乙基纤维素固定化α-淀粉酶的研究

对乙基纤维素固定化α-淀粉酶进行了研究,优化了α-淀粉酶的固定化工艺条件,并比较了游离酶和固定化酶的特性。结果表明,在α-淀粉酶浓度为4g·L-1、乙基纤维素质量分数为0.50%、4℃的条件下,固定化α-淀粉酶的重复操作稳定性最好;固定化α-淀粉酶的最适反应pH值为7.0、最适反应温度为60℃,具有良好的热稳定性、重复使用性和储存稳定性;该固定化方法操作简便,减少了酶变性的可能,最大程度保留了酶的活力。     

响应面法优化海藻酸钠固定α-淀粉酶的研究

利用海藻酸钠为载体包埋制备固定化α-淀粉酶,在海藻酸钠浓度,氯化钙浓度和游离酶添加量的单因素实验基础上,采用响应曲面设计对三因素进行优化确定固定化的最优条件。得到的最佳条件为:海藻酸钠浓度为2.48%、氯化钙浓度为2.04%、游离酶浓度为0.23%,在该条件下进行验证实验得到固定化酶的回收率为74%,达到了较高的固定化酶的回收率。     

α-淀粉酶的固定化及其在邻硝基对甲基苯酚还原反应中的应用

以尼龙作为酶固定化载体材料,采用化学键合法固定α-淀粉酶,并对固定化前后酶的特性进行了研究。结果表明,与游离酶相比,固定化酶最适pH值从6．3提高到7．2,并且在较宽的pH值范围内显出较高的酶活性;固定化α-淀粉酶的最适温度为70℃,比游离酶的最适温度60℃高10℃,显示出较高的热稳定性;将固定化α-淀粉酶应用于邻硝基对甲基苯酚的还原反应,产率为37．09％;将固定化酶在4℃的水溶液中保存14d仍保留79．89％的酶活。     

天然矿物埃洛石为载体固定α-淀粉酶的工艺和性能

以天然纳米材料埃洛石为载体,通过物理吸附法对α-淀粉酶进行固定.利用红外光谱、扫描电镜、透射电镜等对埃洛石的结构和形貌特征进行测试与表征,同时对埃洛石纳米管固定化α-淀粉酶的条件及固定化酶的酶学性能进行了研究,并与游离酶进行了比较.结果表明:这种具有管状结构的埃洛石硅酸盐矿物是理想的酶载体,酶的固定化效率平均达到37.38%;所得的固定化α-淀粉酶4℃下保存15d后,酶活力仍保持90%以上;固定化α-淀粉酶的热稳定性也明显优于游离酶,连续7批次操作后仍保持56.2%的酶活力.     

溶胶-凝胶法固定化α-淀粉酶的研究

采用溶胶-凝胶过程,以正硅酸乙酯为前驱物,对α-淀粉酶进行了固定化。考察了两种水解催化剂盐酸、醋酸对固定化酶活性的影响,并对固定化酶的耐热性、重复使用次数等进行了测试。     

α-淀粉酶在MCM-41介孔分子筛上的固定化研究

采用浸渍法将α-淀粉酶固定在介孔分子筛MCM-41上。考察了吸附时间、给酶量和pH对α-淀粉酶固定化性能的影响,并对固定化酶的活性、稳定性和载体结构等进行了研究。结果表明,在固定化时间为11 h,给酶量为70 mg.g-1,pH=5.9的条件下,固定化酶活性回收率可达48%。与游离酶相比,固定化酶的耐热能力增强,温度达到70℃时,固定化酶相对活性可达到75%,而游离酶只有14%;在pH=3.3～8.0的内,固定化酶相对活性为62%～100%,而游离酶的相对活性为5%～100%,固定化酶具有更宽的pH适应性;此外,固定化酶储存稳定性明显增强,并具有一定的可重复操作性,且固定后载体仍然保持了良好的介孔结构。     

吸附-交联组合法实现α-淀粉酶在MCM-41上的固定化

以MCM-41介孔分子筛为载体,利用直接吸附法、直接交联法及吸附-交联组合法固定α-淀粉酶。考察了3种方法对固定化时间及酶活力回收率的影响,并对不同方法制备的固定化酶的热稳定性、操作稳定性以及载体的结构与性能进行了研究。结果表明,吸附-交联组合法与直接吸附法或直接交联法相比,α-淀粉酶活力回收率高,可达51%以上;同时,吸附-交联组合法固定化酶的热稳定性和操作稳定性虽略低于直接交联法,但远远高于直接吸附法。XRD和N2物理吸附脱附分析结果表明,MCM-41介孔分子筛固定α-淀粉酶后,其孔径、比表面积和孔容均有所减小,但仍然保持了良好的介孔结构。     

琼脂包埋法固定化α-淀粉酶特性的研究

以琼脂作为载体材料,采用包埋法固定化α-淀粉酶,并对其特性进行了研究.结果表明,该固定化酶最适pH 值为7.5、最适温度为55～ 58℃,具有较好的贮存稳定性和反应稳定性,18 d后该固定化酶的残余活力仍保留原酶活的71.6%左右,重复使用7次,酶活力下降不大,其酶活回收率达到78.8%.     

麦芽根中5′-磷酸二酯酶的分离提纯及其固定化

从麦芽根中分离得到了5′-磷酸二酯酶,采用戊二醛为交联剂,将该酶固定到壳聚糖上,用于酵母RNA的催化水解,以制备5′-核苷酸.研究了酶固定化反应的影响因素,在最适条件下,酶活回收率可达53.6%.进一步研究了固定化5′-磷酸二酯酶的酶学性质,测得固定化酶的米氏常数Km为15.38 mg/mL(以RNA为底物),固定化酶催化水解RNA的最适温度为75℃,最适pH值为5.5,实验发现固定化5′-磷酸二酯酶具有更好的耐热性和更高的纯度.     

脂肪酶固定化研究和应用

采用硅藻土作载体,进行了脂肪酶的固定化。利用固定化酶选择性催化1-苯乙醇与乙酸乙烯酯的转酯化反应,得到R-乙酸苯乙酯,进行1-苯乙醇的拆分。实验考察了不同吸附方法固定化酶的效果,确定效果最好的固定方法为载体涂布法,并对该法的固定化条件进行了优化。制备的固定化酶的转酯比活比游离酶提高了14．3倍。固定化没有改变酶的选择性．对映体过剩值仍大于98％。初步探讨了固定化酶和游离酶的反应过程。     

海藻酸钠包埋法共固定α-淀粉酶和糖化酶的研究

以海藻酸钠为载体,用包埋法共固定α-淀粉酶和糖化酶双酶体系,研究了共固定化过程中双酶的比例、pH值、温度对共固定化后体系稳定性的影响,并探讨了此双酶体系在热稳定性、储藏稳定性、连续使用稳定性方面的效果.     

多孔玻璃微珠的制作过程对固定α-淀粉酶的影响

用分相法制作了载体多孔玻璃微珠FXBL,用物理吸附法、共价偶联法和重氮法分别固定α-淀粉酶,比较了它们的固定效果,选择了共价偶联法作为研究多孔玻璃微珠的制作过程对固定α-淀粉酶的影响的实验方法.得出结论:580℃分相玻璃优于560℃,分相时间到36h后,分相对固定化酶活力影响不大;多孔玻璃用0.3 mol/L的KOH溶液扩孔3h最理想;当盐酸的浓度为0.3mol/L时侵蚀成孔,固定化α-淀粉酶活力达到最大值.     

漆酚-(8-羟基)喹啉-Cu(Ⅱ)高分子配合物固定化漆树酶的研究

介绍了漆酚-(8-羟基)喹啉-Cu(Ⅱ)高分子配合物的制备和固定化漆树酶的方法,测定了固定化漆树酶的活性和米氏常数,研究了酸度和温度对固定化漆树酶催化活性的影响及固定化漆树酶的重复催化活性。结果表明,漆酚-(8-羟基)喹啉-Cu(Ⅱ)高分子配合物是漆树酶的良好固定化载体,固定化漆树酶的米氏常数Km=4·85×10-3mol·L-1,小于天然漆树酶的米氏常数,固定化漆树酶的耐热性和耐酸碱性均优于天然漆树酶,并有一定的重复使用性。对漆树酶的固定化方式和固定化漆树酶的催化反应机理也进行了初步讨论。     

聚丙烯酰胺-聚乙二醇对L-天门冬酰胺酶的包埋研究

以聚丙烯酰胺，聚乙二醇为载体制备了固定化L-天门冬酰胺酶。对固定化酶载体材料——凝胶的溶胀比、机械强度及其影响因素进行了研究。结果表明，单体及交联剂浓度是影响凝胶性能的重要因素，聚乙二醇作为稀释剂能有效控制聚合速率，提高凝胶的溶涨性能和韧性。此外考察了酶负载量、pH值和温度等因素对固定化酶活性的影响。实验结果还表明分批反应6次或存储42天后，固定化酶仍保持较高的活力。     

多孔玻璃微珠的制作及其固定α-淀粉酶的研究

用分相法和填充法分别制作了两种载体多孔玻璃微珠FXBL和TCBL,用共价偶联法分别固定α-淀粉酶,确定了其最佳固定条件和最佳应用条件,并研究了固定化酶的性质。主要结论如下:①最佳固定条件为:温度10℃;pH=6.2;给酶量TCBL 2.6 g/LF、XBL 2.4 g/L;时间12 h;②最佳应用条件为:温度75℃,比自由酶高5℃;pH值TCBL固定化酶为5.2、FXBL固定化酶为5.4,分别比自由酶的最适pH值6.0低0.8和0.6个pH值单位;③固定化酶的主要性质为:在80℃受热1 h,固定化酶的活力下降小于7%,而自由酶活力则下降至63%;FXBL固定化酶和TCBL固定化酶分别使用5次和8次还可以保持60%的活力。     

活性物质降解烟叶中淀粉的工艺研究

对固定化酶乳状液添加剂与水溶液酶添加剂降低低次烟叶中淀粉的质量分数进行了研究,考察了两种方法降解烟叶淀粉的工艺条件,并通过实验得出了各自的最佳工艺条件,固定化方法为:α-淀粉酶16 u/g(烟叶),糖化酶80 u/g(烟叶),降解温度50~55℃,作用时间15 h,w(H2O)=20%~25%;水溶液酶为:α-淀粉酶16 u/g,糖化酶80 u/g,温度40~45℃,时间9 h,w(H2O)=20%~25%。结果表明,固定化酶处理烟叶,淀粉降解率为30.25%,好于水溶液酶的25.25%,特别在抽吸品质方面,前者处理明显好于后者处理。     

溶胶-凝胶法固定脂肪酶的方法研究

采用溶胶-凝胶技术,以正硅酸乙酯为前驱物,制备了S iO2微粒,以3-氨基丙基三乙氧基硅烷作偶联剂对S iO2微粒进行表面改性,制备了一种功能化载体3-氨基丙基硅胶。以甲醛为偶联剂,将脂肪酶固定于3-氨基丙基硅胶上。用红外光谱对产物结构进行表征,同时研究了固定化酶的性质。结果表明,氨基化硅胶交联固定化脂肪酶具有可行性,固定化酶的最适反应温度在30℃附近,且在碱性范围内其稳定性比自然酶高;当pH=7.5,其它条件相同时,自然酶的活力大于固定化酶的活力。     

腈水合酶固定化方法和催化特性的研究

以一种能够产生腈水合酶诺卡氏菌为研究对象,针对原来的海藻酸盐包埋法存在的固定化细胞强度较小、通透性较差等问题,改进了对酶的固定化方法,并对固定化腈水合酶的催化特性:最适反应温度、pH值、底物丙烯腈浓度、和表面活性剂性质和丙烯酰胺累积浓度对酶活性的影响等五个方面进行了研究。其中固定化腈水合酶最适反应温度在15~25°C;pH 7.0左右;底物丙烯腈浓度为3%~4%;Triton X-100对酶活性基本无影响,而Tween 80和Tween 60对酶活力有抑制作用;固定化腈水合酶在丙烯酰胺累积浓度为15%~20%之间时,酶活性较好。     

磁性壳聚糖微球固定化环糊精糖基转移酶催化合成α-熊果苷的研究

利用磁性壳聚糖微球固定化环糊精糖基转移酶合成α-熊果苷,采用透射电镜、扫描电镜及傅里叶红外光谱对凝胶颗粒及固定化载体进行表征,探讨了固定化条件及固定化酶的相关酶学性质。结果表明,环糊精糖基转移酶固定化最优条件为:戊二醛体积分数为2%,交联时间为4 h,加酶量为0.45 mg/m L,固定化时间为5 h。相比游离酶,固定化酶温度稳定性提高,重复催化反应5次后,仍能保持初始转化率的46.3%。     

用氨基化硅胶和甲醛固定脂肪酶的研究

以甲醛为偶联剂,将脂肪酶固定在3-氨基丙基硅胶上。以差热分析法测试了自然酶和固定化酶的热稳定性,并研究了反应介质的温度和pH值对自然酶和固定化酶活性的影响。自然酶和固定化酶的最适pH值都在7.5附近,但固定化酶的最适温度较自然酶低。另外,还测试了固定化酶在37℃的磷酸盐缓冲溶液中贮存的稳定性,与自然酶相比其贮存的稳定性有显著的提高,同时发现固定化酶在37℃的磷酸盐缓冲溶液中有一个恢复活力的过程。