不同类型恶性肿瘤患者T淋巴细胞表型分析

目的探讨不同部位恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞膜上CD3、CIM及CD4＋CD25＋（调节性T细胞,regulatoryT,Treg,）的分布情况。方法采用流式细胞术分析52例肿瘤患者外周血淋巴细胞中CD3、CD4＋及CD4＋CD25＋表达情况并与20例健康对照进行比较。结果不同组肿瘤患者的CD3细胞均低于健康对照组（P〉0．05）;各组CD4均低于对照组,结直肠癌患者与对照组比较有统计学意义（P〈0．05）;各组cDfcD去表达均大于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论不同肿瘤患者CD3、CD4细胞表达均低于对照组,调节性T细胞在不同肿瘤患者外周血细胞中的表达均明显高于正常对照,肿瘤患者存在免疫功能异常。     

CD4~＋CD25~＋调节性T细胞在肺癌患者中的表达及临床意义

目的探讨肺癌患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的表达及其临床意义。方法应用流式细胞术分析45例肺癌患者与15例健康对照组外周血CD4＋CD25＋Treg细胞占CD4＋T细胞的比例。结果肺癌患者外周血CD4＋CD25＋Treg细胞占CD4＋T细胞比例为（17.8±6.6）%,表达高于对照组（6.49±0.5）%（P〈0.001）。肺癌患者外周血中Treg细胞数量在不同临床分期和组织学分化程度中的差异有统计学意义（P〈0.01）,但与患者的病理类型无关（P〉0.05）。结论 Treg细胞在肺癌患者中表达明显升高,是肺癌患者免疫功能紊乱的一个证据。     

原发性肝癌患者手术前后外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞变化的临床意义

目的：探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋regulatory T cell,CD4＋CD25＋Treg）在原发性肝癌患者手术前、后外周血中的变化特性,分析CD4＋CD25＋Treg细胞在肝癌细胞免疫中的作用机制。方法选取本院50例原发性肝癌患者作为实验组,分别采集术前7d、术后14d外周血,同时采集本院50例健康体检人群外周血作为对照组,经过流式细胞仪检测,统计分析各组外周血中CD4＋CD25＋Treg细胞、CD4＋T细胞和CD8＋T细胞比率。结果（1）术前外周血中CD4＋CD25＋Treg比率显著高于对照组, CD8＋T细胞比率显著低于对照组,两组差异有显著性意义;CD4＋T细胞比率比较,差异无统计学意义。（2）术后外周血中CD4＋CD25＋Treg,CD4＋T细胞,CD8＋T细胞比率与对照组比较,差异无统计学意义。（3）术前与术后外周血中CD4＋CD25＋Treg、CD8＋T细胞比率比较,两组差异有显著性意义;CD4＋T细胞比率比较,差异无统计学意义。结论原发性肝癌患者手术前、后外周血CD4＋CD25＋Treg变化在肿瘤细胞免疫及临床治疗中具有重要意义。     

呼吸衰竭患者外周血T淋巴细胞亚群的相关研究

目的分析呼吸衰竭患者外周血T淋巴细胞亚群的特点、影响因素、临床意义及其治疗前后测定值的变化。方法采用免疫组织化学染色的方法测定100例呼吸衰竭患者CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋细胞的阳性细胞百分率、CD4^＋／CD8^＋比值以及患者治疗前后外周血中T细胞亚群水平,并与正常对照组进行比较分析。结果呼吸衰竭患者外周血CD3^＋、CD4^＋明显减少,而CD8^＋明显增加,CD4^＋／CD8^＋比值明显下降,与正常组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。呼吸衰竭治疗后CD3^＋、CD4^＋细胞、CD4^＋／CD8^＋比值较前升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论呼吸衰竭患者存在细胞免疫功能紊乱,检测患者外周血T淋巴细胞亚群表达对评估患者的细胞免疫功能及疾病的诊断具有重要的临床意义。     

TGFβ1和CD4＋CD25＋调节性T细胞表达在系统性红斑狼疮发病中的意义

目的检测系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血转化生长因子β1（TGFβ1）和CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）的表达,探索其在SLE发病中的作用及临床意义。方法分别采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）和二色荧光抗体标记流式细胞仪法,对SLE患者和正常对照组血清TGFβ1和外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞进行检测,并结合临床资料进行分析。结果血清TGFβ1和外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞表达在SLE活动组[（715±414）pg/ml、（4.53±0.85）%]明显低于正常对照组[（1314±129）pg/ml、（8.78±2.87）%]和SLE稳定组[（1423±153）pg/ml、（10.89±1.41）%]（均P〈0.05）,而SLE稳定组和正常对照组之间差异无统计学意义（P〉0.05）;SLE患者TGFβ1和CD4＋CD25＋调节性T细胞表达量均与疾病活动度SLEDAI积分呈负相关（r=-0.68,P=0.002;r=-0.78,P=0.000）,与其他临床指标如24h尿蛋白量、抗ds-DNA抗体等无相关性。TGFβ1表达与CD4＋CD25＋调节性T细胞数之间亦未见相关性（r=0.51,P=0.113）。此外,血清TGFβ1表达尚与血小板数量和血红蛋白量成正相关（r=0.71,P=0.001;r=0.44,P=0.042）。结论活动SLE患者血清TGFβ1和外周血CD4＋CD25＋细胞表达减少,提示两者可能参与SLE发病,并对判断疾病活动度有一定的临床意义。     

孕妇外周血CD_4~＋CD_（25）~＋调节性T细胞对子痫前期的预测

目的：探讨孕妇外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Tregs）对子痫前期的预测价值。方法：选取190例于我院产前常规孕期体检及分娩的孕产妇作为研究对象,按孕产妇是否发生子痫前期分为子痫前期组及正常对照组,采用流式细胞仪测定各孕妇20～24周外周血单个核细胞（PBMC）中CD4＋T细胞及CD4＋CD25＋Tregs的比率,并随访至分娩。采用磁珠分选技术分选随访期间确诊子痫前期的患者外周血PBMC中CD4＋CD25＋Tregs和CD4＋CD25-T细胞,酶联免疫仪检测CD4＋CD25＋Tregs对CD4＋CD25-T细胞增殖的抑制作用,并与正常孕妇组对比。结果：①随访情况。190例孕产妇妊娠期内有15例发展为子痫前期,其余175例为正常分娩,2组在剖宫产率、胎儿心率异常率、新生儿1 min及5 min的Apgar评分有显著性差异（P〈0.05）。②CD4＋CD25＋Tregs的数量。子痫前期组和正常对照组外周血PBMC中CD4＋T细胞比率分别为34.21%±6.92%和35.72%±7.45%,2组比较无显著性差异（P〉0.05）。子痫前期组外周血PBMC中CD4＋CD25＋Tregs占CD4＋T细胞的比率为6.71%±2.21%,明显低于正常对照组的12.01%±2.98%（P〈0.05）。③CD4＋CD25＋Tregs的抑制功能。子痫前期组CD4＋CD25＋Tregs对CD4＋CD25-T细胞增殖的抑制百分率为57.56%±9.47%,正常孕妇组为78.27%±12.43%,2组比较有显著性差异（P〈0.05）。④CD4＋CD25＋Tregs的预测性。以CD4＋CD25＋Trges数量变化预测子痫前期的ROC曲线下面积为0.913,Tregs的最佳截断点为6.605%,预测子痫前期的敏感度86.7%、特异度82.85%。结论：孕妇妊娠中期外周血CD4＋CD25＋Tregs数量减少和（或）抑制功能下降与子痫前期的发生相关,可作为子痫前期的预测性指标。     

CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞在急性脑梗死患者外周血中表达的初步研究

目的初步探讨CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞在急性脑梗死患者外周血中的表达情况。方法采用流式细胞术分别检测取98例急性脑梗死患者和50名健康体检者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞所占比例,并用双抗体夹心法检测各组血清TGF-B、IL-10和IL-2。结果急性脑梗死患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞水平显著高于对照组（P〈O．01）,血清中TGF-β、IL-10和IL-2显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论CD4^＋CD25^＋T细胞在急性脑梗死患者外周血中表达显著升高,血清中的相关细胞因子参与诱导CD4^＋CD25^＋T细胞的生成,提示CD4^＋CD25^＋T细胞可能参与了急性脑梗死的发生、发展。     

喘息性肺炎患儿外周血CD137和CD28及T细胞亚群的表达研究

目的探讨喘息性肺炎患儿外周血CD137、CD28共刺激分子和T细胞亚群的表达改变及意义。方法根据患儿肺部体征将支气管肺炎分为喘息性肺炎组和非喘息性肺炎组,用流式细胞仪（FCM）检测喘息性肺炎患儿及正常儿童外周血中共刺激分子CD137、CD28和T细胞亚群的表达,并通过数据对比寻求其规律。结果共刺激分子CD137的表达：正常人组,未经PHA活化的T细胞表面几乎无CD137表达,经PHA活化24h后,表达率为（19.92±1.98）%,喘息性肺炎组未经PHA活化的T细胞表面已有CD137表达,经PHA刺激24h后,CD137在T细胞上的表达率为明显高于正常人（P〈0.01）。T细胞亚群分析显示,CD137在CD4^＋T细胞、CD8^＋T细胞上均有表达,并发现在CD4^＋T细胞上表达多于CD8^＋T细胞。且与正常人和非喘息组比较CD137表达的T细胞亚群差异有统计学意义（P〈0.01）。共刺激分子CD28的表达：喘息性肺炎组共刺激分子CD28表达水平与正常对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。T细胞亚群分析显示喘息性肺炎患儿CD8^＋、CD2^＋8较对照组升高（P〈0.05）,CD8^＋CD28、CD4^＋CD2^＋8较对照组降低（P〈0.05）,CD4^＋、CD28与对照组相比差异无统计学意义。喘息性肺炎中过敏原阳性组CD137水平较过敏原阴性组升高（P〈0.05）,CD137的T细胞亚群表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论共刺激分子CD137参与了喘息性肺炎的发病机制,阻断第二信号有望成为治疗喘息性肺炎的一条新途径。     

HIV/HBV/HCV共感染者CD4＋、CD_8＋T淋巴细胞计数的对比分析

目的研究HIV/HBV/HCV共感染者外周血CD4＋、CD8＋T淋巴细胞计数变化,探讨共感染对HIV感染进程及患者机体免疫功能的影响。方法对75例HIV共感染样本进行外周血CD4＋、CD8＋T淋巴细胞计数测定并进行分析。结果 4组的CD4＋T淋巴细胞计数比较差异无统计学意义（P〉0.05）;4组的CD8＋T淋巴细胞计数及CD4＋/CD8＋比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论共感染会影响患者外周血CD8＋T淋巴细胞计数及CD4＋/CD8＋比值,HIV/HBV/HCV三重感染患者的CD8＋T淋巴细胞计数较其他组高。     

CD4^＋CD25^＋Treg细胞、TGF-β和IL-10在反复自然流产中的变化

目的探讨外周血CD4＋CD25＋Treg细胞数量和抑制性细胞因子TGF-βI、L-10含量变化在反复自然流产中的作用。方法采用ELISA法检测30例反复自然流产患者3、0例正常妊娠妇女和30例正常非孕妇女外周血抑制性细胞因子TGF-β和IL-10含量,三色流式细胞术检测上述研究对象外周血CD4＋CD25＋T细胞比例。结果反复自然流产组妇女外周血CD4＋CD25＋Treg细胞的百分率（6.66±1.30）%明显低于正常非孕组（10.99±2.64）%（P〈0.05）和正常妊娠组（12.63±3.05）%（P〈0.05）。反复自然流产组妇女外周血TGF-β（123.64±27.31）pg/L明显低于正常非孕组对照组TGF-β（179.25±24.67）pg/L（P〈0.05）和正常妊娠组TGF-β（211.72±63.49）pg/L（P〈0.05）;反复自然流产组妇女外周血IL-10（145.37±42.45）pg/L明显低于正常非孕组对照组IL-10（203.47±42.56）pg/L（P〈0.05）和正常妊娠组IL-10（234.45±51.21）pg/L（P〈0.05）。结论外周血CD4＋CD25＋Treg细胞的比例低下以及抑制性细胞因子TGF-β和IL-10含量降低可能参与反复自然流产的发生。     

肝癌患者外周血CD_4~+CD_(25)~+T细胞的检测意义及冷冻消融对其表达的影响

目的探讨肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞的变化意义及冷冻消融治疗对其表达的影响。方法采用流式细胞技术分别检测18例原发性肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞的变化,并与健康对照组比较。同时检测10例原发性肝癌患者冷冻消融术前和术后3个月外周血CD4+CD25+T细胞水平的变化。结果肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞占总CD4+T淋巴细胞百分比高于健康对照组[(15.1±1.6)%vs(7.3±1.2)%,t=15.56,P=0.000]。其升高与患者血清AFP浓度(t=2.16,P<0.05)、肿块大小(t=2.73,P<0.05)和临床分期(t=3.00,P<0.01)显著相关,而与患者性别(t=0.23,P>0.05)、年龄(t=1.61,P>0.05)和结节数量(t=1.00,P>0.05)无显著相关。冷冻消融治疗能使CD4+CD25+T细胞显著性降低[(14.5±1.6)%vs(11.3±1.4)%,t=4.37,P<0.01]。结论原发性肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞水平较高,检测外周血CD4+CD25+T细胞表达可作为肝癌患者荷瘤状况和疗效评估的方法之一。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在晚期肺癌中的表达及临床意义

目的探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg细胞）在晚期肺癌中的表达及其临床意义。方法应用流式细胞术分析30例晚期肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞表达水平,与10例健康人比较。结果晚期肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞数量增加（17．9±6．1）％,表达高于正常人（6．81±0．4）％（P〈0．001）。肺癌患者外周血中Treg细胞数量与患者的病理类型无关（P〉0．05）,但与临床分期和组织学分化程度有关（P〈0．01）。结论Treg细胞在肺癌患者中比率明显升高,并与临床进展有关。     

喘可治注射液对大鼠抗炎和免疫调节机制的研究

目的:探讨喘可治注射液治疗支气管哮喘(简称哮喘)的作用机制.方法:60只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(0.5 ml·kg-1 ·d-1,肌内注射),高、中、低剂量(10、5、2.5 ml·kg-1·d-1,腹腔注射)喘可治注射液组.以2％卵蛋白为激发液,雾化吸入致敏,建立哮喘模型.治疗后,大鼠肺叶经HE染色后行病理切片,采用酶联免疫吸附(ELISA)法分别测定大鼠外周血中白介素-4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)浓度,采用流式细胞仪测定大鼠外周血中CD4+ CD25+T调节细胞和CD3- CD161a+自然杀伤(NK)细胞占淋巴细胞的百分比.结果:各剂量喘可治注射液组大鼠肺叶局部炎症反应均较模型组轻,IL-4浓度均明显下降,与模型组相比差异有显著性(P＜0.01),但各治疗组间、治疗组和正常组间IL-4浓度无显著差异.各治疗组IFN-γ的浓度均较模型组有所上升,其中高剂量组上升最为明显,与模型组比较有显著差异(P＜0.01).高、中、低剂量喘可治注射液组CD4+ CD25+T调节细胞百分比均明显上升,与模型组相比有显著差异(P＜0.05).CD3- CD161.+ NK细胞的百分比各组间比较无显著性差异.结论:喘可治注射液可增加血中IL-4、IFN-γ浓度,及CD4+ CD25+T调节细胞含量,纠正免疫失衡,这可能是其治疗哮喘的机制之一.     

特异性免疫治疗对哮喘大鼠白细胞介素-10和CD_4~＋CD_（25）~＋调节性T细胞的影响

目的：探讨特异性免疫治疗（specific immunotherapy,SIT）对哮喘大鼠白细胞介素-10（IL-10）和CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Tr）的影响。方法：40只健康雄性清洁级Wistar大鼠随机均分成正常对照组、哮喘组、SIT对照组和SIT治疗组,每组10只。通过卵蛋白（OVA）雾化吸入的方法对致敏大鼠进行SIT干预,观察各组支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞分类及计数结果、血清和BALF中IL-10水平及外周血CD4＋CD25＋Tr百分率变化。结果：正常对照组BALF和血清中IL-10浓度分别高于哮喘组和SIT对照组（均为P〈0.01）,哮喘组和SIT对照组BALF和血清中IL-10浓度低于SIT治疗组（P〈0.01,P〈0.05）;正常对照组外周血CD4＋CD25＋Tr百分率显著高于哮喘组、SIT对照组和SIT治疗组（P〈0.01）,而SIT治疗组CD4＋CD25＋Tr百分率分别高于哮喘组和SIT对照组（P〈0.05）。结论：通过上调体内IL-10和CD4＋CD25＋Tr趋于正常状态可能是SIT治疗哮喘有效的重要机制。     

不同剂量雷帕霉素对小鼠体内CD4+CD25+Treg细胞的影响

目的研究不同剂量雷帕霉素对小鼠体内Treg细胞的影响。方法将SPF级昆明系小鼠60只随机分为对照组(A)和实验组(B、C、D),B、C、D三组分别灌胃雷帕霉素1、2、3 mg.kg-1,A组每天予以无菌水灌胃,共3周。3周后,无菌条件下心脏采血,EDTA抗凝,分离脾脏,制备单细胞悬液,采用流式细胞仪检测小鼠外周血和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞水平(CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞的百分比)。结果实验组(B、C、D)小鼠外周血和脾细胞中CD4+CD25+Treg细胞水平分别为(9.62±1.43)%(、13.76±1.97)%(、15.41±2.45)%和(12.23±4.56)%(、23.03±6.18)%(、25.17±6.42)%,对照组(A)小鼠外周血和脾细胞中CD4+CD25+Treg细胞水平分别为(3.52±0.65)%和(6.53±3.01)%,无论是在外周血还是脾细胞中,B、C、D组CD4+CD25+Treg细胞水平明显高于A组(P0.05),C、D组与B组之间CD4+CD25+Treg细胞水平也有明显差异性(P0.05),C组和D组之间CD4+CD25+Treg细胞水平无明显差异性(P0.05)。结论雷帕霉素能够诱导昆明系小鼠体内CD4+CD25+Treg细胞增殖,其使用剂量可以影响CD4+CD25+Treg细胞的增殖程度。     

外周血CD19~+CD23~+B细胞在不同严重程度哮喘患儿中的表达

目的探讨哮喘轻、中、重度急性发作患儿外周血CD19+CD23+B细胞的表达与意义。方法收集2011年2月至2012年2月山西省儿童医院门诊及住院哮喘急性发作患者56例为试验组,依据哮喘急性发作程度分级标准,根据其发病情况,将其分为重度(A组)、中度(B组)、轻度组(C组);并收集参与山西省哮喘发病率流行病学调查的健康儿童36名作为对照组,采用流式细胞技术检测其外周血CD19+CD23+B细胞比率,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测其血清总IgE水平。结果①哮喘急性发作患者外周血CD19+CD23+B细胞水平高于健康儿童,同时,A组>B组>C组,差异有统计学意义(P<0.05);且A组与B组均高于健康对照组(P<0.05);C组高于健康对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);②血清总IgE水平A组>B组>C组>健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。③CD19+CD23+B细胞与总IgE水平呈正相关(r=0.538,P<0.05)。结论哮喘患者外周血CD19+CD23+B细胞升高,并随病情加重而升高。外周血CD19+CD23+B细胞阳性表达率联合血清总IgE水平可用作哮喘病情评估的辅助手段。