四妙勇安汤对糖尿病溃疡大鼠Wnt/β-catenin信号通路表达的影响

目的观察糖尿病溃疡模型大鼠中Wnt/β-catenin信号通路表达的变化及四妙勇安汤对该通路的影响。方法雌性Wistar大鼠按随机数字表随机分为正常对照组(对照组,17只)和糖尿病组(DM组,34只)。对照组给予普通饲料继续饲养,糖尿病组采用高脂高糖饲料联合小剂量链脲佐菌素液腹腔注射法制备糖尿病模型。随后将造模成功大鼠分为糖尿病溃疡组(DU组)、糖尿病溃疡-四妙勇安汤组(DU-四妙组),每组各15只。于对照组选取15只,作为溃疡对照组(CU组)。DU-四妙组采用四妙勇安汤灌胃,CU组及DU组采用生理盐水灌胃。观察创面造模后第3、7、14日各组创面愈合情况的变化,并采用HE染色法检测创面组织形态结构的变化,采用ELISA法、RT-PCR法检测创面组织中β-连环素(β-catenin)、糖原合成激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、R-脊椎蛋白3(R-spondin 3,Rspo-3)蛋白及mRNA的变化。结果创面造模后第3、7、14日,各组大鼠创面愈合率均为CU组DU-四妙组DU组,差异有统计学意义(P0.05)。创面造模后第3、7、14日,与CU组比较,DU组创面组织中β-catenin及Rspo-3蛋白含量及mRNA表达降低,GSK-3β蛋白含量及mRNA表达升高(P0.05);与DU组比较,DU-四妙组β-catenin蛋白含量及mRNA表达升高,GSK-3β蛋白含量及mRNA表达降低(P0.05),DU组与DU-四妙组间Rspo-3蛋白含量及mRNA表达比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 Wnt/β-catenin通路的下调有可能导致了糖尿病溃疡的难愈,而四妙勇安汤也可能通过对Wnt/β-catenin信号通路进行调节而促进了糖尿病溃疡的愈合。     

灯盏花素对腹膜透析相关腹膜间皮细胞VEGF及TGF-β1的影响

目的:探讨灯盏花素对腹膜透析液诱导的体外培养的人腹膜间皮细胞血管内皮细胞生长因子(VEGF)及转化生长因子β1(TGF-β1)分泌的影响。方法:体外培养人腹膜间皮细胞,随机分对照组、PDS组、DA组(灯盏花素终浓度为5μmol/L)、DB组(灯盏花素终浓度为10μmol/L)、DC组(灯盏花素终浓度为20μmol/L)5组对照观察。培养48 h后检测各组上清液中VEGF及TGF-β1的含量并进行比较。结果:腹膜间皮细胞在PDS诱导下,VEGF及TGF-β1分泌显著增加(P<0.01);与PDS组比较,经灯盏花素干预后的VEGF参数DB、DC组及TGF-β1参数DA、DB、DC组显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论:灯盏花素可以抑制腹膜透析液诱导的体外培养的人腹膜间皮细胞VEGF及TGF-β1的分泌。     

毛冬青甲素促进骨髓间充质干细胞迁移的实验研究

目的观察毛冬青甲素（ilexonin A, IA）干预大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）后基质细胞衍生因子（SDF-1）特异性受体CXCR4和Wnt通路中β-连环蛋白（β-catenin）、糖原合成激酶（GSK-3β）的表达情况,探讨IA预处理促进BMSCs体外迁移的分子机制。方法采用全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化大鼠并行BMSCs鉴定。将BMSCs分为对照组、Wnt3a组、IA组、IA + Wnt3a组、IA + Dkk1组、Dkk1组。以Wnt 信号通路的激动剂Wnt3a、抑制剂Dkk1干预,Western blot法观察β-catenin、GSK-3β与CXCR4的表达关系。结果与对照组比较,Wnt3a组、IA组CXCR4、β-catenin蛋白表达显著增强、GSK-3β蛋白表达显著减弱;（P<0.05）,Dkk1组CXCR4、β-catenin蛋白表达显著减弱（P<0.05）;与Wnt3a组、IA组分别比较,IA+Wnt3a组CXCR4蛋白显著增强,GSK-3β蛋白表达显著减弱（P<0.05）;与Dkk1组比较,IA+Dkk1组CXCR4、β-catenin蛋白表达显著增强,GSK-3β蛋白表达显著减弱（P<0.05）;与IA组比较,IA+Dkk1组β-catenin的表达显著减弱,GSK-3β蛋白表达显著增强（P<0.05）。结论IA上调CXCR4 的表达,可能与 BMSCs 的Wnt/β-catenin信号通路激活有关,发挥其促迁移的作用。     

活血化瘀法对鼠颈动脉粥样硬化损伤血管wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:观察活血化瘀法对颈动脉粥样硬化血管内皮损伤模型大鼠wnt/β-catenin信号通路的影响,探讨其可能的作用机制。方法:32只SD大鼠高脂喂养1个月后,随机取8只作为假手术组(仅切开皮肤),其余大鼠均行颈总动脉球囊损伤术,成膜后再随机分为模型组(n=8只)、活血化瘀中药方中剂量(临床等效量)组(n=8只)和高剂量(临床2倍量)组(n=8只)。从术后第4天开始予以相应药物灌胃治疗(模型组、假手术组灌等量生理盐水),2周后取术侧颈总动脉段,采用实时荧光定量PCR法捡测wnt、Fz D1、AXIN1、GSK-3β、β-catenin、VEGF mRNA基因表达水平。结果:与假手术组比较,模型组wnt、Fz D1、AXIN1、β-catenin、VEGF等mRNA水平降低,差异有统计学意义(P0.01),经活血化瘀中药方干预后,上述各基因mRNA水平均有不同程度升高,尤其是高剂量组与模型组比较差异有统计学意义(P0.05~0.01);只有GSK-3βmRNA水平各组无明显差异。结论:活血化瘀法可通过上调wnt/β-catenin信号通路表达,使损伤血管VEGFmRNA基因表达水平上升,提示该法可保护颈动脉粥样硬化血管内皮损伤。     

老鹳草素通过Wnt/β-catenin信号通路影响小鼠骨髓基质干细胞的增殖和成骨分化

目的:观察Wnt/β-catenin信号通路在老鹳草素诱导小鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)增殖和成骨分化中的作用机制。方法:分离、培养小鼠BMSCs,分为对照组(DMEM/F12完全培养基)、老鹳草素低剂量组(10-9mol·L-1老鹳草素+DMEM/F12完全培养基)、老鹳草素中剂量组(10-8mol·L-1老鹳草素+DMEM/F12完全培养基)、老鹳草素高剂量组(10-7mol·L-1老鹳草素+DMEM/F12完全培养基)、老鹳草素高剂量+DKK1(Wnt/β-catenin信号通路特异性阻断剂)组和DKK1组。成骨诱导第7天时,采用CCK-8法检测细胞增殖,碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)试剂盒测定ALP活性及OCN含量。成骨诱导48 h时,采用Real time-PCR和Western-blot检测各组Wnt/β-catenin信号通路的关键信号分子Wnt3a、β-catenin、GSK-3β、Axin2、Runx2 mRNA和蛋白表达。结果:成骨诱导第7天时,老鹳草素各剂量组明显促进BMSCs的增殖,呈剂量依赖性(均P<0.05);同时ALP活性及OCN含量较对照组显著升高,呈剂量依赖性(均P<0.05)。成骨诱导48 h时,老鹳草素各剂量组Wnt3a、β-catenin、Axin2、Runx2 mRNA和蛋白表达较对照组显著上调,GSK-3βmRNA和蛋白表达较对照组显著下调,呈剂量依赖性(均P<0.05)。加入DKK1后,细胞增殖受到显著抑制,ALP活性及OCN含量显著降低(均P<0.05);同时Wnt3a、β-catenin、Axin2、Runx2 mRNA和蛋白表达显著下调,GSK-3βmRNA和蛋白表达显著上调(均P<0.05)。结论:老鹳草素能够明显促进BMSCs的增殖及向成骨方向分化,其机制与Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。     

灯盏花素对梗阻性肾病大鼠局部肾组织血管活性物质的影响

目的:观察灯盏花素对梗阻性肾病大鼠肾组织的保护作用及对血管活性物质的影响.方法:将SD大鼠按照体重不同随机分为假手术组、梗阻性肾病模型组、贝那普利5 mg'kg-1组、灯盏花素100,200 mg· kg-组,ig给药.假手术组及模型组ig给予0.9％氯化钠溶液,1次/d,连续7d.给药结束后收集尿液进行N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)测定,称重大鼠两侧肾脏,HE及Masson染色观察大鼠肾组织病理改变,免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,放射免疫法、比色法分别检测肾组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),血管紧张素转化酶(ACE),一氧化氮(N0)和内皮素-1(ET-1)活性.结果:与假手术组比较,模型组大鼠尿液中NAG酶活性及左侧肾脏质量明显增加(P＜0.01),肾间质可见大量炎性浸润及充血,纤维化明显,肾小管明显增宽,ET-1,ACE及AngⅡ升高而NO含量降低(p＜0.01).与模型组比较,贝那普利组及两个灯盏花素实验组尿液中NAG酶活性及左侧肾脏质量减轻(P＜0.05,P＜0.01),肾组织改善明显.与模型组比较,两个灯盏花素实验组大鼠肾组织中ET-1,ACE及AngⅡ含量降低而NO升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:灯盏花素可能通过影响肾组织中血管活性物质,下调ET-1,ACE及AngⅡ,上调NO等作用减轻梗阻性肾病.     

大鼠灌胃灯盏花素后血浆、胆汁、尿液以及粪便中代谢产物的鉴定

目的 对大鼠灌胃灯盏花素后收集的血浆、胆汁、尿液以及粪便中存在的灯盏乙素的代谢产物进行鉴定.方法 通过使用HPLC结合光电二极管阵列检测器(DAD),采用梯度洗脱的方法 ,对比分析给药组大鼠和空白组大鼠的血浆、胆汁、尿液以及粪便样品,并且在相同的液相色谱条件下与对照品的保留时间和紫外吸收特征进行对照来鉴定主要代谢产物.结果 从大鼠ig 20、200 mg/kg灯盏花素的血浆中鉴定了代谢产物野黄芩素-6-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6-O-β-D-glucuronide,M5);从大鼠ig 20、200 mg/kg灯盏花素的胆汁中鉴定了代谢产物野黄芩素-6,7-O-β-D-二葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6,7-di-O-β-D-glucuronide,M1)、6-O-甲基-灯盏乙素(6-O-methylscutellarin,M3)、、野黄芩素-6-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6-O-β-D-glucuronide,M5)和灯盏乙素(黄芩素苷,scutellarin,M7),从大鼠ig 20 mg/kg灯盏花素的尿液中鉴定了代谢产物野黄芩素-6,7-O-β-D-二葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6,7-di-O-β-D-glucuronide,M1),从大鼠ig 200 mg/kg灯盏花素的尿液中鉴定了代谢产物野黄芩素-6,7-O-β-D-二葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6,7-di-O-β-D-glucuronide,M1)、野黄芩素(scutellarein,M2)和灯盏乙素(scutellarin,M7);从大鼠ig 200 mg/kg灯盏花素的粪便中鉴定了代谢产物野黄芩素(scutellarein,M2).结论 灯盏乙素在大鼠体内发生了广泛的代谢,并且主要以其代谢产物的形式存在;灯盏乙素在大鼠体内产生的代谢产物主要通过尿液和胆汁排泄.     

灯盏花最细粉对慢性肾功能衰竭大鼠保护作用的研究

目的研究灯盏花最细粉对慢性肾功能衰竭大鼠的保护作用。方法雄性SD大鼠40只,随机分为对照组、模型组、灯盏花最细粉组和普通粉组。对照组常规喂养,其余3组ig腺嘌呤(250 mg/kg)制备慢性肾功能衰竭大鼠模型,持续喂养21 d。造模成功后,对照组和模型组大鼠ig等体积蒸馏水,灯盏花最细粉组和普通粉组按照3 g/kg的剂量每天ig给予相应的灯盏花粉1次,持续治疗42 d。观察各组大鼠的一般情况,测定大鼠血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN);实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测肾脏转化生长因子β1(TGF-β1)、纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)m RNA的表达;ELISA法检测大鼠肾组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平;光镜观察大鼠肾组织形态学改变。结果与模型组比较,灯盏花最细粉组和普通粉组大鼠的Scr、BUN水平均降低(P0.05),肾组织TGF-β1、PAI-1 m RNA的表达水平下降(P0.05),TNF-α和IL-1β量降低(P0.05),病理改变也有不同程度的减轻。灯盏花最细粉组的治疗效果优于普通粉组。结论灯盏花对慢性肾功能衰竭大鼠具有很好的保护作用,且最细粉的治疗效果优于普通粉。     

信号通路糖原合成酶激酶-3β在β淀粉样蛋白损伤脑微血管 内皮细胞Tau蛋白表达中的作用及通心络干预研究

目的 :信号通路糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)在β淀粉样蛋白(Aβ)损伤脑微血管内皮细胞分泌Tau蛋白中的作用及通心络干预作用研究。 方法 :采用人脑微血管内皮细胞,随机分为正常组、模型组、通心络3个剂量组,通心络组细胞经通心络预处理6 h后,除正常组,各组加入终浓度为20 μmol·L^-1的Aβ_1-42干预24 h诱导细胞损伤,检测经处理后内皮细胞上清液中Tau蛋白表达及内皮细胞中Tau蛋白及其信号通路GSK-3β的表达情况。 结果 :模型组内皮细胞中Tau蛋白及其信号通路GSK-3β的表达均增强,通心络组Tau蛋白表达及其信号通路GSK-3β的表达均减弱。 结论 :Aβ_1-42可通过信号通路GSK-3β增强Tau蛋白的表达,而通心络降低Aβ1-42损伤的人脑微血管内皮细胞Tau蛋白表达可能通过抑制信号通路GSK-3β表达而实现的。     

肾络通对肾小管间质纤维化大鼠肾素-血管紧张素系统的影响

目的:观察肾络通对阿霉素诱导的肾小管间质纤维化大鼠肾组织肾素血管紧张素系统(RAS)及转化生长因子-β1(TGF-β1)、TGF-β1 mRNA袁达和纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)的影响.方法:采用生化、放射免疫法及免疫组织化学、原位杂交等方法观察大鼠肾功能,肾组织肾素活性、血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)水平及TGF-β1、FN、LN的蛋白表达和TGF-β1 mRNA表达.结果:肾络通及缬沙坦组肾功能明显改善,肾素活性、ANGⅡ水平有所下降,TGF-β1、FN、LN的蛋白表达及TF-β1 mfRNA减少.结论:肾络通可能通过调节RAS,抑制TGF-β1和TGF-β1 mRNA的表达,减少细胞外基质的沉积,减轻肾小管间质纤维化进程.     

毛蕊花糖苷通过Wnt/β-catenin信号通路对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤的改善作用

目的：探究毛蕊花糖苷通过调控Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路对缺血缺氧性脑损伤（HIE）新生大鼠的作用。方法：将72只新生SD雄性大鼠随机分为6组：假手术组、模型组、阳性药物组、毛蕊花糖苷高剂量组、毛蕊花糖苷低剂量组、毛蕊花糖苷+通路抑制组,每组12只,按组分别给予相应的干预。神经学评分评估大鼠神经行为学功能;TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测大鼠海马组织细胞凋亡率;干湿重法检测脑组织含水量;采用ELISA检测海马组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;荧光定量PCR法检测海马组织中Wnt1、Wnt3a、β-catenin mRNA表达水平;Western Blot法检测海马组织中Bcl-2相关x蛋白（Bax）、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Wnt1、Wnt3a、β-catenin蛋白的表达水平。结果：与模型组比较,毛蕊花糖苷高剂量组、毛蕊花糖苷低剂量组大鼠神经学评分,脑组织含水量,细胞凋亡率,凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3及炎症因子TNF-α、IL-1β含量均显著降低（P<0.05）,Wnt1、Wnt3a、...     

基于PP2A与GSK-3β探讨丹栀逍遥散对阿尔茨海默病模型大鼠tau蛋白磷酸化水平的作用机制

目的：研究丹栀逍遥散对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马中tau蛋白磷酸化水平与糖原合成激酶-3β(GSK-3β)、磷酸丝氨酰/磷酸苏安酰蛋白磷酸酶2A(PP2A)不同位点的影响及作用机制。方法：选用90只SPF级Wistar雄性大鼠,用双侧海马区注射冈田酸的方式建立AD大鼠模型。筛选出造模成功的大鼠,随机分为模型组,安理申组(0.5 mg·kg^-1),丹栀逍遥散高、中、低剂量组(17.55、8.77、4.38 g·kg^-1),连续灌胃42 d,1次/d。Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,尼氏染色观察海马区神经元形态结构,实时荧光定量聚合链式反应(Real-time PCR)检测tau蛋白、GSK-3β、PP2A mRNA表达情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测tau蛋白、GSK-3β、PP2A及相关蛋白的表达。结果：与空白组比较,模型组大鼠学习记忆能力显著降低(P<0.01),海马CA3区细胞结构异常,排列杂乱,数量减少,GSK-3β mRNA、GSK-3β、p-GSK-3β-Tyr216、p-PP2A、p-tau表达...     

灯盏花素-β-环糊精包合物片剂的质量标准研究

目的 研究灯盏花素β-环糊精包合物片剂的质量标准.方法 HPLC法测定包合物中灯盏花素含量.结果 灯盏花素的标准曲线方程为:γ=57834X-222894(r=0.999 9),线性范围为33.5～167.5 mg·mL-1;加样回收率为97.12%,RSD为1.67%.结论 本标准能有效控制灯盏花素β-环糊精包合物片...     

灯盏花素对糖尿病大鼠血转化生长因子β1和肾功能影响的实验研究

目的:探讨灯盏花素对糖尿病大鼠血转化生长因子β1和肾功能的影响.方法:选健康雄性昆明种SD大鼠70只,随机分为正常对照组(N)20只、糖尿病组(DM)和糖尿病灯盏花治疗组(EB)各25只,后2组用链脲菌素(streptozotocin, STZ)诱导建立糖尿病肾病大鼠模型,N组和DM组等量生理盐水腹腔内注射,EB组灯盏花素20mg.kg-1d->腹腔内注射,3组给药后2w和6w宰杀,收集血标本检测转化生长因子β1 (TGF-β1)、血肌酐和血尿素氮水平,6w时收集尿标本检测尿肌酐水平.结果:(1)血TGF-β1、血肌酐和血尿素氮水平为糖尿病组>灯盏花组>正常组,而血肌酐降低以2w组更明显(P<0.01);(2)尿肌酐排泄比较:正常组>灯盏花组>糖尿病组,有统计学差异(P<0.05).结论:灯盏花素可能通过对TGF-β1的影响而抑制肾脏增生,增加尿肌酐排泄,降低血尿素氮和血肌酐浓度发挥肾脏保护作用.     

左归丸对去势骨质疏松模型大鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:观察左归丸对去势骨质疏松大鼠模型骨代谢和Wnt/β-链蛋白(β-catenin)信号通路的影响,探讨左归丸防治骨质疏松症的分子生物学机制。方法:采用双侧卵巢切除法制备绝经后骨质疏松症大鼠模型,60只雌性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,雌二醇组(戊酸雌二醇片0.05 mg·kg^-1·d^-1),左归丸低、中、高剂量组(5.5,11,22 g·kg^-1·d^-1)。从造模成功后(第13周)开始,每日灌胃(ig)1次,共持续12周。给药结束后,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠股骨组织结构变化;双能X射线仪检测各组大鼠股骨骨密度(BMD)和骨矿质(BMC);MTS Acumen3型生物力学测试系统检测各组大鼠骨生物力学性能;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中骨碱性磷酸酶(BALP),骨钙素(BGP),抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP),Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PINP)等骨代谢标志物含量及雌二醇(E2)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠胫骨组织中Wnt2,β-catenin,低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)水平及糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)磷酸化水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠BMD,BMC,最大载荷和刚度显著降低(P<0.01),血清E2和PINP含量显著降低(P<0.01),BALP,BGP,TRAP含量显著升高(P<0.01),骨组织中Wnt2,p-GSK-3βSer9,LRP5和β-catenin蛋白表达水平显著降低(P<0.01),股骨骨小梁稀疏变细,数量减少;与模型组比较,雌二醇组和左归丸各组BMD,BMC,最大载荷和刚度明显升高(P<0.05,P<0.01),血清E2和PINP含量明显升高(P<0.05,P<0.01),BALP,BGP,TRAP含量显著降低(P<0.01),骨组织中Wnt2,p-GSK-3βSer9,LRP5,β-catenin蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),股骨骨小梁较模型组变粗,数量增加,结构基本清晰。结论:左归丸对去势大鼠骨质疏松症具有一定的防治作用,其机制可能与提高雌激素水平,激活Wnt/β-catenin信号通路,上调Wnt2和LRP5蛋白表达,抑制GSK-3β的活性,减少β-catenin的降解,协调骨形成与骨吸收的动态耦联平衡,纠正骨代谢紊乱,从而改善骨组织形态相关。     

益气活血方对慢性心力衰竭大鼠心室重构的干预作用及其机制

目的:观察益气活血方对慢性心力衰竭模型大鼠心脏结构变化的影响,并从线粒体动力学和分泌型糖蛋白(Wnt)/β-链蛋白(β-catenin)通路探讨其作用机制。方法:40只雄性SD大鼠随机选取10只为假手术组,其余行左冠状动脉前降支结扎术构建慢性心力衰竭(CHF)大鼠模型,造模完成后随机分为模型组、卡托普利组和益气活血组,每组10只。给药组分别予以卡托普利片13.5 mg·kg^-1·d^-1,益气活血颗粒20 g·kg^-1·d^-1灌胃给药,干预8周后取心脏组织,称取体质量与心脏质量结合超声心动图检测心脏结构变化情况,行马松(Masson)染色测定心肌间质胶原容积分数,应用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌线粒体融合蛋白视神经萎缩相关蛋白1(Opa1),分裂蛋白线粒体动力相关蛋白1(Drp1)的表达水平,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测Wnt/β-catenin通路相关因子低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP6),糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β),β-catenin mRNA的表达。结果:与假手术组比较,模型组左心室壁明显增厚(P<0.05),心腔明显扩大、心肌间质胶原含量升高(P<0.01);Opal表达水平降低,Drp1表达水平升高(P<0.01),LRP6,GSK-3β,β-catenin的mRNA表达量升高(P<0.01)。与模型组比较,益气活血组可减轻室壁增厚和心腔扩大(P<0.05,P<0.01),降低心肌间质胶原含量(P<0.05);上调Opa1的低表达、下调Drpl的高表达、下调LRP6,GSK-3β,β-catenin的高表达(P<0.01),作用效果优于或不劣于卡托普利组。结论:益气活血方可有效减轻慢性心力衰竭大鼠心室重构、改善线粒体能量代谢,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin的相关因子的表达相关。     

灯盏花素包合物冻干粉针的制备及安全性初步考察

 目的制备灯盏花素包合物冻干粉针并初步考察其安全性。方法以2-羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)为包合材料,采用冷冻干燥法制备灯盏花素包合物冻干粉针,摩尔连续递变法确定包合物的包合比例,红外光谱法、差示扫描量热法对包合物进行验证,高效液相色谱法测定包合物前后水溶液中药物的溶解度,并考察灯盏花素冻干粉针剂的溶血性和血管刺激性。结果包合物的包合比例为1∶2,红外光谱法和差示扫描量热法证明了包合物的形成,包合后药物的溶解度显著增加,且包合物冻干粉针无溶血性和血管刺激性。结论羟丙基-β-环糊精能够显著提高灯盏花素的溶解度,且制备的冻干粉针无溶血性和血管刺激性。     

灯盏乙素对痴呆大鼠脑组织神经炎性反应的干预作用

目的:观察灯盏乙素对痴呆模型大鼠脑组织中几种炎性因子表达的影响,探讨其可能的抗炎治疗机制.方法:Wistar大鼠42只,随机分为5组,正常对照组、假手术组、学习记忆损伤模型组、灯盏乙素处理组和脑复康处理组.用双侧脑室注射β淀粉样蛋白(Aβ25-35)联合ip D-半乳糖方法建立痴呆大鼠模型;造模后次日分别用28 mg· kg-1灯盏乙素和365 mg·kg-1脑复康连续ig 20 d;实时定量聚合酶链法(RT-PCR)测定大鼠脑组织核因子(nuclear factor,NF)-κB p65表达的变化;免疫组织化学方法检测大鼠脑组织白介素-1β(IL-1β),白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达.结果:与正常组和假手术组相比,模型组大鼠脑组织中NF-κB p65 mRNA表达水平上升了27％和31％ (P ＜0.05),IL-1β,IL-6,TNF-α表达的阳性细胞分值正常组(1.3±0.5,1.6±0.5,1.6±0.69)和假手术组(1.5±0.5,1.6±0.7,2.0±0.7).模型组明显上升(2.9±0.7,3.2±0.8,3.0 ±0.82),P＜0.05.灯盏乙素处理后NF-κB p65的mRNA表达水平下调了20％ (P ＜0.05),IL-1β,IL-6和TNF-α表达的阳性细胞分值明显下降(2.1±0.67,2.3±0.70,2.2±0.53),P＜0.05.结论:灯盏乙素可阻断痴呆大鼠脑组织中NF-κB p65的活化,抑制炎性因子释放,改善学习记忆能力,通过减轻神经炎症损伤起到神经保护的作用.     

淫羊藿素对腹膜纤维化大鼠糖原合酶激酶3β、β连环蛋白的影响

目的:探讨淫羊藿素对腹膜纤维化大鼠糖原合酶激酶3β(GSK-3β)、β连环蛋白(β-catenin)的影响。方法:30只健康SD大鼠随机分为假手术组(10只)、造模组(20只)。造模组大鼠采用0.1%葡萄糖氯已定腹腔注射建立腹膜纤维化模型,造模成功后随机分为模型组和淫羊藿素组,淫羊藿素组按3 mg/kg剂量灌胃,假手术组、模型组给予等量生理盐水,连续6周,处死大鼠,取腹膜组织。采用HE染色观察腹膜组织病理变化; Masson染色观察腹膜组织胶原纤维化; 免疫组化法、ELISA法检测腹膜组织GSK-3β、β-catenin水平; Western blot检测腹膜组织GSK-3β、p-GSK-3β、β-catenin蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组腹膜组织腹膜增厚,胶原纤维增加,腹膜组织GSK-3β、p-GSK-3β、β-catenin表达明显升高(P<0.05)。与模型组比较,淫羊藿素可减轻腹膜增厚并减少腹膜组织胶原纤维,明显降低腹膜组织GSK-3β、p-GSK-3β、β-catenin蛋白表达(P<0.05)。结论:淫羊藿素可减轻腹膜纤维化大鼠腹膜增厚及腹膜组织胶原纤维,抑制GSK-3β、β-catenin的表达,具有抗腹膜纤维化的重要作用。     

归芪方合苯那普利对糖尿病大鼠肾组织转化生长因子β_1的影响

目的研究归芪方联合血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)苯那普利对糖尿病大鼠肾功能和肾组织转化生长因子β_1(TGF-β_1)基因表达的影响。方法Wistar大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)以建立糖尿病模型,将糖尿病大鼠分为糖尿病模型组、苯那普利治疗组、归芪方治疗组、归芪方合苯那普利治疗组,另设正常对照组。实验第8周时统一处死,观察各组大鼠肾重/体重、血糖、内生肌酐清除率(CCr)及肾组织结构的改变,放免法测定24h尿微量白蛋白排泄率(UAER)、β2-微球蛋白(β_2-MG)、血浆及肾组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量,原位杂交检测肾脏皮质TGF-β_1基因表达的变化。结果与单用苯那普利或归芪方相比,联合用药可明显减少尿白蛋白、β_2-MG,控制肾脏肥大,改善肾功能,使肾皮质TGF-β_1mRNA表达量进一步减少,同时肾脏病理改变亦减轻。结论苯那普利合用归芪方能更有效地抑制TGF-β_1mRNA的表达,减轻肾脏损伤,改善肾功能,延缓糖尿病肾病慢性病理进展。