仿生髓核组织工程细胞支架的构建及初步理化指标分析

目的设计构建一种新型仿生髓核组织工程的细胞支架,以用于髓核组织工程的实验研究.方法以猪Ⅱ型胶原和透明质酸在pH 1～2的环境下混合,先行制备Ⅱ型胶原/透明质酸海绵,再以水溶性碳化二亚胺交联并复合6-硫酸软骨素,从而获得与生理条件下髓核细胞外基质主要成份相同的仿生髓核组织工程细胞支架.并对其理化指标进行初步分析.结果所制备的支架材料为多孔结构,其孔径为89～132μm,孔隙率为94.8%.含水能力为79.2%,热变性温度为74.6℃,糖胺多糖含量为224.6 mg/g,弹性模量为0.673 MPa.结论我们对所制备支架材料的理化指标初步分析认为:该支架符合理想支架材料的结构要求.可对该支架的性能进行深入的研究.     

Ⅱ型胶原-透明质酸-软骨脱细胞基质制备组织工程软骨支架的实验研究

目的探索Ⅱ型胶原(CollagenⅡ,COLⅡ)-透明质酸(Hyaluronic acid,HA)-软骨脱细胞基质(Cartilageacellular extracellular matrix,CAEM)通过低温冷冻法制备组织工程软骨支架的可行性。方法将COLⅡ和HA及CAEM按15∶3∶45的比例混合,通过低温冷冻干燥的方法制备组织工程软骨支架,测定其孔隙率、吸水率、降解率,检测支架的理化性能,并行HE染色及甲苯胺蓝染色观察支架结构情况。用CCK8法评价其细胞毒性及粘附性情况。结果 COLⅡ-HA-CAEM复合支架孔隙率为87.3%±3.7%,吸水率为1522.0%±29.3%,21天降解率为29.2%±2.4%,CCK8法检测结果显示,COLⅡ-HA-CAEM复合支架对细胞具有良好的粘附性,其生物学性能良好。结论 COLⅡ-HA-CAEM复合支架能为软骨细胞的生长和增殖提供优良的微环境,在组织工程软骨重建中具有潜在的应用价值。     

适于肝干细胞培养的壳聚糖—硫酸肝素—透明质酸复合支架

目的选用适宜的三维支架在体外构建类似于体内的肝干细胞(HSCs)生长的微环境。方法以壳聚糖、硫酸肝素和透明质酸三种材料为原料,以冷冻干燥法制孔技术制备壳聚糖-硫酸肝素-透明质酸(C-HS-Ha)三维(3D)多孔隙复合支架,检测该支架的吸水率、孔隙率、孔径及降解率后,接种HSCs注入此支架,通过检测细胞在支架上的黏附率、细胞在支架内的形貌以及生长活力等情况来评价支架。结果吸水率、孔隙率、孔径及降解率都适合细胞生长;壳聚糖-透明质酸(C-Ha)支架与C-HS-Ha复合支架相比较,细胞黏附率前者约为后者的50%,细胞增殖数约是后者的75%;HSCs在支架内相互连接并贯穿孔间交织成网状。结论 C-HS-Ha复合支架是一种适于HSCs生长和增殖的材料,有望作为体外三维环境的支架材料并被用于组织工程和药物筛选等。     

氨基葡萄糖与硫酸软骨素复合片的制备

①目的 研究氨基葡萄糖与硫酸软骨素复合片的制备工艺并考察片剂的溶出度.②方法 氨基葡萄糖与硫酸软骨素按5:4的比例混合加入填充剂,采用湿法制粒,压片制成氨基葡萄糖与硫酸软骨素复合片,测定复合片的溶出度.以大鼠为实验动物研究复合片抗急性炎症作用.③结果 以溶出度为评价指标,筛选片剂的最佳处方.优选出氨基葡萄糖与硫酸软骨素复合片最佳处方为:12%的微晶纤维素为填充剂,2.5%羧甲基淀粉钠为粘合剂和2.5%交联聚乙烯吡咯烷酮为崩解剂.大鼠足趾肿胀实验结果 显示给药28天,氨基葡萄糖与硫酸软骨素复合片各给药组足趾肿胀度均小于正常对照组(P＜0.05).④结论 制成的氨基葡萄糖与硫酸软骨素复合片具有药物溶出迅速,有明显的抗急性炎症作用.     

羊水粘多糖双向电泳分析及其在粘多糖贮积症产前诊断中的应用

采用醋酸纤维薄膜双向电泳,对20例正常妊娠中期羊水粘多糖作了分析,发现仅出现硫酸软骨素和透明质酸两种组份。2例粘多糖贮积症高危孕妇的羊水检查结果还显示硫酸皮肤素和硫酸乙酰肝素两种异常组份,分别诊断为粘多糖贮积症Ⅰ型和Ⅱ型,并经流产胎儿肝组织超微结构检查证实。该方法具有分辨率高、操作简单、省时、省费用等优点,适宜临床应用。     

真皮支架材料的组织相容性研究

目的 探讨不同真皮材料的体内组织相容性,筛选合适的真皮支架材料.方法 将胶原、硫酸软骨素、透明质酸和甲壳糖按一定比例制备成复合凝胶,将其同胶原海绵、明胶海绵3种真皮支架材料埋植入129小鼠皮下,术后3,7,10 d;2,3,4,5,6周取材,形态学观察材料在体内的反应、血管化进程和降解速度等,评价其组织相容性.结果 复合凝胶和胶原海绵体内引起轻微的炎症反应,以创伤性修复为特征,约4周降解.明胶海绵的组织反应以淋巴细胞和巨噬细胞浸润为主,降解周期约5周.结论 3种材料均无明显毒性,组织反应低,易于血管化,相容性好.     

乙醛对硫酸软骨素抗凝血作用的影响

①目的　研究乙醛对硫酸软骨素抗凝血作用的影响。②方法　从家兔颈总动脉取血 ,分别测定加入不同浓度硫酸软骨素后的凝血时间以及硫酸软骨素中加入乙醛、乙醇后的凝血时间。③结果　乙醛加硫酸软骨素组的凝血时间大于硫酸软骨素组 (F =2 1 .33,q =34.1 3,P <0 .0 5 ) ;乙醇加硫酸软骨素组的凝血时间较硫酸软骨素组无明显改变 (F =3.73,q =0 .0 6 ,P >0 .0 5 )。 ④结论　乙醛可提高硫酸软骨素的抗凝血作用 ,而乙醇对硫酸软骨素的抗凝血作用无明显影响     

分层复合骨-软骨支架的制备及生物相容性初步研究

目的 制备分层复合骨-软骨支架及研究其生物相容性.方法 首先制备纳米羟基磷灰石(nano-HAP)/Ⅰ型胶原复合材料,以nano-HAP/Ⅰ型胶原/聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为骨部分支架,透明质酸钠/PLGA为软骨部分支架,分层复合构建骨-软骨支架,透射电镜、红外光谱、X射线衍射分析nano-HAP/Ⅰ型胶原复合材料颗粒粒径大小、化学组成及结晶度,扫描电镜观察支架微观形貌,并通过大鼠骨髓基质干细胞-支架复合培养、噻唑蓝法检测支架的生物相容性及细胞毒性.结论 分层复合骨-软骨支架具有良好的微观结构,无细胞毒性,细胞与支架生物相容性良好,适合作为骨-软骨支架.     

猪硫酸软骨素的制备和含量测定

目的：建立制备猪硫酸软骨素的最佳实验方案．方法：以稀碱-浓盐法制备猪硫酸软骨素,用红外光谱法和咔唑分光光度法鉴定猪硫酸软骨素的含量和结构．结果：对自制猪硫酸软骨素和商品硫酸软骨素进行红外吸收光谱比较分析发现,其特征吸收峰均在3400,1620,1560,1240,860cm^-1处．自制猪硫酸软骨素质量浓度在0．00～0．25g／L范围内线性关系良好（r=0．9998,n=7）,加样回收率为99．48％,RSD=0．73％．结论：本法简单、快速,结果准确,可作为制备猪硫酸软骨素和检测含量的方法．     

葡糖胺、硫酸软骨素及二者联合使用治疗痛性膝关节炎

背景:葡糖胺和硫酸软骨素可用于治疗骨关节炎。进行一项多中心、双盲、安慰剂和塞来考昔对照的葡糖胺和(或)软骨素关节炎干预试验(G AIT),以评价其对骨关节炎膝部疼痛的疗效和安全性。方法:1583例症状性膝关节炎患者每日随机接受1500m g葡糖胺、1200m g硫酸软骨素、葡糖胺加硫酸软骨素、200m g塞来考昔或安慰剂治疗24周。允许对乙酰氨基酚治疗痛觉丧失的每日最大剂量为4000m g。根据膝痛严重程度对患者进行分组犤轻度(n=1229)vs中重度(n=354)犦。主要观察指标为膝痛从基线到第24周时减轻20%。结果患者的平均年龄为59岁,64%为女性。总体而…