~(18)F-氟代脱氧葡萄糖影响HepG2肝癌细胞增殖的初步研究

为研究18F-FDG对HepG2肝癌细胞增殖的影响,探讨其作用机制,以0—92.5×106 Bq/mL的18F-FDG作用HepG2肝癌细胞后6、12和24 h,用倒置显微镜观察、流式细胞术和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测细胞增殖、凋亡、活性氧含量及P53基因表达。结果表明,18F-FDG能诱导HepG2肝癌细胞的凋亡,并随18F-FDG放射性浓度的增大,细胞凋亡率增大,活性氧含量增加,P53表达增强。由此可见,18F-FDG能通过诱发HepG2肝癌细胞凋亡来抑制其增殖,且抑制率呈放射性浓度依赖性升高。     

吲哚美辛对荷瘤小鼠抗肿瘤作用机制的实验研究

用微观放射自显影技术及免疫组化法探讨了非甾体类抗炎药吲哚美辛(IN)对Lewis肺癌的生长抑制作用机制。结果显示:与对照组相比,实验组IN的抑瘤率为55.05%;IN可显著下调Bcl-2蛋白的表达(t=6.154,P<0.001),对Bax蛋白的表达没有明显影响(t=2.101,P>0.05)。放射自显影结果显示,在肿瘤细胞的细胞膜、细胞浆及细胞核中均有黑色银颗粒分布,且在用药后12 h时肿瘤组织中的平均银颗粒数高于4、7、243、6 h时。以上结果表明,IN可抑制Lewis肺癌的生长,其机制与下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达及降低Bcl-2/Bax的比值有关;IN可进入到肿瘤细胞内发挥抗肿瘤作用。     

白介素-6对受全身分次照射荷瘤小鼠肿瘤细胞增殖与凋亡的影响

以受分次全身照射的三种荷瘤小鼠为研究对象,探讨白介素-6(IL-6)对不同肿瘤细胞增殖、凋亡及凋亡相关基因p53、bcl-2表达的影响。本实验采用流式细胞术检测IL-6对S180肉瘤、H22肝癌、Lewis肺癌三种荷瘤小鼠经6MVX线分次全身照射后肿瘤细胞凋亡及增殖指数的影响,以免疫组织抗生蛋白链霉素?过氧化物酶?生物素(SP)法检测以上三种荷瘤小鼠肿瘤组织中p53、bcl-2的表达水平,及IL-6对经照射的三种荷瘤小鼠肿瘤组织p53、bcl-2表达水平的影响。结果表明:在接受全身分次照射的三种荷瘤小鼠中,Lewis肺癌IL-6组SPF值及PI值均较对照组低,AI值较对照组高(P<0.05),S180肉瘤荷瘤鼠结果相反(P<0.01),而在H22肝癌两组肿瘤细胞凋亡及增殖指数未见明显差异(P>0.05)。其机理可能与IL-6改变了肿瘤细胞所处的周期时相的比例有关。IL-6对凋亡相关基因p53、bcl-2的表达在不同肿瘤组织中具有不同影响,Lewis肺癌荷瘤鼠IL-6组肿瘤细胞p53表达水平较对照组低,S180肉瘤荷瘤鼠IL-6组肿瘤细胞bcl-2、p53表达水平较对照组高,而H22肝癌荷瘤鼠两组肿瘤细胞bcl-2、p53表达水平无明显差异。其作用可能与IL-6对不同肿瘤组织中凋亡相关基因p53、bcl-2的表达产生不同影响有关。     

沉默乏氧诱导因子-1α和生存素基因联合放疗对裸鼠移植人肝癌的抑瘤效应

为探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)乏氧诱导因子-1α(Hypoxia induced factor1α,HIF-1α)和生存素(Survivin)基因联合X射线照射对裸鼠移植人肝癌细胞SMMC-7721的抑瘤效应,肿瘤局部注射脂质体包裹的靶向HIF-1α和/或Survivin基因的RNA干扰质粒后,接受5Gy X射线照射。观察各组裸鼠治疗后不同时间肿瘤体积和平均存活时间,以免疫组化染色法检测肿瘤组织Survivin、HIF-1α、增殖细胞核抗原(Proliferation cell nuclear antigen,PCNA)表达和肿瘤间质微血管密度,以TUNEL法检测肝癌细胞凋亡。结果表明,治疗开始后第9-21天,双干扰联合放疗组裸鼠肿瘤体积显著小于单干扰联合放疗组,且平均生存时间明显延长。治疗结束后1天,双干扰联合放疗组裸鼠肿瘤组织Survivin、HIF-1α、PCNA表达和肿瘤间质微血管密度明显低于对照组和放疗组,双干扰联合放疗组移植瘤凋亡细胞百分数较其它组明显升高。结果提示,双干扰联合放疗可有效地抑制裸鼠移植人肝癌细胞增殖和血管生成,促进细胞凋亡,其抑瘤效应明显优于放疗和单干扰联合放疗。     

放疗后早期肿瘤组织内99Tcm-rh-Annexin Ⅴ分布与Survivin、Caspase-3蛋白表达的相关性研究

采用99Tcm-rh-AnnexinⅤ作为核素凋亡显像示踪剂,观察小鼠放疗后早期肿瘤组织内Survivin、Caspase-3蛋白表达。结果显示,放疗组肿瘤组织内99Tcm-rh-AnnexinⅤ分布、TUNEL检测阳性细胞数及Caspase-3蛋白表达均明显多于对照组,Survivin蛋白表达A组明显高于B组,差异均存在显著性（P均<0.01）。相关性研究表明,肿瘤组织的放射性摄取与TUNEL阳性细胞数呈明显正相关（r=0.942,P=0.000）;肿瘤组织内Survivin蛋白表达与Caspase-3蛋白表达呈明显负相关（r=-0.836,P=0.000）。肿瘤组织内99Tcm-Annexin Ⅴ分布与Caspase-3蛋白表达呈明显正相关（r=0.948,P=0.000）,与Survivin蛋白表达呈明显负相关（r=-0.819,P<0.01）。以上结果提示,肿瘤组织内99Tcm-rh-AnnexinⅤ的分布可以反映放疗后早期肿瘤组织细胞凋亡的状况以及凋亡调控蛋白Survivin、Caspase-3表达水平的变化。     

放疗后早期肿瘤组织内^99Tc^m-rh-Annexin V分布与Survivin、Caspase-3蛋白表达的相关性研究

采用^99Tc^m-rh-Annexin V作为凋亡显像示踪剂,观察小鼠放疗后早期肿瘤组织内Survivin、Caspase-3蛋白表达。结果显示,放疗组肿瘤组织内^99Tc^m-rh-Annexin V分布、TUNEL检测阳性细胞数及Caspase-3蛋白表达均明显多于对照组,Survivin蛋白表达A组明显高于B组,差异均存在显著性（P均＜0．01）。相关性研究表明,肿瘤组织的放射性摄取与TUNEL阳性细胞数呈明显正相关（r=0．942,P=0．000）;肿瘤组织内Survivin蛋白表达与Caspase-3蛋白表达呈明显负相关（r=-0．836,P=0．000）。肿瘤组织内^99Tc^m-Annex-inV分布与Caspase-3蛋白表达呈明显正相关（r=0．948,P=0．000）,与Survivin蛋白表达呈明显负相关（r=-0．819,P〈0．01）。以上结果提示,肿瘤组织内^99Tcm—rh—Annexin V的分布可以反映放疗后早期肿瘤组织细胞凋亡的状况以及凋亡调控蛋白Survivin、Caspase-3表达水平的变化。     

MG132联合X射线对非小细胞肺癌生长转移和凋亡的影响

探讨蛋白酶体抑制剂MG132联合X射线对非小细胞肺癌H1299细胞生长、转移侵袭和细胞凋亡的影响及机制。采用MTT法检测不同MG132浓度不同时间处理后肺癌H1299细胞的增殖;Transwell小室实验测定肺癌细胞的迁移和侵袭能力;流式细胞术测定肺癌细胞的凋亡;Western—blot法测定蛋白表达水平。结果表明,MG132能明显抑制H1299细胞的生长,并呈现剂量-效应和处理时间-效应关系;MG132在无毒性剂量下联合X射线可显著抑制H1299细胞的迁移及侵袭能力,并明显诱导细胞凋亡;MG132能明显降低H1299细胞的基质金属蛋白酶-2、-9的表达水平,降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平,同时增加凋亡蛋白Bax的表达水平。提示MG132可以显著抑制人非小细胞肺癌H1299细胞的生长,且在无毒性剂量下联合X射线可以明显降低癌细胞转移和侵袭能力,能显著加强X射线诱导的细胞凋亡作用。     

沉默乏氧诱导因子-1α和生存素基因联合X射线照射对乏氧细胞的体外抑瘤效应

为探讨RNA干扰（RNA interference，RNAi）沉默乏氧诱导因子-1α（Hypoxia induced factor -1α，HIF-1α）和生存素（Survivin）基因联合X射线照射对乏氧人肝癌细胞SMMC-7721的体外抑瘤效应，利用双靶向HIF-1α和Survivin基因载体，采用阳离子脂质体介导法转染SMMC-7721细胞，经乏氧培养36h后，分别以RT-PCR和Western blot法检测HIF-1α和Survivin基因的mRNA及其蛋白表达，分别以四甲基偶氮唑盐（MTT）法和流式细胞术检测细胞存活分数及细胞凋亡。结果表明，转染质粒pGenesil-Survivin-HIF的SMMC-7721细胞中，HIF-1α和Survivin基因mRNA表达水平与对照和阴性干扰组相比明显降低（p〈0．05），也未检测到HIF-1α和Survivin蛋白的表达。单、双干扰联合放疗组存活分数较照射组明显降低（p〈0．01），双干扰联合放疗组存活分数较其它组也明显降低（p〈0．01）。单、双干扰联合放疗组凋亡细胞百分数较对照组明显升高（p〈0．01），双干扰联合放疗组凋亡细胞百分数较其它组也明显升高（p〈0．01）。结果提示，质粒pGenesil—Survivin—HIF可有效地干扰乏氧SMMC-7721细胞HIF-1α和Survivin基因的mRNA及其蛋白表达。双干扰联合放疗组对乏氧SMMC-7721细胞的体外抑瘤效应明显优于单干扰联合放疗组。     

18FDG-PET/CT评价顺铂联合吲哚美辛及其衍生物对Lewis肺癌治疗效果的实验研究

为评价吲哚美辛及其衍生物组胺吲哚美辛对鼠Lewis肺癌的治疗效果,建立40只Lewis肺癌昆明小鼠腋下移植瘤模型,并随机分为四组:顺铂(DDP)治疗组、顺铂+吲哚美辛(DDP+Indomethacin IN)治疗组、顺铂+组胺-吲哚美辛(DDP+His-IN)治疗组及生理盐水对照组。各组小鼠于治疗前后各行PET/CT显像及取眼眶血0.2 mL,留取肿瘤组织进行组织学检测。结果显示,治疗后不同治疗组与生理盐水对照组比较靶本比均有显著性差异(P<0.05),各组治疗后TNF-α含量均升高,以DDP+His-IN组更为显著;抑瘤率未见明显差异(P>0.05)。表明IN、His-IN与DDP联合用药抗肿瘤效果好,尤其DDP与His-IN联合应用抗肿瘤效果更佳;另外,T/B比值变化能较早反映化疗药物的抗肿瘤效果。     

重离子诱导人舌鳞癌细胞凋亡和Bax/Bcl-2蛋白表达的变化

探讨重离子辐照对人舌鳞癌Tb细胞的凋亡及Bax/Bcl-2蛋白表达的影响.采用0、0.5、1.0、2.0、4.0 Gy重离子束辐照人舌鳞癌Tb细胞,应用MTT法检测细胞存活,流式细胞技术检测细胞周期变化,Hoechst 33258/PI复染法观察Tb细胞凋亡形态,并采用Western-blot法检测Bax/Bcl-2蛋白表达情况.结果发现,Tb细胞经12C6+离子束辐照后存活率显著下降,呈剂量依赖性的生长抑制;Tb细胞呈现蓝色荧光浓集成团的凋亡形态,且凋亡比例随辐照剂量增加;G2/M期细胞百分数随照射剂量增加而增加(P＜0.05).Western-blot结果显示Bax蛋白表达水平随辐照剂量逐渐上升,但在4 Gy组其表达不再增高,Bcl-2蛋白在1.0、2.0、4.0 cy组随剂量增大呈下降趋势.以上结果提示重离子束辐照对Tb细胞有抑制作用,Bax/Bcl-2蛋白表达是重离子治癌的机制之一.     

131I治疗对SD大鼠血清降钙素水平的影响

为了研究SD大鼠甲状腺经不同剂量¹³¹I内照射后,短期内C细胞损伤情况及对大鼠血清降钙素（calcitonin,CT）水平和CT储备功能的影响,将30只SD大鼠随机分成对照组、小剂量组、大剂量组,分别测定给Na¹³¹I前及给Na¹³¹I一月后血清降钙素水平,并通过钙负荷-降钙素释放试验测定降钙素储备功能。结果显示：给Na¹³¹I后小剂量组和大剂量组CT基础值、经钙负荷后降钙素峰值、升高幅度均明显降低,与给药前有显著差异（P＜0.05）。且不同剂量间CT基础值、降钙素峰值及升高幅度均有显著性差异。甲状腺组织CT免疫组化染色结果显示,照射后C细胞数量及分布密度明显降低。因此认为,¹³¹I治疗后大鼠血清CT水平减低,CT储备功能下降,其减低程度与¹³¹I剂量有相关性。     

18F-FDG PET/CT早期监测小剂量顺铂在体化疗敏感性的实验研究

42只双侧前胸壁荷瘤的VX2兔模型(共计84个肿瘤)随机分为治疗组(n=32)和对照组(n=10).治疗组静脉给予4mg/kg顺铂前(Pre-therapy)和给药后95-100min(Day 0)、Day 1、Day7、Day 14行PET/CT显像;对照组不给化疗药物,其余与实验组相同.取葡萄糖摄取最大值(SUVmax)进行分析,CT测量肿瘤大小.按肿瘤体积分组,Day 7时治疗组肿瘤体积增长>1倍则为不敏感,反之为敏感.结果显示:(1)Day 0敏感组SUVmax减低率为(-48.96±12.27)%,而不敏感组和对照组为(21.26±18.26)%和(7.16±13.47)%,三组SUVmax变化有显著差异(P<0.05).(2)Pre-therapy、Day 0、Day 1、Day 14两组肿瘤体积无显著性差异(P>0.05),但Day 7敏感组肿瘤体积小于不敏感组及对照组,差异有显著性(P<0.05).(3)Day 7、Day 14敏感组肿瘤坏死率大于不敏感组及对照组,差异有显著性(P<0.05).(4)HE染色观察不同时间点切除的肿瘤标本发现:Day 7、Day 14时敏感组肿瘤细胞数少而炎性和坏死细胞数增加.表明根据化疗药物给予后FDG减低程度,18F-FDG PET/CT能在体、早期、灵敏检出肿瘤对化疗药物的敏感性.     

耐辐射球菌PprI蛋白对急性放射损伤小鼠防护作用的初步研究

研究耐辐射球菌PprI蛋白对哺乳动物急性放射损伤的防护作用,初步探讨其作为一种新的抗辐射蛋白的作用机制。将PprI蛋白或生理盐水注射入小鼠肌肉内,观察辐照后第1、7、14、28天小鼠外周血象以及小鼠骨髓、胸腺和脾脏淋巴细胞的凋亡情况。研究结果表明：与生理盐水注射组相比,PprI蛋白注射组外周血白细胞计数于照后第28天显著增高（p〈0．05）;外周血小板数和淋巴细胞百分率于照后第1、7天显著增高（p〈O．05）;PprI蛋白注射组脾脏淋巴细胞凋亡率在照后第1、7、14天明显降低（p〈0．05）;胸腺淋巴细胞凋亡率于照后第14和28天明显降低（p〈0．05）;骨髓细胞凋亡率在照后第1、14和28天明显降低（p〈0．05）;并且骨髓细胞凋亡率于照后第28天基本恢复正常。上述结果初步表明,耐辐射球菌PprI蛋白对哺乳动物急性放射损伤有着明显的防护作用。     

18F-FDG PET/CT显像对心肌“缺血记忆”的分子机制研究

建立了不同程度的犬急性心肌缺血-再灌注模型。利用¹⁸F-FDG PET/CT动态心肌显像和实时定量PCR方法探讨了缺血心肌葡萄糖代谢改变（缺血记忆）和缺血程度的关系。将8只杂种犬随机分为球囊封堵20 min组（4只）和40 min组（4只）,在空腹状态下（禁食>12 h）行基础、缺血1 h和缺血24 h的¹⁸F-FDG PET/CT动态心肌显像以及⁹⁹Tc^m-MIBI SPECT心肌灌注显像。计算缺血区和非缺血区心肌的葡萄糖摄取率比值K。所有显像完成后处死实验犬并分别取缺血区、非缺血区心肌组织。应用实时定量PCR方法,测定葡萄糖转运体蛋白1、4（GLUT-1、GLUT-4）、心脏脂肪酸结合蛋白（H-FABP）基因的mRNA表达量。两组犬三次心肌灌注显像均未见异常。基础显像时,两组预封堵心肌与非缺血区心肌¹⁸F-FDG摄取率的比值K无明显差异;缺血1 h后,两组K值均增加,且40 min组高于20 min组;缺血24 h后,40 min组的K值仍高于基础状态,而20 min组的K值与基础状态下无明显差异。PCR结果示,两组非缺血心肌的GLUT-1、GLUT-4以及H-FABP基因mRNA表达量无明显差异,而缺血心肌的GLUT-1和GLUT-4基因mRNA表达量增加,H-FABP基因的mRNA表达量减低,且40 min组的改变较20 min组更为明显。以上结果提示,心肌缺血-再灌注后,缺血心肌对葡萄糖（¹⁸F-FDG）摄取增加的程度和持续时间（缺血记忆）与缺血的程度相关。     

燃料组件修复过程中单根燃料棒损坏影响分析

以核电厂燃料组件修复过程中单根燃料棒损坏释放的放射性物质为分析对象,就放射性物质释放对组件修复的工作人员产生的累积有效剂量进行评估,对向环境释放的气态流出物的放射性总活度进行计算,并对气态流出物排放监测的影响开展分析。分析结果表明单根燃料棒损坏后,执行燃料组件修复的每位工作人员接受的累积有效剂量为12.2 mSv,低于GB 18871—2002规定的工作人员职业照射年平均有效剂量限值20 mSv;向环境释放的气态流出物中惰性气体与碘的放射性总活度分别为3.51×10¹¹ Bq和2.17×10⁸ Bq,远小于GB 6249—2011规定的年排放控制值6.0×10¹⁴ Bq和2.0×10¹⁰ Bq。燃料棒损坏后40 min烟囱排气惰性气体测量仪的读数小于1.0×10¹¹ Bq/h,核电厂无需进入应急待命状态。     

18F-FDG符合显像诊断梗死心肌活力的实验研究

将6只20kg的小型猪制作心肌梗死模型,进行心肌99Tcm-甲氧基异丁基异腈(99Tcm-sestamibi,99Tcm-MIBI)血流灌注显像确定梗死区,用18F-脱氧葡萄糖(18F-fluorodeoxyglucose,18F-FDG)观察空腹与糖负荷图像的差别,确定心肌坏死或存活区.制作模型前进行自身对照形成对照组.并进行B超心功能检查.结果显示:心肌梗死区大部分心肌没有活力,99Tcm-MIBI和18F-FDG都没有摄取.空腹时有部分心肌显影,糖负荷时该区域显影程度减轻.     

长江沿岸部分NORM行业水中210Po的分析

人类所受辐射照射主要来源于天然辐射。本工作分析了长江沿岸部分NORM行业水中²¹⁰Po的浓度。结果表明,燃煤电厂、水泥厂、钢铁厂、铁矿排出水口中²¹⁰Po的活度浓度分别为(0.93～4.76)×10^-3 Bq/L、(1.12±0.07)×10^-2 Bq/L、(9.89±0.78)×10^-3 Bq/L、(2.17±0.21)×10^-3 Bq/L,均在长江水系²¹⁰Po的波动范围之内。稀土加工排放的废水和雨水中²¹⁰Po的活度浓度分别为(1.03~1.40)×10^-1Bq/L、(3.05±0.04)×10^-1Bq/L,比本底水平高两个数量级,需要引起特别关注,有待于进一步研究。