平贝总碱体外抗菌活性研究

探讨平贝总碱的体外抑菌活性.采用纸片扩散法和琼脂平板稀释法测定平贝总碱对常见致病菌的体外抗菌活性及最低抑菌浓度(MIC).平贝总碱对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、克雷伯氏肺炎杆菌、铜绿色假单胞杆菌皆有抗菌作用,对克雷伯氏肺炎杆菌的最低抑菌浓度为2.5mg/ml;对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿色假单胞杆菌的最低抑菌浓度为5mg/mL.     

博落回生物碱的抑菌作用研究

以20％的甲醇作溶剂，盐酸小檗碱及青霉素做对照，将博落回碱，盐酸血根碱，盐酸小檗碱配成9600μg／ml的溶液，并测定了这三种物质对常见的5种细菌的抑菌效力(抑菌圈直径)及最低抑菌浓度(MIC)。结果表明，这三种物质具有不同程度的抑菌效力，其中盐酸血根碱具有很强的广谱抑菌作用。     

基于对照制剂和UPLC的牛黄清胃丸中黄柏的质量评价

目的建立牛黄清胃丸中盐酸小檗碱的含量测定方法,并设定等级标准,评价黄柏的投料质量。方法采用超高效液相色谱法(UPLC)测定49批次样品和对照制剂中盐酸小檗碱的含量。色谱柱为AQUITY UPLC BEH C_(18)柱,流动相为乙腈-水(每100 ml加十二烷基硫酸钠0.2 g)(50:50,v/v,用磷酸调pH至2),流速为0.2 ml/min,进样量2μl,柱温为35℃,检测波长265 nm。结果盐酸小檗碱浓度在0.02～0.12 mg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999);精密度、稳定性、重复性试验中盐酸小檗碱峰面积的RSD为2.23%;平均加样回收率为96.31%,RSD为1.47%(n=6)。所有批次样品的盐酸小檗碱含量均在二等限度以上;其中有29批次样品达到一等限度。结论该方法简便、准确、高效,为牛黄清胃丸中黄柏投料质量优劣的评价提供了参考。     

紫叶小檗果小檗碱的提取及抑菌活性研究

研究紫叶小檗果小檗碱的提取条件及其抑菌活性。在单因素实验和正交实验基础上,得到小檗碱的最佳提取工艺。通过平板抑菌实验测定紫叶小檗果小檗碱对马铃薯干腐病菌(Fusarium solani,F.s.)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea,B.c.)、尖孢镰刀病菌(Fusarium oxysporum,F.o.)、苹果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides,C.g.)、水稻稻瘟病菌(Magnaporthe grisea,M.g.)、苹果腐烂病菌(Cytospora sp,C.s.)六种植物病菌的抑制作用;采用滤纸片法评估紫叶小檗果及葛根、紫叶小檗果配伍制剂对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌活性。实验结果表明,小檗碱最佳提取条件为:纤维素酶用量120 mg、酶解时间120 min、料液比1:12 g/mL、浸提时间150 min,得率达到0.198%。在小檗碱浓度为4 mg/mL时,对六种植物病菌抑菌效果由大到小排序如下:尖孢镰刀病菌(F.o.) > 苹果腐烂病菌(C.s.) > 番茄灰霉病菌(B.c.) > 水稻稻瘟病菌(M.g.) > 马铃薯干腐病菌(F.s.) > 苹果炭疽病菌(C.g.),小檗碱对尖孢镰刀病菌具有较好的抑菌活性,抑菌率在小檗碱浓度为4 mg/mL时可达到89.28%;葛根与紫叶小檗果配伍对金黄色葡萄球菌的抑菌活性较强,对大肠杆菌的抑菌活性存在最佳配伍,为葛根:紫叶小檗果质量比6:44。综上所述,本实验所得提取工艺稳定、可行,可用于紫叶小檗果中小檗碱的提取,并且紫叶小檗果中小檗碱具有较强的抑菌活性,可用于食品防腐、农业生物防治等领域。     

细叶小檗果小檗碱抑菌性能及机理

本实验采用滤纸片法测定细叶小檗果实中的小檗碱对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌以及沙门氏菌的抑菌活性,以平板涂布法确定其对4种供试菌的最低抑菌浓度,评价其抑菌能力;同时通过测定生长曲线、电导率、核酸含量、细胞膜Na~+/K~+-ATP酶活力以及进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,进一步探究小檗碱抑菌机理。结果表明,小檗碱对4种供试菌均有一定的抑菌效果,对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌以及沙门氏菌的最低抑菌浓度分别为2.40、3.60、3.30 mg/mL和3.95 mg/mL,对大肠杆菌的抑菌效果较显著;扫描电子显微镜结果显示,小檗碱使菌体的形态受损、细胞破裂、细胞内物质外泄,导致菌悬液中核酸含量和电导率增大;聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明小檗碱能够抑制蛋白的合成;此外,小檗碱能使细胞膜Na+/K+-ATP酶活力降低。因此,小檗碱能通过破坏细胞膜结构抑制菌体蛋白表达,导致菌体死亡,具有良好的抑菌能力。综上,细叶果实小檗碱可作为天然防腐剂,抑制食品中腐败菌的生长,延长食品货架期。     

HPLC同时测定复方苦参肠炎康片中4种有效成分含量

目的建立同时测定复方苦参肠炎康片中芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和甘草酸4种有效成分含量的方法。方法采用高效液相色谱法(HPLC),色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈为流动相A,以0.2%磷酸溶液为流动相B,梯度洗脱,流速1.0 ml/min,检测波长245 nm,柱温30℃,进样量10μl。结果芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和甘草酸的线性范围分别为0.015~0.365 mg/ml,0.025~0.625 mg/ml,0.020~0.500 mg/ml,0.003~0.075 mg/ml(r分别为0.9999,0.9991,0.9999,0.999);精密度、稳定性、重复性试验的RSD2.0%;芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和甘草酸的加样回收率分别为101.5%~103.2%,97.6%~102.6%,100.1%~103.8%,97.2%~99.2%,RSD分别为0.48%,1.99%,1.59%,0.80%(n=6)。结论该方法简单快速、准确性好,可用于复方苦参肠炎康片的质量控制。     

细叶小檗碱的抑菌稳定性及其对细菌蛋白质的影响

通过滤纸片法测定细叶小檗碱对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌与大肠杆菌的抑菌圈直径（DIZ）,使用二倍稀释法测定其最低抑菌浓度（MIC）,评估其抑菌活力。通过分析温度、pH值以及紫外线照射对小檗碱抑菌活力变化率的影响,研究其稳定性。此外,测定菌体细胞内外蛋白质浓度,聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析小檗碱对细菌蛋白质的影响。结果表明：小檗碱对4种供试菌种均有一定的抑菌效果,对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌以及沙门氏菌的抑菌圈直径分别为（11.6±0.11）,（10.1±0.18）,（10.2±0.14）mm和（9.8±0.14）mm,最低抑菌浓度分别为2.40,3.60,3.30和3.945 mg/mL,对大肠杆菌的抑菌效果较显著。紫外线照射对小檗碱的抑菌活力几乎没有影响,强酸、强碱及高温破坏部分小檗碱的结构,抑菌活力降低。加入小檗碱的细菌细胞内蛋白浓度降低,而细胞外蛋白浓度增加。通过计算细胞蛋白总浓度以及SDS-PAGE分析表明小檗碱能够抑制蛋白的合成。     

芪连降糖片的质量标准研究

目的 建立芪连降糖片的质量标准。方法 采用薄层色谱法（TLC）定性鉴别芪连降糖片中的黄芪、黄连（味连）。采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC-ELSD）测定芪连降糖片中黄芪甲苷的含量,色谱柱为Phenomenex Luna C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-水（33:67）,流速为1.0 ml/min。采用HPLC法同时测定芪连降糖片中表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量,色谱柱同黄芪甲苷含量测定,流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液（48:52）（每100 ml中加十二烷基硫酸钠0.4 g,再以磷酸调节pH值为4.0）,流速为1.0 ml/min,检测波长为345 nm。结果 黄芪、黄连（味连）薄层色谱斑点清晰,阴性对照无干扰。黄芪甲苷、表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱分别在30.28～969.00,0.97～30.91,3.71～118.88,0.95～30.50,16.26～520.20μg/ml范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为98.8%,97.8%,101.2%,98.9%和97.3%,RSD...     

皇帝柑皮中粗黄酮的提取及其抑菌活性研究

以95%乙醇为提取溶剂从晒干的皇帝柑皮中提取粗黄酮并测定其含量,考察了不同条件下黄酮提取液的体外抑菌效果。结果表明:皇帝柑皮中提取的粗黄酮浓度为17.69 mg/mL、黄酮总含量88.45 mg、粗黄酮提取率为1.1%。皇帝柑皮粗黄酮提取液,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度均为8.085mg/mL,对酵母菌的最小抑菌浓度为5.390 mg/mL,对黑曲霉和米曲霉的最小抑菌浓度分别为3.234 mg/mL,4.042 mg/mL;在pH 4.0～5.7偏酸性条件下抑菌活性强,在偏碱性条件下抑菌活性弱,80℃以上高温会降低皇帝柑皮粗黄酮抑菌活性;24 h内对细菌和酵母菌抑菌效果好,48 h内对霉菌抑菌效果好。     

沙拉沙星体外诱导鼠伤寒沙门菌耐药实验

目的为获得体外鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhimurium)对盐酸沙拉沙星(sarafloxacin hydrochloride)的活性耐药菌株,研究诱导其产生耐药的盐酸沙拉沙星最低浓度,为评价食品中沙拉沙星残留导致的微生物耐药提供依据。方法设置盐酸沙拉沙星0.001、0.002 5、0.005、0.025、0.05、0.1μg/ml实验组和空白对照组、NaOH溶剂对照组,采用NCCLS法测试最小抑菌浓度,对鼠伤寒沙门菌进行耐药诱导,耐药判断为≥8×MIC(0.25μg/ml)。对产生耐药的鼠伤寒沙门菌的gyrA基因片段进行PCR扩增,焦磷酸凝胶测序法鉴定gyrA基因常见5个位点观察突变。结果盐酸沙拉沙星在0.005μg/ml水平传到第10代时,MIC增大32倍,抑菌浓度增加到1μg/ml,耐药菌增殖停止;传到第25代时,鼠伤寒沙门菌gyrA基因Ser83位点发生突变,获得多株稳定、有生物活性的耐药菌株。沙拉沙星浓度≥0.025μg/ml时,细菌不生长;沙拉沙星浓度≤0.002 5μg/ml时细菌生长,不产生耐药。结论沙拉沙星浓度为0.005μg/ml时可体外诱导鼠伤寒沙门菌产生耐药,经传代后获得具生物活性的耐药菌株。     

红檵木叶抑菌活性物提取分离研究

用不同浓度乙醇作提取溶剂,采用正交试验,通过抑菌实验得到红檵木叶抑菌活性物质最佳提取条件为:60%乙醇、45℃、3h。提取物对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为12.5mg/ml,对痢疾杆菌为50mg/ml,对大肠杆菌为25mg/ml。提取液抑菌活性具热稳定性,但在碱性条件下不稳定。溶剂萃取以乙酸乙酯萃取物抑菌活性最强,硅胶柱层析和薄层层析进一步分离,得到三个抑菌活性较强的组分,化学反应和UV检测表明其属可水解鞣质类。     

水溶性蜂胶对常见口腔致臭菌的体外抑制作用

为了研究水溶性蜂胶对几种常见口臭致臭菌的体外抑菌作用,采用杯碟法检测水溶性蜂胶对牙龈卟啉菌、中间普氏菌和具核梭杆菌的最小抑菌浓度,确定其抑菌效能。结果显示水溶性蜂胶对牙龈卟啉菌、中间普氏菌、具核梭杆菌均有抑菌作用,最小抑菌浓度分别为62.50、31.25和125.00mg/ml。结论:水溶性蜂胶对常见口臭致臭菌有抑制作用。     

超声辅助提取功劳木中盐酸小檗碱工艺研究

为了优化功劳木中盐酸小檗碱的超声波辅助提取工艺,采用单因子实验和L9(34)正交实验设计,研究了超声时间、超声功率、乙醇浓度、提取温度、液料比、筛分目数对功劳木中盐酸小檗碱提取的影响。结果表明,影响盐酸小檗碱得率的主次因素为乙醇浓度,液料比,超声时间,超声功率;经正交实验确定功劳木盐酸小檗碱最佳提取工艺条件为:乙醇浓度80%,超声提取时间为30min,超声功率选择为500W,液料比为9,经5次平行实验验证,该实验工艺稳定可靠,与对照实验相比,盐酸小檗碱得率可提高56.1%。     

20种中草药抗菌活性研究

本文选择了20中具有抗菌消炎作用的中药的水提物,用试管2倍稀释法,测试浓度为6.25mg/ml-200mg/ml,对啤酒酵母、假丝酵母、黑曲霉及拟青霉进行了抗菌试验,发现不同药物抗菌活性不同,其中苦参总碱,黄芩提取物,具有较强的抑菌活性,苦参总碱,黄芩提取物(黄芩甙95%)对假丝酵母的抑菌浓度小于0.0625g/ml,本文也对苦参总碱对假丝酵母的抑菌机理进行了研究,推断苦参总碱的抑菌是通过抑制HMP途径抑制假丝酵母的生长.     

油橄榄叶提取物的抑菌活性研究

以牛津杯扩散法考察油橄榄叶提取物(OLE)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等8种致病菌的抑菌活性,用稀释法分析OLE对8种细菌生长的影响,并探究最低抑菌质量浓度(MIC)和最低杀菌质量浓度(MBC)。结果表明:以盐酸小檗碱作为对照,OLE对蜡状芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、抗四环素大肠杆菌的抑菌作用优于盐酸小檗碱; OLE对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌作用较强(MIC 1 mg/mL,MBC 2 mg/mL)。20 mg/mL的OLE对大肠杆菌的抑制作用最强,为极度敏感(大肠杆菌的d=(25. 07±3. 02) mm,抗四环素大肠杆菌的d=(24. 89±1. 58) mm);葡萄球菌次之(表皮葡萄球菌的d=(20. 11±1. 02) mm,金黄色葡萄球菌的d=(21. 35±2. 06) mm,金黄色葡萄球菌(SH7) d=(20. 01±1. 21) mm);而芽孢杆菌处于中度敏感状态。OLE除对铜绿假单胞菌的对数生长期无明显影响外,对其余7种细菌的对数生长期均有延缓作用。OLE具有较强的抑菌活性,可作为一种绿色安全的植物源抑菌制剂。     

灰灰菜提取物体外抑菌活性的研究

目的：探讨灰灰菜的体外抑菌活性。方法：分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯对灰灰菜65% 乙醇提取物进行萃取,然后用滤纸片扩散法和最低抑菌浓度法(MIC)检测3 种萃取物对7 种人体常见致病菌生长的影响。结果：石油醚、氯仿萃取物对供试菌均无明显抑制作用,而乙酸乙酯萃取物的抑菌活性很强,其对大肠杆菌的最小抑制浓度(MIC)小于1.56mg/ml,对绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、藤黄微球菌的MIC 分别为3.13、6.25、6.25、12.5mg/ml,而对粪肠球菌和白假丝酵母的MIC 均大于50mg/ml。结论：乙酸乙酯萃取物对细菌具有明显的抑制作用,且对革兰氏阴性菌的抑制效果强于革兰氏阳性菌,但对真菌的抑制作用不明显。     

迎春花叶抑菌活性物研究

采用硅胶柱层析(CC)、薄层层析(TLC)和重结晶等技术,从迎春花叶乙酸乙酯萃取物中分离到一强抑菌活性单体。经理化检测和波谱分析数据鉴定属裂环烯醚萜葡糖苷类(secoiridoid glucosides)的迎春花素(jasminin)。该单体在强酸性环境中不稳定,高温、紫外光处理后抑菌活性稳定,对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)为均为1mg/ml,对痢疾杆菌、大肠杆菌的最小抑菌浓度为0.5mg/ml,对三个受试菌的最小杀菌浓度(MBC)为2mg/ml。     

麦麸多糖提取工艺及其抑菌活性的研究

通过单因素和L9(33)正交试验对麦麸多糖的微波法提取工艺进行研究,得出提取的最佳工艺条件为:时间90 s、功率320 W、料液比1∶30,在此工艺条件下,麦麸多糖得率为6.57%。通过体外抑菌试验及最小抑菌浓度的测定研究了麦麸多糖的抑菌效果,结果表明:麦麸多糖浓度为40～60 mg/mL时,其对地衣芽胞杆菌、大肠杆菌、金黄色葡糖球菌及沙门氏菌等常见致病菌已达到较好的抑菌效果;麦麸多糖的最低抑菌浓度为地衣芽孢杆菌8.0 mg/mL,大肠杆菌10.0 mg/mL,金黄色葡萄球菌和沙门氏菌均为6.0 mg/mL。     

石榴皮单宁的提取、纯化及抑菌作用的研究

石榴皮中含有丰富的单宁类物质,具有良好的抑菌活性。以丙酮为提取溶剂,采用超声波辅助法对石榴皮单宁进行提取,并用Amberlite XAD-16大孔吸附树脂纯化,经高效液相色谱对其组分进行分析后,采用琼脂稀释法做最小抑菌浓度实验,结果表明:石榴皮提取物的主要成分为安石榴苷,纯化后质量浓度由12.3%提高到64.2%;石榴皮粗提物对金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、沙门氏菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为0.312、10、0.625mg/mL和大于10mg/mL,纯化物对四种菌的最小抑菌浓度分别为0.156、5、0.625、10mg/mL。     

青麦仁麸皮中阿魏酸的抗氧化性和抑菌活性研究

通过铁离子还原法、DPPH自由基清除法、羟基自由基清除法、ABTS自由基清除法来探索阿魏酸的体外抗氧化活性;采用试探性试验与牛津杯法、琼脂培养基稀释法和液体培养法分别测定青麦麸阿魏酸对部分食品腐败菌的敏感性、最小抑菌浓度和最小杀菌浓度.试验结果表明,随着阿魏酸的质量浓度升高,其铁离子还原能力逐渐增大;随着摩尔浓度升高,其对DPPH自由基、羟基自由基和ABTS自由基清除能力逐渐增大.同时,阿魏酸对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌有抑制效果,随着阿魏酸浓度的提升,其相对应的抑制作用逐渐增强,最低抑菌浓度分别为12.5 mg/mL、6.25 mg/mL、6.25 mg/mL,最低杀菌浓度分别为200 mg/mL、>400 mg/mL、200 mg/mL.