哮喘患者外周血单个核细胞CD4~+CD25~+调节性T细胞及IL-4分泌水平的检测

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞在哮喘发病机制中的作用,为哮喘的临床治疗提供新的思路和方法。方法:分离哮喘患者和正常人外周血单个核细胞(PBMC),用流式细胞仪分析CD4+CD25+调节性T细胞在外周血单个核细胞中的比例;酶联免疫吸附法(ELASA)检测外周血PBMC培养上清IL-4的分泌状况。结果:哮喘组外周血CD4+CD25+调节性T细胞的百分率为(3.2±1.5)%,健康对照组为(6.5±2.5)%,哮喘组明显低于对照组(P<0.05);哮喘组外周血PBMC培养上清IL-4分泌水平为(57.3±13.5)ng/L,健康对照组为(28.6±7.2)ng/L,哮喘组明显高于对照组(P<0.05)。结论:CD4+CD25+调节性T细胞可能参与了哮喘的发生与发展。     

CD4+CD25+T淋巴细胞在支气管哮喘患者外周血的表达及意义

目的 探讨外周血CD4+CD25+T淋巴细胞与支气管哮喘的关系.方法 用流式细胞术分别检测支气管哮喘患者34例(A组)和健康人25例(B组)外周血CD4+CD25+T淋巴细胞的百分率,采用ELISA法检测外周血血清白细胞介素10(IL-10)水平,用化学发光法检测外周血IgE水平,并分析CD4+CD25+T淋巴细胞与外周血IgE及IL-10水平的相关性.结果 A组外周血CD4+CD25+T淋巴细胞百分率显著低于B组[(5.90±1.10)%vs.(7.13±1.48)%](P<0.05),且与血IL-10呈正相关,与IgE呈负相关(P<0.05).结论 CD4+CD25+T淋巴细胞在支气管哮喘患者中高表达,与IL-10及IgE有一定的相关性,是参与支气管哮喘的发生、发展的重要T淋巴细胞.     

不同剂量雷帕霉素对小鼠体内CD4+CD25+Treg细胞的影响

目的研究不同剂量雷帕霉素对小鼠体内Treg细胞的影响。方法将SPF级昆明系小鼠60只随机分为对照组(A)和实验组(B、C、D),B、C、D三组分别灌胃雷帕霉素1、2、3 mg.kg-1,A组每天予以无菌水灌胃,共3周。3周后,无菌条件下心脏采血,EDTA抗凝,分离脾脏,制备单细胞悬液,采用流式细胞仪检测小鼠外周血和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞水平(CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞的百分比)。结果实验组(B、C、D)小鼠外周血和脾细胞中CD4+CD25+Treg细胞水平分别为(9.62±1.43)%(、13.76±1.97)%(、15.41±2.45)%和(12.23±4.56)%(、23.03±6.18)%(、25.17±6.42)%,对照组(A)小鼠外周血和脾细胞中CD4+CD25+Treg细胞水平分别为(3.52±0.65)%和(6.53±3.01)%,无论是在外周血还是脾细胞中,B、C、D组CD4+CD25+Treg细胞水平明显高于A组(P0.05),C、D组与B组之间CD4+CD25+Treg细胞水平也有明显差异性(P0.05),C组和D组之间CD4+CD25+Treg细胞水平无明显差异性(P0.05)。结论雷帕霉素能够诱导昆明系小鼠体内CD4+CD25+Treg细胞增殖,其使用剂量可以影响CD4+CD25+Treg细胞的增殖程度。     

CD19+CD24hiCD38hi B细胞亚群在系统性红斑狼疮患者外周血中的表达

目的探讨CD19+CD24hi CD38hi B细胞亚群在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中的表达及临床意义。方法流式细胞术检测SLE患者(S组,36例)和正常对照组(C组,20例)CD19+CD24hi CD38hi、CD19+CD24int CD38int、CD19+CD24hi CD38-B细胞亚群百分比水平。S组中,20例为SLE活动(S1组),16例为SLE稳定(S2组)。结果 S组CD19+CD24hi CD38hi B细胞亚群百分比显著高于C组[(10.93±6.30)%vs.(7.51±2.73)%](P<0.05),且S1组高于S2组(P<0.05)。S组CD19+CD24hi CD38-B细胞亚群百分比显著低于C组[(15.52±9.54)%vs.(26.46±11.07)%](P<0.05)。S组CD19+CD24hi CD38hi B细胞亚群表达水平与SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分正相关(P<0.05)。结论 CD19+CD24hi CD38hi B细胞亚群对效应T细胞分泌促炎症因子缺乏抑制功能与其存在功能缺陷有关,而非因其数量不足。CD19+CD24hi CD38hi B细胞亚群在SLE患者外周血中的表达水平可能与疾病活动相关。     

肺癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测及其临床意义

目的 探讨检测肺癌患者手术前后外周血CD4+CD25+调节性T细胞的临床意义.方法 原发性肺癌患者43例(肺癌组),健康体检者20例(健康对照组).应用流式细胞术检测其外周血CD4+CD25+调节性T细胞的水平.结果 肺癌组患者手术前外周血CD4+CD25+调节性T细胞表达高于健康对照组(P<0.01);肺癌组患者术后30 d时外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平较术前明显下降(P<0.05).结论 肺癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的水平增高;肺癌患者术后外周血CD4+CD25+调节性T细胞的水平下调,提示术后机体抗肿瘤免疫功能有了一定程度恢复.     

CD4~+CD25~+Treg细胞、TGF-β和IL-10在反复自然流产中的变化

目的探讨外周血CD4+CD25+Treg细胞数量和抑制性细胞因子TGF-βI、L-10含量变化在反复自然流产中的作用。方法采用ELISA法检测30例反复自然流产患者3、0例正常妊娠妇女和30例正常非孕妇女外周血抑制性细胞因子TGF-β和IL-10含量,三色流式细胞术检测上述研究对象外周血CD4+CD25+T细胞比例。结果反复自然流产组妇女外周血CD4+CD25+Treg细胞的百分率(6.66±1.30)%明显低于正常非孕组(10.99±2.64)%(P<0.05)和正常妊娠组(12.63±3.05)%(P<0.05)。反复自然流产组妇女外周血TGF-β(123.64±27.31)pg/L明显低于正常非孕组对照组TGF-β(179.25±24.67)pg/L(P<0.05)和正常妊娠组TGF-β(211.72±63.49)pg/L(P<0.05);反复自然流产组妇女外周血IL-10(145.37±42.45)pg/L明显低于正常非孕组对照组IL-10(203.47±42.56)pg/L(P<0.05)和正常妊娠组IL-10(234.45±51.21)pg/L(P<0.05)。结论外周血CD4+CD25+Treg细胞的比例低下以及抑制性细胞因子TGF-β和IL-10含量降低可能参与反复自然流产的发生。     

猪囊尾蚴病患者CD4~+ CD25~+调节性T细胞水平的变化

目的检测猪囊尾蚴病患者外周血中CD4+CD25+调节性T淋巴细胞及其FOXP3的表达情况,探讨CD4+CD25+调节性T淋巴细胞在猪囊尾蚴感染中的免疫调控作用及意义。方法采用流式细胞仪检测11例猪囊尾蚴病患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞的含量,同时观察CD4+CD25+T细胞中表达FOXP3群体的百分含量。结果囊尾蚴病患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞的百分含量为6.11%,较正常人(3.94%)明显升高(P<0.05);患者外周血中CD4+CD25+T细胞表达FOXP3的细胞百分含量为15.67%,与正常对照组(11.09%)有显著性差异(P<0.05)。结论猪囊尾蚴病患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞的百分含量显著升高,表明CD4+CD25+调节性T细胞可能参与猪囊尾蚴感染的免疫抑制。     

幽门螺杆菌感染与儿童支气管哮喘患儿循环CD4+CD25+调节性T细胞的相关性分析

目的 探究幽门螺杆菌感染与儿童支气管哮喘患儿循环CD4+CD25+调节性T细胞的相关性.方法 选取本院2015年1月至2016年6月期间收治的支气管哮喘患儿共160例,根据患儿哮喘的发作情况将这160例患儿分为发作组和缓解组,同期选取80例健康儿童作为对照组,检测哮喘儿童的幽门螺杆菌感染情况,比较3组患者CD4+CD25+调节性T细胞的情况.结果 发作组患儿幽门螺杆菌阳性率显著高于缓解组(42.50％比22.50％),差异有统计学意义(x2=12.266,P＜0.05);幽门螺杆菌阴性组患儿CD4+CD25+调节性T细胞水平显著高于阳性组(8.01±2.43)比(5.38±2.16)],差异有统计学意义(F=5.554,P＜0.05).结论 发生幽门螺杆菌感染时,感染加重导致免疫功能异常,使CD4+CD25+调节性T细胞水平降低,从而可能导致了支气管哮喘的发生.     

系统性红斑狼疮患者外周血CD4~+调节性T细胞CD25~+和FOXP3~+的表达及意义

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+T细胞CD25和FOXP3的表达及其临床意义。方法流式细胞术检测20例SLE患者(9例为狼疮性肾炎)及10例健康对照组PBMC中CD4+T细胞中CD25及Foxp3的表达。结果 SLE患者CD4+CD25highT细胞中FOXP3+T细胞的表达明显低于健康对照组(P<0.05),与SLE疾病活动指数SLEDAI积分明显负相关(r=-0.514,P<0.01),与补体C4正相关(r=0.362,P<0.05),与ESR及CRP负相关(r分别=-0.23、-0.216,P<0.05),与外周血免疫球蛋白IgG、IgA、IgM及补体C3水平无明显相关性。将SLE患者分为狼疮性肾炎(LN)组及非肾损(SLE-NR)组,两组CD4+CD25highT细胞及CD4+CD25lowT细胞中FOXP3+T细胞的表达均明显低于健康对照组(P<0.05);LN组CD4+T细胞中CD25high及CD25low的表达均较SLE-NR组增高(P<0.05)。结论 SLE患者外周血中CD4+CD25high T细胞中FOXP3+的表达水平明显降低,且与疾病活动性相关,而LN患者代偿增高的无FOXP3表达的CD4+CD25+T细胞可能与其发病机制有关。     

肝癌患者外周血CD_4~+CD_(25)~+T细胞的检测意义及冷冻消融对其表达的影响

目的探讨肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞的变化意义及冷冻消融治疗对其表达的影响。方法采用流式细胞技术分别检测18例原发性肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞的变化,并与健康对照组比较。同时检测10例原发性肝癌患者冷冻消融术前和术后3个月外周血CD4+CD25+T细胞水平的变化。结果肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞占总CD4+T淋巴细胞百分比高于健康对照组[(15.1±1.6)%vs(7.3±1.2)%,t=15.56,P=0.000]。其升高与患者血清AFP浓度(t=2.16,P<0.05)、肿块大小(t=2.73,P<0.05)和临床分期(t=3.00,P<0.01)显著相关,而与患者性别(t=0.23,P>0.05)、年龄(t=1.61,P>0.05)和结节数量(t=1.00,P>0.05)无显著相关。冷冻消融治疗能使CD4+CD25+T细胞显著性降低[(14.5±1.6)%vs(11.3±1.4)%,t=4.37,P<0.01]。结论原发性肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞水平较高,检测外周血CD4+CD25+T细胞表达可作为肝癌患者荷瘤状况和疗效评估的方法之一。     

特异性免疫治疗对哮喘大鼠白细胞介素-10和CD_4~＋CD_（25）~＋调节性T细胞的影响

目的：探讨特异性免疫治疗（specific immunotherapy,SIT）对哮喘大鼠白细胞介素-10（IL-10）和CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Tr）的影响。方法：40只健康雄性清洁级Wistar大鼠随机均分成正常对照组、哮喘组、SIT对照组和SIT治疗组,每组10只。通过卵蛋白（OVA）雾化吸入的方法对致敏大鼠进行SIT干预,观察各组支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞分类及计数结果、血清和BALF中IL-10水平及外周血CD4＋CD25＋Tr百分率变化。结果：正常对照组BALF和血清中IL-10浓度分别高于哮喘组和SIT对照组（均为P〈0.01）,哮喘组和SIT对照组BALF和血清中IL-10浓度低于SIT治疗组（P〈0.01,P〈0.05）;正常对照组外周血CD4＋CD25＋Tr百分率显著高于哮喘组、SIT对照组和SIT治疗组（P〈0.01）,而SIT治疗组CD4＋CD25＋Tr百分率分别高于哮喘组和SIT对照组（P〈0.05）。结论：通过上调体内IL-10和CD4＋CD25＋Tr趋于正常状态可能是SIT治疗哮喘有效的重要机制。     

慢性乙型重型肝炎患者外周血调节性T细胞表达

目的通过观察外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）水平,探讨其在慢性乙型重型肝炎患者中的作用。方法流式细胞仪技术检测30例慢性乙型重型肝炎患者（CSHB）、30例慢性乙型肝炎患者（CHB）和15例健康志愿者（正常对照组）PBMCs中Treg的比例。结果慢性乙型重型肝炎患者外周血Treg细胞的平均百分率为（2．45±0．23）％,较慢性乙型肝炎患者的（9．48±0．48）％有极其显著差异（P〈0．01）,较健康对照组（5．65±0．61）％则有显著差异（P〈0．05）。结论Treg在慢性乙型重型肝炎的病情进展及病毒抑制清除等方面起着重要的作用。     

恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞CD25的测定与临床检验学研究

目的探讨恶性肿瘤患者T淋巴细胞CD25＋水平的临床意义。方法用流式细胞仪检测70名正常人和274例恶性肿瘤患者外周血CD4＋CD25＋和CD8＋CD25＋水平。结果恶性肿瘤患者外周血CD4＋CD25＋水平比正常人高,差异有统计学意义（P〈0.05）;恶性肿瘤患者外周血CD8＋CD25＋水平与正常人比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。其中,食管癌、肝癌和肺癌的CD4＋CD25＋水平与正常人比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;肠癌、胃癌和鼻咽癌的CD4＋CD25＋水平与正常人比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论恶性肿瘤患者外周血CD4＋CD25水平的增高可作为恶性肿瘤免疫诊断的参考指标。     

Treg细胞在儿童过敏性哮喘SIT治疗过程中的变化

目的：本研究通过观察对室尘螨（HDM）过敏的儿童哮喘患者,过敏原特异性免疫治疗（allergen specific immunotherapy, SIT）后外周血CD4＋CD25＋CD127-Treg细胞（regulatory T cell, Treg）细胞）占CD4＋T cell的百分比的变化,以及它们在SIT治疗中的作用,初步探讨儿童过敏性哮喘SIT的机制,从而为哮喘的防治提供新思路。方法选取郑州大学第一附属医院儿科门诊48例儿童过敏性哮喘患者分两组,一组进行标准化SIT 1.5-2年后,采集两组患者的外周静脉血。用流式细胞仪检测每组标本中CD4＋CD25＋CD127-T细胞占CD4＋T细胞的百分比,结果采用统计学软件进行统计学分析。结果CD4＋CD25＋CD127-T细胞占CD4＋T细胞的百分比在HDM-SIT组显著增高。结论本实验进一步证实了哮喘患者SIT治疗有效;在HDM-SIT组CD4＋CD25＋CD127-T细胞占CD4＋T细胞的百分比升高,提示CD4＋CD25＋CD127-T细胞可能在儿童过敏性哮喘特异性免疫治疗中起重要作用。     

三氧化二砷对兔卵蛋白诱导性关节炎的治疗作用的实验研究

目的探讨三氧化二砷对日本大耳白兔卵蛋白诱导性关节炎模型外周血中抑炎因子(IL-10)、促炎因子(TNF-α)、CD4+、CD8+T细胞含量及CD4+/CD8+比值的影响。方法将48只日本大耳白兔随机分为模型组、正常对照组、三氧化二砷低剂量组(1.0 mg·kg-1·d-1)、三氧化二砷中剂量组(2.0 mg·kg-1·d-1)、三氧化二砷高剂量组(4.0 mg·kg-1·d-1)、激素组醋酸泼尼松龙(10 mg·d-1),每组8只。成功建立卵蛋白诱导关节炎兔模型后,分别给药2周,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测兔外周血中的IL-10、TNF-α,流式细胞仪检测CD4+、CD8+T细胞的含量。结果卵蛋白诱导法可以成功诱导兔的关节炎,模型组外周血中的IL-10含量较正常对照组降低(P0.01),模型组TNF-α较正常对照组上升(P0.05),三氧化二砷各剂量组兔的关节炎症状不同程度改善,IL-10含量较模型组升高(P0.05),而TNF-α较模型组降低(P0.05);模型组外周血CD4+及CD4+/CD8+比值较正常对照组显著升高(P0.01),三氧化二砷治疗组比值均比正常组出现不同程度的下降。结论三氧化二砷可能通过抑制CD4+T细胞的异常增生,减轻细胞免疫应答、调节卵蛋白关节炎兔外周血T细胞各亚群的紊乱缓解RA的病程发展,该作用可能是三氧化二砷治疗类风湿关节炎的重要机理之一。     

系统性红斑狼疮患者外周血CD40-CD40L测定的临床意义

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者在疾病的不同阶段外周血单个核细胞(PBMC)CD40-CD40L、活化淋巴细胞亚群的表达水平。方法采用流式细胞术检测SLE患者不同时期淋巴细胞表达的CD40-CD40L的百分率,同时对淋巴细胞的表型及HLA-DR进行测定。结果活动期SLE患者淋巴细胞表达的CD40、CD40L均明显高于正常对照组(P<0.05);活动期SLE患者表达的HLA-DR、CD3+HLA-DR+细胞、CD4+HLA-DR+细胞、CD8+HLA-DR+细胞、CD8+细胞、CD19+细胞均显著高于正常对照组(P<0.05),而缓解期与正常对照组之间,差异均无统计学意义(P>0.05);活动期SLE患者表达NK细胞明显比正常对照组低(P<0.05);活动期SLE患者表达的CD3+、CD4+与正常对照组相比,虽有降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。相关分析表明,SLE患者(活动期和缓解期)淋巴细胞表达CD40-CD40L的水平与淋巴细胞活化程度呈正相关。结论活动期SLE患者外周血PBMC存在CD40与CD40L的异常表达,以及活动期SLE患者淋巴细胞的异常活化,这些免疫细胞异常在SLE的发病中起到重要的作用,并且异常程度与疾病活动度相关。     

TGFβ1和CD4＋CD25＋调节性T细胞表达在系统性红斑狼疮发病中的意义

目的检测系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血转化生长因子β1（TGFβ1）和CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）的表达,探索其在SLE发病中的作用及临床意义。方法分别采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）和二色荧光抗体标记流式细胞仪法,对SLE患者和正常对照组血清TGFβ1和外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞进行检测,并结合临床资料进行分析。结果血清TGFβ1和外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞表达在SLE活动组[（715±414）pg/ml、（4.53±0.85）%]明显低于正常对照组[（1314±129）pg/ml、（8.78±2.87）%]和SLE稳定组[（1423±153）pg/ml、（10.89±1.41）%]（均P〈0.05）,而SLE稳定组和正常对照组之间差异无统计学意义（P〉0.05）;SLE患者TGFβ1和CD4＋CD25＋调节性T细胞表达量均与疾病活动度SLEDAI积分呈负相关（r=-0.68,P=0.002;r=-0.78,P=0.000）,与其他临床指标如24h尿蛋白量、抗ds-DNA抗体等无相关性。TGFβ1表达与CD4＋CD25＋调节性T细胞数之间亦未见相关性（r=0.51,P=0.113）。此外,血清TGFβ1表达尚与血小板数量和血红蛋白量成正相关（r=0.71,P=0.001;r=0.44,P=0.042）。结论活动SLE患者血清TGFβ1和外周血CD4＋CD25＋细胞表达减少,提示两者可能参与SLE发病,并对判断疾病活动度有一定的临床意义。