DNA-烷基转移酶(AGT)抑制剂及其在抗肿瘤耐药作用方面的研究进展

烷化剂类抗癌药物可攻击细胞DNA分子众多部位,产生一系列DNA加合物,影响DNA复制和转录等过程,从而诱导细胞变异或凋亡。O~6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶(O~6-alkylguanine-DNA alkyltransferase,AGT)是哺乳动物体内普遍存在的一种DNA修复蛋白酶,可使受损DNA得以修复,导致肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性,降低肿瘤化疗的效果。就近年来有关DNA烷化损伤、AGT介导的肿瘤细胞的耐药性以及AGT抑制剂的应用研究进展进行综述。     

肿瘤靶向性多功能亚硝基脲的合成及抗肿瘤活性评价

氯乙基亚硝基脲(CENUs)是临床上重要的抗肿瘤药物,该类药物通过诱导形成DNA股间交联(dG-dC交联)发挥抗肿瘤作用。但O~6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶(O~6-alkylguanine-DNA alkyltransferase, AGT)介导的细胞耐药性及明显的毒副作用降低了其抗癌效果。合成了一种肿瘤靶向性多功能亚硝基脲,该化合物由具有低氧选择活性的偶氮苯衍生物、能够抑制AGT活性的O~6-苄基鸟嘌呤衍生物和氯乙基亚硝基脲3部分组成。该化合物能够特异性地在低氧肿瘤区域被还原,释放AGT抑制剂和氯乙基亚硝基脲,从而发挥靶向抗肿瘤作用。多功能亚硝基脲及其各中间产物的化学结构经高分辨质谱、~1HNMR、~(13)CNMR及IR数据确证。通过CCK-8法评价了上述化合物对人脑神经胶质瘤SF763细胞的增殖抑制活性;并用荧光成像法评价了该化合物对SF763细胞的促凋亡活性。结果表明,与临床一线亚硝基脲类抗肿瘤药物尼莫司汀相比,多功能亚硝基脲能够更有效地抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡,并具有明显的低氧靶向性。     

低氧激活偶氮苯类AGT抑制剂的合成及还原性研究

O~6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶(AGT)是一种重要的DNA修复酶,AGT在保护正常细胞DNA不受烷化剂损伤的同时,也能够修复抗癌烷化剂对肿瘤细胞DNA的损伤,进而导致抗肿瘤药物的耐药性。设计合成了一类具有肿瘤低氧靶向性的AGT抑制剂,合成化合物能够特异性地在肿瘤低氧环境中被还原,释放AGT抑制剂——O~6-3-氨基苄基鸟嘌呤(ABG);而在常氧条件下不能被激活,不能发挥AGT抑制作用。因此,合成化合物可与氯乙基亚硝基脲等烷化剂联合用药,通过靶向性地抑制肿瘤低氧区域中AGT的活性,提高肿瘤细胞对抗癌烷化剂的敏感性。设计合成了4种以偶氮甲苯衍生物为低氧激活基团的O~6-烷基鸟嘌呤衍生物。经过体外实验模拟实体瘤中的低氧环境,确证了4种化合物均能够选择性地在低氧条件下被还原为AGT抑制剂——ABG; 4种目标化合物的还原活性为:(E)-6-((3-((4-(二丙基氨基)苯基)二氮烯基)苄基)氧基)-9H-嘌呤-2-胺(E)-6-((3-((4-(乙基氨基)苯基)二氮烯基)苄基)氧基)-9H-嘌呤-2-胺(E)-6-((3-((4-(二乙基氨基)苯基)二氮烯基)苄基)氧基)-9H-嘌呤-2-胺(E)-6-((3-((4-(甲基氨基)苯基)二氮烯基)苄基)氧基)-9H-嘌呤-2-胺,为开发新型靶向性抗肿瘤药物以及设计高效低毒的联合用药策略提供了新的思路。     

十二烷基二甲基苯氧乙基氯化铵的合成研究

苯酚与1．2-二氯乙烷在相转移催化剂存在下反应制得β-氯乙基苯基醚,该化合物与十二烷二甲基胺发生季铵化反应制得十二烷基二甲基苯氧乙基氯化铵。通过性质试验及红外光谱分析初步验证了产品的结构。     

O~6-甲基脱氧鸟嘌呤核苷和N~7-甲基脱氧鸟嘌呤核苷的制备

O~6-甲基脱氧鸟嘌呤核苷(O~6emdGuo)和N~7-甲基脱氧鸟嘌呤核苷(N~7mdGuo)是脱氧鸟嘌呤核苷的甲基加成物。可用2′-脱氧鸟嘌呤核苷和重氮甲烷的乙醚溶液于0℃反应2小时制备。重氮甲烷是以N-甲基-N-亚硝基对甲苯磺酰胺在碱性溶液中反应得到的。     

9-(2-羟基乙基)-6-氨基-2-烷硫基嘌呤衍生物的合成

以2-氨基-6-氯嘌呤为原料,与2-溴乙基乙酸酯反应得到9-乙酰氧基乙基-2-氨基-6-氯嘌呤(Ⅰ),收率65.6%;Ⅰ经重氮-烷硫化得到9-乙酰氧基乙基-2-烷硫基-6-氯嘌呤(Ⅱ),收率58.3%~72.1%;Ⅱ与叠氮化钠反应得到9-乙酰氧基乙基-2-烷硫基-6-叠氮嘌呤(Ⅲ),收率86.4%~92.0%。经核磁检测Ⅲ在溶液中存在叠氮结构(A)和四氮唑结构(T)的互变异构现象,CDCl3中叠氮结构比例在61.5%~67.2%。采用PPh3-HCl-DMSO为反应体系,"一锅法"将叠氮基还原为氨基同时将酯基彻底水解,高收率(~90%)得到9-(2-羟基乙基)-6-氨基-2-烷硫基嘌呤衍生物(Ⅳ)。这些化合物的结构经IR、1HNMR、13CNMR及HRMS得到确证。     

间甲苯胺烷基醇类化合物的合成

间甲苯胺烷基醇类化合物在临床生化检验中是一类较新型的 Trinder's 反应色团。我们参照文献合成了两个间甲苯胺烷基醇类化合物。1 实验部分1.1 N,N-二(2-羟乙基)间甲苯胺。间甲苯胺20mL(0.19mol)、2-氯乙醇64mL(0.95mol)、水190mL、碳酸钙26g(0.26mol),在搅拌下回流反应7h。趁热过滤。未反应的碳酸钙用少量热水洗,滤液用 NaCl 饱和,用乙醚提取,无水硫酸钠干燥。浓缩后减压蒸馏177～178℃/1200Pa,用乙酸乙酯重结晶,得29.2g。收率80%。m.p.72～73℃。TLC:用     

烷基锍类化合物与DNA复合物的性质研究

为开发新型非病毒基因载体,研究了烷基锍类化合物作为基因载体的性能.通过动态光散射实验测定了烷基锍类化合物与质粒DNA复合物的粒径和Zeta电位,通过MTT法研究了烷基锍类化合物的细胞毒性,并通过荧光显微镜观察了复合物的细胞摄取情况.结果 表明,4个烷基锍类化合物与质粒DNA在硫磷比(S/P)为40/1、50/1时形成复...     

N,N-二烷基氨基乙基-4-氯苄基醚的合成

采用相转移催化的方法合成了5个N,N-二烷基氨基乙基-4-氯苄基醚化合物,产率为67%～82%.适宜的反应条件是:以二烷基氨基乙醇、4-氯氯化苄为原料,四丁基溴化铵为相转移催化剂,氢氧化钠固体为碱,甲苯为溶剂,n(R1R2NCH2CH2OH):n(ClArCH2Cl):n(NaOH):n(PTC)=1:1:2:0.05,反应时间为2 h,温度为70℃.产物经过沸点、元素分析、红外光谱、氢质子核磁共振谱给予确证.     

SnCl2催化合成N,N-二乙基甘氨酸酯

对9种N,N-二乙基甘氨酸酯的合成进行了研究。以SnC l2作催化剂,N,N-二乙基甘氨酸分别与正己醇、正辛醇、正癸醇、正十二烷醇、正十四烷醇、正十六烷醇、香叶醇、香茅醇和1,6-己二醇在环己烷中回流反应合成了N,N-二乙基甘氨酸正己酯、N,N-二乙基甘氨酸正辛酯、N,N-二乙基甘氨酸正癸酯、N,N-二乙基甘氨酸正十二烷醇酯、N,N-二乙基甘氨酸正十四烷醇酯、N,N-二乙基甘氨酸正十六烷醇酯、N,N-二乙基甘氨酸香叶醇酯、N,N-二乙基甘氨酸香茅醇酯和N,N-二乙基甘氨酸-6-羟基-1-己酯,其结构经IR谱1、HNMR谱和ESI-MS谱确证。并考察了各因素对产物收率的影响,较佳的反应条件是:n(脂肪醇)∶n(N,N-二乙基甘氨酸)∶n(氯化亚锡)=1∶1.2∶0.09,在环己烷中回流2.5 h,产物的收率为89.3%~97.6%。     

生产取代的氯甲烷化合物的方法

正这一过程可以提供工业更有利生产氯甲烷化合物与烷氧羰基取代,一个烷基羰基组或芳基组。解决方案:对于一个取代的氯甲烷化合物的生产过程(例如,2-氯-3,5-戊二酮)由公式(2)(其中E1至E3是每一烷氧羰基可取代,一个烷基羰基组可被取代的芳基组,可取代或氢)包括反应一组6元素的金属或一组6元素化合物与过氧化氢制备一组6元素氧化     

含酯基不对称双季铵盐表面活性剂的合成

以长链烷基叔胺、盐酸、环氧氯丙烷为原料,合成了N (3 氯 2 羟丙基) N,N 二甲基长链烷基氯化铵,研究了其合成工艺,优化反应条件为:n(长链烷基叔胺)∶n(盐酸)∶n(环氧氯丙烷)=1∶1∶1 1,反应温度为40℃,体系pH=6～7。以月桂酸及2 二甲氨基乙醇为原料,酯化得到二甲基月桂酸乙基叔胺(Ⅲ),利用其与N (3 氯 2 羟丙基) N,N 二甲基长链烷基氯化铵季铵化得到含酯基不对称双季铵盐阳离子表面活性剂〔长链烷基分别为(Ⅰ)C12H25和(Ⅱ)C14H29〕。经测定,产物的临界胶束浓度CMC分别为6 61×10-3、8 31×10-3mol·L-1,γCMC分别为37 6、39 2mN·m-1,证明所合成的含酯基不对称双季铵盐阳离子表面活性剂具有较高的表面活性。     

疏水缔合水溶性聚合物P(AM/NaAA/DiAC14)的合成与性能

以双烯丙基胺和1-溴代十四烷为原料成了疏水单体N,N-双烯丙基-N-十四烷基胺(DiAC14);采取前加碱二元胶束共聚-共水解法合成了疏水缔合丙烯酰胺/丙烯酸钠/N,N-双烯丙基-N-十四烷基胺共聚物[P(AM/NaAA/DiAC14)],研究了其在水溶液中的缔合行为.结果表明P(AM/NaAA/DiAC14)缔合行为取决于其Mη的大小、疏水单体摩尔分数及其嵌段长度和分布.     

(甲基)丙烯酸全氟烷基乙酯及其关键中间体的合成

(甲基)丙烯酸全氟烷基乙酯是制备含氟憎水憎油织物整理剂的最重要也是最关键的中间单体.综述了调聚法合成关键中间体全氟烷基乙基碘化物,电解氟化法、四氟乙烯与甲醇调聚法、酯化-水解法或酯化-催化氢化法合成全氟烷基醇,以及(甲基)丙烯酸全氟烷基乙酯的合成方法,以期为(甲基)丙烯酸全氟烷基乙酯制备的工业化提供必要的技术支撑.     

2-氯-6-甲氧基-9-烷基嘌呤化合物的合成

以2-氨基-6-氯嘌呤为原料,通过烃基化反应、重氮化反应和烷氧基化反应,得到2-氯-6-甲氧基-9-烷基嘌呤化合物,其结构经MS、1HNMR和元素分析等方法确认。探讨了溶剂选择、原料配比、催化剂和反应温度等因素对N9-烃基化反应的影响,其最优反应条件为:以DMF为溶剂,碳酸钾为缚酸剂,苄基三乙基氯化铵为相转移催化剂,n(2-氨基-6-氯嘌呤)∶n(溴代烷)=1∶3,n(溴代烷)∶n(碳酸钾)=1∶1.5,与碳酸钾等物质的量的苄基三乙基氯化铵,反应温度为20℃,烃基化反应收率可达76%以上。     

6-烃氧基-2-烷硫基腺苷化合物的合成及抗血小板凝聚活性

以鸟嘌呤核苷(Ⅰ)为原料,经羟基保护得到2',3',5'-三-O-乙酰基鸟嘌呤核苷(Ⅱ),Ⅱ与三氯氧磷反应得到2-氨基-6-氯-9-(2',3',5'-三-O-乙酰基-β-D-呋喃核糖基)嘌呤(Ⅲ),Ⅲ再进行重氮-烷硫化反应,生成2-烷硫基-6-氯-9-(2',3',5'-三-O-乙酰基-β-D-呋喃核糖基)嘌呤(Ⅳ),Ⅳ与醇进行亲核取代反应同时脱去糖环保护得到8个6-烃氧基-2-烷硫基嘌呤腺苷化合物(Ⅴ)。化合物的结构经1HNMR、13CNMR、IR和HRMS表征,同时对合成的目标化合物进行了体外抗血小板凝聚活性测试。结果表明,在测试浓度为10μmol/L时,6-(2-呋喃甲基)氧基-2-丙硫基腺苷具有较高的抗血小板凝聚活性。     

(4R,6S)-6-乙酰氧甲基-2,2-二甲基-1, 3-二氧六环-4-乙酸叔丁酯合成研究

以(S)-4-氯-3-羟基丁腈为起始物料,与六甲基二硅胺烷进行羟基保护反应合成(3 S)-4-氯-3-[(三甲基硅烷基)氧基]丁腈.(3 S)-4-氯-3-[(三甲基硅烷基)氧基]丁腈在四氢呋喃中与溴乙酸叔丁酯进行加成反应合成(5S)-6-氯-3,5-二羟基乙酸叔丁酯.(5S)-6-氯-3,5-二羟基乙酸叔丁酯在水中,...     

烷基氯代物在光照下铜催化的三氟甲基化反应

在光照、铜(Ⅰ)催化剂和碱作用下,N,N-二甲基乙酰胺(DMAc)中烷基氯代物与三氟甲基三甲基硅烷反应,完成烷基氯代物的三氟甲基化。该合成方法高效,且避免了高温和有毒有害的反应条件。烷基氯代物的三氟甲基化有助于我们构建一种非活化C(sp~3)-CF_3键,具有十分重要的研究价值。     

6-氯鸟嘌呤合成工艺的改进

以鸟嘌呤为起始原料,首先鸟嘌呤与N,N-二甲基甲酰胺和三氯氧磷反应,其后调节溶液pH值在3-4范围内进行水解反应,制得2-甲酰氨基-6-氯嘌呤,再经碱水解、中和得6-氯鸟嘌呤。考察了投料方式、重结晶溶剂对收率的影响,得到适宜的工艺条件为：投料时,先将三氯氧磷在低温下滴入N,N-二甲基甲酰胺配成混合溶液,其后滴入鸟嘌呤,在1,2-二氯乙烷中进行反应;重结晶溶剂选用N,N-二甲基甲酰胺,产品收率达78%（以鸟嘌呤计）,纯度为99%。     

O~6-甲基脱氧鸟嘌呤核苷—磷酸的制备

O~6-甲基脱氧鸟嘌呤核苷一磷酸由O~6-甲基脱氧鸟嘌岭苷与磷酸三甲酯在-10℃反应得粗品,再经 DEAE-Sephadex 和 Tsk-gel Toyopearl 二次柱层析纯化,最后用甲醇、丙酮和乙醚(1:1:8)重结晶,得无色针状结晶。