上海地区血液透析患者与供血者中输血传播病毒DNA检测及部分核苷酸序列分析

目的　了解上海地区暴露于血及血制品的血透患者中输血传播病毒（ＴＴＶ）感染率。方法　采用套式ＰＣＲ技术,检测了 ６例血透患者和 ４９例供血员血清中 ＴＴＶ ＤＮＡ,并对其中各 １例 ＰＣＲ产物（２７２ｂｐ）测］３。结果血透患者ＴＴＶ ＤＮＡ的检出率为 ３２．８％（２０／６１）,供血员的检出率为 ２４． ５％（１２／４９）。 ２０例 ＴＴＶＤＮＡ阳性血透患者中,６例为单纯ＴＴＶ感染,６例为ＴＴＶ、ＨＣＶ及ＨＧＶ重叠感染,４例为ＴＴＶ、ＨＣＶ和４例为ＴＴＶ、ＨＧＶ重叠感染。在所有ＴＴＶ感染者中,仅发现１例血清ＡＬＴ升高,该病例为ＴＴＶ、ＨＣＶ及ＨＧＶ重叠感染。对ＰＣＲ阳性扩增产物２７２ｂｐ测序结果显示,上海株（ＳＨＰ、ＳＨＤ）核苷酸的同源性为９９．６％,与深圳株、２株日本株核着酸的同源性分别为９７．４％、９８．７％和９８．７％,表明ＴＴＶ上海株与深圳株及日本株（Ｎ２２、Ｇ１ａ）属同一亚型,首次证实了上海地区的ＴＴＶ感染。结论ＴＴＶ感染可经血传播。其致病性较弱,对ＴＴＶ的研究尚属开始,ＴＴＶ的病原学、流行病学及临床意义等问题还有待进一步探索和阐明。     

TTV感染血清学,原位杂交及干扰素治疗研究

目的了解ＴＴＶ感染状况,探讨ＴＴＶ致病性及对干扰素治疗的应答。方法采用ＰＣＲ和原位杂交方法检测血清和肝组织中ＴＴＶ ＤＮＡ,回顾分析８例ＴＴＶ／ＨＣＶ感染者干扰素治疗后病毒及ＡＬＴ应答状况。结果各型肝病患者（３６．７％～４２．８％）和职业供血员（４３．２％）ＴＴＶ感染率均显著高于义务供血员（健康对照人群,５．６％）。部分感染者采用斑点杂交方法可自血清中检出ＴＴＶ ＤＮＡ（３／３０,１０．０％）,提示存在较高的血清病毒负荷, １６例慢性非甲～戊型肝炎患者及１６例肝炎后肝硬化患者肝组织以原位杂交检测,各６例ＴＴＶ ＤＮＡ阳性（３７．５％）。 ８例ＴＴＶ／ＨＣＶ混合感染者经２４周疗程干扰素治疗后,６例维持持久ＡＬＴ应答（停药后２４周ＡＬＴ正常）,治疗１２周时, ８例血清ＴＴＶ ＤＮＡ均阴转,但 ２例停药后复阳, ＡＬＴ无应答的２例患者, ＨＣＶ ＲＮＡ呈阳性但ＴＴＶ ＤＮＡ阴怀;而ＴＴＶ ＤＮＡ阳转的２例患者ＡＬＴ均维持应答。结论 ＴＴＶ感染在肝病患者和职业供血员中较普遍, ＴＴＶ可在肝组织中活跃复制,其对干扰素治疗反应较敏感,ＴＴＶ／ＨＣＶ重叠感染时ＴＴＶ无明显致肝损伤作用。     

经输血传播病毒(TTV)在血液透析患者中感染状况及基因分析

目的 研究我国血液透析患者人群中经输血传播病毒（ＴＴＶ）的感染及基因变异状况。方法 设计特异性引物采用半巢式ＰＣＲ方法对北京市２所综合性大医院５０例血液透析患者血清标本进行ＴＴＶ ＤＮＡ的检测并将产物克隆及序列分析。结果 经过半巢式ＰＣＲ检测，血透患者ＴＴＶ ＤＮＡ阳性率为１４％。对其中４例标本中分离出的ＴＴＶ ２７０个碱基核酸片段序列分析表明：基因同源性为９９．１％￣１００％，推测的编码氨基酸序     

丙型及非甲-庚型肝炎患者血清TTV检测及临床分析

目的 了解郑州地区不同肝病患者中ＴＴＶ（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｖｉｒｕｓ）感染状况及其临床特点。方法 自行设计ＴＴＶ ＯＲＦ１保守区的两对引物,对２０例非甲－庚型肝炎和９７例丙型肝炎患者血清进行ＰＣＲ检测,并对３０例资料完整的丙肝患者是否合并ＴＴＶ感染及其临床特点进行分析。结果 丙型和非甲－庚型肝炎患者血清ＴＴＶ ＤＮＡ检出率分别为１６．５％（１６／９７）和２０％（４／２     

TTV单独及重叠HBV感染的临床研究

目的：了解输血传播病毒（Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ Ｔｉａｎｓｍｉｔｔｅｄ Ｖｉｒｕｓ，ＴＴＶ）单独及重叠乙肝病毒（ＨＢＶ）感染的临床特征，探讨其致病性。方法：用套式聚合酶链反应检测血清中ＴＴＶ ＤＮＡ，用ＥＬＩＳＡ法和／或ＰＣＲ法对其他肝炎病毒标志物进行血清学检测。结果：肝病患者ＴＴＶ ＤＮＡ总的阳性率为２１．９％（１０７／４８９）。从临床分型来看，ＴＴＶ单独感染者以急性肝炎（ＡＨ）为多见，占７５％     

多重和套式聚合酶链反应检测血液、腹膜透析患者血清中HBV DNA和HCV RNA

利用免疫学和聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，对３５例血液透析（血透）、１４例腹膜透析（腹透）患者的８４份血清进行了检测。血透组抗－ＨＣＶ阳性率８２．９％，ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ阳性率５１．４％；腹透组抗－ＨＣＶ阳性率仅７．１％，ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ均阴性。ＨＢｓＡｇ和（或）ＨＢｅＡｇ在二组的阳性率分别为２５．７％和２１．４％；ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ阳性率分别为４５．７％和６４．２％。透析患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感染率显著高于一般人群。血、腹透两组ＨＣＶ感染率相差非常显著，血透患者抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ阳性高于腹透患者，表明血透过程在丙型肝炎传播方面起重要作用。作者还采用多重和套式ＰＣＲ方法，将ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ在合并的逆转录和ＰＣＲ扩增系统中，连续进行逆转录和第一轮多重ＰＣＲ扩增，再进行第二轮多重ＰＣＲ，具有特异、敏感、简便、快速和经济等特点，适于临床应用。     

输血后乙型和丙型肝炎病毒感染的前瞻性调查

目的 了解输血所致ＨＢＶ和ＨＣＶ感染现状及ＨＢｓＡｇ抗ＨＣＶ和ＡＬＴ筛检供血的效果。方法 对１３８例输血者输血前，后１，３，６，９个月血清标本及其供血检测ＨＢｓＡｇ，抗ＨＢｓ，抗ＨＢｃ，抗ＨＣＶ和ＡＬＴ，并对部分血清标本用ＰＣＲ及巢式ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ，结果和结论 输血后ＨＢＶ和ＨＣＶ感染率分别为１．４％（２／１３８）和３４．８％（４８／１３８），输血后乙型和丙型肝炎发生     

PCR检测HBV感染患者血清HBV DNA的临床意义

目的探讨急、慢性乙型肝炎及与ＨＢＶ感染相关的肝硬变和肝癌患者血清ＨＢＶＤＮＡ的临床意义．方法应用ＰＣＲ技术检测不同ＨＢＶ感染２０５例，患者血清ＨＢＶＤＮＡ，并与正常人２０例作比较．结果ＨＢＶ感染患者２０５例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性率为６９３％，慢性乙肝、乙肝后肝硬变和肝癌患者的阳性率分别为７６４％，７１９％和７００％，显著高于急性乙肝患者２１７％的阳性率（Ｐ＜００１）；ＨＢｅＡｇ（＋）患者血清ＨＢＶＤＮＡ阳性率为９３６％，显著高于ＨＢｅＡｇ（－）抗ＨＢｅ（＋）／（－）和ＨＢｓＡｇ（－）患者的阳性率（４５６％，２５０％和１２５％，Ｐ＜００１）；血清ＨＢＶＤＮＡ阳性和阴性两组患者的血清ＡＬＴ水平无明显差异（Ｐ＞００５）．结论血清中ＨＢＶＤＮＡ持续存在可能与乙型肝炎的慢性化有关，而与ＨＢＶ感染患者的肝损伤无明显关系     

维持性血透患者六种肝炎病毒感染的调查研究

目的：了解维持性血液透析患者六种肝炎病毒感染情况,探讨其与输血、透析时间、肝功能的关系。方法：对１６７例维持性血液透析患者进行调查,采用第二代酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）检测ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＥＶ、ＨＧ,用套式ＰＣＲ法检测经输血传播的肝炎病毒（ＴＴＶ）ＤＮＡ,并按血透时间、输血次数等分组进行对比分析。结果：ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ、ＨＨＥＶ、ＨＧＶ、ＴＴＶ感染率分别为０％、２０．４％、５５．７％、０％、     

一种新型肝炎相关性病毒的分子生物学研究

目的 了解南京地区ＴＴＶ病毒感染情况，重叠ＴＴＶ感染对慢性乙型肝炎病变和蔼和ＨＢＶ复制的影响。方法 采用巢式ＰＣＲ方法检测血清标本中ＴＴＶ－ＤＮＡ。结果 ４６９ 血清标本中，ＴＴＶＤＮＡ总检出率为２１．１％。其中健康人群、献血员、血透患者、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、戊型肝炎、庚型肝炎、非甲－非庚型肝炎检出率分别是９．４％、３３．３％、３０．８％、１１．６％、１９．９％、１５．４％、８．７％、９     

肝炎患者中新型肝炎病毒感染及临床分析

为了解广西玉林市肝炎患者中新型肝炎病毒（ＴＴＶ）感染及临床特点，我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法检测了３２例病毒性肝炎患者血清ＴＴＶ－ＤＮＡ。现报道如下。对象与方法３２例均为医院传染科１９９８年６月收治的病毒性肝炎患者。诊断依据１９９５年北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议修订方案。男性２７例，女性５例，年龄１８～６６岁，平均４０．４岁。急性肝炎（ＡＨ）１３例，慢性肝炎（ＣＨ）１６例，肝硬化（ＬＣ）３例。血清ＴＴＶＤＮＡ用ＰＣＲ法检测，试剂盒由厦门泰伦生物工程有限公司提供。严格按照试剂盒说明书操…     

多重和套式聚合酶链反应检测血液,腹膜透析患者血清中HBV D…

利用免疫学和聚合反应（ＰＣＲ）方法，对３５例血液透析（血透），１４例腹膜透析（腹透）患者的８４份血清进行了检测。血透组抗－ＨＣＶ阳性率８２．９％，ＨＣＶ ＲＮＡ ＰＣＲ阳性率５１．４％；腹透组抗－ＨＣＶ阳性率仅７．１％，ＨＣＶ ＲＮＡ ＰＣＲ均阴性。ＨＢｓＡｇ和（或）ＨＢｅＡｇ在二组的阳性率分别为２５．７％和２１．４％；ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ阳性率分别为４５．７％和６４．２％。透析患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感     

斑点杂交法检测肝病患者TTV感染状况初探

目的 探讨斑点杂交法在检测肝病患者ＴＴ病毒（ＴＴＶ）感染状况中的应用价值。方法 提抽患者血清中ＤＮＡ,分别采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）及斑点杂交技术检测其中的ＴＴＶ病毒ＤＮＡ。结果 在３０份非甲～非戊型肝炎患者血清中,ＰＣＲ方法检出１１份为ＴＴＶ阳性,检出率为３６．７％。采用斑点杂交法检出３份阳性血清,阳性率为１０％。制备的探针具有ＴＴＶ特异性,可检出相当于１０＾６拷贝的病毒ＤＮＡ。结论 以地高辛标     

CPH肝组织,血清HBV与血清HBV标志物不同状态的相关性探讨

目的和方法：经肝活检诊断为慢性迁延性肝炎（ＣＰＨ）５１例，均做ＰＣＲ、斑点杂交进行肝组织、血清ＨＢＶＤＮＡ检测，同时用ＥＬＩＳＡ方法检测了ＨＢＶ血清标志物。结果，ＨＢＶＤＮＡ检出率依次为肝组织ＰＣＲ９４１％（４８／５１）、血清ＰＣＲ９２２％（４７／５１）和肝组织斑点杂交９０２％（４６／５１）。三者之间无显著差异（χ２＝０４９５，Ｐ＞００５）。各项血清标志物总检出率ＨＢｓＡｇ３７２％（１９／５１），ＨＢｅＡｇ３３３％（１７／５１）和抗－ＨＢｅ２１５％（１１／１５），显著低于ＰＣＲ和斑点杂交ＨＢＶＤＮＡ的检出率（χ２＝３０．９，Ｐ＜０００５）。在抗－ＨＢｅ（＋）的１１例患者中１０例检出肝组织和血清ＨＢＶＤＮＡ，８例抗－ＨＢｓ（＋）患者，６例肝组织及血清ＰＣＲＨＢＶＤＮＡ阳性，结论：表明抗－ＨＢｅ（＋）及／或抗－ＨＢｓ（＋）不能代表ＨＢＶ复制停止或被清除，并且肝脏病变可仍然存在     

各型病毒性肝炎TTV DNA检测结果

各型肝炎中及献血者中ＴＴＶ合并感染情况。设计特异性引物,采用半套式ＰＣＲ法,对辽沈地区２０例散发性非甲－非庚型肝炎,２０例慢性乙型肝炎,２０例慢性丙型肝炎及４０例重型肝炎与５０例献血者血清进行ＴＴＶ ＤＮＡ检测。非甲－非庚型肝炎血清阳性１例（５％）;重型肝炎阳性９例（２２．５％）;慢性乙肝阳性５例（２５％）;慢性丙肝阳性３例（１５％）;献血者未查出ＴＴＶ ＤＮＡ阳性者。二株ＴＴＶ ＤＮＡ扩增产物的     

急性非甲～庚型肝炎患者血清TTVDNA检测分析

为了解非甲～庚型肝炎的病原学感染状况 ,对供血员 2 4例 ,急性非甲～庚型肝炎患者 31例血清采用ＰＣＲ技术进行ＴＴＶＤＮＡ检测。结果显示 ,供血员ＴＴＶＤＮＡ阳性率为 12 .5% ( 3/2 4 ) ;急性非甲～庚型肝炎患者阳性率为 4 1.9% ( 13/31)。ＴＴＶ感染不仅在不明病源的肝炎患者中有较高的检出率 ,在无症状供血员中也有一定的感染。除 1例因胰腺癌手术有输血史外 ,余均无输血及血制品史 ,说明粪 口传播即肠道感染乃是目前最广泛的途径。研究证明 ,沈阳地区存在着较高的ＴＴＶ感染 ,不仅在肝炎患者 ,且在供血员中均有ＴＴＶ阳性者 ,提示开…     

肝癌组织中丙型和乙型肝炎病毒基因状况研究

采用逆转录巢式ＰＣＲ技术检测了５１例ＨＣＣ患者的肝癌及癌周肝组织中ＨＣＶＲＮＡ正负链，同时以巢式ＰＣＲ技术检测了这些组织中的ＨＢＶＤＮＡ。结果，１１．８％（６／５１）检出组织中ＨＣＶＲＮＡ正链：其中５例在癌周肝组织，２例在癌组织中检测出ＨＣＶＲＮＡ负链，由于负链ＲＮＡ为ＨＣＶ的复制中间体，不释放到细胞外，其检出ＨＣＶ感染与ＨＣＣ关系的研究提供了进一步的病因证据，组织中ＨＢＶＤＮＡ检出率高达９２．２     

HBV感染者血清HBeAg/IC和HBV DNA间的关系

资料与方法：ＨＢＶ感染者１１７例,正常对照２０例,研究对象排除其它肝炎病毒感染,半年内未经抗病毒及免疫治疗。采用ＥＬＩＳＡ及Ｎａｓｔｅｄ－ＰＣＲ方法分别检测ＨＢＶ感染者血清中ＨＢｅＡｇ／免疫复合物（ＩＣ）和ＨＢＶ ＤＮＡ。 结果：１１７例ＨＢＶ感染者血清中共检出ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性２３例,ＨＢＶＤＮＡ阳性 ５５例, ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性者中 ＨＢＶＤＮＡ阳性率为９１．３％（２１／２３例）,而ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阴性的９４例中ＨＢＶ ＤＮＡ阳性３４例,阳性率为３６．２％,两组差异有非常显著性,ｘ２＝８．１５…     

TTV在非甲-庚型肝炎患者中的检测、克隆及测序

目的分析ＴＴＶ（Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｔｒａｎｓｍｉｔｅｄｖｉｒｕｓ）深圳分离株ＯＲＦ１部分基因序列。方法在ＴＴＶＯＲＦ１设计引物，建立巢式聚合酶链反应（Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ），检测４０例广东地区非甲－庚型肝炎患者血清中ＴＴＶＤＮＡ。对ＰＣＲ产物进行分子克隆，以荧光法（ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，３７３Ａ）测序。结果４０例非甲－庚型肝炎中２１例ＴＴＶＤＮＡ阳性（５２．５％）。对其中一株ＴＴＶ（ＳＺ１）ＯＲＦ１部分基因克隆、测序，并与Ｏｋａｍｏｔｏ等报道的２株（Ｎ２２、Ｇ１ａ）相比较，其核苷酸序列的同源性分别为９６．７％与９７．４％。结论本研究证实我国华南地区存在ＴＴＶ感染。ＴＴＶ的分子克隆与测序及ＰＣＲ诊断技术的建立对国内进一步开展ＴＴＶ感染的诊断与流行病学调查均具有重要意义     

血液透析病人和供血员感染TTV的研究

通过对尿毒症血液透析病人和供血员感染ＴＴＶ的研究 ,证实血液透析是传播ＴＴＶ的重要途径 ,为血液透析病人做好ＴＴＶ感染的预防工作提供科学依据。采用套式ＰＣＲ法检测 10 5例尿毒症血液透析病人和 4 8例供血员血清ＴＴＶＤＮＡ感染情况 ,并对透析频率与感染ＴＴＶ的关系进行分析。结果表明 ,10 5例尿毒症血液透析病人血清ＴＴＶＤＮＡ阳性 4 8例 ,感染率为 4 5.7% ,其中透析 3～ 2 5次感染率为 16.0 % ,2 6～ 4 5次感染率为 4 4 .2 % ,4 6次以上感染率为 67.6%。 4 8例供血员血清ＴＴＶＤＮＡ阳性 7例 ,感染率为 16.4 %。尿毒症血液透…