孕妇外周血CD_4~＋CD_（25）~＋调节性T细胞对子痫前期的预测

目的：探讨孕妇外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Tregs）对子痫前期的预测价值。方法：选取190例于我院产前常规孕期体检及分娩的孕产妇作为研究对象,按孕产妇是否发生子痫前期分为子痫前期组及正常对照组,采用流式细胞仪测定各孕妇20～24周外周血单个核细胞（PBMC）中CD4＋T细胞及CD4＋CD25＋Tregs的比率,并随访至分娩。采用磁珠分选技术分选随访期间确诊子痫前期的患者外周血PBMC中CD4＋CD25＋Tregs和CD4＋CD25-T细胞,酶联免疫仪检测CD4＋CD25＋Tregs对CD4＋CD25-T细胞增殖的抑制作用,并与正常孕妇组对比。结果：①随访情况。190例孕产妇妊娠期内有15例发展为子痫前期,其余175例为正常分娩,2组在剖宫产率、胎儿心率异常率、新生儿1 min及5 min的Apgar评分有显著性差异（P〈0.05）。②CD4＋CD25＋Tregs的数量。子痫前期组和正常对照组外周血PBMC中CD4＋T细胞比率分别为34.21%±6.92%和35.72%±7.45%,2组比较无显著性差异（P〉0.05）。子痫前期组外周血PBMC中CD4＋CD25＋Tregs占CD4＋T细胞的比率为6.71%±2.21%,明显低于正常对照组的12.01%±2.98%（P〈0.05）。③CD4＋CD25＋Tregs的抑制功能。子痫前期组CD4＋CD25＋Tregs对CD4＋CD25-T细胞增殖的抑制百分率为57.56%±9.47%,正常孕妇组为78.27%±12.43%,2组比较有显著性差异（P〈0.05）。④CD4＋CD25＋Tregs的预测性。以CD4＋CD25＋Trges数量变化预测子痫前期的ROC曲线下面积为0.913,Tregs的最佳截断点为6.605%,预测子痫前期的敏感度86.7%、特异度82.85%。结论：孕妇妊娠中期外周血CD4＋CD25＋Tregs数量减少和（或）抑制功能下降与子痫前期的发生相关,可作为子痫前期的预测性指标。     

CD4^＋CD25^＋Treg细胞、TGF-β和IL-10在反复自然流产中的变化

目的探讨外周血CD4＋CD25＋Treg细胞数量和抑制性细胞因子TGF-βI、L-10含量变化在反复自然流产中的作用。方法采用ELISA法检测30例反复自然流产患者3、0例正常妊娠妇女和30例正常非孕妇女外周血抑制性细胞因子TGF-β和IL-10含量,三色流式细胞术检测上述研究对象外周血CD4＋CD25＋T细胞比例。结果反复自然流产组妇女外周血CD4＋CD25＋Treg细胞的百分率（6.66±1.30）%明显低于正常非孕组（10.99±2.64）%（P〈0.05）和正常妊娠组（12.63±3.05）%（P〈0.05）。反复自然流产组妇女外周血TGF-β（123.64±27.31）pg/L明显低于正常非孕组对照组TGF-β（179.25±24.67）pg/L（P〈0.05）和正常妊娠组TGF-β（211.72±63.49）pg/L（P〈0.05）;反复自然流产组妇女外周血IL-10（145.37±42.45）pg/L明显低于正常非孕组对照组IL-10（203.47±42.56）pg/L（P〈0.05）和正常妊娠组IL-10（234.45±51.21）pg/L（P〈0.05）。结论外周血CD4＋CD25＋Treg细胞的比例低下以及抑制性细胞因子TGF-β和IL-10含量降低可能参与反复自然流产的发生。     

CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞在急性脑梗死患者外周血中表达的初步研究

目的初步探讨CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞在急性脑梗死患者外周血中的表达情况。方法采用流式细胞术分别检测取98例急性脑梗死患者和50名健康体检者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞所占比例,并用双抗体夹心法检测各组血清TGF-B、IL-10和IL-2。结果急性脑梗死患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞水平显著高于对照组（P〈O．01）,血清中TGF-β、IL-10和IL-2显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论CD4^＋CD25^＋T细胞在急性脑梗死患者外周血中表达显著升高,血清中的相关细胞因子参与诱导CD4^＋CD25^＋T细胞的生成,提示CD4^＋CD25^＋T细胞可能参与了急性脑梗死的发生、发展。     

CD4＋CD25＋Treg调节性T细胞及其细胞因子在大鼠动脉粥样硬化中改变的研究

目的 研究CD4＋ CD25＋ Treg调节性T细胞及其分泌的细胞因子在大鼠动脉粥样硬化中的改变.方法 制备动脉粥样硬化模型,取雄性SD大鼠30只,随机分为正常饮食组（A组）10只及高脂饮食组（B组）20只,高脂饮食组再分为对照组与干预组各10只,干预组高脂饲料喂养前腹腔注射抗CD25＋单克隆抗体250μg,A组及对照组腹腔注射大鼠IgG抗体（250μg）,高脂饮食组定期用维生素D腹腔注射.上述各组喂养3个月后,各组随机抽取6只大鼠通过流式细胞学技术检测CD4＋ CD25 ＋Treg细胞及Foxp3＋的表达、检测炎症因子IL-10,IL-1β水平,处死各组大鼠做病理切片.结果 3组中干预组CD4＋ CD25＋ Treg细胞及Foxp3＋表达下降最明显,IL-10水平明显下降,IL-1β水平明显升高,A组CD4＋ CD25＋ Treg细胞及Foxp3＋表达最高,IL-10水平亦最高,IL-1β水平最低.而对照组在干预组及A组之间.结论 动脉粥样硬化形成中CD4＋ CD25＋ Treg调节性T细胞及其分泌的细胞因子受到抑制,而不是CD4＋ CD25＋ Treg调节性T细胞分泌的因子却显著升高,考虑动脉粥样硬化的形成有免疫反应参与.     

Treg细胞在儿童过敏性哮喘SIT治疗过程中的变化

目的：本研究通过观察对室尘螨（HDM）过敏的儿童哮喘患者,过敏原特异性免疫治疗（allergen specific immunotherapy, SIT）后外周血CD4＋CD25＋CD127-Treg细胞（regulatory T cell, Treg）细胞）占CD4＋T cell的百分比的变化,以及它们在SIT治疗中的作用,初步探讨儿童过敏性哮喘SIT的机制,从而为哮喘的防治提供新思路。方法选取郑州大学第一附属医院儿科门诊48例儿童过敏性哮喘患者分两组,一组进行标准化SIT 1.5-2年后,采集两组患者的外周静脉血。用流式细胞仪检测每组标本中CD4＋CD25＋CD127-T细胞占CD4＋T细胞的百分比,结果采用统计学软件进行统计学分析。结果CD4＋CD25＋CD127-T细胞占CD4＋T细胞的百分比在HDM-SIT组显著增高。结论本实验进一步证实了哮喘患者SIT治疗有效;在HDM-SIT组CD4＋CD25＋CD127-T细胞占CD4＋T细胞的百分比升高,提示CD4＋CD25＋CD127-T细胞可能在儿童过敏性哮喘特异性免疫治疗中起重要作用。     

CD4~＋CD25~＋调节性T细胞在肺癌患者中的表达及临床意义

目的探讨肺癌患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的表达及其临床意义。方法应用流式细胞术分析45例肺癌患者与15例健康对照组外周血CD4＋CD25＋Treg细胞占CD4＋T细胞的比例。结果肺癌患者外周血CD4＋CD25＋Treg细胞占CD4＋T细胞比例为（17.8±6.6）%,表达高于对照组（6.49±0.5）%（P〈0.001）。肺癌患者外周血中Treg细胞数量在不同临床分期和组织学分化程度中的差异有统计学意义（P〈0.01）,但与患者的病理类型无关（P〉0.05）。结论 Treg细胞在肺癌患者中表达明显升高,是肺癌患者免疫功能紊乱的一个证据。     

CD4、CD8分子在被动吸烟诱导的肺气肿大鼠中的表达及意义

目的探讨CD4、CD8分子在被动吸烟诱导的肺气肿大鼠中的表达及意义。方法 26只大鼠随机分为2组：正常对照组、肺气肿组。单纯吸烟法建立肺气肿模型,熏烟暴露共计74d。以酶联免疫吸附法（ELISA）测定2组血清和支气管肺泡灌洗液（BALF）中的CD4、CD8分子、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-8（IL-8）的浓度。肺组织切片行苏木素-伊红染色观察形态学改变,并定量测定肺平均内衬间隔（MLI）、平均肺泡数（MAN）。结果 （1）肺气肿组血清CD4含量、CD4/CD8较正常对照组降低（P〈0.05）;但其BALF中CD4分子含量、CD4/CD8和正常对照组比较,差异无显著意义（P〉0.05）。（2）肺气肿组血清及BALF中TNF-α、IL-8浓度较正常对照组增加（P〈0.05）。（3）肺气肿组MLI比正常对照组增高,MAN比正常对照组降低（P〈0.05）。（4）血清CD4分子和IL-8浓度呈负相关（r=-0.59,P〈0.05）,但和TNF-α浓度无明显相关（r=-0.26,P〉0.05）;血清CD4/CD8和TNF-α、IL-8浓度呈负相关（r分别为-0.51,-0.60,P〈0.05）。结论吸烟肺气肿大鼠可出现全身免疫功能降低,易诱发血清中炎症因子浓度升高。     

TGFβ1和CD4＋CD25＋调节性T细胞表达在系统性红斑狼疮发病中的意义

目的检测系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血转化生长因子β1（TGFβ1）和CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）的表达,探索其在SLE发病中的作用及临床意义。方法分别采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）和二色荧光抗体标记流式细胞仪法,对SLE患者和正常对照组血清TGFβ1和外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞进行检测,并结合临床资料进行分析。结果血清TGFβ1和外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞表达在SLE活动组[（715±414）pg/ml、（4.53±0.85）%]明显低于正常对照组[（1314±129）pg/ml、（8.78±2.87）%]和SLE稳定组[（1423±153）pg/ml、（10.89±1.41）%]（均P〈0.05）,而SLE稳定组和正常对照组之间差异无统计学意义（P〉0.05）;SLE患者TGFβ1和CD4＋CD25＋调节性T细胞表达量均与疾病活动度SLEDAI积分呈负相关（r=-0.68,P=0.002;r=-0.78,P=0.000）,与其他临床指标如24h尿蛋白量、抗ds-DNA抗体等无相关性。TGFβ1表达与CD4＋CD25＋调节性T细胞数之间亦未见相关性（r=0.51,P=0.113）。此外,血清TGFβ1表达尚与血小板数量和血红蛋白量成正相关（r=0.71,P=0.001;r=0.44,P=0.042）。结论活动SLE患者血清TGFβ1和外周血CD4＋CD25＋细胞表达减少,提示两者可能参与SLE发病,并对判断疾病活动度有一定的临床意义。     

胸腺切除术后应用免疫抑制剂治疗重症肌无力的分析研究

目的探讨重症肌无力患者胸腺切除术后应用免疫抑制剂治疗的CD4＋CD25＋Tr细胞百分率和乙酰胆碱受体抗体的变化。方法 A组（n=34）重症肌无力患者胸腺切除术后应用免疫抑制剂组;B组（n=35）重症肌无力患者胸腺切除后未应用免疫抑制剂组;用流式细胞仪计数外周血A、B2组治疗前和治疗后6个月的CD4＋CD25＋Tr细胞的百分率和酶联免疫吸附法检测乙酰胆碱受体抗体（AchR-Ab）,应用许氏临床评分法对病情的严重程度和转归进行评定。结果 A、B2组比较CD4＋CD25＋Tr细胞百分率、乙酰胆碱受体抗体（AchR-Ab）、临床相对计分在治疗后6个月差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 HTK胸腺切除后应用免疫抑制剂6个月后,重症肌无力患者的CD4＋CD2＋5Tr细胞的百分率明显增高和AchR-Ab明显降低,肌无力症状稳定缓解。     

青蒿鳖甲汤对急性白血病缓解期患者CD34~＋源DC诱导过程中IL-12的影响

目的：探讨青蒿鳖甲汤对AML-CR患者CD34＋源DC诱导过程IL-12的影响。方法：选择贵州省人民医院AML-CR患者4例,免疫磁珠法提取CD34＋细胞后以细胞因子扩增CD34＋细胞,再以含药血清与细胞因子共诱导DC,观察DC形态,ILISA法分别检测第0、6、9天的IL-12水平。结果：各组IL-12水平随DC的逐渐成熟而逐渐升高,其中含药血清组与空白、因子组比较有显著差异（P〈0.05）,其中高剂量组与中低剂量组比较有显著差异（P〈0.05）,高剂量组与因子、空白组比较有显著差异（P〈0.01）,中剂量组与低剂量组、因子与空白组比较无显著差异（P〉0.05）。结论：青蒿鳖甲汤在体外能从造血干细胞层面提高AML-CR患者IL-12水平,且以高剂量组效果最佳。     

喘可治注射液对大鼠抗炎和免疫调节机制的研究

目的:探讨喘可治注射液治疗支气管哮喘(简称哮喘)的作用机制.方法:60只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(0.5 ml·kg-1 ·d-1,肌内注射),高、中、低剂量(10、5、2.5 ml·kg-1·d-1,腹腔注射)喘可治注射液组.以2％卵蛋白为激发液,雾化吸入致敏,建立哮喘模型.治疗后,大鼠肺叶经HE染色后行病理切片,采用酶联免疫吸附(ELISA)法分别测定大鼠外周血中白介素-4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)浓度,采用流式细胞仪测定大鼠外周血中CD4+ CD25+T调节细胞和CD3- CD161a+自然杀伤(NK)细胞占淋巴细胞的百分比.结果:各剂量喘可治注射液组大鼠肺叶局部炎症反应均较模型组轻,IL-4浓度均明显下降,与模型组相比差异有显著性(P＜0.01),但各治疗组间、治疗组和正常组间IL-4浓度无显著差异.各治疗组IFN-γ的浓度均较模型组有所上升,其中高剂量组上升最为明显,与模型组比较有显著差异(P＜0.01).高、中、低剂量喘可治注射液组CD4+ CD25+T调节细胞百分比均明显上升,与模型组相比有显著差异(P＜0.05).CD3- CD161.+ NK细胞的百分比各组间比较无显著性差异.结论:喘可治注射液可增加血中IL-4、IFN-γ浓度,及CD4+ CD25+T调节细胞含量,纠正免疫失衡,这可能是其治疗哮喘的机制之一.     

外周血CD19~+CD23~+B细胞在不同严重程度哮喘患儿中的表达

目的探讨哮喘轻、中、重度急性发作患儿外周血CD19+CD23+B细胞的表达与意义。方法收集2011年2月至2012年2月山西省儿童医院门诊及住院哮喘急性发作患者56例为试验组,依据哮喘急性发作程度分级标准,根据其发病情况,将其分为重度(A组)、中度(B组)、轻度组(C组);并收集参与山西省哮喘发病率流行病学调查的健康儿童36名作为对照组,采用流式细胞技术检测其外周血CD19+CD23+B细胞比率,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测其血清总IgE水平。结果①哮喘急性发作患者外周血CD19+CD23+B细胞水平高于健康儿童,同时,A组>B组>C组,差异有统计学意义(P<0.05);且A组与B组均高于健康对照组(P<0.05);C组高于健康对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);②血清总IgE水平A组>B组>C组>健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。③CD19+CD23+B细胞与总IgE水平呈正相关(r=0.538,P<0.05)。结论哮喘患者外周血CD19+CD23+B细胞升高,并随病情加重而升高。外周血CD19+CD23+B细胞阳性表达率联合血清总IgE水平可用作哮喘病情评估的辅助手段。     

肝癌患者外周血CD_4~+CD_(25)~+T细胞的检测意义及冷冻消融对其表达的影响

目的探讨肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞的变化意义及冷冻消融治疗对其表达的影响。方法采用流式细胞技术分别检测18例原发性肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞的变化,并与健康对照组比较。同时检测10例原发性肝癌患者冷冻消融术前和术后3个月外周血CD4+CD25+T细胞水平的变化。结果肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞占总CD4+T淋巴细胞百分比高于健康对照组[(15.1±1.6)%vs(7.3±1.2)%,t=15.56,P=0.000]。其升高与患者血清AFP浓度(t=2.16,P<0.05)、肿块大小(t=2.73,P<0.05)和临床分期(t=3.00,P<0.01)显著相关,而与患者性别(t=0.23,P>0.05)、年龄(t=1.61,P>0.05)和结节数量(t=1.00,P>0.05)无显著相关。冷冻消融治疗能使CD4+CD25+T细胞显著性降低[(14.5±1.6)%vs(11.3±1.4)%,t=4.37,P<0.01]。结论原发性肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞水平较高,检测外周血CD4+CD25+T细胞表达可作为肝癌患者荷瘤状况和疗效评估的方法之一。     

猪囊尾蚴病患者CD4~+ CD25~+调节性T细胞水平的变化

目的检测猪囊尾蚴病患者外周血中CD4+CD25+调节性T淋巴细胞及其FOXP3的表达情况,探讨CD4+CD25+调节性T淋巴细胞在猪囊尾蚴感染中的免疫调控作用及意义。方法采用流式细胞仪检测11例猪囊尾蚴病患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞的含量,同时观察CD4+CD25+T细胞中表达FOXP3群体的百分含量。结果囊尾蚴病患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞的百分含量为6.11%,较正常人(3.94%)明显升高(P<0.05);患者外周血中CD4+CD25+T细胞表达FOXP3的细胞百分含量为15.67%,与正常对照组(11.09%)有显著性差异(P<0.05)。结论猪囊尾蚴病患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞的百分含量显著升高,表明CD4+CD25+调节性T细胞可能参与猪囊尾蚴感染的免疫抑制。     

恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞CD25的测定与临床检验学研究

目的探讨恶性肿瘤患者T淋巴细胞CD25＋水平的临床意义。方法用流式细胞仪检测70名正常人和274例恶性肿瘤患者外周血CD4＋CD25＋和CD8＋CD25＋水平。结果恶性肿瘤患者外周血CD4＋CD25＋水平比正常人高,差异有统计学意义（P〈0.05）;恶性肿瘤患者外周血CD8＋CD25＋水平与正常人比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。其中,食管癌、肝癌和肺癌的CD4＋CD25＋水平与正常人比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;肠癌、胃癌和鼻咽癌的CD4＋CD25＋水平与正常人比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论恶性肿瘤患者外周血CD4＋CD25水平的增高可作为恶性肿瘤免疫诊断的参考指标。     

特异性免疫治疗对哮喘大鼠转化生长因子-β1／Smad信号通路的影响

目的：探讨特异性免疫治疗（specific immunotherapy,SIT）对哮喘大鼠转化生长因子-β1（TGF—β1）及信号转导分子Smads表达的影响。方法：40只健康雄性清洁级Wistar大鼠随机均分成正常对照组、哮喘组、SIT对照组和SIT治疗组等4组,每小组10只。通过卵蛋白（OVA）雾化吸入的方法对致敏大鼠进行SIT,用双抗体夹心ELISA法测定血清和BALF中TGF-β1浓度,免疫组化方法检测肺组织TGF-β1以及磷酸化Smad2／3（P—Smad2／3）、Smad7蛋白表达水平。结果：哮喘组和SIT治疗组的血清、BALF中TGF—β1浓度均分别高于正常对照组,但SIT治疗组与哮喘组相比,两者的TGF-β1浓度则均有所下降;哮喘组肺组织TGF-β1和P-Smad2／3蛋白表达较正常对照组和SIT治疗组增高,而Smad7蛋白表达下降。结论：SIT通过抑制哮喘大鼠体内TGF—β1和P—Smad2／3的过度表达及上调Smad7,从而阻断TGF-β1的胞内信号转导,可在一定程度上减轻哮喘大鼠气道炎症和抑制气道重塑的发生发展。     

三氧化二砷对兔卵蛋白诱导性关节炎的治疗作用的实验研究

目的探讨三氧化二砷对日本大耳白兔卵蛋白诱导性关节炎模型外周血中抑炎因子(IL-10)、促炎因子(TNF-α)、CD4+、CD8+T细胞含量及CD4+/CD8+比值的影响。方法将48只日本大耳白兔随机分为模型组、正常对照组、三氧化二砷低剂量组(1.0 mg·kg-1·d-1)、三氧化二砷中剂量组(2.0 mg·kg-1·d-1)、三氧化二砷高剂量组(4.0 mg·kg-1·d-1)、激素组醋酸泼尼松龙(10 mg·d-1),每组8只。成功建立卵蛋白诱导关节炎兔模型后,分别给药2周,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测兔外周血中的IL-10、TNF-α,流式细胞仪检测CD4+、CD8+T细胞的含量。结果卵蛋白诱导法可以成功诱导兔的关节炎,模型组外周血中的IL-10含量较正常对照组降低(P0.01),模型组TNF-α较正常对照组上升(P0.05),三氧化二砷各剂量组兔的关节炎症状不同程度改善,IL-10含量较模型组升高(P0.05),而TNF-α较模型组降低(P0.05);模型组外周血CD4+及CD4+/CD8+比值较正常对照组显著升高(P0.01),三氧化二砷治疗组比值均比正常组出现不同程度的下降。结论三氧化二砷可能通过抑制CD4+T细胞的异常增生,减轻细胞免疫应答、调节卵蛋白关节炎兔外周血T细胞各亚群的紊乱缓解RA的病程发展,该作用可能是三氧化二砷治疗类风湿关节炎的重要机理之一。