小鼠腹水型肝癌高、低转移细胞系的超微结构定量分析

本文对小鼠腹水型肝癌淋巴道高转移细胞系（Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｌ－１６Ａ３）和低转移细胞系（Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｌ－Ａ２）的超微结构进行了比较观察，并应用体视学方法进行了定量分析。结果表明Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｌ－１６Ａ３细胞剖面平均直径、核质比较均Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｌ－Ａ２大。Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｌ－１６Ａ３细胞的分裂相、核畸形、核仁边集较多见，胞质中粗面内质网、游离核糖体较丰富，细胞表面微绒毛较多。表明不同转移能力的Ｈｃａ瘤细胞在形态上也有差异。     

不同免疫力小鼠体内肝癌细胞转移特性的变化

ＨＣａ－Ｆ２５／１６Ａ３－Ｆ（Ｆ）和ＨＣａ－Ｆ２５／Ａ２－Ｐ（Ｐ）是从小鼠腹水型肝癌细胞中分离出来的，在有正常免疫功能小鼠体内只经淋巴道转移的同源而具有不同转移力的两株克隆细胞系。将Ｆ细胞和Ｐ细胞接种到三种不同免疫功能的小鼠皮下（皮下组）和尾静脉内，它们均出现了淋巴结转移。皮下组Ｆ细胞在６１５小鼠和ＳＣＩＤ小鼠体内转移率均很高，在ＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ／ｎｕ小鼠体内转移率最低。Ｐ细胞在三种小鼠体内随免     

利用流式细胞术研究榄香烯对肝癌腹水瘤细胞系Hca—F25／CL—1 …

采用小鼠肝癌腹水瘤细胞系Ｈｃａ－Ｆ２５／ＣＬ－１６Ａ３,利用流式细胞术研究了榄香烯对肿瘤细胞的作用,对Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｃｌ－１６Ａ３细胞周期的影响、ＤＮＡ含量的分析以诱导细胞凋亡。结果表明：榄香烯可以明显抑制Ｈｃａ－Ｆ２５／ＣＬ－１６Ａ３细胞的增殖,有效地杀伤肿瘤细胞;榄香烯对ＣＯ／ＧＩ期细胞无明显作用,主要作用于Ｓ期,阻止由Ｓ期进入Ｇ２／Ｍ期,从而抑制肿瘤生长;可以ＧＯ／ＧＩ期前出现一个凋亡特异     

小鼠肝癌（HCa）两株克隆细胞系转移表型的比较

来自同一祖先的两株不同亚克隆细胞系Ｈｃａ－１６Ａ３－Ｆ（Ｆ）和ＨＣａ－Ａ２－Ｐ（Ｐ），在两种不同小鼠体内经不同途径接种所得的转移率和转移部位显示有差别：Ｃ３／ｈｅ小鼠皮下组，Ｆ呈现高淋巴道转移（８０．０％），而Ｐ未出现转移，Ｃ３Ｈ／ｈｅ小鼠尾静脉组，Ｆ在卵巢（２８．６％）和淋巴结（２８．６％）有较低的转移率，Ｐ权出现一例（１４．３％）卵巢转移，然而，在裸鼠体内却出现了异常的变化，Ｆ呈现高血道（肺脏７１．４％）转移而不出现淋巴道和其他部位转移，但Ｐ却出现高淋巴道转移（８５．７％）兼有低血道（肺脏２８．６％，卵巢１４．３％，肾脏２８．６％）转移。体内实验结果提示：ＨＣａ细胞中含有转移、浸润能力不同的亚群；Ｆ细胞在体内具有较强的浸润力与转移力，且有淋巴道转移的倾向；Ｐ细胞的浸润力和转移力则低于Ｆ细胞，但若给其提供适当的到达器官的通路，完全能形成实验性转移灶。Ｃ３Ｈ／ｈｅ小鼠也是ＨＣａ细胞生长和转移的理想宿主。     

小鼠高低转移性肝癌微卫星不稳定性的研究

目的：了解小鼠高、低转移性肝癌细胞系Ｈｃａ／１６Ａ３－Ｆ（Ｆ）和Ｈｃａ／Ａ２－Ｐ（Ｐ）发生微卫星不稳定性（ＭＳＩ）情况,探讨它们与肝癌发生及转移之间的关系。方法：随机选择３号和１６号染色体上１５个多态微卫星标记,采用聚合酶链式反应－简单重复序列多态性（ＳＳＬＰ）和单链构象多态性（ＳＳＣＰ）方法对Ｆ和Ｐ细胞系进行分析。结果：Ｆ和Ｐ细胞系有信息的微卫星位点其等位基因与Ｃ３Ｈ相同,且存在多位点ＭＳＩ。结     

青春双歧杆菌菌液对肝癌腹水瘤细胞内某些钙稳态指标的影响

作者采用青春双歧杆菌菌液与小鼠肝癌腹水癌细胞系ＨＣａ／１６Ａ３－Ｆ相互作用，测定了作用前后肿瘤细胞线粒体钙及细胞核钙浓度的变化。发现二者钙水平对照组明显升高。即胞内贮钙增加，提示可能导致胞液钙水平下降。结果表明双歧杆菌菌液对小鼠肝癌腹水瘤细胞系ＨＣａ／１６Ａ３－Ｆ胞内钙稳态具有一定的影响，可为双歧杆菌的抗肿瘤作用提供一定的依据。     

凋亡相关基因FasL和Bcl-2在小鼠肝癌中的表达

ＨＣａ－Ｆ和ＨＣａ－Ｐ是同源且转移能力不同的肝癌细胞系,Ｐ为低转移（转移率〈３０％）,Ｆ为高转移（转移率〉８０％）。经Ｓｐ法免疫组化染色发现：ＦａｓＬ在Ｆ原发瘤中的表达显著强于Ｐ原发瘤（Ｐ〈０．０１）,Ｂｃｌ－２在两者均为强阳性,无显著性差别,提示ＦａｓＬ可能赋予Ｆ细胞杀伤免疫细胞的能力并与其较强的转移力相关。     

异搏停对小鼠肝癌腹水瘤细胞Hca—F／25／CL—16A3内某些钙稳…

Ｃａ＾２＋与肿瘤代谢有着极为密切的关系。本文报道了钙拮抗剂异搏停作用Ｈｃａ－Ｆ２５／ＣＬ－１６Ａ３细胞后胞内某些钙稳态指标的改变。结果表明，用药后细胞有分化现象且生长速度减慢，同时胞液Ｃａ＾２＋浓度和微粒体Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性明显降低，而线粒体和微粒体贮钙水平显著升高，细胞核钙和细胞总钙明显下降。     

逆转录病毒介导的人肝癌特异性HSV－tk／ACV的体外抗肝癌作用

目的：建立肝癌特异性前药转换基因治疗的方法。方法和结果：构建携带单纯疮疹病毒胸苷激酶基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体，经过ＰＡ３１７细胞包装及病毒滴度测定后，感染肝癌ＨｅｐＧ２和ＳＭＭＣ７７２１细胞，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交方法证明ＨＳＶ－ｔｋ基因在ＡＦＰ高分泌的ＨｅｐＧ２细胞中得到特异转录，以阿昔洛韦（ＡＣＶ）为前药攻击转基因的肝癌细胞显示对ＨｅｐＧ２有相对选择性杀伤作用。结论：该ＡＦＰｅ／ＨＳＶ－ｔｋ／前药转换疗法为肝癌特异性基因治疗提供了有价值的资料。     

癌基因H－ras、P53、C－erbB－2蛋白产物在克隆化肝癌裸鼠模型的表达

在建立不同克隆化肝癌裸鼠移植瘤株模型的基础上，用ＡＢＣ免疫酶标记法研究了癌基因Ｈ－ｒａｓ、Ｐ５３、Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白在不同克隆化肝癌裸鼠移植模型瘤组织中的表达，同时也检测了ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＨＢｓＡｇ等的表达。结果表明：具有较强侵袭力和转移力的ＣＳ克隆株肝癌裸鼠移植瘤组织对Ｈ－ｒａｓ，Ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因蛋白产物呈阳性反应，对ＡＦＰ、Ｐ５３呈弱阳性反应；而侵袭力弱的ＣＢ克隆株肝癌裸鼠移植瘤组织仅对Ｃ－ｅｒｂＢ－２呈弱阳性反应；其母系肝癌细胞株对上述癌基因蛋白产物呈弱阳性表达。提示Ｈ－ｒａｓ和突变型Ｐ５３基因的异常表达确实与肿瘤转移有一定相关性。     

肝癌腹水瘤细胞系Hca—F25／CL—16A3及A2对宿主红细胞及淋巴样…

本文利用腹水型肝癌不同转移力瘤株（Ｈｃａ－Ｆ２５／ｃＬ－１６Ａ３及Ａ２）攻击６１５小鼠，观察瘤细胞对宿主红细胞及淋巴样器官过氧化与抗氧化作用的影响。结果发现，荷瘤宿 主红细胞及淋巴样器官ＳＯＤ／ＬＰＯ比值变化特征为：荷瘤组显著低于正常 ，１６Ａ３组显著低于Ａ２组，但丙瘤株使以上指变化程度不同，这可能与瘤株的免疫原性不同有关。这些结果提示，肿瘤的发生发展与宿主淋巴样器官中过氧化反应的加强与抗氧化酶活     

肝癌腹水瘤细胞系H_（ca）－F_（25）／CL－16A_3及A_2对宿主红细胞

本文利用腹水型肝癌不同转移力瘤株（Ｈｃａ－Ｆ２５／ｃＬ－１６Ａ３及Ａ２）攻击６１５小鼠，观察瘤细胞对宿主红细胞及淋巴样器官过氧化与抗氧化作用的影响。结果发现，荷瘤宿主红细胞及淋巴样器官ＳＯＤ／ＬＰＯ比值变化特征为：荷瘤组显著低于正常组，１６Ａ３组显著低于Ａ２组，但两瘤株使以上指标变化程度不同，这可能与瘤株的免疫原性不同有关。这些结果提示，肿瘤的发生发展与宿主淋巴样器官中过氧化反应的加强与抗氧化酶活性的下降有密切关系，值得进一步探讨。     

凋亡相关基因bcl—2,bax,Fas及FasL在乙型肝炎病毒相关性？…

目的 探讨原发性肝癌中乙型肝炎病毒感染与凋亡基因ｂｃｌ－２、ｂａｘ、Ｆａｓ及ＦａｓＬ表达的关系。方法 采用免疫组化技术分析４０例原发肝细胞癌组织中乙肝病毒表现抗原（ＨＢｓＡｇ）阳性组和ＨＢｓＡｇ阴性组ｂｃｌ－２、ｂａｘ、Ｆａｓ及ＦａｓＬ的表达。结果 癌组织中ＨＢｓＡｇ阳性率为３０％（１２／４０）,癌旁组织中ＨＢｓＡｇ阳性率为６２．５％（２５／４０）,１２例ＨＢｓＡｇ阳性的癌组织中ｂｃｌ－２的ｂａｘ     

异搏停对小鼠肝癌腹水瘤细胞Hca－F_（25）／CL－16A_3内某些钙稳态指标的影响

Ｃａ２＋与肿瘤代谢有着极为密切的关系。本文报道了钙拮抗剂异搏停作用于Ｈｃａ－Ｆ２５／ＣＬ－１６Ａ３细胞后胞内某些钙稳态指标的改变。结果表明，用药后细胞有分化现象且生长速度减慢，同时胞液Ｃａ２＋浓度和微粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性明显降低，而线粒体和微粒体贮钙水平显著升高，细胞核钙和细胞总钙明显下降。结果提示，钙拮抗剂可使肿瘤细胞内的钙分布发生变化，从而改变了与肿瘤细胞的分化和增殖密切相关的钙恒稳状态。     

代谢性酸中毒犬脑脊液［HCO－_3］与Pco_2的关系

作者旨在探讨代谢性酸中毒时脑脊液（ＣＳＦ）［ＨＣＯ－３］与ＰＣＯ２的相互关系。两组代谢性酸中毒模型均由静脉内输入０．２ｍｏｌ／ＬＨＣＩ产生，［ＨＣＯ－３］ａ１ｈ内下降到（１２２）ｍｍｏｌ／Ｌ。实验６ｈ时ＣＳＦ［ＨＣＯ－３］：１组（正常碳酸血性代酸）下降了１．６ｍｍｏｌ／Ｌ；组（低碳酸血性代酸）下降了７．０ｍｍｏｌ／Ｌ．ＣＳＦ［ＨＣＯ－３］与ＣＳＦＰｃｏ２，显著正相关（ｒ＝０．８３４，Ｐ＜０．０ｌ）．结果说明代谢性酸中毒时ＣＳＦ［ＨＣＯ－３］并不受［ＨＣＯ－３］ａ的明显影响，主要取决于ＣＳＦＰｃｏ２的变化，其调节机制与脉络丛上皮细胞内ＣＯ２的水化作用和ＣＡ活性有关。     

钙调素拮抗对贮脂细胞胶原合成的影响

为探讨ＣａＭ在ＦＳＣ胶原合成和基因表达过程中的作用，并导找防治肝纤维化的新方法，本文应用＾Ｈ３－Ｐｒｏｌｉｎｅ掺入法观察了ＣＡ（Ｗ－７和ＡＣＮＳ２５μｍｏｌ／Ｌ）对ＦＳＣ细胞胶原代谢的影响；进一步应用斑点杂交结合图象分析的方法，对ＣＡ在胶原基因表达中的作用进行了半定量分析。实验发现，ＣＡ可以抑制ＦＳＣ胶原的合成和胶原基因的表达（方差分析，Ｐ〈０．０５）。结果表明ＣａＭ参与ＦＳＣ胶原代谢的调节，应用     

双特异性单克隆抗体介导的单核－巨噬细胞抗肝癌作用

目的研究双特异性单克隆抗体介导的单核－巨噬细胞抗肝癌作用。方法采用化学交联法，用异型化学交联剂Ｎ－琥珀酰亚氨基－３－（２－二硫吡啶）丙酸酯（ＳＰＤＰ），将具有高亲和性的抗肝癌单抗ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ′）２与抗单核－巨噬细胞的单抗ＭＡｂ７Ｆ（ａｂ′）２联结成双特性单抗ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ′）２－ＭＡｂ７Ｆ（ａｂ′）２，经ＦＰＬＣＳｅｐｈａｃｒｙ１Ｓ－２００纯化。用间接免疫荧光法鉴定其特性。结果ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ′）２及ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ′）２－ＭＡｂ７Ｆ（ａｂ′）２对肝癌细胞间接免疫荧光染色阳性，ＭＡｂ７Ｆ（ａｂ′）２及ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ′）２－ＭＡｂ７Ｆ（ａｂ′）２对单个核细胞染色为阳性。而这些抗体对肺腺癌细胞均呈阴性；单纯ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ′）２无导向单核－巨噬细胞杀伤肝癌细胞作用，ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ′）２－ＭＡｂ７Ｆ（ａｂ′）２及ＭＡｂ７Ｆ（ａｂ′）２均可介导单核－巨噬细胞对肝癌细胞起杀伤作用，并且前者强于后者。结论ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ′）２－ＭＡｂ７Ｆ（ａｂ′）是一种具有双特异性的单克隆抗体，可以提高人单核－巨噬细胞杀伤肝癌细胞的作用。     

携带HuIFN－β cDNA的重组逆转录病毒载体的构建及在人肝癌细胞中的特异表达

目的：研究逆转录病毒介导干扰素基因转移及在肝癌细胞中特异表达作用。方法：将人β干扰素（ＨｕＩＦＮ－β）ｃＤＮＡ克隆到逆转录病毒载体ＰＬ位点，分别构建了转录受ＳＶ４０启动子驱动的载体ＭＮＳＩＦＮＢ和转录受人甲胎蛋白增强子（ＡＦＰｅ）调控的载体ＭＮＡＩＦＮＢ。用脂质体转染法将载体分别转导ＰＡ３１７包装细胞，质粒转染率为每１０５ＰＡ３１７细胞（４～２５）×１０３ＣＦＵ／μｇ，病毒感染率（４．５～５００）×１０４ＣＦＵ／ｍｌ。重组病毒在４μｇ／ｍｌｐｏｌｙｂｒｅｎｅ存在条件下感染人肝癌、肾癌及黑色素瘤细胞。结果：ＮｅｏＲ克隆ＲＮＡ斑点杂交及ＩＦＮ活性分析证明，人ＡＦＰｅ可促进异源启动子启动ＨｕＩＦＮ－β基因在合成ＡＦＰ的人肝癌细胞中高效特异转录和表达。结论：ＡＦＰ＂持家基因＂顺式调控序列在合成ＡＦＰ的肝癌细胞中特异驱动ＩＦＮ－β基因表达，该研究为肝癌特异性免疫基因治疗提供了资料。     

胎儿LAK／IL—2治疗长期HBV无症状携带者的临床研究

应用儿脾ＬＡＫ细胞，配合ｒＩＬ－２和ｒＩＦＮ－γ治疗８例长期ＨＢＶ无症状携带者，结果表明：有７５％（６／８）的患者ＨＢｅＡｇ转阴，其中有２５％（２／８）的患者ＨＢｅＡｇ和ＨＢｓＡｇ均转阴，治疗后ＣＤ＾＋８Ｔ细胞稍有增高，Ｔａｃ抗原比治疗前和对照组均显著增高，血ｓＩＬ－２Ｒ，ＩＬ－８和ＮＴＦ－α治疗后均显著增高。     

钙指示剂Fura－2／AM对血小板功能及细胞内游离钙测定结果的影响

本实验结果表明，以Ｆｕｒａ－２／ＡＭ负载家兔洗脱血小板，当Ｆｕｒａ－２／ＡＭ的浓度低于２μｍｏｌ／Ｌ时，３μｍｏｌ／Ｌ和１０μｍｏｌ／Ｌ花生四稀酸（ＡＡ）诱导的血小板聚集（透光度增加：７２．５±７．８４％）及释放反应（ＡＴＰ释放：１．１２±０．２１μｍｏｌ／４×１０５血小板）不受影响，但随Ｆｕｒａ－２／ＡＭ浓度增加，ＡＡ的聚集和释放反应明显减弱（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。Ｆｕｒａ－２／ＡＭ浓度对单一血小板内钙（［Ｃａ２＋］ｉ）的静息水平无影响，但Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为２μｍｏｌ／Ｌ时，ＡＡ诱导的［Ｃａ２＋］ｉ动员最明显。另外，标本中血小板的数量也明显影响［Ｃａ２＋］ｉ的测定结果（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。提示，Ｆｕｒａ－２／ＡＭ浓度过高，很可能导致过多的钙离子被螯合，降低了血小板的功能，同时，细胞内游离钙与Ｆｕｒａ－２／ＡＭ的结合过程存在着饱和性。