胃癌患者血清和组织miR-30a表达与胃泌素及患者临床病理特征的相关性研究

目的探讨胃癌患者血清和组织中miR-30a表达情况与血清胃泌素-17(G-17)及患者临床病理特征的关系。方法选取2018年3月至2019年12月在重庆医科大学附属第一医院大足医院确诊的68例初诊胃腺癌患者作为研究对象,采集血样和胃癌组织、癌旁正常组织标本;另选取同期30例健康者血清标本作为对照组。提取血清和组织总RNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-30a相对表达量,另外检测血清G-17水平。采用双荧光素酶报告基因分析miR-30a和胃泌素基因(GAST)的靶向调控关系。结果 GEPIA数据库和OncomiR数据库分析显示,胃癌组织GAST表达量较癌旁正常组织升高,差异有统计学意义(P0.05),胃癌组织中miR-30a表达量低于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P0.05),且GAST与miR-30a表达量呈明显负相关(r=-0.520,P0.05)。双荧光素酶报告基因分析显示,miR-30a mimics和GAST-3′UTR-WT共转染,荧光素酶相对表达量降低(P0.05)。与健康者血样或相配对的癌旁正常组织比较,胃癌患者血清和胃癌组织中miR-30a相对表达量[血清:(0.688±0.279)vs.(1.000±0.200),t=5.524,P0.05;胃癌组织:(0.348±0.244)vs.(1.000±0.175),t=13.211,P0.05]明显降低,且与肿瘤直径、TNM分期、血清癌胚抗原、糖类抗原(CA)19-9、CA 125水平及幽门螺杆菌感染均有关(P0.05)。Pearson相关分析显示,胃癌患者血清miR-30a相对表达量与血清G-17水平呈负相关(r=-0.729,P0.05)。结论胃癌患者血清和胃癌组织中miR-30a相对表达量普遍降低,与血清G-17过表达有关,而且GAST基因是miR-30a潜在的下游靶基因,miR-30a/胃泌素有望成为胃癌治疗的新靶点。     

miR-27a及其靶标PPAR-γ与冠心病合并2型糖尿病的相关性分析

目的研究血清miR-27a及其靶标过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)与冠心病合并2型糖尿病(T2DM)的相关性及临床意义。方法选取2018年12月至2019年12月于万宁市人民医院就诊的38例单纯T2DM患者作为T2DM组,36例单纯冠心病(CAD)患者作为CAD组,37例CAD合并T2DM患者作为CAD-T2DM组,另外选取36例健康人群作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测血液miR-27a的表达情况,采用ELISA检测血清PPAR-γ水平,采用双荧光素酶报告基因分析miR-27a及其与PPAR-γ的靶向关系。采用多因素Logistic回归分析并绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清miR-27a用于辅助诊断T2DM发生CAD的临床价值。结果与对照组、T2DM组、CAD组比较,CAD-T2DM组患者血清miR-27a表达水平降低,血清PPAR-γ水平升高,差异均有统计学意义(P0.05),二者呈负相关(r=-0.808,P0.05)。经荧光素酶报告基因确认,PPAR-γmRNA是miR-27a的下游靶基因。经多元线性回归模型分析,血清miR-27a低表达可增加T2DM发生CAD的风险(OR=0.738,P0.05)。ROC曲线分析显示,血清miR-27a辅助诊断T2DM发生CAD的ROC曲线下面积为0.850(95%CI:0.766～0.934,P0.05),cut off值为0.555时,灵敏度和特异度分别为84.2%和70.3%。结论 CAD合并T2DM患者血清miR-27a表达水平降低,与血清PPAR-γ水平升高有关,检测血清miR-27a表达水平对于T2DM发生CAD有一定的辅助诊断价值,而且miR-27a/PPAR-γ也有望成为未来预防或治疗CAD合并T2DM的新靶点。     

microRNA-22在特发性肺动脉高压发病机制中的作用

目的 研究血浆microRNA-22 (miR-22)在特发性肺动脉高压(IPAH)诊断中的价值及发病机制中的作用.方法 应用real-time PCR方法检测IPAH患者及匹配健康人血浆miR-22表达水平,结合生物信息学方法分析miR-22靶基因MYCBP,并采用eGFP报告基因对靶基因进行实验验证.结果 IPAH患者血浆miR-22表达水平明显降低(P＜0.01),ROC曲线下面积(AUC)为0.744;生物信息学分析及eGFP报告基因验证,MYCBP是miR-22的靶基因之一.结论 血浆miR-22在IPAH患者表达明显下调,可作为IPAH诊断分子标志物,miR-22通过靶基因MYCBP激活c-Myc信号通路,促进细胞增殖相关基因转录,是导致IPAH患者肺动脉中膜平滑肌增殖及肺血管重构的可能机制之一.     

miR-181b-3p在胃癌患者血清中的表达及其靶基因预测

目的 研究血清miR-181 b-3 p检测在胃癌诊断中的价值.方法 采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测35例胃癌患者(研究组)和45例健康志愿者(对照组)血清中miR-181b-3p的相对表达水平,并比较不同年龄、性别、临床及病理学特征胃癌患者血清中的miR-181b-3p相对表达水平.绘制受试者工作特征(ROC)曲线计算曲线下面积,评价miR-181b-3p对胃癌的诊断效能.结合miRDB、miRWalk、TargetScan和DIANA TOOLS数据库预测miR-181b-3p的靶基因,并绘制蛋白互作网络图.结果 与对照组比较,研究组血清中miR-181b-3p的相对表达水平明显升高,差异有统计学意义(t=7.943,P<0.05).未/低分化程度、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期胃癌患者血清中miR-181 b-3 p相对表达水平明显高于中/高分化程度、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期胃癌患者,差异有统计学意义(t=3.509、P<0.001,t=3.080、P=0.004,t=2.641、P=0.013).血清miR-181b-3p检测诊断胃癌的ROC曲线下面积为0.886(95％CI:0.815～0.956),灵敏度为68.8％,特异度为91.1％.miR-181b-3p预测靶基因所编码蛋白质间相互作用关系较复杂.结论 血清miR-181b-3p在胃癌患者中表达上调,且能够有效区分胃癌患者和健康人群,有望作为诊断胃癌的生物标志物.     

血清miR-10b在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义

目的探讨乳腺浸润性导管癌患者血清miR-10b表达情况及其与临床病理特征的关系。方法乳腺浸润性导管癌患者29例为乳腺癌组,成年女性体检健康者48例为对照组;采用实时荧光定量PCR法检测2组血清miR-10b相对表达量;绘制ROC曲线,评估血清miR-10b水平对乳腺浸润性导管癌的诊断价值,分析其与临床病理特征的关系。结果乳腺癌组血清miR-10b相对表达量(2.140±1.769)高于对照组(1.408±1.328)(P0.05);当血清miR-10b最佳截断值为0.334时,诊断乳腺浸润性导管癌的AUC为0.646(95%CI:0.523～0.769),灵敏度为89.70%,特异度为41.70%;乳腺癌组术前有淋巴结转移患者血清miR-10b相对表达量(3.449±1.855)高于无淋巴结转移者(1.077±0.630)(P0.05),不同年龄、月经状态、肿瘤直径及雌激素受体、孕激素受体、人表皮生长因子受体-2阳性或阴性患者血清miR-10b相对表达量比较差异无统计学意义(P0.05)。结论血清miR-10b对乳腺浸润性导管癌有一定诊断价值,其升高可能与患者不良预后有关。     

MSCT增强扫描联合血清CGA水平检测对鼻咽癌患者诊断准确率的影响

目的:探究多层螺旋CT(MSCT)增强扫描联合血清嗜铬粒蛋白A(CGA)水平检测对鼻咽癌患者诊断准确率的影响。方法:选取我院2015年4月～2017年11月鼻咽癌患者103例设为研究组,另选同期鼻咽部良性病变患者106例设为对照组,均行MSCT增强扫描、血清CGA水平检测,对比2组血清CGA水平,比较MSCT增强扫描、血清CGA水平单一及联合检测鼻咽癌患者的诊断效能。结果:研究组血清CGA水平高于对照组,差异显著(P0.05);MSCT增强扫描、血清CGA水平联合检测诊断特异度对比差异不显著(P0.05),联合检测诊断灵敏度95.15%、准确率84.21%高于单一检测,差异显著(P0.05)。结论:鼻咽癌患者血清CGA表达水平呈异常高表达,MSCT增强扫描、血清CGA水平联合检测,可显著提高鼻咽癌诊断灵敏度及准确率,有助于鼻咽癌早期诊断。     

miR-3648对胃癌细胞增殖和转移的影响及其临床意义

目的探讨miR-3648在胃癌诊断中的临床意义以及其对胃癌细胞增殖和转移的影响。方法采用OncomiR在线工具分析miR-3648在胃癌中的表达情况。收集2018年6月至2020年3月经手术切除的100例胃癌患者的胃癌组织和相应的癌旁正常组织标本。采用实时荧光定量反转录PCR(qRT-PCR)检测胃癌组织和癌旁正常组织以及胃癌细胞中miR-3648的相对表达水平,分析其相对表达水平与胃癌患者临床病理特征的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-3648的相对表达水平在胃癌诊断中的作用。将miR-3648抑制物(inhibitor)瞬时转染MGC-803和BGC-823细胞。CCK-8法和Transwell实验分别检测转染后细胞增殖和迁移、侵袭情况。结果 OncomiR在线工具分析显示,胃癌患者miR-3648表达水平高于健康人群(P0.05)。qRT-PCR对临床标本的检测显示,胃癌组织miR-3648相对表达水平较癌旁正常组织高(P0.05)。miR-3648表达水平与胃癌患者年龄、性别以及分化程度无关(P0.05),但和肿瘤最大径、淋巴结转移、TNM分期、癌胚抗原(CEA)水平、糖类抗原(CA)19-9水平以及CA724水平有关(P0.05)。胃组织miR-3648相对表达水平用于诊断胃癌的ROC曲线下面积为0.897,最佳截断值为3.02。转染miR-3648 inhibitor能有效干扰MGC-803和BGC-823细胞中内源miR-3648的表达(P0.05)。转染miR-3648 inhibitor能显著抑制MGC-803和BGC-823细胞增殖和迁移、侵袭(P0.05)。结论 miR-3648表达水平检测在胃癌诊断中有一定的价值,干扰miR-3648表达能抑制胃癌细胞增殖和转移。     

miR-224靶向抑制ECRG4表达对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的研究微小RNA-224(miR-224)及其靶基因食管癌相关基因4(ECRG4)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达和对A549细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法利用原位杂交、荧光定量PCR、免疫组织化学和Western blot检测NSCLC临床标本和细胞系中miR-224和ECRG4的表达水平;通过microRNA.org网站预测miR-224与ECRG4的靶向关系,并行双荧光素酶报告基因实验和Western blot进行验证;分析抑制miR-224及联合抑制ECRG4对A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果 NSCLC癌组织中miR-224表达水平明显高于癌旁组织,ECRG4mRNA和ECRG4蛋白表达水平均明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05)。与健康人肺支气管上皮细胞系HBE相比,NSCLC细胞系L78、A549、H460中miR-224表达水平明显升高,ECRG4mRNA和ECRG4蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。经microRNA.org网站预测、双荧光素酶报告基因实验和Western blot证实,ECRG4是miR-224的靶基因。抑制miR-224可抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭(P0.05),而联合抑制ECRG4则可逆转抑制miR-224对A549细胞的抑制作用(P0.05)。结论 miR-224可通过靶向ECRG4促进NSCLC细胞A549增殖、迁移和侵袭,提示miR-224和ECRG4可能成为诊断和治疗NSCLC的靶点。     

MiR-155及其靶基因MMP16在反复植入失败患者子宫内膜中的表达

目的观察miR-155及其靶基因在反复植入失败患者子宫内膜中的表达。方法选取2018年5月至2019年12月在秦皇岛市妇幼保健院生殖医学科进行体外受精与胚胎移植(IVF-ET)或者卵细胞质内单精子注射(ICSI)治疗的不孕患者,其中由于男方因素或者输卵管因素于我院首次进行辅助助孕后妊娠并分娩的患者15例作为对照组;至少进行3次移植(新鲜或者解冻的胚胎,每次至少有一枚优质胚胎,移植优质胚胎数≥4)均未妊娠的患者15例作为反复植入失败(RIF)组;采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-155及基质金属蛋白酶16基因(MMP16)mRNA在子宫内膜的表达;利用生物信息学技术预测miR-155的下游靶基因;利用双荧光素酶实验验证miR-155的靶基因;采用蛋白印迹法检测RIF患者内膜MMP16的表达;利用相关性分析判断miR-155和MMP16的相关性。结果 RIF组miR-155水平高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);通过生物信息学、双荧光素酶报告基因检测技术以及转染实验发现,miR-155通过结合于MMP16 3′UTR而抑制MMP16 mRNA和蛋白质的表达。qRT-PCR实验结果表明,RIF组MMP16 mRNA和蛋白质的表达水平下调,并且MMP16 mRNA表达水平与miR-155的表达水平呈负相关(r=-0.967,P0.05)。结论 MiR-155在RIF患者子宫内膜中的表达上调,可能通过调控MMP16基因来影响子宫内膜的容受性。     

鼻咽癌患者血清miRNA-331-3p的表达及对鼻咽癌筛查的价值分析

目的探讨鼻咽癌患者血清miRNA-331-3p表达水平、临床意义及对鼻咽癌筛查的价值。方法收集2017年10月至2019年2月湖南省人民医院耳鼻咽喉头颈外科诊断为鼻咽癌患者50例及健康体检者50例血清标本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应测定血清标本miRNA-331-3p表达水平。统计分析鼻咽癌患者血清miRNA-331-3p相对表达水平与鼻咽癌临床及病理参数间的关联,采用受试者工作特征曲线分析miRNA-331-3p对鼻咽癌的诊断效率。结果①鼻咽癌组血清miRNA-331-3p相对表达量较正常组低(P0.01)。②鼻咽癌组血清miR-331-3p相对表达量在不同TNM分期及远处转移情况中差异有统计学意义(P0.01);在性别、年龄、肿瘤范围、淋巴结转移上差异均未见统计学意义(P均0.05)。③血清中miR-331-3p相对表达量诊断鼻咽癌的最佳临界值为1.81,其诊断的灵敏度为74.2%,特异度为93.1%。结论鼻咽癌患者血清miRNA-331-3p表达水平出现下调,血清miRNA-331-3p与肿瘤TNM分期及远处转移有关,有较好的鼻咽癌检测效能,有助于肿瘤病情进展判断,有望成为鼻咽癌筛查的新分子标志物。     

miR-9调控GOLPH3抑制食管癌EC109细胞的增殖和迁移

目的探讨微小RNA(microRNA,miRNA,miR)-9在食管癌中的表达水平及其对食管癌细胞生物学功能的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测食管癌患者癌组织及其癌旁组织中miR-9及高尔基体磷蛋白3(GOLPH3)基因的表达水平;miR-9模拟物转染食管癌细胞系EC109,qRT-PCR检测miR-9的表达水平;MTT试验、平板克隆形成试验、Transwell迁移试验和流式细胞术检测过表达miR-9对EC109细胞生物学功能的影响。构建野生型和突变型GOLPH3双荧光素酶报告基因载体,并检测荧光素酶活性。qRT-PCR及western blot检测过表达miR-9后,GOLPH3 mRNA和蛋白质的表达水平。结果与癌旁组织相比,食管癌组织中miR-9的表达水平明显降低(P0.01),而GOLPH3基因表达水平明显升高(P0.01)。与阴性对照组相比,miR-9模拟物转染后,食管癌EC109细胞中miR-9的表达水平明显升高(P0.01),且细胞增殖和迁移能力明显降低(P0.01),其细胞周期阻滞于G_2/M期(P0.01)。双荧光素酶报告实验、qRT-PCR和western blot证实miR-9能与GOLPH3特异性结合(P0.01),并介导GOLPH3 mRNA的降解(P0.01),且GOLPH3蛋白的表达水平降低(P0.05)。结论 miR-9在食管癌中呈低表达,并可通过调控GOLPH3参与食管癌的发生、发展。     

鼻咽癌患者血清miR-144-3p及miR-151-3p的表达水平及临床价值

目的　探讨鼻咽癌患者血清miR-144-3p及miR-151-3p的表达水平及临床价值。方法　选取2016年1月～2020年7月涿州市医院收治的106例鼻咽癌患者和50例健康对照组作为研究对象，采用实时定量PCR法检测miR-144-3p及miR-151-3p表达水平。应用受试者工作特征（ROC）曲线分析miR-144-3p及miR-151-3p诊断鼻咽癌的价值。Pearson相关分析鼻咽癌患者血清miR-144-3p与miR-151-3p表达水平的相关性。结果　鼻咽癌组血清miR-144-3p（2.36±1.05 vs 0.82±0.27）及miR-151-3p（3.58±1.73 vs 0.97±0.36）表达水平均明显高于对照组，差异有统计学意义（均P <0.001）。鼻咽癌患者血清miR-144-3p及miR-151-3p表达水平升高与临床分期高、分化程度低、淋巴结转移及远处转移有关（t=5.824~19.307，均P <0.01）。ROC曲线显示， miR-144-3p为1.61及miR-151-3p为2.25是诊断鼻咽癌的最佳截断值，二者联合诊断鼻咽癌的曲线下面积（0.937，95%CI:0.875~0.99）最大，其敏感度和特异度为95.3%和87.0%。鼻咽癌患者血清miR-144-3p表达水平与miR-151-3p呈正相关（r=0.872，P<0.001）。结论　鼻咽癌患者血清miR-144-3p及miR-151-3表达水平明显升高，二者联合诊断鼻咽癌的价值较高。     

miR-124与HLA-G在宫颈癌中的表达及变化研究

目的 探讨miR-124与人类白细胞抗原G(HLA-G)在宫颈癌中的表达及变化.方法 选取2018年1月至2019年1月该院住院治疗的65例宫颈癌患者作为研究组,另选取同期在该院进行子宫肌瘤切除的40例患者作为对照组,通过实时荧光定量PCR检测宫颈组织中miR-124相对表达水平,采用化学发光免疫检测血清HLA-G水平,观察miR-124与HLA-G在宫颈癌中的表达及变化.结果 研究组宫颈组织中miR-124相对表达水平低于对照组,研究组血清HLA-G水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组宫颈组织中miR-124相对表达水平在国际妇产科联盟(FIGO)分期、淋巴结转移、腺体浸润及脉管浸润间比较,差异有统计学意义(P<0.05);而血清HLA-G水平在FIGO分期、淋巴结转移、脉管浸润间比较,差异有统计学意义(P<0.05).miR-124与HLA-G联合检测的灵敏度为87.18％,特异度为83.52％.结论 miR-124与HLA-G水平变化与宫颈癌FIGO分期、淋巴结转移及脉管浸润有关,二者联合检测有望成为宫颈癌诊断的新靶点.     

乳腺癌患者血清miR-765,miR-200b水平检测及与临床病理学相关研究

目的 探讨乳腺癌患者血清miR-765与miR-200b的表达及其临床应用价值。方法 选取乳腺癌患者58例,乳腺良性疾病患者28例及体检健康者30例,应用实时荧光定量PCR技术检测血清miR-765和miR-200b的表达水平,评价指标的诊断价值,并分析与乳腺癌临床病理特征的相关性。结果 乳腺癌患者血清miR-765和miR-200b相对表达量均显著性低于乳腺良性疾病患者(t=3.955,2.657,P<0.05)和健康对照者(t=4.465,3.518,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-765在乳腺癌诊断中的AUC为0.843(95%CI:0.767～0.919),miR-200b在乳腺癌诊断中的AUC为0.897(95%CI:0837～0.957)。miR-765联合miR-200b在乳腺癌诊断中的AUC为0.952(95%CI:0.941～0.990),两者联合优于单一检测miR-765或miR-200b。在乳腺癌患者中血清miR-765相对表达量与临床分期相关(t=3.222,P<0.05); miR-200b相对表达量与临床分期、淋巴结转移相关(t=1.855,3.987,P均<0.05)。结论 乳腺癌患者血清miR-765与miR-200b表达水平显著降低,并与乳腺癌临床病理特征明显相关,血清miR-765与miR-200b联合检测具有较高的临床应用价值。     

miR-135b-5p调控TIMP3的表达对鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响

目的探讨miR-135b-5p对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、转移的影响及其可能的机制。方法使用Lipofectamine-2000将miR-135b-5p siRNA转染至SUNE-1细胞,并将NC siRNA转染至SUNE-1细胞中作为对照组。实时定量PCR检测NP69、CNE-1、SUNE-1、C666-1细胞系及鼻咽癌组织中miR-135b-5p及TIMP3的表达水平。双荧光素酶报告基因检测miR-135b-5p及TIMP3的调控关系,免疫蛋白印迹实验检测TIMP3蛋白的表达含量,CCK-8实验检验SUNE-1细胞的增殖能力,Transwell实验检验SUNE-1细胞的迁移及侵袭能力。miR-135b-5p的表达与鼻咽癌(NPC)患者的临床病理学参数之间的关联。结果 miR-135b-5p在CNE-1、SUNE-1、C666-1细胞系及鼻咽癌组织中表达含量均上升,并且在SUNE-1细胞系中其的表达水平最低;双荧光素酶报告基因结果显示:抑制miR-135b-5p表达可显著增高SUNE-1细胞中TIMP3的荧光素酶活性;抑制miR-135b-5p表达后,TIMP3蛋白的表达相应上调,同时削弱了SUNE-1细胞增殖、迁移、侵袭能力。同时收集整理NPC患者相关临床资料进行对比分析,结果发现miR-135b-5p的表达与NPC的病理分期相关以及淋巴结转移情况呈正相关。结论抑制miR-135b-5p的表达可抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并靶向上调TIMP3的表达。     

miR-625靶向HMGA1对食管癌细胞生物学行为的影响及机制

目的分析miR-625靶向高迁移率族蛋白A1(HMGA1)对食管癌细胞生物学行为的影响及机制。方法收集2018年3月—2019年3月经手术切除的食管癌组织及癌旁组织(距癌组织≥5 cm)标本,体外培养食管癌细胞系(KYSE150、KYSE30、ECA109、EC9706)和正常食管上皮细胞HET-1A,采用RT-qPCR检测不同组织和细胞中miR-625的表达。将miR-625 mimic、miR-625 inhibitor转染ECA109细胞,采用CCK-8实验、流式细胞仪、Transwell小室实验和划痕实验检测miR-625对ECA109细胞增殖、周期、侵袭和迁移的影响,Western blot检测增殖、侵袭和迁移相关蛋白的表达。经生物信息学软件在线预测miR-625靶基因,通过RT-qPCR、Western blot及双荧光素酶报告基因检测验证靶向关系。同时干预miR-625和HMGA1,检测ECA109细胞增殖、周期、侵袭和迁移。结果 miR-625相对表达量,食管癌组织低于癌旁组织,食管癌细胞系KYSE150、KYSE30、ECA109、EC9706低于正常食管上皮细胞HET-1A(P0.05)。与mimic NC组比较,miR-625 mimic组miR-625相对表达量、处于G1期细胞比例及p21、E-cadherin表达升高,细胞增殖、侵袭、迁移能力及处于S期细胞比例、Cyclin D1、N-cadherin、Vimentin表达降低(P0.05);miR-625 inhibitor组可逆转上述作用(P0.05)。miR-625与HMGA1 3'端非编码区存在结合位点。与mimic NC组比较,miR-625 mimic组细胞中相对荧光素酶活性和HMGA1表达降低(P0.05)。与pcDNA3.1-HMGA1组比较,miR-625+HMGA1组HMGA1表达及细胞增殖、侵袭、迁移能力降低,处于G1期细胞比例升高(P0.05)。结论 miR-625在食管癌中低表达,miR-625过表达可靶向HMGA1抑制食管癌细胞的增殖、侵袭与迁移。     

血清miR-33a、miR-29c、miR-126联合检测对脑动脉粥样硬化的诊断价值

目的探讨血清miR-33a、miR-29c、miR-126联合检测对脑动脉粥样硬化的诊断价值。方法选择2018年1月至2020年1月该院收治的脑动脉粥样硬化患者120例为研究组,同期体检健康者120例为对照组。根据不同脑动脉硬化严重程度将患者分为单动脉组(23例)、双动脉组(53例)、多动脉组(44例)。采用实时荧光定量PCR检测研究组与对照组及不同脑动脉粥样硬化严重程度患者血清miR-33a、miR-29c、miR-126的相对表达水平。采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清miR-33a、miR-29c、miR-126对脑动脉粥样硬化的诊断价值。结果研究组血清miR-33a、miR-29c、miR-126的相对表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-33a、miR-29c、miR-126在不同脑动脉粥样硬化严重程度患者中的相对表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-33a、miR-29c、miR-126单项检测对脑动脉粥样硬化诊断的灵敏度分别为95.00%、93.00%、92.00%,特异度分别为95.00%、92.00%、91.00%。血清miR-33a、miR-29c、miR-126联合检测对脑动脉粥样硬化诊断的灵敏度为96.67%,特异度为90.00%,准确度为93.33%。结论血清miR-33a、miR-29c、miR-126可作为联合诊断脑动脉粥样硬化的潜在标志物。     

miR-218负调控SFMBT1抑制肝癌细胞增殖

目的探讨miR-218是否通过调控含有4个mbt区域的scm相关基因(SFMBT1)影响肝癌细胞增殖能力。方法 RT-PCR检测人肝癌细胞Hu H-7、Hep G2、SNU-449和人正常肝细胞HH中miR-218的水平。靶基因预测软件预测miR-218的靶基因并用荧光素酶报告基因进行鉴定,RT-PCR和Western blot检测miR-218对靶基因的调控作用。肝癌细胞转染miR-218模拟物(miR-218 mimics组)、SFMBT1小干扰RNA(SFMBT1 siRNA组),同时设置对照组(只加入转染试剂)。噻唑蓝(MTT)检测各组细胞存活率。结果肝癌细胞Hu H-7、Hep G2、SNU-449中miR-218表达水平均明显低于正常肝细胞HH(P0.01)。Hep G2细胞中miR-218表达水平最低,后续选用Hep G2细胞深入研究。miR-218的靶基因是SFMBT1,并且miR-218负调控SFMBT1靶基因。miR-218 mimics组和SFMBT1 siRNA组细胞存活率均明显低于对照组(P0.01)。miR-218 mimics和SFMBT1 siRNA共转染后的细胞存活率比miR-218mimics组和SFMBT1 siRNA组均明显降低(P0.01)。结论 miR-218能够负调控靶基因SFMBT1抑制人肝癌细胞的增殖。     

非小细胞肺癌患者呼出气冷凝液与血清及组织中miRNA486检测的比较研究和临床意义

摘要：目的?分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者呼出气冷凝液(EBC)中microRNA486(miR-486)的表达水平及其临床应用价值。方法?选取2016年6月至2017年12月在南通市第一人民医院呼吸科和胸外科接受治疗并经病理证实为NSCLC的50例患者为研究组，50例健康体检者为对照组。用实时定量PCR技术检测EBC和血清中miR-486的表达水平，同时检测NSCLC患者组织中miR-486的表达水平。用化学发光法检测血清中CEA、细胞角蛋白19片段(CYFRA211)的表达水平。分析miR-486在NSCLC不同病理分期和病理类型的表达水平差异；并用ROC曲线分析EBC miR-486单独及其联合血清CEA、CYFRA211对NSCLC的筛查效能。结果?NSCLC患者EBC和血清中miR-486的相对表达量低于对照组(P<0.05)。非小细胞肺癌晚期(Ⅲ～Ⅳ期)患者EBC和血清中miR-486的表达量低于早期(Ⅰ～Ⅱ期)患者(P<0.05)。ROC分析显示，EBC和血清中miR-486诊断NSCLC的敏感性分别为92%、74%；特异性分别为52%、72%，miR-486与血清CEA、CYFRA211联合筛查非小细胞肺癌敏感性为72%，特异性为78%。结论?miR-486在NSCLC患者癌组织、血清和EBC中均低表达，EBC中miR-486与血清CEA、CYFRA211联合检测对NSCLC的早期诊断有潜在的价值。     

非小细胞肺癌患者癌组织和血浆中microRNA-21的表达及意义

目的探讨microRNA-21(miRNA-21,miR-21)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者肺癌组织和血浆中的表达及临床意义。方法用荧光定量PCR检测100例NSCLC患者肺癌组织及癌旁组织miR-21的相对表达量,并检测100例NSCLC患者及100例健康人血浆miR-21的相对表达量,用t检验比较其表达水平的差异,用卡方检验分析肺癌组织miR-21表达量与各临床病理资料之间的关系,ROC曲线评价miR-21对NSCLC的诊断价值。结果 miR-21在肺癌组织的表达水平高于癌旁组织(t=10.154,P0.05),且在NSCLC患者血浆中的表达水平高于健康人(t=13.444,P0.05);肺癌组织中miR-21高表达患者肺癌复发转移率明显高于低表达患者(χ2=11.335,P0.05);生存分析显示,肺癌组织或血浆中miR-21高表达患者较低表达者生存期明显缩短(χ2为6.685和5.692,P0.05);ROC曲线表明,miR-21对NSCLC诊断价值中等。结论 miR-21在NSCLC患者癌组织及血浆中均有高表达,肺癌组织miR-21高表达与NSCLC复发转移具有密切关系,可作为NSCLC诊断及评价预后的指标。