小檗碱预处理拮抗过氧化氢所致PC12细胞的损伤：抗氧化自由基效应

背景: 小檗碱是从中药黄连中分离提取的生物碱，研究表明有抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗氧化和降血脂等药理作用。但其对过氧化氢诱导的神经元损伤是否有保护作用尚未见报道。 目的: 观察过氧化氢诱导损伤PC12细胞接受小檗碱干预的变化，并分析其作用机制。 设计、时间及地点: 重复测量，体外细胞生化水平对比实验。实验于2007-9/2009-7在广东医学院完成。 材料: PC12细胞由广东医学院张海涛教授赠送；小檗碱、二氯二乙酸荧光素和二甲基亚砜购于美国Sigma公司；过氧化氢购于广州化学试剂厂；马血清和胎牛血清购于杭州四季青生物工程公司；乳酸脱氢酶（LDH）和丙二醛（MDA）试剂盒为南京建成生物工程研究所产品。 方法: PC12培养于内含体积分数100 ml/L马血清和50 ml/L胎牛血清的DMEM培养液中，隔日换液，根据实验需要将细胞分为3组，小檗碱组：将浓度分别为1，3，10μmol/L丹皮酚加入培养液，1h后将过氧化氢加入培养液；空白组：细胞以正常培养液培养；过氧化氢组：细胞仅加入过氧化氢。 主要观察指标: 采用MTT还原法检测细胞生存率；流式细胞仪检测细胞内活性氧；化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性及细胞内丙二醛(MDA)含量。 结果: 过氧化氢组PC12细胞生存率明显低于空白组，差异比较有显著性意义(P<0.01)，小檗碱组不同浓度条件下细胞生存率均显著高于过氧化氢组，差异比较有显著性意义(P<0.01)；过氧化氢组PC12细胞LDH 活性、细胞内活性氧及丙二醛含量显著高于空白组，差异比较有显著性意义(P<0.01)，小檗碱组不同浓度条件下LDH 活性、细胞内活性氧及丙二醛含量均低于过氧化氢组(P < 0.05~0.01)。 结论:小檗碱对过氧化氢所致PC12细胞损伤有保护作用，且该作用可能与其抗氧化作用途径有关。     

丹参酮对β-淀粉样肽致拟痴呆小鼠的保护作用及机制

目的探讨丹参酮对β-淀粉样肽（A13）致拟痴呆小鼠（AD小鼠）的保护作用及机制。方法利用单侧脑室一次性注射可溶性大片段Aβ1-42复制拟痴呆动物模型，将小鼠随机分为对照组，模型组、脑复康（200mg／kg）组及丹参酮（20、40、80mg／kg）组。通过避暗实验和Morris水迷宫实验观察丹参酮对AD小鼠学习记忆能力的影响及血清、脑、肝脏内SOD、MDA含量和皮层和海马中AChE、NO含量的变化。结果脑室内注射Aβ1-42后小鼠出现学习记忆障碍；血清、脑、肝中SOD活性降低、MDA含量增加；大脑皮层、海马组织中AChE、NO含量上升；应用丹参酮后AD小鼠学习记忆能力提高，丹参酮组中、高剂量组抑制了血清、脑、肝中SOD活性的降低和MDA含量的增加（P〈0．01，0．001），亦减少大脑皮层、海马组织中AChE、NO的生成（P〈0．05，0．01，0．001）。结论丹参酮对β-淀粉样肽致拟痴呆小鼠具有一定的保护作用，其机制可能与抗氧化、抑制AChE生成有关。     

Aβ对原代培养海马神经元NO、NOS和LDH影响及bFGF保护作用

目的　探讨β-淀粉样蛋白 (amyloid-beta protein,Aβ)对原代培养海马神经元一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)和乳酸脱氢酶 (LDH)的影响及碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)的保护作用。方法　通过测定原代培养新生大鼠海马神经元培养液中 NO、NOS及 LDH的含量变化 ,观察 Aβ1 -40对神经元的损伤及 b FGF的保护作用。结果　Aβ1 -40作用于海马神经元 2 4h后 ,培养上清液中 NO、NOS含量增加 ,LDH活性升高 ,与对照组比较差异有显著性 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1 )。经 b FGF预处理的海马神经元暴露于 Aβ1 -40 2 4h后 ,NO、NOS含量及 LDH活性均降低 ,且与损伤组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　 b FGF对 Aβ诱导海马神经元损伤具有一定的保护作用。     

阿托伐他汀对淀粉样β蛋白诱导大鼠原代海马神经元损伤保护作用的研究

目的探讨阿托伐他汀(atorvastatin,Ato)对β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的体外培养原代海马神经元损伤保护作用。方法选用出生0~24hSprague-Dawley大鼠乳鼠,解剖显微镜下分离海马,进行海马神经元体外培养,培养10d后用于实验。将培养的海马神经元分为3组:(1)正常对照组:加入含有1%(质量浓度)DMSO培养基;(2)Aβ1-42组:加入1.25μmol/L Aβ;(3)Aβ(1.25μmol/L)+不同浓度阿托伐他汀组(0.1、0.5、1、2.5μmol/L)。应用CellTiter-GloTM荧光细胞活性试剂盒检测培养海马神经元ATP含量,用以反映神经元活力;通过CytoTox-ONETM试剂盒测定培养细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,用以测定神经元细胞膜的损伤程度;应用免疫荧光染色观察神经元突触素(SYP)、突触后致密蛋白95(PSD-95)、bassoon蛋白表达。Western印迹法半定量检测海马神经元突触蛋白SYP、PSD-95、bassoon的改变。结果与正常对照组比较,培养10d海马神经元经1.25μmol/L Aβ1-42作用48h后,其ATP和LDH水平均明显降低(均P0.01),而0.5、1.0、2.5μmol/L Ato组能够明显抑制Aβ1-42引起的ATP和LDH水平降低(P0.01)。免疫荧光及Western blot结果显示,1.25μmol/L Aβ1-42可使海马神经元SYP、PSD-95、bassoon蛋白表达明显降低,而Ato能够明显抑制Aβ1-42引起的SYP、PSD-95、bassoon蛋白表达降低。结论 Ato对Aβ诱导的体外培养海马神经元毒性有保护作用,这种保护作用可能与Ato对抗Aβ1-42引起的海马神经元SYP、PSD-95、bassoon表达降低有关。     

白藜芦醇预处理对神经干细胞氧糖剥夺损伤的保护作用简

目的探讨白藜芦醇预处理对神经干细胞氧糖剥夺损伤的保护作用。方法用含有白藜芦醇的细胞培养基预培养神经干细胞1h，更换低糖培养基后将细胞培养在缺氧培养盒内6h进行氧糖剥夺实验（OGD）；采用噻唑蓝（MTI＂）比色实验检测细胞活性；用LDH试剂盒测细胞培养基中乳酸脱氢酶（LDH）活性。结果白藜芦醇预处理（PRC）组细胞MTT值高于对照组（n=7，P〈0．01），PRC组细胞培养基上清中LDH低于对照组（n=5，P〈0．01）。结论白藜芦醇预处理对神经干细胞氧糖剥夺损伤有保护作用。     

FZS中药合剂对Aβ42寡聚体致PC12细胞损伤的保护作用研究

目的探讨FZS中药合剂对Aβ42寡聚体致PC12细胞损伤的保护作用,及不同浓度Aβ42寡聚体的PC12细胞毒性作用比较研究。方法分别用不同浓度Aβ42寡聚体作用于PC12细胞,加FZS中药合剂进行干预并与正常细胞进行对照研究。应用噻唑蓝（MTT）、LDH检测细胞活性,同时采用光镜、原位末端标记（TUNEL）方法检测细胞凋亡。原子力显微镜（AFM）鉴定并观察Aβ42寡聚体、Aβ42及细胞表面的形态变化。结果MTT在Aβ42寡聚体组表达明显降低（P＜0．05）；LDH在Aβ42寡聚体组表达明显增高（P＜0．05）；光镜观察及TUNEL染色Aβ42寡聚体组均发现典型的凋亡PC12细胞,凋亡率较Aβ42组差异有显著意义（P＜0．05）。FZS中药合剂组细胞凋亡串均明显降低,差异有显著意义（P＜0．05）。结论Aβ42寡聚体在神经细胞凋亡过程中发挥了重要的作用,其聚集变化可通过AFM进行观察。FZS中药合剂有确切的神经细胞保护作用,其作用与药物浓度相关。     

蛇床子素对MPP~＋损伤PC12细胞的保护作用研究

目的观察蛇床子素（osthole）对1-甲基-4-苯基吡啶离子（MPP＋）诱导PC12细胞损伤的神经保护作用。方法将MPP＋加入培养的PC12细胞中,建立多巴胺能神经元损伤模型,加入不同浓度的蛇床子素预处理细胞（0.01、0.05、0.1mmol/L）。处理24h后用噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞活性;以乳酸脱氢酶（LDH）活性测定反映细胞的损伤程度;采用Westernblot法检测Bax、Bcl-2蛋白的表达,分析Bax/Bcl-2比值变化,以及检测细胞色素C的改变。结果蛇床子素可以明显减少MPP＋诱导的PC12细胞活性的降低,LDH的释放,Bax/Bcl-2比值的增高以及细胞色素C的释放（P〈0.05）。结论蛇床子素对MPP＋诱导的PC12细胞损伤具有保护作用。     

β-淀粉样肽诱导单核细胞培养上清液致神经细胞损伤模型的建立

目的建立β淀粉样肽（Aβ1-40）诱导THP-1单核细胞（模拟小胶质细胞）的上清液致SK—N—SH神经细胞损伤的细胞模型，并研究神经细胞损伤的机制。方法用乳酸脱氢酶（LDH）漏出率观察人神经母细胞瘤SK-N—SH细胞系的损伤程度；以放射免疫法测定THP-1单核细胞培养的上清液中炎性细胞因子IL-1β、IL-8和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度。结果Aβ1-40（终浓度125nmol／L）与THP-1单核细胞孵育0．5～4h，取上清液加入到培养的SK-N—SH神经细胞共孵育24h，SK-N-SH神经细胞LDH漏出率较对照组明显增高，其中Aβ诱导THP-1细胞2h的上清液对SK—N—SH神经细胞的损伤最明显。Aβ1-40与THP-1单核细胞孵育2h，其上清液中炎性细胞因子IL-1β、IL-8和TNF-α水平比对照组明显增高。结论Aβ1-40诱导THP-1单核细胞可作为免疫炎性损伤的细胞模型，炎性细胞因子水平增高是Aβ引起神经细胞损伤的机制。     

人参皂甙Rb1、Rb3、Rg1对培养皮层神经细胞的抗缺血效应及其机制

目的研究人参皂甙(Ginsenosides，GS)的3种单体成分GSRb1、Rb3、Rg1对培养的皮层神经细胞的抗缺血效应及其机制。方法体外培养小鼠胎鼠大脑皮层神经细胞，观察缺血／再灌注对神经细胞的毒性及(GSRb1、Rb3、Rg1的保护作用。结果培养的小鼠胎鼠大脑皮层神经细胞缺血／再灌注损伤后，细胞出现明显损伤性变化．神经细胞活性降低，电镜观察显示神经细胞呈变性至坏死等不同程度的损伤，死亡率明显升高．培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)释放量增加，而细胞匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)含量明显减少．丙二醛(MDA)生成显著增多。GSRb1、Rb3、Rg160μmol／L能不同程度地抑制缺血／再灌注引起的损伤性改变，培养上清液中LDH释放减少，而细胞匀浆中SOD含量明显增加．MDA生成显著降低。结论(1)GSRb1、Rb3、Rg1对神经细胞有明显的抗缺血效应；(2)GSRb1、Rb3、Rg1抗缺血的作用机制可能与其提高神经细胞抗氧化能力、减少自由基的生成，保护细胞的结构与功能有关。     

丹参川芎嗪注射液对Aβ损伤的PC12细胞保护作用及机制研究

目的 探讨丹参川芎嗪注射液对Aβ损伤的PC12细胞可能的保护作用及机制。方法 将PC12细胞分为5组:空白对照组(未加任何处理药物)、Aβ诱导组(20 μmol/L Aβ处理组)和预处理组(分别加入浓度为5 ml/L、10 ml/L、20 ml/L的丹参川芎嗪注射液孵育24 h后加20 μmol/L Aβ),通过CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,Hoechst 33258染色观察PC12细胞核的改变,荧光分光光度计测定LDH、SOD、GSH及caspase-3活性水平,免疫组织化学方法观察细胞色素C(Cyt-C)蛋白释放水平,Western Blot检测Bcl-2的表达水平。结果 丹参川芎嗪注射液(5、10、20 ml/L)预处理对Aβ诱导的PC12细胞损伤有较好的保护作用,其保护作用随着药物浓度的增加而增强。它能增加Aβ损伤的PC12细胞增殖活力,减少Aβ诱导的PC12细胞凋亡,降低细胞核凝聚现象,抑制Aβ损伤的PC12细胞LDH释放,增强SOD和GSH活性,促进Cyt-C在细胞内表达,降低caspase-3活性,促进Bcl-2的表达。结论 丹参川芎嗪注射液对Aβ诱导的PC12细胞损伤具有与线粒体通路相关的保护作用,其保护作用与它抑制细胞凋亡、抗氧化应激、维持线粒体正常功能、抑制caspase-3的激活、促进抗凋亡因子Bcl-2的表达有关。     

Aβ42寡聚体对PC12细胞损伤作用的研究

目的 研究Aβ42寡聚体对PC12细胞的损伤作用,观察Aβ42寡聚体的聚集状态的变化.方法 用不同浓度Aβ42寡聚体作用于PC12细胞,并与Aβ42作用的PC12细胞、正常PC12细胞进行对照研究.应用MTT、LDH检测细胞活性,原位末端标记（TUNEL）方法检测细胞凋亡.应用原子力显微镜（AFM）观察Aβ42寡聚体的聚集状态、PC12细胞表面形貌变化.结果 MTT、LDH在Aβ42寡聚体组的改变较对照组、Aβ42组差异有显著意义（P＜0.05）;TUNEL法测定Aβ42寡聚体组凋亡率高,较对照组、Aβ42组差异有显著意义（P＜0.05）.Aβ42寡聚体对PC12细胞的损伤作用随浓度增高而增加.原子力显微镜可观察到Aβ42寡聚体、Aβ42的不同聚集状态.结论 Aβ42寡聚体的细胞损伤作用与浓度相关,且强于Aβ42.利用原子力显微镜可观察Aβ的聚集变化.     

抗抑郁药万拉法辛对Aβ25-35诱发PC12细胞损伤的保护作用

目的研究抗抑郁药万拉法辛对β淀粉样蛋白片段(Aβ25-35)诱发PC12细胞损伤的保护作用。方法将培养的PC12细胞分为3组:正常对照组、Aβ损伤组和药物保护组。Aβ损伤组用Aβ25-35处理细胞,药物保护组在用Aβ25-35处理前2h加入抗抑郁药万拉法辛。采用细胞形态学方法、LDH法、MTT法、免疫组化法及western blot法观察抗抑郁药万拉法辛的保护作用。结果药物保护组与Aβ损伤组相比细胞数显著增多,受损变圆的细胞数较少;LDH释放量较少(P<0.01);OD490值显著升高(P<0.01)。Aβ损伤组中Bcl-2的表达比正常对照组低,药物保护组Bcl-2的表达比Aβ25-35损伤组升高;药物保护组、Aβ损伤组与对照组相比细胞内Bax蛋白表达均无明显变化。结论抗抑郁药万拉法辛对Aβ25-35诱发PC12细胞损伤有保护作用,其机制可能和万拉法辛升高Bcl-2蛋白水平有关。     

乌司他丁对缺氧诱导PC12细胞神经损伤的保护作用研究

目的 探讨乌司他丁对缺氧诱导PC12细胞神经损伤的作用及分子机制。方法 PC12细胞分为对照组、缺氧组、缺氧+乌司他丁低、中、高剂量组、缺氧+miR-NC组、缺氧+miR-190组、缺氧+乌司他丁+anti-miR-NC组、缺氧+乌司他丁+anti-miR-190组。检测培养液中乳酸脱氢酶（LDH）漏出率及细胞中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量；流式细胞术检测细胞凋亡；蛋白质印迹法（Western blotting）检测蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-190表达水平。结果 与缺氧组比较，缺氧+乌司他丁低、中、高剂量组PC12细胞中LDH漏出率降低，SOD活性升高，MDA含量降低，细胞凋亡率降低，Bcl-2相对表达量升高，Bax相对表达量降低，miR-190相对表达量升高，且呈剂量依赖性（均P<0.05）。miR-190过表达后，LDH漏出率降低，SOD活性升高，MDA含量降低，细胞凋亡率降低，Bcl-2相对表达量升高，Bax相对表达量降低（均P<0.05）。抑制miR-190表达能逆转乌司他丁对缺氧诱导的PC12细胞损伤的作用。结论 乌司他丁可能通过上调miR-190表达对缺氧诱导PC12细胞神经损伤起保护作用。     

代谢型谷氨酸受体5对创伤性神经元损伤保护作用研究

目的研究代谢型谷氨酸受体5（mGluR5）的特异性激动剂对创伤性脑损伤后神经元的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法原代培养2W大鼠皮层神经元细胞,采用神经元机械性损伤模型,加入两种mGluR5特异性激动剂2-氯-5羟苯基甘氨酸（CHPG）和3-氰．氮苯甲酰胺（CDPPB）,通过乳酸脱氢酶（LDH）释放率、caspase-3活性检测,研究mGluR5激动剂对神经元损伤可能具有的保护作用;通过western—blot检测细胞外信号调节激酶（ERK）、c—Jun氨基末端激酶（JNK）、p38表达变化并研究这种保护作用的产生机制。结果损伤后LDH释放率和easpase-3活性显著增加,CHPG和CDPPB明显抑制了LDH的释放率和easpase-3的活性,并呈剂量依赖性;Westernblot结果提示,CHPG和CDPPB显著增加了ERK的磷酸化水平,而对JNK、p38无影响。结论mGluR5的激动剂CHPG和CDPPB对机械性神经元损伤具有保护作用,这种保护作用可能是通过激活ERK通路实现。     

β-淀粉样蛋白对体外培养的血管平滑肌细胞的作用及同型半胱氨酸对其影响

目的观察同型半胱氨酸（Hcy）对受β-淀粉样蛋白1-40（Aβ1-40）作用的体外培养的血管平滑肌细胞（VSMC）的影响。方法取大鼠主动脉段,体外进行培养,分别加入不同浓度Aβ1-40和同型半胱氨酸,光镜下观察细胞数量及形态,利用MTT法观察细胞增殖及细胞活力,流式细胞技术检测观察细胞凋亡情况,SOD以及H2O2试剂盒分别检测细胞超氧化物歧化酶的活力以及过氧化氢产生情况。结果（1）光镜下观察可见,Aβ1-40、Hcy与血管平滑肌细胞共同培养时细胞较Aβ1-40单独作用时明显减少;（2）MTT结果显示Aβ1-40抑制体外培养的血管平滑肌细胞的增生并可致其凋亡,在有同型半胱氨酸存在的时候Aβ1-40对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用以及促进凋亡作用都有增加,此作用具有时间及浓度依赖性;（3）SOD活力以及H2O2检测示Aβ1-40、Hcy共同作用时SOD活力以及H2O2含量较Aβ1-40单独作用时明显增加。结论同型半胱氨酸对于β-淀粉样蛋白1-40所致的体外培养血管平滑肌细胞损伤有促进作用。     

雷沙吉兰（Rasagiline）对Aβ25-35诱导PC12凋亡的防护作用细胞

目的探讨雷沙吉兰（Rasagiline）对β-淀粉样蛋白（Ap）诱导PCI2细胞损伤阿尔茨海默病（AD）模型的保护作用及其机制。方法不同浓度的Aβ25-35（1μmol／L，10μmol／L，20μmol／L）作用于PCI2细胞48h，MTT法检测细胞存活率．选用使细胞存活率降低到64％的Aβ浓度20μmol／L。用不同浓度的雷沙吉兰（0．1μmol／L，1μmol／L，10μmol／L）预孵育PC12细胞1h，再加入20μmol／l，的Aβ共孵育48h，再测MTT活性，并用荧光染料丫啶橙和溴化乙啶染色，在荧光显微镜下计数凋亡细胞检测凋亡细胞百分率。结果 Aβ在20μmol／L时使PC12细胞存活率降低至64％，与对照组差异显著，1μmol／L的雷沙吉兰可显著提高细胞存活率至85％。对照组细胞凋亡率为2％．20μmol／L，Aβ作用48h后，PC12细胞凋亡率达13％，1μmol／L的雷沙吉兰使20μmol／L。Aβ诱导的PC12细胞凋亡率下降到5％。结论 雷沙吉兰对Aβ引起的PC12细胞损伤具有明显的保护作用．其机制可能与抑制Aβ诱导的凋亡有关。     

枸杞多糖对小鼠海马神经元癫间模型的保护作用和可能的作用机制研究

目的 研究枸杞多糖对小鼠海马神经元癫间模型的保护作用和潜在作用机制。方法 采用无Mg²⁺培养液建立癫间细胞模型，分为对照组(细胞用含Mg²⁺溶液的Neurobasal-A培养液培养)、模型组(细胞用无Mg²⁺细胞外液培养)、枸杞多糖低剂量组(25 mg·L^-1)、中剂量组(50 mg·L^-1)和高剂量组(100 mg·L^-1)。MTT法检测细胞存活率；流式细胞术检测细胞凋亡；分光光度法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)含量；RT-qPCR检测TNF-α、IL-1β、COX-2 mRNA及BDNF mRNA表达水平；Western blot检测caspase-3、cleaved-caspase-3蛋白及酪氨酸激酶受体B(TrkB)、BDNF蛋白表达水平。结果 与对照组比较，模型组细胞存活率和SOD活性降低；凋亡率、MDA和LDH含量增加；TNF-α、IL-1β、COX-2 mRNA表达水平、BDNF mRNA和蛋白表达水...     

大黄酚对神经细胞缺氧损伤的保护作用

目的 观察大黄酚对缺氧PC12细胞损伤的保护作用;方法 培养PC12细胞,建立缺氧致神经细胞损伤模型;缺氧前后四甲基偶氮唑盐法（MTT）检测PC12细胞增殖活性、光镜观察PC12细胞形态、测定上清液中乳酸脱氢酶（LDH）活性、早期癌基因表达产物（c-fos）荧光免疫组化表达和逆转录酶聚合酶链反应（RT-PCR）分析神经型一氧化氮合酶（nNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA的表达;结果 大黄酚明显改善缺氧PC12细胞的活力,对损伤细胞形态有改善作用,使损伤细胞的培养上清液中的LDH明显减少;c-fos表达减少,PCR结果分析显示nNOS mRNA在缺氧早期表达.iNOSmRNA主要在缺氧晚期表达.结论 本缺氧模型能够引起PC12细胞凋亡现象,大黄酚能减轻PC12细胞缺氧损伤,对神经元细胞有保护作用.     

两种方法提取乳鼠神经细胞建立缺氧/复氧损伤模型的研究

目的比较两种不同方法培养乳鼠神经细胞稳定性,并探讨H_2O_2对原代培养神经细胞造成缺氧/复氧损伤模型的最佳处理时间。方法两种方法培养原代神经细胞,加入600μmol/L H_2O_2培养50 min、2 h、3 h后换正常培养液继续培养18 h,造成神经细胞缺氧/复氧损伤。MTT法检测各组细胞生存率,检测LDH活性、SOD、MDA含量和RhoA活性。结果与空白组相比,缺氧50 min、2 h、3 h培养各组细胞存活率下降,LDH活性增加,SOD含量下降,MDA含量升高,RhoA含量增加P均0.05。与直接法组相比,种植法组细胞在缺氧50 min、2 h各组细胞存活率高,细胞LDH漏出少,SOD含量高,MDA生成少P均0.05。结论与直接法相比,种植法培养的神经细胞状态更稳定,缺氧50 min、复氧18 h时制作神经细胞损伤模型最接近体内缺氧损伤状态,可用于实验。     

IL—1β对大鼠胆碱能神经元的影响

目的探讨IL-1β对大鼠胆碱能神经元的损伤作用及机制。方法将IL-1β缓慢释放颗粒（IL-1βpellet）植入大鼠右侧Meynert核(nbM,基底核),复制胆碱能系统受损的动物模型;将不同剂量的人重组白细胞介素-1β（rhIL-1β）加入培养大鼠前脑基底神经元中,复制rhIL-1β诱导神经元损伤模型,检测（乙酰胆碱酯酶）AchE活性和脂质过氧化物（LPO）含量的变化。结果IL-1β损伤侧皮质AchE活性较未损伤侧、正常组及假手术组均显著降低（P<0.01）。50-500U/mlrhIL-1β可引起培养的神经元AchE活性明显下降（P<0.05）;100-500U/mlrhIL-1β可引起神经元LPO含量明显升高（P<0.01）。结论IL-1β慢性作用可以造成大鼠中枢胆碱能系统的损害,其机制可能是通过脂质过氧化作用。