Apelin-13对高糖诱导的脐静脉内皮细胞凋亡的保护作用北大核心CSCD

目的探讨Apelin-13对高糖环境下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护机制是否与沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)相关。方法实验分组分为4部分。实验Ⅰ,将HUVECs分为6组,分别为空白组(5.5 mmol·L^(-1)糖)、模型组(33 mmol·L^(-1)高糖)、各实验组(分别用1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7)和1×10^(-6)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)。实验Ⅱ,将HUVECs分为4组,分别为空白组(5.5 mmol·L^(-1)糖)、模型组(33 mmol·L^(-1)高糖)、对照组(1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin)、实验组(用1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)糖)。实验Ⅲ,将HUVECs分为2组,分别为空载质粒组(1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)和APJ低表达组(1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)。以上3个实验均用Western blot法检测高糖环境下SIRT1蛋白的表达水平。实验Ⅳ,将HUVECs分为5组,分别为空白组(5.5 mmol·L^(-1))、模型组(33 mmol·L^(-1)高糖)、实验组(用1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)、抑制剂组(33 mmol·L^(-1)高糖+1×10^(-5)mol·L^(-1)EX527)、干预组(用1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖+1×10^(-5)mol·L^(-1)EX527)。用流式细胞术检测HUVECs的凋亡率。结果实验Ⅰ,空白组、模型组和1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7)和1×10^(-6)mol·L^(-1)Apelin实验组的SIRT1蛋白相对表达量分别为0.51±0.06,0.30±0.05,1.02±0.07,1.12±0.10,1.14±0.10和1.05±0.10,模型组的SIRT1蛋白相对表达量与4个实验组和空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验Ⅱ,空白组、模型组、对照组和实验组的SIRT1蛋白相对表达量分别为0.82±0.09,0.59±0.05,0.77±0.05和0.72±0.06;模型组的SIRT1蛋白相对表达量与实验组和空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验Ⅲ,空载质粒组和APJ低表达组的SIRT1蛋白表达水平分别为0.94±0.13和0.71±0.17,差异有统计学意义(P<0.05)。实验Ⅳ,空白组、模型组、实验组、抑制剂组和干预组的细胞凋亡率分别为(13.60±0.92)%,(24.63±1.25)%,(12.73±1.00)%,(25.68±1.42)%和(10.25±2.30)%。模型组的细胞凋亡率与空白组和实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);抑制剂组的细胞凋亡率与干预组相比,差异有统计学意义(P<0.05);干预组的细胞凋亡率与实验组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Apelin-13减轻高糖诱导的脐静脉内皮细胞凋亡的机制与SIRT1信号通路无关。     

丹参多酚酸盐治疗心绞痛患者的临床研究

目的观察丹参多酚酸盐对心绞痛患者血脂、E选择素及炎性因子的影响。方法将我院心内科收治的106例心绞痛患者,随机分为试验组53例和对照组53例。对照组给予常规治疗;试验组在对照组基础上给予丹参多酚酸盐,每次250 mL,每天1次,静脉滴注。2组均治疗4周。比较2组患者的血脂、炎性指标、可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)、E-选择素、P-选择素、血小板聚集率及药物不良反应发生情况。结果治疗后,试验组患者5μmol·L-1腺苷二磷酸(ADP)诱导剂血小板聚集率、30μmol·L-1肾上腺素(EP)诱导剂血小板聚集率、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、sCD40L、E-选择素及P-选择素水平为(50.11±14.06)%,(27.14±16.51)%,(271.38±42.15)ng·L^-1,(390.58±104.47)μg·L^-1,(7.41±1.58)mg·L^-1,(3.75±1.03)mmol·L^-1,(1.85±0.61)mmol·L^-1,(3.24±0.82)mmol·L^-1,(1.75±0.64)mmol·L^-1,(8.27±2.41)μg·L^-1,(43.51±13.08)μg·L^-1,(223.74±39.17)μg·L^-1。对照组的上述指标分别为(63.28±10.17)%,(34.06±18.15)%,(310.75±59.37)ng·L^-1,(500.16±117.35)μg·L^-1,(9.12±2.76)mg·L^-1,(4.78±1.11)mmol·L^-1,(2.54±0.79)mmol·L^-1,(4.15±0.91)mmol·L^-1,(1.33±0.75)mmol·L^-1,(10.06±3.22)μg·L^-1,(53.34±14.58)μg·L^-1,(246.25±42.51)μg·L^-1,差异均有统计学意义(均P<0.05)。2组药物不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论丹参多酚酸盐治疗心绞痛,可以有效降低患者炎性反应,并起到抗凝降脂的作用。     

红芪多糖对ob/ob小鼠肝脂质合成影响

目的研究红芪多糖(HPS)对ob/ob小鼠肝组织固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)和肝脂质从头合成相关蛋白的影响。方法按照体重将ob/ob雄性小鼠随机分为5组:模型组、阳性药对照组和高、中、低3个剂量实验组,每组10只;将同品系正常C57BL/6野生型雄性小鼠10只作为正常组。阳性药对照组灌胃硫辛酸30 mg·kg^-1·d^-1,高、中、低3个剂量实验组灌胃HPS 200,100,50 mg·kg^-1·d^-1,均连续灌胃8周。以酶联免疫吸附法检测各组小鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)含量。用逆转录-PCR法和蛋白质印迹法分别检测肝组织中SREBP-1、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、脂肪酸合成酶(FAS)和硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)基因量(2-△△Ct值)和蛋白的表达。结果正常组、模型组、阳性药对照组和高、中、低3个剂量实验组的TC含量分别为(1.69±0.16),(3.97±0.34),(1.77±0.25),(1.86±0.63),(2.20±0.75)和(3.58±0.25)μmol·L^-1;此6组的TG含量分别为(0.65±0.03),(1.32±0.04),(0.84±0.04),(0.86±0.04),(0.97±0.05)和(1.20±0.03)μmol·L^-1;此6组的LDL含量分别为(0.55±0.13),(1.68±0.21),(0.72±0.28),(0.98±0.15),(1.25±0.23)和(1.47±0.34)μmol·L^-1;此6组的HDL含量分别为(2.05±0.02),(1.15±0.04),(2.00±0.04),(1.98±0.02),(1.63±0.04)和(1.37±0.06)μmol·L^-1;此6组SREBP-1c基因表达量分别为1.00±0.00,1.39±0.02,1.07±0.15,1.03±0.05,1.14±0.04和1.25±0.08;此6组的FAS基因表达量分别为1.00±0.00,1.45±0.10,1.04±0.11,1.07±0.05,1.18±0.05和1.27±0.06;此6组的ACC1基因表达量分别为1.00±0.00,1.27±0.05,1.02±0.12,1.03±0.06,1.11±0.03和1.21±0.04;此6组SCD基因表达量分别为1.00±0.00,1.22±0.08,1.00±0.07,1.01±0.11,1.14±0.04和1.19±0.03。上述指标:模型组与正常组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);阳性药对照组和高、中2个剂量实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。蛋白表达结果的趋势与基因表达基本一致。结论HPS可能通过调控SREBP-1及其下游肝脂质从头合成关键酶来改善ob/ob小鼠肝脂肪变性。     

红景天苷对过氧化氢诱导SHSY-5Y细胞氧化应激损伤的影响北大核心CSCD

目的探究红景天苷通过沉默信息调节因子2相关酶1(sirtuin 1,Sirt1)抑制过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的神经母细胞瘤细胞SHSY-5Y氧化应激损伤的机制。方法将对数生长期的人神经母细胞瘤细胞SHSY-5Y随机分为空白组、模型组和低、中、高剂量实验组。空白组给予生理盐水处理,模型组给予100μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)处理,低、中、高剂量实验组先分别用1,10,100μmol·L^(-1)红景天苷处理后,再用100μmol·L^(-1)过氧化氢处理。用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,以流式细胞术检测细胞凋亡率,以酶联免疫吸附(ELISA)法检测一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平,以实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)、免疫荧光技术及蛋白质印迹(Western blot)法检测Sirt1 mRNA和蛋白的表达水平。结果空白组、模型组和低、中、高剂量实验组的细胞活力分别为(100.00±5.99)%,(22.89±4.17)%,(30.75±6.01)%,(60.69±9.37)%,(80.81±4.38)%;凋亡率分别为(6.77±0.72)%,(68.53±11.07)%,(57.01±6.33)%,(46.41±8.54)%,(20.12±3.60)%;NOS水平分别为(0.41±0.08),(4.99±0.32),(4.24±0.24),(2.95±0.19),(2.33±0.25)ng·mL^(-1);SOD水平分别为(24.15±1.92),(10.65±0.78),(13.62±1.52),(17.01±1.63),(21.38±0.54)U·mg^(-1);MDA水平分别为(6.31±0.89),(15.40±1.03),(11.77±0.90),(9.95±1.01),(7.51±1.13)ng·mL^(-1);8-OHdG水平分别为(3.67±0.30),(10.99±1.04),(9.72±1.35),(6.89±0.33),(4.62±0.66)μmol·mg^(-1);模型组和空白组的上述指标比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);低、中、高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论红景天苷对过氧化氢诱导SHSY-5Y细胞氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能与Sirt1蛋白激活相关。     

L型钙通道介导垂体腺苷酸环化酶激活肽38对大鼠胰岛素分泌的促进作用及其机制研究

目的研究垂体腺苷酸环化酶激活肽38(PACAP38)对大鼠胰岛素分泌的影响及其机制。方法 (1)将大鼠胰岛和胰岛细胞分为4组:正常组(2.8 mmol·L^-1葡萄糖)、模型组(8.3 mmol·L^-1葡萄糖)和低,高2个剂量实验组(模型组+1,10 nmol·L^-1 PACAP38),测定不同干预下的胰岛素分泌量。(2)将大鼠胰岛和胰岛细胞分为5组:正常组、模型组、高剂量实验组、阿折地平(L型钙通道阻滞药)组(模型组+0.1μmol·L^-1阿折地平)和联合组(阿折地平组+高剂量实验组),用胰岛素分泌实验和钙成像技术分别检测阿折地平干预下胰岛素分泌量和β细胞内Ca^2+浓度(F-F0值)水平。结果 (1)正常组、模型组和低、高2个剂量实验组的胰岛素分泌量分别为(86.74±4.05),(165.63±5.26),(175.03±5.21)和(209.28±4.13)μu·mL^-1,模型组与正常组相比,胰岛素分泌量明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);高剂量实验组与模型组相比,胰岛素分泌显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)正常组、模型组、高剂量实验组、阿折地平组和联合组的胰岛素分泌量分别为(46.93±4.58),(79.11±8.02),(135.65±3.68),(72.78±7.95),(78.51±5.13)μu·mL^-1;这5组的Ca^2+浓度分别为3.00×10^-2±0.12,6.57×10^-2±0.35,1.40×10^-1±0.46,7.71×10^-2±0.42,8.00×10^-2±0.43,上述指标:模型组与正常组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.001);联合组与高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.001);阿折地平与模型组比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 PACAP38通过作用于L型钙通道,使β细胞内Ca^2+浓度升高,最终促进胰岛素分泌。     

银杏素调节NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路对高糖诱导肾小球内皮细胞焦亡的影响

目的 探讨银杏素调节核转录因子кB/Nod样受体蛋白3/半胱天冬酶-1(NF-κB/NLRP3/Caspase-1)信号通路对高糖诱导肾小球内皮细胞焦亡的影响。方法 将肾小球内皮细胞(HRGECs)作为研究对象，将HRGECs细胞分为正常组(正常5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)、银杏素低剂量组(30 mmol/L葡萄糖+5μmol/L银杏素)、银杏素中剂量组(30 mmol/L葡萄糖+10μmol/L银杏素)、银杏素高剂量组(30 mmol/L葡萄糖+20μmol/L银杏素)、BAY组[(30 mmol/L葡萄糖+20μmol/L银杏素+2.5μmol/L NF-κB的特异性抑制剂BAY 11-7085(BAY)]、MCC950组(30 mmol/L葡萄糖+20μmol/L银杏素+10μmol/L NLRP3抑制剂MCC950)、VX-765组(30 mmol/L葡萄糖+20μmol/L银杏素+20μmol/L Caspase-1抑制剂VX-765),各组细胞加入相应试剂后共培养24 h; MTT法检测细胞存活率；流式细胞术检测细胞焦亡情况；试剂盒法测定细胞...     

沙利度胺对胶质瘤U251细胞增殖及血管内皮生长因子表达的影响北大核心CSCD

目的探究不同浓度沙利度胺对人胶质瘤U251细胞增殖和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法用0,10,50,100,200μmol·L^(-1)沙利度胺分别处理人胶质瘤U251细胞,用噻唑蓝(MTT)法分检测24、48和72 h的细胞活力,用流式细胞术各组细胞凋亡情况,用蛋白质印迹(Western blot)法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达的影响,用酶联免疫吸附(ELISA)法测定细胞培养上清液中VEGF水平。结果0,10,50,100,200μmol·L^(-1)沙利度胺组细胞凋亡率分别为(3.21±0.82)%,(28.21±4.23)%,(37.17±2.39)%,(68.12±3.28)%,(79.29±3.26)%,Bcl-2的表达分别为1.42±0.11,1.17±0.12,0.95±0.06,0.68±0.07,0.24±0.06,差异均有统计学意义(均P<0.05);干预72 h,0,10,50,100,200μmol·L^(-1)沙利度胺组细胞活性分别为0.89±0.15,0.56±0.08,0.43±0.26,0.22±0.19,0.14±0.12,VEGF水平分别为(395.63±9.47),(161.12±6.47),(112.52±6.16),(98.81±9.92),(79.92±3.48)pg·mL^(-1),差异均有统计学意义(均P<0.05),且具有剂量依赖性。结论沙利度胺对胶质瘤U251细胞具有显著的抑制作用,可以显著诱导细胞凋亡并抑制VEGF的表达。     

β-蜕皮甾酮对高糖诱导的大鼠成骨细胞增殖、分化和凋亡的影响

目的探讨β-蜕皮甾酮对高糖诱导的大鼠成骨细胞增殖、分化和凋亡的影响及分子机制。方法将大鼠成骨细胞随机分为空白组(5.5 mmol·L-1葡萄糖)、模型组(25 mmol·L-1葡萄糖)、低、中、高剂量实验组(1,5,25μmol·L-1β-蜕皮甾酮+25 mmol·L-1葡萄糖)、p38 MAPK激活组(10μmol·L-1 anisomycin+25μmol·L-1β-蜕皮甾酮+25 mmol·L-1葡萄糖)、阴性对照组(与anisomycin等量的PBS+25μmol·L-1β-蜕皮甾酮+25 mmol·L-1葡萄糖)。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡情况;用蛋白质印迹法检测Run相关基因2(RunX2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)和磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)蛋白表达。结果空白组、模型组、低、中、高剂量实验组、阴性对照组、p38 MAPK激活组大鼠成骨细胞活性分别为(102.41±5.34)%,(68.57±5.25)%,(75.36±7.06)%,(79.13±8.24)%,(83.20±8.89)%,(83.17±8.93)%,(71.11±6.16)%;细胞凋亡率分别为(4.23±0.56)%,(18.57±1.96)%,(13.08±1.34)%,(10.30±0.95)%,(8.25±1.08)%,(8.36±1.12)%,(16.48±1.56)%;RunX2蛋白表达水平分别为0.81±0.07,0.31±0.04,0.45±0.06,0.55±0.04,0.61±0.08,0.63±0.07,0.41±0.05;ALP蛋白表达水平分别为0.75±0.08,0.38±0.05,0.49±0.07,0.59±0.05,0.65±0.08,0.68±0.07,0.44±0.06;OCN蛋白表达水平分别为0.69±0.05,0.28±0.03,0.34±0.05,0.47±0.04,0.45±0.05,0.46±0.05,0.31±0.04;p-p38 MAPK蛋白表达水平分别为0.22±0.04,0.84±0.09,0.59±0.06,0.41±0.04,0.32±0.04,0.32±0.07,0.74±0.07;模型组与空白组相比,低、中、高剂量实验组与模型组相比,p38 MAPK激活组与阴性对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论β-蜕皮甾酮可能通过抑制p38 MAPK信号通路促进大鼠成骨细胞增殖、分化,抑制细胞凋亡。     

MicroRNA-136在妊娠糖尿病患者血清中的表达及其对高糖诱导的滋养层细胞增殖和侵袭的影响北大核心CSCD

目的研究微小RNA-136(miR-136)在妊娠糖尿病患者血清中的表达,及其对高糖诱导的滋养层HTR8-S/Vneo细胞损伤的保护作用。方法选择在本院进行产检和住院分娩的妊娠糖尿病患者45例(妊娠糖尿病组),并选择同期在本院产检和分娩的健康产妇45例作为对照组,用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组血清中miR-136的表达。将HTR8-S/Vneo细胞分为正常组(5 mmol·L^(-1)葡萄糖处理)、高糖组(25 mmol·L^(-1)葡萄糖处理)、第1转染组(给予高糖处理,并转染抑制剂阴性对照)和第2转染组(给予高糖处理,并转染miR-136抑制剂)。用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞的增殖;用划痕实验检测细胞的迁移;用Transwell小室法评估细胞的侵袭能力。结果对照组和妊娠糖尿病组产妇血清中miR-136的相对表达水平分别为1.09±0.56,2.31±0.74,妊娠糖尿病组血清中miR-136的表达水平显著高于对照组(P<0.05)。正常组、高糖组、第1转染组、第2转染组细胞的存活率为(100.00±0.00)%,(71.26±3.08)%,(69.34±2.75)%,(92.53±4.13)%;迁移率为(76.32±4.87)%,(46.81±2.49)%,(51.59±4.32)%,(67.94±3.18)%;细胞的侵袭数分别为(58.00±3.61),(31.33±2.52),(29.33±2.08)和(52.00±3.60)个。高糖组与正常组比较,第2转染组与第1转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-136在妊娠糖尿病患者血清中高表达,下调miR-136可促进高糖诱导的HTR8-S/Vneo细胞增殖、迁移和侵袭。     

鹅不食草心菊内酯对肝星状细胞活化的抑制作用机制研究

目的研究鹅不食草心菊内酯(helenalin)对LX-2人肝星状细胞(HSCs)活化的抑制作用及其机制。方法用白细胞介素-1β(IL-1β)20 ng·mL^-1刺激LX-2细胞建立体外细胞模型,另取未刺激细胞作为正常组。将损伤细胞分为5组:模型组、阳性对照组[LY294002(磷脂酰肌醇3激酶/丝苏氨酸蛋白激酶通路抑制剂)20μmol·L^-1]和高、中、低3个剂量实验组(helenalin:2.0,1.0,0.5μmol·L^-1),均干预24 h。用四甲基偶氮唑盐法检测细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时荧光定量-PCR法检测微小RNA-21(miR-21)基因的表达,蛋白质印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原和Ⅲ型胶原蛋白的表达(光密度值)。结果Helenalin作用24 h时的IC₅₀为6.98μmol·L^-1,根据细胞的增殖抑制率,选择低于IC₅₀的3个浓度(2.0,1.0,0.5μmol·L^-1)作为后续实验的给药浓度。正常组、模型组和高、中、低3个剂量实验组的miR-21基因相对表达量分别为0.99±0.15,1.71±0.07,1.03±0.04,1.01±0.02和1.19±0.12;正常组、模型组、阳性对照组和高、中、低3个剂量实验组的总凋亡率分别为(1.45±0.33)%,(1.93±0.55)%,(23.33±0.49)%,(19.77±0.65)%,(10.70±0.75)%和(3.01±0.38)%;上述6组的α-SMA蛋白相对表达量分别为0.19±0.02,0.26±0.04,0.15±0.02,0.15±0.02,0.18±0.04和0.20±0.04;上述6组的I型胶原蛋白相对表达量分别为0.15±0.02,0.39±0.05,0.19±0.01,0.24±0.04,0.37±0.04和0.38±0.06;上述6组的Ⅲ型胶原蛋白相对表达量分别为0.07±0.01,0.31±0.04,0.09±0.01,0.05±0.01,0.05±0.01和0.18±0.02。上述指标:模型组与正常组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01);3个剂量实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论Helenalin抗肝纤维化的作用机制可能与抑制肝星状细胞的增殖活化、诱导细胞凋亡和减少活化细胞内胶原的合成并下调miR-21基因的表达有关。     

利拉鲁肽对糖尿病大鼠心肌损伤的改善作用研究

目的观察利拉鲁肽(LRG)能否通过调控NOD样受体家族3(NLRP3)炎性小体延缓2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌病变及其机制。方法按照体重将大鼠随机分为3组:正常组、模型组和实验组,每组10只。实验组皮下注射LRG 200μg·kg ^-1,正常组和模型组给予等剂量0.9%NaCl,1次/日,连续4周。以试剂盒法测定肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)水平;计算心脏质量指数(HMI)、左心室质量指数(LVWI);以免疫印迹法测定心肌组织NLRP3和沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白表达水平(灰度值)。结果正常组、模型组和实验组CK分别为(370.85±38.73),(615.12±52.57)和(493.49±45.32)U·mL^-1;这3组的LDH分别为(686.12±63.05),(1161.60±154.05)和(885.53±109.62)U·L^-1;这3组的HMI分别为(2.22±0.25),(3.04±0.16)和(2.51±0.25)mg·g^-1;这3组的LVWI分别为(1.59±0.18),(2.24±0.16)和(1.85±0.26)mg·g^-1;这3组的NLRP3蛋白表达分别为0.31±0.05,0.81±0.05和0.55±0.11;这3组的SIRT1蛋白表达分别为0.70±0.10,0.21±0.03和0.49±0.05;上述指标:模型组与正常组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01);实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 LRG能够延缓T2DM心肌病变,其机制可能与激活SIRT1从而抑制NLRP3炎性小体的活化及减轻心肌炎性损伤有关。     

虾青素对过氧化氢诱导胎盘滋养细胞HTR-8/SVneo的影响

目的观察虾青素通过烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶/活性氧(ROS)信号通路对过氧化氢(H2O2)诱导人胎盘滋养细胞HTR-8/SVneo的影响。方法实验分为空白组、模型组和实验组,每组8个复孔;实验组HTR-8/SVneo细胞预先以10 nmol·L^-1虾青素处理24 h,之后实验组和模型组细胞均以250μmol·L-1H2O2作用24 h;空白组未进行任何药物干预。以噻唑蓝(MTT)法检测各组HTR-8/SVneo细胞增殖情况,以DCF-DA荧光染色检测各组HTR-8/SVneo细胞内ROS水平,检测各组HTR-8/SVneo细胞培养上清中乳酸(LDH)及氧化应激指标含量,以蛋白质印迹法检测各组细胞NADPH氧化酶4(NOX4)、p22phox蛋白表达情况。结果干预后24 h,空白组、模型组及实验组HTR-8/SVneo细胞内ROS荧光强度值分别为2.76±0.43,34.15±2.34,15.61±1.85,LDH分别为(756.24±31.05),(1785.46±34.69),(1235.26±26.75)U·L^-1,超氧化物歧化酶(SOD)分别为(23.56±2.24),(10.04±2.02),(15.16±3.08)U·mg^-1,丙二醛(MDA)分别为(0.46±0.14),(0.96±0.21),(0.68±0.13)U·mg^-1,Nox4蛋白相对表达量分别为0.32±0.04,0.89±0.06,0.64±0.03,p22phox蛋白相对表达量分别为0.15±0.03,0.75±0.04,0.49±0.02,模型组分别与空白组和实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论虾青素对H2O2诱导人胎盘滋养细胞HTR-8/SVneo氧化应激损伤具有保护作用,可能与干扰NADPH氧化酶/ROS信号通路活性有关。     

生长抑素与乌司他丁联合肠内营养治疗重症急性胰腺炎患者的临床研究

目的观察生长抑素与乌司他丁联合肠内营养对重症急性胰腺炎(SAP)患者血管内皮功能及肠黏膜屏障的影响。方法将102例SAP患者,随机分为对照组和试验组,各51例。2组均予生长抑素6 mg,用微量泵进行24 h持续静脉滴注,乌司他丁起始剂量每次10万单位,溶于5%葡萄糖注射液或0.9%NaCl注射液500 mL中静脉滴注,每次1~2 h,每天1~3次,根据患者状况改善情况逐渐减量。对照组给予常规静脉营养支持;试验组给予肠内营养支持。2组均治疗2周。比较2组患者治疗前后炎性因子、血管内皮功能、肠黏膜屏障指标、白蛋白、淀粉酶及急性生理与慢性健康评分(APACHE-Ⅱ)。结果治疗后,试验组白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血栓素B2(TXB2)、血管性血友病因子(vWF)、内皮素(ET)、D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)、果糖/甘露醇(L/M)、淀粉酶及APACHE-Ⅱ、白蛋白(ALB)和一氧化氮(NO)水平分别为(18.94±4.05)pg·mL^-1,(22.73±4.29)pg·mL^-1,(15.53±3.31)pg·mL^-1,(211.52±11.24)pg·mL^-1,(103.73±14.83)%,(102.51±11.06)pg·mL^-1,(5.27±6.51)μg·mL^-1,(2.05±0.96)U·mL^-1,0.13±0.05,(428.59±52.35)U·L^-1,6.63±2.11,(4.24±1.18)g·L^-1,(10.71±3.94)U·mL^-1。对照组的上述指标分别为(27.51±6.27)pg·mL^-1,(36.58±5.61)pg·mL^-1,(19.15±4.08)pg·mL^-1,(274.94±13.08)pg·mL^-1,(151.62±14.85)%,(122.82±12.59)pg·mL^-1,(8.14±7.29)μg·mL^-1,(3.41±1.02)U·mL^-1,0.22±0.09,(861.81±74.83)U·L^-1,8.54±2.28,(2.65±1.09)g·L^-1,(5.62±2.08)U·mL^-1,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组和试验组的药物不良反应发生率分别为3.92%和0,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论生长抑素与乌司他丁联合肠内营养可以有效抑制SAP患者体内炎症反应,促进血管内皮功能的恢复和肠黏膜屏障的修复。     

盐酸氨溴索对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺纤维化的影响

目的研究盐酸氨溴索对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠肺纤维化的影响及作用机制。方法将60只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(n=20)、模型组(n=20)及实验组(n=20)。模型组及实验组大鼠均用气管滴注3 mg·kg^-1脂多糖(LPS)100μL,构建ARDS大鼠模型。造模成功后,实验组大鼠腹腔注射盐酸氨溴索注射液40.0 mg·kg^-1·d^-1,对照组与模型组则注射等量生理盐水,连续干预21 d。用酶联免疫吸附法检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平及羟脯氨酸(HYP)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物(GSH-Px)含量,用蛋白质印迹法检测大鼠肺组织中核因子-κB(NF-κB)P65蛋白表达水平。结果对照组、模型组及实验组大鼠肺组织炎性因子TNF-α分别为(10.87±1.22),(36.93±3.14),(17.86±2.38)pg·g^-1,IL-6分别为(14.73±1.56),(37.12±4.61),(20.96±2.03)pg·g^-1,HYP分别为(319.55±46.37),(743.22±91.31),(415.38±57.88)μg·g^-1;MDA分别为(12.78±1.96),(33.45±5.16),(18.02±3.34)μmol·g^-1;SOD分别为(69.76±10.32),(28.63±2.89),(56.12±5.33)kU·g^-1,GSH-Px分别为(46.23±4.81),(15.04±2.39),(37.73±3.68)kU·g^-1,大鼠肺组织中NF-κB P65蛋白相对表达量分别为0.09±0.04,0.81±0.15,0.34±0.11。模型组和实验组与对照组比,以上各指标差异均有统计学意义(均P<0.05);实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论盐酸氨溴索可降低炎症因子水平、减少氧自由基生成,抑制肺组织NF-κB P65蛋白表达,进而减轻ARDS大鼠肺损伤及肺纤维化。     

雷诺嗪对高脂高糖诱导的胰岛β细胞NIT-1功能损伤的保护作用

目的 观察雷诺嗪对高糖高脂诱导的胰岛β细胞NIT-1三酰甘油(TG)含量及脂肪酸转位酶(FAT/CD36)表达的增加和胰岛素分泌功能损伤的保护作用. 方法 用放免法检测高糖高脂及5 μmol.L^-1雷诺嗪共同作用后细胞基础胰岛素分泌(BIS)和葡萄糖刺激后胰岛素分泌(GSIS)水平的变化,酶法检测胞内TG含量,Western blot检测细胞FAT/CD36蛋白的表达. 结果正常组、高糖高脂组和雷诺嗪组的胞内TG含量分别为(2.31±0.05),(5.17±0.03)和(3.63±0.01) mmol.L^-1;BIS分别为(0.67±0.03),(0.32±0.07),(0.51±0.03)ng.mL^-1,GSIS分别为(1.68±0.17),(1.35±0.08),(1.47±0.11)ng.mL-1;FAT/CD36的相对表达量比值A1分别为(0.53±0.08),(1.78±0.05)和(1.07±0.06). 与正常组比较,高糖高脂组GSIS降低,细胞内TG含量增多. FAT/CD36蛋白表达显著增加(P<0.05). 而雷诺嗪与高糖高脂的共同作用24 h后可以显著升高GSIS,同时降低胞内TG含量,减少FAT/CD36蛋白. 结论 雷诺嗪对高糖高脂导致的胰岛细胞NIT-1分泌功能损伤有保护作用,同时可以减少胞内脂质沉积,其分子机制可能是通过脂肪酸转位酶FAT/CD36蛋白表达的改变.     

稳定同位素非衍生化UPLC-MS/MS法快速测定重症肺炎患者血清氨基酸的变化

目的建立快速测定人血清中非衍生化的20种氨基酸的超高效液相色谱串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)分析方法,并用于检测重症肺炎患者血清氨基酸变化。方法用Acquity BEH Amide色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.7μm),以稳定同位素标记的氨基酸作为内标,流动相为乙腈-水-20 mmol·L^-1乙酸铵-0.5%甲酸溶液,梯度洗脱。选择重症肺炎者16例与健康者14例进行检测。结果在所设定的色谱条件下,基质效应不影响测定结果,各氨基酸在标准曲线范围内线性关系良好,相关系数均r2>0.99。准确度、批内和批间精密度均RSD<15%,在测定过程中稳定性符合要求。重症肺炎组与健康组相比,谷氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、丝氨酸和组氨酸水平显著升高,谷氨酰胺、苏氨酸和赖氨酸水平显著降低,其中这2组的谷氨酸含量分别为(177.49±65.38)和(77.43±31.83)μmol·L^-1;这2组的谷氨酰胺含量分别为(222.49±100.36)和(896.09±173.93)μmol·L^-1,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论该方法可用于重症肺炎患者血清中氨基酸的含量测定。