养体,采用平板计数法考查辐照后的细胞存活率,黄嘌呤氧化法检测胞内SOD活性,脉冲场凝胶电泳分析DNA双链断裂水平的变化.结果表明,不同浓度外源SOD均可使γ射线辐照后的细胞存活率明显增加;营养体胞内残留SOD活性与外源SOD浓度以及辐照剂量之间的关系没有明显的变化规律;外加SOD使细胞DNA.双链断裂水平(PR)显著下降.并且细胞存活率和PR值随外源SOD浓度以及辐照剂量变化的趋势基本一致.研究结果显示外源SOD在γ射线辐照中对枯草芽孢杆菌有保护效应,且SOD的保护效应与其浓度呈一定相关.     

应用单细胞微凝胶电泳技术检测成纤维细胞的放射敏感性

应用单细胞微凝胶电泳（SCGE）技术以及噻唑蓝（MTT）比色法检测辐射诱发的成纤维细胞系AT5BIVA和GM637的初始DNA双链断裂数及断裂拍的修复与细胞放射敏感性之间的关系。结果表明,AT5BIVA细胞系的放射敏感性显著高于GM637。两种细胞系的初始DNA双链断裂数均随剂量的增加而增加,呈显著的剂量效应关系,在给定的剂量点,辐射诱发的AT5BIVA细胞系的初始DNA双链断裂数显著高于GM637。AT5BIVA纱对辐射诱发的DNA双链断裂的修复能力小于GM637。结果提示,辐射诱发的初始DNA双链断裂数及断裂后的修复与细胞的放射敏感性均有一定的相关性,作为细胞放射敏感性预测指标具有很大的应用潜势。     

电离室充不同气体的饱和特性实验研究

对体积为1 L的球形不锈钢高气压电离室,用实验方法测量了5种气体（Ar、N2、He、Kr和Xe）的饱和特性.本文主要介绍了测量方法及其结果.结果表明,在相同的充气压力下,He气最容易饱和,Xe气最不容易饱和,Ar气和N2气的饱和电压相近.     

HALS对PE辐射致色的影响

研究了受阻胺类光稳定剂（HALS）对聚乙烯（PE）辐射致色的影响，发现各种HALS均能减少PE的辐射致色，在辐照剂量低于100kGy时，添加五甲基HALS的PE的黄度比添加相应的四甲基HALS的PE的黄度略高；而在辐照剂量高于100kGy时，结果相反。并且发现，在相同的辐照剂量下，添加聚合物型HALS的PE的黄度比添加相应的黄体型HALS的PE的黄度低一些。还测定了添加HALS的PE在辐照后烷基自由基，羰基的生成。发现，在辐照剂量较大时，添加TMPM的PE的烷基自由基相对浓度大于添加PMPM的烷基自由基相对浓度，在辐照剂量较低时，含五甲基基HALS的PE薄膜的羰基指数比含四甲基HALS的PE薄膜的小，而在辐照剂量较高时，结果相反，认为HALS通过清除自由基抑制PE的辐射致色。     

荧光法检测辐射所致肿瘤细胞DNA链断裂与3-氨基苯甲酰胺对重接修复的抑制

采用简化的DNA解旋荧光法(FADU),检测HeLa S3细胞在受到γ射线照射后的DNA链断裂,在10 Gy以内,剂量效应曲线呈线性。ADP-核糖基转移酶特异性抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3AB),在无毒浓度下可以抑制HeLa S 3细胞DNA链断裂重接,并可降低H3La S3细胞照后活存率。3AB单独与HeLa S 3细胞保温,不造成DNA链断裂,同时未见对细胞有毒性反应。3AB可以作为有希望的放疗增敏剂深入研究。     

聚氧化乙烯水凝胶膜的辐射接技研究(英)

为了得到一种理想的水凝胶伤口敷料,研究了应用电子束辐射接枝了不同比例聚乙烯醇（PVA）的聚氧化乙烯（PEO）水凝胶膜的制备和该膜的理化特性。实验结果显示,PEO接枝水凝胶膜的凝胶分数主要依赖于辐射剂量和聚合物浓度。而其溶胀度与辐射剂量聚合物的浓度;混合比例和分子量密切相关。该膜的抗张强度和断裂伸长率则明显地依赖于辐射剂量和聚合物的混合比例。实验发现,比例为7：3的20wt％PEOE-30接枝水凝胶膜与其它PEO接枝水凝胶膜和单纯PEOE-30水凝胶膜相比具有较好的理化特性,例如韧性,较少气泡,适度的凝胶分数,溶胀度和断裂伸长率,尤其它的较高的抗张强度。实验结果表明,PVA在辐射接枝后能够通过降低PEO水凝胶膜的溶胀度而改善PEO水凝胶膜的机械强度。     

放射性核素在地下水中的迁移

本文叙述了放射性核素~(137)Cs、~(90)Sr-~(90)Y和~(144)Ce-~(144)Pr在地下水和岩石间的分配系数K_d的实验室测定方法,研究了放射性核素浓度、岩石种类及岩石粒度对K_d值的影响。测定了这三种核素模拟在三万吨TNT地下核爆炸空腔充满水时的浓度下的分配系数K_d值,计算了它们在地下水中的迁移速率。     

人血T·B淋巴细胞转化过程的辐射敏感性比较研究

离体人血经~(60)Coγ线照射后,用ConA刺激T细胞转化;LPS+DS共同刺激B细胞转化;以~(14)C-缬氨酸掺入实验。用液体培养法和扩散盒培养技术,分别观察T·B细胞在转化、增殖过程中的抑制程度。结果表明:受照射后T细胞比B细胞受抑明显,反映T细胞比B细胞的辐射敏感性高。     

聚氧化乙烯水凝胶膜的辐射接枝研究

为了得到一种理想的水胶伤口敷料,研究了应用电子束辐射接枝了不同比例聚乙烯醇（ＰＶＡ）的聚氧化乙烯（ＰＥＯ）水凝胶膜的制备和该膜的理化特性。实验结果显示。ＰＥＯ接枝不凝摹凝胶分数主要依赖于辐射剂量和聚合物浓度。而其溶胀度与辐射剂量聚合物的浓度,混合比例和分子量密切相关。该膜的抗张强度和断裂工度则明显地领事于辐射剂量和聚合物的混合比例。实验发现,比例为７：３的２０ｗｔ％ＰＥＯＥ－３０接枝不凝胶膜与其它     

溶剂对甲基丙烯酸三丁基锡酯与甲基丙烯酸甲酯辐射共聚的影响

以FT-IR为定量工具,分别测定了以环己烷、甲苯、氯仿、正丁醇、吡啶为溶剂20℃时甲基丙烯酸三丁基锡酯(TBTM)与甲基丙烯酸甲酯(MMA)辐射共聚的共聚参数。观察到表征TBTM活性的参数In1/r_2与溶剂的偶极矩成一线性关系;溶剂的极性对TBTM与MMA共聚的反应活性有影响。溶剂极性增加,TBTM反应活性下降。     

武汉市水体中天然放射性水平调查

本文介绍了武汉市江河、湖泊和饮用水中 U、Th、~(226)Ra、~(40)K 水平的调查结果,其范围值分别为:U,(7.01—10.08)×10~(-3)Bq/L;Th,(3.61—13.92)×10~(-4)Bq/L,~(226)Ra,(2.90—4.38)×10~(-3)Bq/L;~(40)K,(5.86—28.68)×10~(-2)Bq/L。枯水期江河水中天然放射性核素含量明显高于平水期,同一水期中放射性核素分布比较均匀,均在正常本底范围内。     

两种改进型氡采样器温,湿度影响试验

本文介绍温、湿度变化对两种改进型被动式活性炭累积氡采样器吸附性能的影响。结果表明,温度(T)在15—35℃,相对湿度(R.H.)在33%—88%范围内,温、湿度变化对带扩散控制管采样器吸附氡量没有显著影响;对带烧结金属过滤器的采样器吸附氡量也只有较轻微的影响;而作为对照的常规采样器的影响则是显著的。