生活饮用水对石榴皮多酚提取纯化工艺的影响

目的 考察水质对石榴皮多酚提取纯化工艺的影响。方法 分别用生活饮用水和纯化水对石榴皮粉末进行提取分离纯化,对其流分中的石榴皮多酚类物质进行高效液相法(HPLC)测定。结果 生活饮用水对石榴皮粉末提取纯化得到安石榴苷含量为2.65%;纯化水对石榴皮粉末提取纯化得到安石榴苷含量为78.79%。 结论 生活饮用水对石榴皮多酚提取纯化的影响极大,会加速石榴皮多酚类物质的氧化。     

安石榴苷的纯化及对金黄色葡萄球菌抑菌作用的研究

采用超声波辅助法从石榴皮中提取单宁类物质,并用Amberlite XAD-16大孔吸附树脂进行柱层析,以甲醇梯度洗脱法进行纯化,经高效液相色谱对其组分进行分析后,以安石榴苷含量最高的组分对金黄色葡萄球菌进行抑菌实验,分别测得抑菌圈直径和最小抑菌浓度,并检测了安石榴苷对金黄色葡萄球菌生长曲线的影响。液相结果表明,随着洗脱剂浓度的升高,安石榴苷的含量呈现先升高后降低的趋势,最高含量达79.6%;抑菌结果表明,安石榴苷纯化物对金黄色葡萄球菌有明显的抑菌效果,最小抑菌浓度为0.1mg/m L,安石榴苷纯化物以剂量依赖的形式抑制金黄色葡萄球菌的生长。     

石榴皮多酚纯化及其抗氧化活性表征

目的：研究石榴皮多酚的纯化技术以及对石榴皮多酚提取物进行体外抗氧化活性表征。方法：选用国产10种大孔吸附树脂对超声波辅助提取所得的石榴皮粗提物进行分离纯化,并研究吸附动力学特征。采用4种常用体外抗氧化评价方法对纯化的石榴皮多酚进行活性表征。结果：大孔吸附树脂D160和XRD-6使石榴皮多酚粗提物中多酚纯度由35.05%提高到87.81%,其中,安石榴苷的纯度由原来的21.25%提高到73.96%。体外抗氧化实验表明,抗氧化活性与石榴皮提取物中多酚的纯度,尤其是安石榴苷的纯度,呈明显的剂量-效应关系;结论：大孔吸附树脂可以应用于石榴皮多酚的分离纯化;安石榴苷是石榴皮多酚中起抗氧化活性的关键成分。     

石榴皮多酚的提取、制备及其应用研究进展

石榴皮作为一种可再生资源,其含有丰富的多酚,在食品中具有广阔的应用前景。该文对石榴皮多酚的提取、纯化、检测和应用研究现状进行综述;并介绍石榴皮中最重要的两种多酚——安石榴苷和鞣花酸的研究现状,特别是对安石榴苷的水解、鞣花酸的提取及制备等进行详细阐述;并以大白鼠为模型,阐明安石榴苷体内代谢的一般途径。     

石榴皮安石榴苷提取工艺及抗氧化活性研究

以石榴皮为研究对象,用毒害小的乙醇溶液为提取溶剂,以安石榴苷为分离目标,用高效液相色谱法检测安石榴苷含量,采用Box-Behnken中心组合设计原理设计试验,应用响应面法优化提取工艺条件,通过考察·OH、O_2~-·、DPPH·清除能力,评价提取物的体外抗氧化性。响应面法优化结果显示,安石榴苷提取的最优条件为:乙醇浓度60%,料液比1:25(g/mL),提取温度60℃,提取时间6 h;在此条件下进行验证,安石榴苷的提取量可达到70.89g/kg,各因素对安石榴苷提取的影响顺序为:乙醇浓度提取温度提取时间料液比;自由基清除试验显示,安石榴苷粗提物可以较好地清除·OH、O_2~-·、DPPH·,且对各自由基清除能力明显高于石榴皮原料。     

田口法优化石榴皮中3种活性成分的提取工艺

采用田口法优化乙醇回流提取石榴皮中3种酚酸——安石榴林、安石榴苷和鞣花酸,并使3种成分产率达到最大。通过单因素试验和田口法优化显著影响石榴皮提取的因素,包括乙醇体积分数、提取温度、提取时间、液料比、粒径和提取次数。结果表明,优化后取得的乙醇体积分数、提取温度、提取时间、液料比、粒径和提取次数分别为20%、70℃、2 h、50︰1(mL/g)、0.125 mm和提取2次。在这些最佳条件下,从1 g干燥的石榴皮粉末中可获得17.89±0.27 mg安石榴林、498.66±2.13 mg安石榴苷、7.30±0.05 mg鞣花酸,与预测值17.94 mg安石榴林、497.44 mg安石榴苷、7.26 mg鞣花酸符合。因此,达到利用田口法使安石榴林、安石榴苷和鞣花酸3种成分产率最大的目标。     

大孔吸附树脂及高速逆流色谱分离纯化石榴皮中安石榴苷

为了从石榴皮中制备高纯度安石榴苷,采用大孔吸附树脂和高速逆流色谱分离纯化石榴皮中安石榴苷。响应面分析结果显示,最优纯化条件为:吸附液浓度1.0 mg/mL,吸附时间50 min,吸附流速1.0 mL/min,在此条件下,吸附率达到86.16%,各因素对吸附率影响顺序为吸附流速吸附液浓度吸附时间;洗脱乙醇体积分数40%,洗脱时间150 min,洗脱流速1.0 mL/min,在此条件下,洗脱率达到71.89%,各因素对洗脱率影响顺序为乙醇体积分数洗脱流速洗脱时间;以正丁醇-三氟乙酸-水(100︰1︰100)为溶剂体系,上相为流动相,下相为固定相,流速1.5 mL/min,转速800 r/min,可以得到纯度为90%以上的安石榴苷纯化产物。该工艺可为石榴皮综合利用提供技术参考。     

响应面优化石榴皮安石榴苷提取工艺及其抗氧化活性研究

为研究石榴皮安石榴苷的超声提取工艺及体外抗氧化活性,在单因素试验的基础上,采用响应面方法（response surface methodology,RSM）,研究乙醇浓度、提取时间、料液比、超声功率及提取次数对提取石榴皮中安石榴苷含量的影响,优化安石榴苷的超声辅助提取工艺;通过测定其对DPPH自由基、羟基自由基（·OH）、超氧阴离子自由基（·O2-）和ABTS+自由基的清除能力,对安石榴苷提取物的体外抗氧化活性进行研究。结果显示,乙醇浓度和提取时间均对安石榴苷的含量有显著影响,其中乙醇浓度影响最大,料液比影响最小,最佳工艺条件为：乙醇浓度63%、料液比1∶26（g/mL）、超声功率200 W、提取时间40 min,提取1次,在此条件下安石榴苷含量达到（88.16±0.10）mg/g。体外抗氧化试验结果表明,安石榴苷提取物对DPPH自由基、·OH、·O2-和ABTS+自由基的IC50分别为101.0、227.0、341.6、35.81 μg/mL。其抗氧化活性均在一定浓度范围呈剂量效应关系。     

大孔吸附树脂分离石榴皮中安石榴苷工艺研究

采用大孔吸附树脂分离石榴皮中安石榴苷。对比吸附率和解吸率,筛选大孔吸附树脂;考察梯度洗脱和等度洗脱分离纯化效果,选择分离方式;通过单因素试验,确定分离纯化参数。试验结果显示:选用LX-3010树脂在长径比为5∶1树脂柱中以等度洗脱方式分离纯化可以得到较高的安石榴苷提取量。单因素结果显示,树脂分离条件为:吸附液浓度2.0 mg/m L,吸附时间30 min,吸附流速1.5 m L/min;洗脱乙醇浓度40%,洗脱时间180 min,洗脱流速1.5 m L/min。在此条件下,可以得到纯度为80.12%的安石榴苷纯化产物。     

石榴皮多酚体外抗脂质过氧化作用研究

为研究石榴皮多酚的抗脂质过氧化作用及起关键作用的成分,采用3个脂质过氧化研究体系,即卵黄体系、低密度脂蛋白体系和大鼠肝脏匀浆体系,利用硫代巴比妥酸法测定了石榴皮多酚纯化物、安石榴苷标准品和鞣花酸标准品对体外金属离子诱导性脂质过氧化的抑制作用。结果表明:安石榴苷,鞣花酸和石榴皮多酚纯化物均能有效抑制体外金属离子诱导的脂质过氧化,并且具有良好的剂量效应关系,其抗脂质过氧化的能力强弱顺序依次是:安石榴苷>鞣花酸>石榴皮多酚纯化物>茶多酚,说明安石榴苷是石榴皮多酚中抗脂质过氧化的的关键物质。     

石榴皮多酚分离纯化及对脂肪酸合成酶抑制作用的研究

以总多酚质量分数、吸附率、解吸率为指标,进行石榴皮总多酚的分离纯化研究,并通过反相高效液相色谱（reverse phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC）法测定石榴皮多酚中的鞣花酸、安石榴苷、绿原酸、槲皮素和表儿茶素质量分数。同时研究石榴皮多酚纯化物对脂肪酸合成酶的抑制作用。结果表明：石榴皮多酚纯化的最佳条件为采用D101大孔树脂,石榴皮溶液进柱质量浓度为10 mg/mL,流速为2 BV/h,清洗用水5 BV,乙醇洗脱剂的体积分数为70%,用量为5.5 BV;纯化后石榴皮多酚质量分数为71.64%,较纯化前多酚质量分数49.31%有明显提高;纯化后石榴皮多酚中安石榴苷、鞣花酸、绿原酸、槲皮素和表儿茶素质量分数分别为46.91%、9.44%、0.53%、0.75%、0.32%。石榴皮多酚提取物对脂肪酸合成酶的半最大效应浓度（concentration for50% of maximal effect,EC50）为0.72 mg/mL,说明石榴皮多酚对脂肪酸合成酶具有较好的抑制作用。     

石榴皮单宁的提取、纯化及抑菌作用的研究

石榴皮中含有丰富的单宁类物质,具有良好的抑菌活性。以丙酮为提取溶剂,采用超声波辅助法对石榴皮单宁进行提取,并用Amberlite XAD-16大孔吸附树脂纯化,经高效液相色谱对其组分进行分析后,采用琼脂稀释法做最小抑菌浓度实验,结果表明:石榴皮提取物的主要成分为安石榴苷,纯化后质量浓度由12.3%提高到64.2%;石榴皮粗提物对金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、沙门氏菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为0.312、10、0.625mg/mL和大于10mg/mL,纯化物对四种菌的最小抑菌浓度分别为0.156、5、0.625、10mg/mL。     

石榴皮多酚对脂变L-02肝细胞胆固醇合成的影响及机制探究

研究了石榴皮多酚纯化物、安石榴苷和石榴鞣花酸对脂变肝细胞胆固醇合成的影响及机制;采用MTT法筛选石榴皮多酚适宜浓度,体积分数50%胎牛血清的RPMI-1640培养基与L-02肝细胞孵育48 h建立脂肪变性肝细胞模型;实验分为正常组、模型组和治疗组,治疗组加入不同浓度的受试物,继续培养48 h,油红O染色定性观察细胞形态和脂滴堆积,高效液相色谱法定量检测细胞内胆固醇含量;紫外分光-速率法检测HMG-CoA还原酶活性变化;结果显示石榴皮多酚均能成剂量依赖性地减少细胞内脂滴的积累、减少细胞内总胆固醇的含量,同时抑制HMG-CoA还原酶的活性,其中以100μg/mL的安石榴苷标品效果最佳。表明石榴皮多酚具有降低肝细胞内总胆固醇的作用,可能是通过抑制HMG-CoA还原酶活性实现的,安石榴苷是石榴皮多酚中降血脂的主要活性形式。     

RP-HPLC法测定石榴汁中的4种多酚类成分

目的:建立检测石榴汁中没食子酸、石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸的测定方法。方法:采用高效液相色谱法,ArcusEP-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.1%TFA为流动相梯度洗脱,流速1.0mL/min,没食子酸的检测波长254nm,石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸的检测波长377nm。结果:没食子酸、石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸分别在0.020~0.320μg,0.038~0.608μg,0.074~1.184μg,0.039~0.624μg之间线性关系良好,平均加样回收率分别为97.05%、96.21%、95.30%、98.14%。结论:本方法精密可靠,可作为石榴汁中没食子酸、石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸4种多酚成分的检测方法。     

石榴皮多酚对脂变L-02肝细胞HMG-CoA还原酶mRNA表达的影响

研究了石榴皮多酚纯化物、安石榴苷和石榴鞣花酸对脂变L-02肝细胞胆固醇合成限速酶HMG-CoA还原酶mRNA表达的影响;采用MTT法筛选石榴皮多酚适宜浓度;体积分数50%胎牛血清的RPMI-1640培养基与L-02肝细胞孵育48 h建立脂肪变性肝细胞模型;实验分为正常组、模型组和治疗组,治疗组加入不同浓度的受施物,继续培养48 h,采用RT-PCR法检测不同受施物对脂变L-02肝细胞HMG-CoA还原酶mRNA表达的影响;结果显示:石榴皮多酚均能呈剂量依赖性地减弱脂变L-02肝细胞mRNA表达,且以100μg/mL的安石榴苷标品抑制作用最强;表明石榴皮多酚降肝细胞总胆固醇作用是通过降低HMG-CoA还原酶mRNA表达实现的,安石榴苷是石榴皮多酚中降血脂的主要活性形式。     

石榴皮多酚抗肿瘤活性及其机制研究进展

现代研究表明,石榴皮多酚在预防和治疗癌症方面都表现出了良好的生物学活性,安石榴苷和鞣花酸作为其主要成分也分别具有良好的抗肿瘤活性。本文就近年来国内外对石榴皮多酚、安石榴苷和鞣花酸的抗肿瘤活性和机制研究进展进行综述,以期为石榴资源的充分利用提供参考。     

超声处理对石榴皮多酚提取效果的影响

石榴皮是一种易获得的、廉价的,但含有丰富多酚的废料。采用超声辅助提取法从石榴皮中提取多酚,优化工艺参数并利用高效液相色谱法(HPLC)测定石榴皮中多酚的成分和含量,同时研究了石榴皮表面在超声处理下的变化。研究结果表明,在超声条件下,用水作为溶剂有更高的多酚得率,比甲醇等有机溶剂提取效果更好。在优化条件,即液固比(mL∶g)为60∶1,超声功率为400 W和超声时间为25 min时,多酚的最佳得率为39.30 mg/g(以没食子酸为标准),高于传统溶剂提取法的得率(32.58 mg/g)。HPLC分析得到石榴皮多酚中安石榴苷含量最高,其次是石榴皮鞣素,并且超声处理能较大地强化提取效果。石榴皮表面显微观察证明,超声能够显著破坏石榴皮表面而影响植物组织完整性,使多酚更多地释放出来。     

石榴皮多酚调控肝细胞内胆固醇平衡的相关通路研究

探讨石榴皮多酚对成人肝细胞脂滴形成的影响,对肝细胞胆固醇合成限速酶基因及低密度脂蛋白受体基因表达的调控作用及其机制。以石榴皮多酚纯化物(PPPs)、安石榴苷(PC)和石榴鞣花酸(EA)为受试物,以体外培养成人正常肝细胞L-02为研究对象,采用油红O染色法观察肝细胞内脂滴变化情况,利用实时荧光定量核酸扩增(realtime quantitative,RT-PCR)分析对肝细胞胆固醇合成限速酶关键基因HMGCR m RNA、SE m RNA及肝细胞低密度脂蛋白受体基因LDLR m RNA及其上游基因SREBP-2 m RNA表达的影响。结果表明:石榴皮多酚三种受试物均能减少细胞内脂滴的形成,以石榴鞣花酸效果最好;与模型组相比较,石榴皮多酚各处理组均可极显著降低(p0.01)肝细胞内胆固醇含量;与正常组相比较,石榴皮多酚三种受试物均可使胆固醇合成关键酶HMGCR和SE基因表达调控至较低水平,对LDLR基因和SREBP-2基因表达则有明显的上调作用。石榴皮多酚及其主要成分(安石榴苷和石榴鞣花酸)降低肝细胞胆固醇及降脂作用的机制可能是通过下调胆固醇合成限速酶基因表达,上调肝细胞低密度脂蛋白受体基因表达而实现的。     

水解法制备石榴皮鞣花酸工艺研究

建立了以60％乙醇超声提取石榴皮粉末,粗提物经石油醚萃取除去脂溶性物质,乙酸乙酯萃取,萃取物用酸水解法水解制备鞣花酸的方法.采用超高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS)确定了乙酸乙酯萃取部位的主要成分为粟木鞣花素、安石榴苷、石榴亭A、鞣料云石素、石榴亭B、鞣花酸,并鉴定酸水解产物为鞣花酸.采用毛细管电泳法(CE)监测了乙酸乙酯萃取物的酸水解历程,结果表明,随着水解时间的增加,乙酸乙酯萃取物的电泳峰不断减少,而水不溶物鞣花酸的质量不断增加.正交实验考察了水解时间、水解温度、酸浓度对鞣花酸得率的影响,最优水解条件为:水解时间6h、温度100℃、硫酸浓度1.0mol/L,鞣花酸得率达32.7％.     

响应面试验优化石榴皮多酚提取工艺及石榴不同部位多酚的抗氧化活性分析

以石榴皮为原料,通过单因素试验及响应面试验优化石榴皮多酚的最佳提取工艺条件为：乙醇体积分数40%、超声波功率250 W、浸提温度60 ℃、料液比1∶27.5（g/mL）、超声时间39.3 min。此工艺条件下的多酚提取量为（1.13±0.26）mg/g。在优化条件下分别对石榴皮、石榴瓤和石榴籽中的多酚类化合物进行提取并比较其抗氧化活性,得到石榴不同部位的抗氧化活性大小依次为石榴皮＞石榴籽＞石榴瓤;进一步研究了人工模拟胃肠液对抗氧化活性最强组分石榴皮多酚活性的影响,发现经人工胃液处理后,石榴皮多酚的抗氧化活性升高（P＜0.05）,而经人工肠液处理后其抗氧化活性降低（P＜0.05）,推断石榴多酚类化合物在模拟胃肠液条件下其结构和功能的变化是不同的。