海藻糖合酶的分离纯化及部分酶学性质

用硫酸铵沉淀、凝胶过滤层析、离子交换层析对一株芽孢杆菌SH-110产生的海藻糖合酶粗酶液进行纯化,用PAGE电泳逐步分析纯化的结果,用SDS-PAGE电泳证明该酶的分子量为62.4 kD。酶反应最适pH值为7.0,最适作用温度为35℃,金属离子Zn2+、K+、Na+对酶活性有激活作用,Ba2+、Ca2+、Mn2+对酶活性有抑制作用。酶底物专一性初步分析结果表明,该酶确实是以麦芽糖为专一性底物来转化生成海藻糖的海藻糖合酶的一种新酶。     

重组天门冬酰胺酶Ⅱ纯化过程的毛细管电泳监测法

目的建立重组天门冬酰胺酶Ⅱ纯化过程质量监控的方法。方法用高效毛细管区带电泳法监 测 Ｌ－天门冬酰胺酶的纯化过程。经优化的电泳条件为：４５ｃｍｘ５０ｕｍ ｉ．ｄ．石英毛细管（有效长度为 ３７．５ｃｍ）,检测波 长 ２１４ｎｍ,分离电压 １２ｋＶ,压差迸样 １０ｓ,恒温 １３℃,分离介质为 ｐＨ７．０的 ８０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸钠缓冲液。实测了 ６批样品 的纯度,用于各纯化步骤的质量监控。结果该方法简单、快速,尤其适合于重组蛋白的质量控制。结论毛细管 区带电泳法（ＣＺＥ）,可以用于对Ｌ－天门冬酰胺酶的纯化过程的质量监控,还可用于半成品和成品的质量控制。     

重组蛹虫草超氧化物岐化酶脱辅基蛋白的表达、纯化及其活性重建

目的表达并纯化重组蛹虫草超氧化物歧化酶脱辅基蛋白,并考查各种金属离子对其活性重建的作用。方法用不含Cu2+和Zn2+的培养基培养重组菌株,并表达重组蛋白,采用DEAE-FF和CM-52进行纯化;在脱辅基蛋白溶液中加入Cu2+、Mn2+、Mg2+、Ni2+或Ag+,测定SOD酶活力的变化。结果蛹虫草脱辅基Cu,Zn-SOD在不含Cu2+和Zn2+的培养基中得到表达,纯化后的样品经SDS-PAGE分析,在相对分子质量17000处出现单一条带,经活性电泳分析无酶活力;脱辅基蛋白活性重建的最适宜Cu2+浓度为0.005mmol/L,但其紫外吸收图谱与天然SOD不同;0.1mmol/L的Mn2+、Mg2+、Ni2+、Ag+重建的酶活力远低于Cu2+重建的cm-SOD的酶活力。结论已成功表达并纯化了蛹虫草脱辅基Cu,Zn-SOD,各种金属离子只能有限地重建脱辅基Cu,Zn-SOD的活性。     

从活性干酵母中提取SOD的研究

本文就超氧化物歧化酶SOD研究现状及应用情况进行了简单介绍,对从活性干酵母中提取SOD的优势进行了详细分析。继而本文从SOD粗酶液提取和SOD活性测定两个方面对于从活性干酵母中直接提取SOD的工艺进行了探索。研究对比了采用石英砂研磨法、细胞自溶法、氯仿-乙醇法等不同方法进行SOD酶提取的效果,利用邻苯三酚自氧化法测定SOD活性方法进行酶活测定,最终发现甲苯破壁法得到的SOD酶活性情况最佳。最后就甲苯法破壁提取SOD的工艺进行了优化。     

金黄色葡萄球菌滤液中凝固酶组分分析

目的对金黄色葡萄球菌滤液制剂中凝固酶进行纯化,并对其性质及作用进行分析。方法用分子筛层析等方法纯化凝固酶,用HPLC、光谱等方法对其进行纯度和性质分析。用双向免疫扩散试验和T淋巴细胞增殖试验检测其生物学特性。结果经纯化的凝固酶纯度达97%以上,相对分子质量约为350000,含17种氨基酸,主要紫外吸收峰出现在260nm左右,α-螺旋含量占27.3%,组分中含糖约18.1%,T淋巴细胞增殖试验和双向免疫扩散法证明纯化的凝固酶具有生物学活性。结论金黄色葡萄球菌滤液中凝固酶为一类糖与蛋白复合物,具有抗原活性,可能在金黄色葡萄球菌滤液的功效中发挥作用。     

噻菌灵农药的纯化与定值

[目的]直接合成的噻菌灵未达到标准物质的要求,纯化后的样品为农药标准物质的研制奠定了基础。[方法]通过重结晶方法对原药进行纯化,探索了纯化过程中各个条件,确定了简易的纯化方法。[结果]纯化后的噻菌灵的纯度为99.7%,经过专业机构的测定和实验室的定值验证了该量值的准确性。[结论]用无水乙醇重结晶所得到的纯品纯度为99.7%,用IR、GC-MS定性,用气相色谱仪定量,达到了农药标准物质纯度的要求。     

Nocardia sp.腈水合酶的纯化过程研究

对Nocardiasp.高活力腈水合酶进行了纯化研究。在细胞破碎中,超声时间对腈水合酶比酶活存在一个最优值,超声时间为20.00min时得到的比酶活最高。在离子交换层析过程中,采用DEAE-Sepharose作为层析介质,分别对平衡缓冲液pH、离子强度和线性梯度洗脱体积进行了优化。结果表明,采用pH7.20、50mmolL-1的Na2HPO4-NaH2PO4溶液作为平衡缓冲液,0.00~1.00molL-1的NaCl线性梯度洗脱,洗脱体积为20~25倍柱体积,此条件下腈水合酶的纯化倍数和酶活收率较佳。以Phenyl-SepharoseFF为层析介质研究了疏水层析精制腈水合酶的工艺过程,采用两步层析优化方法纯化出的Nocardiasp.腈水合酶比酶活达到2648.0U穖g-1,酶活收率为40.84%,用SDS-PAGE检测其纯度为99.00%以上。Nocardiasp.腈水合酶的两个亚基分子量分别为22.90kDa和27.38kDa。     

肠道病毒71型多克隆抗体F(ab’)2片段的制备及其体外中和效果评价

目的制备肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)多克隆抗体F(ab’)2片段,并评价其体外中和效果。方法采用硫酸铵分级沉淀法从EV71感染的兔血清中提取Ig G,用胃蛋白酶进行酶解,正交试验确定最佳酶解条件;使用阴离子交换层析(Q Sepharose Fast Flow)纯化得到F(ab’)2片段,采用体外中和试验检测其对EV71的中和效果。结果硫酸铵分级沉淀法得到电泳纯的Ig G;最佳酶解条件为:胃蛋白酶与Ig G按1∶10的质量比混合,47℃反应4 h,在此条件下,F(ab’)2的产率最大值为79.51%,且方差分析表明,酶切比例对F(ab’)2产率的影响最大,温度次之,时间对F(ab’)2产率的影响不明显;经阴离子交换层析纯化,可有效去除Fc片段,得到电泳纯的F(ab’)2;F(ab’)2具有与Ig G、正常血清同等的中和效果。结论成功制备了EV71兔多克隆抗体F(ab’)2片段,初步确定该F(ab’)2片段具有良好的体外中和效果。     

大蒜中SOD的提取研究

对从大蒜中提取超氧化物歧化酶（SOD）进行了探索性实验.通过不同的方法提取、纯化SOD,从而找到活性高、纯化倍数高的较好方法.     

核酸酶P1的纯化和酶学性质研究

桔青霉发酵液通过硫酸铵分级沉淀、凝胶层析和离子交换纤维素层析等生化分离步骤,得到的核酸酶P1比活力为711U/mg,纯化倍数1500。纯化的酶蛋白纯品经SDS 聚丙烯酰胺电泳,呈现一条单带。该酶催化反应的最适pH范围为6～8,最适温度在70℃,在60℃以下时酶活较为稳定.锌离子对此酶有明显的激活作用,而铜离子具有明显的抑制作用。     

Many Drugs of Abuse May Be Acutely Transformed to Dopamine,Norepinephrine and Epinephrine In Vivo

It is well established that a wide range of drugs of abuse acutely boost the signaling of the sympathetic nervous system and the hypothalamic–pituitary–adrenal (HPA) axis, where norepinephrine and epinephrine are major output molecules. This stimulatory effect is accompanied by such symptoms as elevated heart rate and blood pressure, more rapid breathing, increased body temperature and sweating, and pupillary dilation, as well as the intoxicating or euphoric subjective properties of the drug. While many drugs of abuse are thought to achieve their intoxicating effects by modulating the monoaminergic neurotransmitter systems (i.e., serotonin, norepinephrine, dopamine) by binding to these receptors or otherwise affecting their synaptic signaling, this paper puts forth the hypothesis that many of these drugs are actually acutely converted to catecholamines (dopamine, norepinephrine, epinephrine) in vivo, in addition to transformation to their known metabolites. In this manner, a range of stimulants, opioids, and psychedelics (as well as alcohol) may partially achieve their intoxicating properties, as well as side effects, due to this putative transformation to catecholamines. If this hypothesis is correct, it would alter our understanding of the basic biosynthetic pathways for generating these important signaling molecules, while also modifying our view of the neural substrates underlying substance abuse and dependence, including psychological stress-induced relapse. Importantly, there is a direct way to test the overarching hypothesis: administer (either centrally or peripherally) stable isotope versions of these drugs to model organisms such as rodents (or even to humans) and then use liquid chromatography-mass spectrometry to determine if the labeled drug is converted to labeled catecholamines in brain, blood plasma, or urine samples.     

2001—2002年国外塑料工业进展

收集了2001年7月到2002年6月有关国外塑料工业的相关期刊资料，介绍了2001年到2002年国外塑料工业的发展情况，提供了世界各地域塑料原材料的产量及构成比，日本，美国，加拿大，德国，法国，比利时，墨西哥，芬兰，西班牙等国家的树脂产量，消费量及增长率，以及日本，西欧，北美等地区的不同品种塑料原料消费量和增长率统计，按通用热塑性树脂（聚乙烯，聚丙烯，聚苯乙烯，聚氯乙烯，ABS树脂），工程塑料（尼龙，聚碳酸酯，聚甲醛，热塑性聚酯，聚苯醚），通用热固性树脂（酚醛，聚氨酯，不饱和树脂，环氧树脂），特种工程塑料（聚苯硫醚，液晶聚合物，聚醚醚酮）不同品种的顺序，对树脂的产量，消费量及合成工艺，产品应用开发，树脂品种的延伸及应用的进一步扩展等有关技术作了详细的介绍。     

2002～2003年国外塑料工业进展

收集了2002年7月-2003年6月国外塑料工业的相关期刊资料，介绍了2002年-2003年国外塑料工业的发展情况，提供了世界各大地区塑料的产量、增长率及所占份额，美国、德国、日本、韩国、法国、比利时、中国台湾、加拿大、巴西、西班牙等国家和地区的树脂产量及消费量，各国、各地区塑料原材料的产量、进出口量、国内消费量及人均消费量，以及日本的塑料原材料的生产情况。按通用热塑性树脂(聚乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚氯乙烯、ABS树脂)、工程塑料(聚酰胺、聚碳酸酯、聚甲醛、热塑性聚酯、聚苯醚)、通用热固性树脂(酚醛、聚氨酯、不饱和树脂、环氧树脂)、特种工程塑料(聚苯硫醚、液晶聚合物、聚醚醚酮)的品种顺序．对树脂的产量、消费量、供需状况及合成工艺、产品开发、树脂品种的延伸及应用的进一步扩展等有关技术作了详细的介绍。     

多层双锥液固逆流浸洗塔颗粒停留时间分布研究

针对石油钻井钻屑污染物治理的需要,开发了具有新颖结构的多层双锥液固逆流浸洗塔,整体上具有液固两相多级逆流传质浓度分布特征,级内呈现液固流态化良好的混合传递特性。釆用脉冲示踪法进行了颗粒停留时间分布实验研宄,结果显示多釜串联模型符合其结构与流动混合特征,以理论级数N作为模型参数可以很好地表达颗粒物性及操作参数对过程的影响。在研究范围内,内径100mm的24层双锥塔理论级数在6.11~11.0,随液固比增大而增大、随颗粒粒径增大而减小的趋势。该塔在理论级数6.93的操作条件下连续逆流浸洗,钻屑平均停留时间4.23min残留COD浓度77mg·L-1,与6级间歇逆流平衡浸洗钻屑残留COD浓度56 mg.L-1的实验结果相近,为多釜串联模型用于多层双锥塔浸洗传质模型研究与过程放大提供了实验依据。     

2009～2010年世界塑料工业进展

收集了2009年7月～2010年6月世界塑料工业的相关资料,介绍了2009～2010年世界塑料工业的发展情况,提供了世界塑料产量、消费量及全球各类树脂的需求量及产能情况.按通用热塑性树脂(聚乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚氯乙烯、ABS树脂),工程塑料(尼龙、聚碳酸酯、聚甲醛、热塑性聚酯、聚苯醚),特种工程塑料(聚苯硫醚、液晶聚合物、聚醚醚酮),通用热固性树脂(酚醛、聚氨酯、不饱和聚酯树脂、环氧树脂)不同品种的顺序,对树脂的产量、消费量、供需状况及合成工艺、产品应用开发、树脂品种的延伸及应用的进一步扩展等技术作了详细介绍.     

2004～2005年国外塑料工业进展

收集了2004年7月-2005年6月国外塑料工业的相关资料，介绍了2004年～2005年国外塑料工业的发展情况。提供了世界几大区域塑料的产量、增长率及所占份额；美国、德国、日本、韩国、法国、比利时、印度、西班牙、中国台湾、加拿大、巴西、英国等国家和地区的不同树脂的产量及消费量；各国、各地区塑料原料的产量、进出口量、国内消费量和人均消费量；日本塑料原料的生产情况。按通用热塑性树脂（聚乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚氯乙烯、ABS树脂）、工程塑料（聚酰胺、聚碳酸酯、聚甲醛、热塑性聚酯、聚苯醚）、通用热固性树脂（酚醛、聚氨酯、不饱和树脂、环氧树脂）、特种工程塑料（聚苯硫醚、液晶聚合物、聚醚醚酮、聚砜）的品种顺序，对树脂的产量、消费量、供需状况及合成工艺、产品开发、树脂品种的延伸及应用的扩展作了详细的介绍。     

ICP-MS法测定地球化学样品中As、Cr、Ge、V等18种微量痕量元素的研究

建立了测定地球化学样品中包括As、Cr、Ge、V等18种微量、痕量元素的ICP-MS方法。地化试样用HF-HNO3混酸分解后,以1 1 HNO3溶解干渣。由于制样不使用盐酸,避免了Cl对As、Cr、Ge、V的质谱干扰。用国家一级地球化学标准物质GBW 07309制备溶液优化仪器工作参数,并用于校准。方法测定限(6s)为:0.007~6.4μg/g,精密度(RSD%,n=12)为:29%~9.4%,经过国家一级地球化学标准物质的分析验证,结果与标准值吻合。方法已应用于国土资源调查的试样分析。