中国沙棘染色体的染色和制片技术

以中国沙棘的茎尖为材料,进行不同的取样时间、预处理、固定、解离时间处理后,压片观察染色体。结果表明:早上09:00～10:00取生长旺盛的茎尖组织,用8-羟基喹啉预处理材料1.5～2.5h,卡诺固定液固定2～3h置于60℃恒温水浴酸化15～20min,用改良的卡宝品红染色15min,制出的玻片染色体清楚,效果极佳。     

木薯染色体数目的鉴定技术

以木薯的根尖、茎尖为材料,对木薯的染色体的镜检技术进行了研究.结果表明:采用8-羟基喹啉预处理根尖2 h、盐酸溶液解离15 min、改良苯酚品红染色10～15 min,效果理想;染色体缩短变直,分散均匀,并均匀地染上了蓝紫色,较易进行染色体的观察和计数.     

外源激素对马铃薯扦插苗腋芽薯形成的影响

以剪取的马铃薯品种大西洋试管脱毒苗移栽成活后20天、30天、40天的茎尖为试验材料,在扦插前用四种不同的生根液进行处理,研究它们对扦插苗腋芽薯形成的影响。结果表明,剪取茎尖的幼苗的苗龄越小,四种生根处理的差异愈小,幼苗的苗龄越大,四种生根处理的差异愈大,其中用赤霉素 NAA处理的扦插苗匍匐茎最多,结薯量最高。     

药用植物刺五加根尖压片技术研究

[目的]研究药用植物刺五加根尖的压片技术。[方法]以刺五加幼苗根尖为试材,通过压片试验研究取材时间、预处理液浓度、预处理时间、固定和保存、解离时间和染色条件对根尖压片效果的影响。[结果]最佳取材时间为9：30～10：30和13：30～14：30;用0．10％秋水仙素处理2．5和3．0h的材料的中期和前中期细胞增多;固定根尖2．0～4．0h对后续操作没有显著影响;60℃下解离10min以上根尖的细胞膜破裂较多,解离8min以下的根尖的细胞壁没有破碎,镜下观察细胞呈方形,无膨胀。室温下解离15min以上和12min以下的解离效果都不理想。室温下用1mol／L盐酸解离根尖15rain,然后用改良的石炭酸品红染液进行染色,通常染色10min左右即可达到较好的染色效果。[结论]该研究为刺五加的染色体核型分析提供了技术支持。     

新疆紫草不同材料染色体制片技术研究

[目的]研究新疆紫草不同材料的染色体制片方法,为今后倍性鉴定奠定技术基础.[方法]以新疆紫草根尖及毛状根根尖为试验材料,采用常规制片法,分别考察培养方式及培养时间、取材时间、预处理方法、酸解方法、酸解时间、染色时间对染色体制片效果的影响.[结果]B5固体培养基培养4d的毛状根中期分裂相指数较大,且染色体清晰,制片效果较好;早上08:00取材的毛状根根尖的中期分裂相指数(124.2‰)最高,原植物根尖(115.4‰)在早上10:00取材较为适宜;毛状根根尖采用0.1;秋水仙素、温度15℃、预处理时间4h时的中期分裂指数为97.6‰～124.2‰,室温酸解法、10;盐酸、酸解时间为12 min、染色时间为20 min有利于毛状根根尖的制片.原植物根尖采用0.1;～0.2;秋水仙素、温度4 ～15℃、预处理时间3h、室温酸解法、10;盐酸、酸解时间为15 min时的中期分裂指数为128.6‰～128.9‰.[结论]材料不同则取材时间及秋水仙素预处理时间就有所不同.秋水仙素预处理时间、温度及酸解时间是影响新疆紫草染色体制片效果的关键因素.     

马铃薯病毒试管苗保存技术及病毒侵染力的研究

无菌条件下切取毒源马铃薯茎尖于MS培养基中培养,当毒源试管苗长至10 cm时切取单节段扩繁。通过免疫电镜法、电镜负染法和DAS-ELISA法鉴定,筛选出4管纯毒源材料。筛选出的试管苗毒源经18个月保存病毒仍存在,将毒源试管苗移至花盆中栽培,试验管苗表现出马铃薯病毒A(PVA)侵染症状,用毒源马铃薯汁液接种的指示植物也表现典型PVA症状,说明毒源试管苗保存的PVA具有侵染力。用试管苗保存马铃薯病毒,可提高毒源保存效果。     

小麦根尖染色体制片及植株倍性鉴定

[目的]探讨小麦根尖染色体制片的最佳技术参数,并对小麦远杂组培苗进行倍性鉴定。[方法]以品种郑麦9023为材料,通过种子催芽、种子根根尖压片试验对小麦根尖的染色体制片方法进行探讨,找出最适合的技术参数,用于小麦远杂组培苗的根尖染色体压片试验,并对其倍性进行鉴定。[结果]利用冰水混合物处理根尖可代替浓度0.1%秋水仙素的作用;根尖的酸解时间宜控制在9.5～10.0min;夏季染色时间宜在5 min以内,冬季染色时间宜在10～15 min。经染色体压片计数得到该小麦组培苗的染色体数为21条,鉴定其为小麦单倍体苗,可进行下一步育种。[结论]该研究对指导单倍体育种具有重要作用。     

三七根尖染色体倍性鉴定技术研究

为明确三七染色体的数目和倍性,采用多倍体三七籽条根尖进行染色体制片技术研究。结果表明,用8-羟基喹啉预处理根尖6 h(更换试液2 h/次),清洗,然后在水中延展10 min,用卡诺固定液Ⅰ固定3～24 h,换入70%酒精保存,水洗后加1 mol/L HCl于58～60℃水浴锅中水解10 min,倒去HCl,置于45%乙酸中浸泡2 min,用Schiff试剂染色40 min左右,2.5%纤维素酶+1.25%果胶酶混合酶液酶解37 min,洗涤酶液,固定,制片可得到较好的染色体制片效果,能清楚看到加倍的染色体。     

文心兰染色体的制片技术

以文心兰根尖为材料,采用常规制片法,对染色体制片的取样时间、预处理液、固定液、解离时间、染色液及染色时间进行了研究。结果表明：文心兰组织培养苗培养温度为25℃;适宜的取样时间为5～6月的上午10：00;材料放入1g·L^–1的秋水仙素＋0.002mol·L^–1的8-羟基喹啉混合液中室温预处理4h的效果最好,用卡诺氏液固定12～24h,可获得较多的细胞分裂相,1mol·L^–1的盐酸60℃水浴锅中恒温解离8min的效果较好,用改良的苯酚品红染色制片效果最好。     

马铃薯试管苗保存毒源PVA技术的研究

报道了含PVA毒源的马铃薯试管苗保存技术及效果。在无菌条件下切取毒源马铃薯茎尖于盛MS培养基的试管中培养,当毒源马铃薯长至12 cm时单节切段进一步扩繁培养。利用免疫电镜法、电镜负染法筛选出3管纯毒源材料。进一步试验表明:免疫电镜法鉴定证明毒源马铃薯试管苗接种3周后病毒含量明显提高;毒源马铃薯试管苗移至花盆中栽培表现出典型的PVA症;用毒源马铃薯的汁液接种指示植物表现典型PVA状,说明毒源马铃薯试管苗的PVA具有侵染力。用马铃薯试管苗保存PVA毒源,克服了传统保存中的不足,提高了保存效果。     

橡胶树芽接桩不同质种植材料生长试验初报

对橡胶树芽接桩7类不同质种植材料,即芽接桩砧木大小、紫芽（幼态）、绿芽（老态）、砧木刺检胶乳多少、生产常规种植材料,进行对比栽培试验研究,得到了大砧木比小砧木,紫芽比绿芽,砧木刺检胶乳多的材料比砧木刺检胶乳少的材料、常规种植材料比刺检胶乳少的材料生长速度快的结果,尤其紫芽种植材料生长表现较佳,由此提出合理选用无性系种植材料的建议。     

不同光质对矮生黄瓜形态结构的影响

以蔓生黄瓜129(对照)和矮生黄瓜D0462为试材,试验采用石蜡切片技术对不同光质处理后的黄瓜叶片和节间进行切片观察,用透射电镜观察其叶绿体超微结构,研究光质对其生长及形态结构的影响。结果表明,蓝光和红光对蔓生黄瓜和矮生黄瓜均有影响,且蓝光影响更大。矮生黄瓜经蓝光和红光处理后叶片厚度、节间单位面积的细胞数显著或极显著增加且显著或极显著大于蔓生对照,细胞长极显著缩短,细胞宽显著或极显著增加。通过电镜观察叶绿体超微结构可知,经红光处理后,矮生黄瓜的淀粉粒数极显著多于蔓生对照,基粒数极显著小于蔓生对照。另外经蓝光处理后,对矮生黄瓜的叶绿体大小、基粒厚度和基粒片层数影响极大。     

北方核桃芽接技术改良的研究

[目的]改变核桃嫁接成本居高不下的现状,拟通过技术手段降低苗木繁育成本。[方法]采用方块芽接方法以,分析砧木处理和剪砧时期对嫁接核桃生长状况和成本的影响。[结果]平茬的成活率高于不平茬的成活率,但可嫁接比例较不平茬的低了9个百分点,且平茬处理成本略高于不平茬处理的成本;不同剪砧时期造成的成本差异十分明显,嫁接后15 d剪砧成本是嫁接后1d剪砧成本的5倍。[结论]砧木不平茬可令苗木管理简单方便,虽成活率有所降低,但总体成本低;嫁接后嫁接口上部砧木去除时期越早越好,嫁接后5 d内剪除同,不仅可以提高苗木质量,还会大幅降低苗木管理成本。     

油茶高接换冠成活率及生长量影响因素的研究

以普通油茶作砧木、普通油茶和攸县油茶作接穗进行高接换冠,开展郁闭度、接穗保存时间、坡位和不同物种接穗对嫁接成活率及接穗新梢生长量影响的试验研究。结果表明:随着油茶林分郁闭度的增大,嫁接成活率增高;接穗保存时间越短,嫁接成活率越高;山腰的嫁接成活率高达82.3%,明显高于山顶和山脚;普通油茶和攸县油茶嫁接亲和性差异不大。偏相关分析表明,郁闭度对成活率影响最大,其次为接穗保存时间,而坡位和品种对成活率影响较弱。坡位对新梢生长量影响明显,接穗保存时间和接穗品种对新梢生长量影响较小。     

不同培养基对葡萄柚砧木种子萌发的影响

为了找到柚类砧木苗培育的最佳培养基配方,以曼赛龙柚种子为试验材料,研究不同培养基、不同植物激素对种子萌芽和出苗的影响。结果表明:MS培养基对曼赛龙柚种子发芽率和出苗率比1/5MT、1/2MT、MT培养基及1/5MS、1/2MS培养基更好,出苗率为81.7%,是最适培养基。NAA、6-BA、GA_3均能缩短曼赛龙柚种子萌芽时间,而用100mg·L~(-1) GA_3浸种24h的种子发芽率和出苗率最高,效果最好。     

多粘类芽孢杆菌CP7β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆、表达及应用

【目的】克隆多粘类芽孢杆菌(Paenibaccillus polymyxa)CP7的β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因,构建高效表达工程菌株,为CP7菌的抗菌活性组分研究和开发利用以及葡聚糖酶在农业生产中的应用提供理论依据。【方法】通过CP7菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆及原核表达构建工程菌株,采用平板对峙培养和生长速率测定法研究重组酶对供试真菌的生长抑制活性,同时采用体外消化法研究该酶对麦类饲料消化率的影响。【结果】成功克隆目的基因并在原核系统获得高效表达。重组酶蛋白对4种供试真菌菌丝生长具有明显抑制作用,平均抑制率高达40%以上;添加了重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的处理组样品,经体外消化后黏度降低了4.69%(P﹥0.05)。【结论】β-1,3-1,4-葡聚糖酶是CP7菌发酵液中抗真菌活性组分或其中之一,对真菌生长抑制的活性作用提示其可作为农业抗病虫害新型药物进行开发研究;该酶能够有效降低麦类饲料黏度,表明其作为饲料添加剂的开发利用同样具有良好前景。     

梨矮砧组培苗微嫁接技术研究

以梨矮化砧木S2组培苗为接穗与杜梨实生砧木进行嫁接,研究了影响微嫁接成活率的因素。结果表明,选择继代培养30d左右、生长健壮、顶端具有明显新梢、基部半木质化的组培苗,经过4～6d的强光炼苗,嫁接到半木质化杜梨砧木上,在25℃左右、湿度70%～75%和适当遮光环境下容易成活,成活率高达84.8%。     

杜梨黄果嫁接对比试验

分别以杜梨苗和黄果根蘖苗作砧木，以黄果作为接穗进行嫁接，当年杜梨嫁接苗成活率为92．3％，苗高1．2-1．7m根茎1．9-2．0cm，生长势稍优于根蘖苗。     

新型苹果矮化砧木辽砧2号抗寒性试验

[目的]为选育抗寒的苹果矮化砧木提供依据。[方法]用枝条电泳和区域栽植的方法,对新型苹果矮化砧木——辽砧2号进行抗寒性试验。[结果]在相同条件下,辽砧2号半致死温度比M26低-7.7℃,比抗寒性极强的山丁子仅低-2.2℃。在辽宁省新宾县、铁岭县年平均气温为6.1～7.0℃的寒地苹果栽培区栽植,4年生的辽砧2号砧木存活率达95%,比寒富苹果品种的存活率高15%,表现出很强的抗寒性。[结论]枝条电导是检测果树抗寒性的有效方法。