煤工尘肺患者循环DNA的提取鉴定及应用

目的:初步建立血浆循环DNA的提取及检测方法,探讨其在煤工尘肺发生发展过程中的作用。方法:选取煤工尘肺组(31例)、接尘工人组(38例)和正常对照组(40例)3组研究对象,采用磁珠法提取血浆循环DNA,实时定量PCR技术检测血浆循环DNA的相对水平,并根据Ct值绘出ROC曲线。结果:煤工尘肺组、接尘工人组和正常对照组血浆循环DNA的Ct值分别为18.00±1.07、19.20±0.58和19.80±1.57,煤工尘肺组血浆循环DNA的平均水平高于其他两组,差异具有统计学意义(P<0.05),根据煤工尘肺组与对照组数据所得ROC曲线下面积为0.839,煤工尘肺组与接尘工人组为0.859。结论:该方法能够方便快速的检测血浆循环DNA水平,血浆循环DNA水平的增高在煤工尘肺病的发生发展过程中具有重要的意义。     

荧光定量PCR检测手足口病患者血浆循环DNA及其临床意义

目的：利用实时荧光定量PCR技术检测手足口病患者血浆循环DNA水平。方法分别收集健康人和手足口病患者的血浆样本,用实时荧光定量PCR方法检测样本中的血浆循环DNA。结果手足口病患者的血浆循环DNA的CT值为（23.58±1.18）,显著低于健康对照组的（35.66±1.32）（P<0.001）。结论实时荧光定量PCR技术检测血浆循环DNA可以作为诊断手足口病的一种方法。     

荧光定量PCR检测病毒性心肌炎患者血浆循环DNA及其临床意义

目的:利用实时荧光定量PCR技术来检测病毒性心肌炎患者血浆循环DNA水平。方法:分别收集健康人和病毒性心肌炎患者的血浆样本,用实时荧光定量PCR方法检测样本中的血浆循环DNA。结果:病毒性心肌炎患者的血浆循环DNA的CT值为25.22±1.26,明显低于健康人30.66±1.52,有显著性差异(P<0.01)。结论:实时荧光定量PCR技术检测血浆循环DNA可以成为诊断病毒性心肌炎的一种方法。     

慢性乙型肝炎患者外周循环DNA的定量检测

目的探讨外周循环DNA水平定量检测在诊断肝组织损伤中的价值。方法纳入慢性乙型肝炎轻度、中度、重度患者及健康对照者各30例,采用双重荧光定量PCR法检测血浆中循环DNA的含量。结果健康对照组,慢性乙型肝炎轻度、中度和重度患者外周循环DNA水平分别为(21±9、29±8、38±8和81±16)μg/L,随着慢性乙型肝炎患者病情加重,外周循环DNA水平逐渐升高,慢性乙型肝炎重度患者外周循环DNA水平显著高于健康对照组(P<0.01)。慢性乙型肝炎患者外周循环DNA水平与ALT和AST呈显著正相关(r值分别为0.612和0.632,P值均<0.01)。HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者外周循环DNA显著高于HBeAg阴性组(68μg/L±14μg/L vs 23μg/L±12μg/L,P<0.05)。结论外周循环DNA的含量可反映肝脏的炎性反应程度,有可能作为肝脏炎性反应活动程度的一项监测指标。     

脓毒症患者血浆miR-223表达水平及其临床意义

目的：探讨脓毒症患者血浆miR-223表达水平及其诊断价值。方法选取克拉玛依市中心医院2013年3月至2016年2月收治的脓毒症患者31例(病例组)和同期健康查体者33例(对照组)为研究对象，分别采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)法和免疫比浊法检测两组患者血浆miR-223和C反应蛋白(CRP)表达水平，并应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)计算miR-223和CRP诊断脓毒症的价值。结果病例组患者的血浆miR-223和CRP表达水平分别为(19.56±5.78)×10-4copy和(48.61±12.88) mg/L，对照组分别为(12.22±4.75)×10-4copy和(8.63±3.21) mg/L，病例组患者的miR-223和CRP均明显著高于对照组，差异均有显著统计学意义(P<0.01)；血浆miR-223、CRP及两者联合诊断脓毒症的敏感性分别为83.3%、60.9%和80.6%，特异性分别为71.9%、53.1%和81.3%，ROC曲线下面积AUC分别为0.82，0.67和0.90。结论脓毒症患者血浆微小miR-223和CRP均显著升高，可作为脓毒症诊断的生物学参考指标。     

儿童白血病患者血浆循环DNA检测及临床意义

目的:通过对儿童白血病患者血浆循环DNA定量检测,分析血浆循环DNA含量用于儿童白血病诊断的价值。方法:用血液微量DNA抽提试剂盒提取血浆循环DNA,以SYBR GreenⅠ荧光染色法分别检测46例儿童急性白血病患者、20例健康对照标本血浆循环DNA含量;利用受试者工作特征(ROC)曲线评价血浆循环DNA对儿童白血病的诊断价值。结果:儿童白血病患者血浆循环DNA含量为(30.04±15.13)ng/mL,高于对照组(12.22±7.10)ng/mL,二者差异有统计学意义(P<0.05);循环DNA含量16.3l ng/mL为诊断儿童白血病最佳临界值,敏感性和特异度分别为86.96%和75.00%, ROC曲线下面积(AUC)为0.879。结论:血浆循环DNA定量检测有可能成为一种新的用于儿童白血病诊断方法。     

危重症患者血浆DNA水平及其对疾病严重程度和预后的预测价值

采用实时荧光定量PCR技术对132例急诊重症监扩室( EICU)患者血浆DNA水平进行定量检测,根据预后将患者分为存活组(95例)、死亡组(37例),分别检测患者入EICU后即刻、24 h、48 h及1周血浆DNA的量;另选30例健康体检者为健康对照组。与健康对照组相比, EICU患者血浆DNA水平明显升高,各时相点血浆DNA水平升高差异均有统计学意义(P<0.05)。 EICU患者死亡组血浆DNA水平高于存活组,其中24 h、48 h时相点血浆DNA水平升高差异有统计学意义(P<0.05)。血浆DNA的受试者工作特征曲线(ROC)曲线下面积(AUC)较乳酸及 APACHEⅡ评分的AUC大,其中48 h血浆DNA的AUC最大为0.847(95% CI 0.648~1.000)。     

实时荧光定量PCR检测小鼠脑组织中3-羟基丁酸受体基因PUMA-G的转录表达

[摘要] 目的 检测小鼠海马、下丘脑、额叶皮质和颞叶皮质组织中的3-羟基丁酸和烟酸受体基因PUMA-G（protein upregulated in macrophages by IFN-g）的转录表达。方法 采用试剂盒法提取脑组织总RNA,分光光度法测定RNA的含量和纯度,变性凝胶电泳检测RNA的完整性,实时荧光定量PCR技术检测PUMA-G的转录表达。结果 与阳性对照组（心肌组织）一样,PUMA-G在小鼠海马、下丘脑、额叶皮质和颞叶皮质组织中均有转录表达,其循环阈值（cycle threshold, Ct）低于40个循环数。但是各种脑组织中的转录表达水平不同,其中下丘脑的表达量最高与阳性对照组（35.15±0.31）相似,其Ct值为35.39±0.57,而颞叶皮质中的表达最低,其Ct值为38.67±0.90,海马和额叶皮质的Ct值分别为37.59±0.60和37.75±0.51。结论 通过实时荧光定量PCR技术检测到PUMA-G在小鼠脑组织中的转录表达。     

乳腺癌患者肿瘤循环DNA的定量分析

目的:检测乳腺癌患者肿瘤循环DNA的含量及其p16基因5' CpG岛甲基化状态的改变. 方法:收集61例乳腺癌患者、33例乳腺良性病变患者和27例健康志愿者的血浆样本,抽提血浆循环DNA,以SYBR green I荧光染色法行DNA定量;利用半巢式甲基化特异性PCR技术,检测61例乳腺癌患者血浆循环DNA和相应癌组织p16基因5' CpG岛甲基化状态的改变. 结果:乳腺癌患者、乳腺良性病变患者、健康自愿者肿瘤循环DNA浓度分别为(65.0±45.3), (19.0±9.5)和(13.0±7.3) μg/L,乳腺癌患者血浆循环DNA浓度显著高于乳腺良性病变患者和健康自愿者,差异有统计学意义(P＜0.05). 61例乳腺癌患者血浆循环DNA和相应癌组织p16基因5' CpG岛甲基化状态的改变检出率分别为44.3%和46.2%,两者检出率无统计学差别(P＞0.05). 结论:血浆肿瘤循环DNA的定量有可能成为一种新的恶性肿瘤标志物.     

血浆miR-106b表达水平对乳腺癌诊断的临床意义

目的：探讨miR-106b对乳腺癌诊断的参考意义,为诊断乳腺癌提供新的方法。方法：荧光定量PCR检测正常乳腺细胞系MCF-10A及乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435的miR-106b表达水平。收集30例乳腺癌患者临床病例资料,采集患者血浆,以正常人血浆作为对照,运用RT-PCR方法分析血浆miR-106b相对表达量与临床特征的关系, 评估血浆miR-106b对乳腺癌的诊断效能。 结果：MCF-10A细胞miR-106b的相对表达量为1.00±0.08,MCF-7细胞为5.15±0.45,MDA-MB-231细胞为6.86±0.57,MDA-MB-435细胞为3.86±0.29。乳腺癌患者血浆及正常人血浆中miR-106b相对表达量分别为4.13±2.47和1.00±0.75 (p<0.05)。乳腺癌患者中miR-106b相对表达量与患者年龄、肿瘤大小无显著的相关性(p>0.05),而与肿瘤的分化程度、临床分期有关(p<0.05)。经ROC曲线分析,miR-106b对乳腺癌患者和正常对照中诊断乳腺癌的AUC为0.831 (95%CI:0.719-0.942),敏感性和特异性分别为86.67%和76.67%。结论:乳腺癌患者血浆miR-106b的异常高表达可能成为乳腺癌诊断的新靶点。     

小儿耳鼻喉手术麻醉的新进展

因小儿耳鼻喉手术刺激强,时间短,且常与气道相关,故麻醉的控制有一定难度,现对国内外现阶段小儿耳鼻喉手术麻醉的改良方法及新观点进行评述,以期对临床工作有较好的指导意义。     

云南省2006年登革热监测分析

目的了解云南省登革热的疫情动态、人群抗体水平、媒介伊蚊种群（包括成幼虫孳生和密度变化）的动态变化、为登革热流行趋势的预测、预警和制定防治对策、措施提供科学依据。方法各级医疗、卫生、检疫机构的医务人员对疑似、临床病例进行及时发现和诊断;在流行季节前随机抽取正常人群血清,-20℃保存,用ELISA方法进行血清学检测;在6～10月采用定时、定点调查法,对登革热的主要传播媒介白纹伊蚊、埃及伊蚊的种群、孳生环境、伊蚊幼虫指数和成蚊密度进行监测,每月1次。结果2006年云南省发生输入性登革热病例18例;健康人群登革热IgG抗体阳性率8．09％。伊蚊幼虫密度布雷图指数（BI）、容器指数（Cl）分别在14～98、4．7～73．68之间,白纹伊蚊成蚊密度在3．5～34只,人工小时之间。结论云南省输入性登革热疫情有不断上升的趋势;人群抗体水平登革热IgG抗体阳性率较高,提示当地人群中可能存在该病毒的既往感染或隐性感染;媒介伊蚊幼虫布雷图指数、容器指数和白纹伊蚊成蚊密度均较高。对登革热传播具有极高的危险性,应引起高度注意。     

大鼠脑出血灶周围星形胶质细胞内糖原含量的变化

目的：研究脑出血后局部超微结构的变化，探讨脑出血的病理生理过程，为临床治疗提供理论依据．方法：健康雄性SD大鼠4只，随机等分为实验组和对照组．实验组采用细菌胶原酶注射制作纹状体脑出血模型，对照组采用相同方法在相应部位注入等体积生理盐水，采用透射电镜观察脑出血后24h病变局部及其周围和对照组超微结构的变化和糖原的水平变化．结果：电镜观察到在脑出血动物出血灶周围区，不同类型的细胞内均可见到各种各样的超微结构改变．最为醒目的是在脑内血肿周围星形胶质细胞胞质和突起内有大量的糖原颗粒聚集，尤其在毛细血管周围的胶质细胞突起内非常明显；小胶质细胞和少突胶质细胞内均未发现明显糖原颗粒存在．在生理盐水对照组动物，相应部位的各种细胞的超微结构正常；而且神经元、各种胶质细胞和毛细血管内皮细胞内均无明显糖原颗粒聚集．结论：脑出血周围糖原含量增高，局部存在明显的糖代谢障碍．     

2001年我国医药研究的若干进展

随着国内外生命科学和生物技术等的飞速发展,我国医药技术在2001年取得了长足的进步。提前完成了我国所承担的人类基因组汁划中的1％测序任务,到2000年,中国科学家在功能基因研究和基因组多样性领域共完成研究论文1850篇,遍及医药各领域,研究手段和水平可于国际先进水平媲美,中国完全有条件在“后基因时代”成为主角之一。     

Cohort Mortality Study in Three Ceramic Factories in Jingdezhen in China

To investigate the health impacts of crystalline silica mixed dust and other potential occupational hazards on workers in ceramic factories, a cohort study of 4851 workers registered in the employment records in 3 ceramic factories in Jingdezhen city of China between 1972 and 1974 was identified. The cohort mortality was traced throughout 2003 with an accumulation of 128970.2 person-years, revealed 1542 deaths. Standardized mortality ratios （SMRs） were calculated for the main causes of death by using Chinese national mortality rates as reference. The mortality from all causes in three ceramic factories was 12.0‰ and the cumulative mortality was 31.8%. Malignant neoplasm, cardiovascular diseases, respiratory diseases, infectious diseases were the first four illnesses that threaten workers’ life, and they accounted for 73.2% of all deaths. The results of this study showed that the standardized mortality ratio for all subjects was 1.02, which is very close to that expected on the basis of the China national mortality rates. Statistically significant mortality excesses for respiratory disease （SMR=1.36）, pneumoconiosis （SMR=37.34）, infectious disease （SMR=5.70） and pul- monary tuberculosis （SMR=3.88） were observed. The mortality of 2938 dust-exposed workers was higher than that of 1913 non dust-exposed workers. Except for pneumoconiosis, the mortality from lung cancer, non-malignant respiratory diseases and pulmonary tuberculosis in dust-exposed workers were significantly increased as compared with that in non-exposed workers, and the relative risks （RRs） were 1.86 （1.16–2.99）, 2.50 （1.84–3.40）, 1.81 （1.34–2.45）. The exposure-response relationships between cumulative dust exposure level and mortality from all causes, colorectal cancer, lung cancer, respiratory diseases, and pulmonary tuberculosis were also identified. The findings indicated that silica mixed dust in ceramic factories has harmful impact on the workers’ health and life span in ceramic factory.     

2009年泉州市流感监测结果分析

目的了解泉州市2009年流感活动情况及其型别特征。结论通过流行病学和病原学监测,对泉州市流感流行情况进行分析。结果 2009年全市流感样病例占就诊人数的0.26%～2.34%;全年采集监测标本1392份,经RT-PCR法检测样本阳性率为22.34%;经MDCK细胞分离流感毒株134株,其中季节性H3N2和HINl型各占60.45%和11.19%,甲型H1N1流感占21.64%,B型占6.70%。结论 2009年泉州市流感春夏季以季节性H3N2亚型流感为优势毒株,秋冬季以甲型H1N1流感为流行株,需加强泉州市流感监测和流感病毒抗原变异研究。     

黄芪在体内抗氧化作用的实验研究

目的:探讨黄芪水提物抗氧化、清除体内自由基的生物活性。方法:将昆明种小鼠随机分为对照组和黄芪低、中、高剂量组,每组10只。连续灌胃给药7天,采血后,迅速取出肝组织,制成匀浆。测定超氧化物歧化酶(SOD)的活力及丙二醛(MDA)含量。结果:黄芪可减少MDA含量,增强SOD活力。结论:黄芪可有效清除体内的氧自由基,具有减少氧化应激引起的器官损伤和延缓机体衰老的作用。     

昆明市某高校957名学生失眠症情况调查评估

目的了解昆明市某高校大学生失眠情况及其分布特征.方法对昆明市某高校957名学生进行睡眠质量和失眠相关问题的问卷调查.结果 27.3%的同学有不同程度的失眠,女生失眠率高于男生（P〈0.01）;本科生的失眠检出率高于研究生（P〈0.05）;三年级学生失眠率高于一年级和二年级学生（P=0.01）.不同专业、不同年龄段学生失眠率差异无统计学意义.结论性别、年级、学历是影响高校学生睡眠的主要因素.