RP-HPLC法测定石榴汁中的4种多酚类成分

目的:建立检测石榴汁中没食子酸、石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸的测定方法。方法:采用高效液相色谱法,ArcusEP-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.1%TFA为流动相梯度洗脱,流速1.0mL/min,没食子酸的检测波长254nm,石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸的检测波长377nm。结果:没食子酸、石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸分别在0.020~0.320μg,0.038~0.608μg,0.074~1.184μg,0.039~0.624μg之间线性关系良好,平均加样回收率分别为97.05%、96.21%、95.30%、98.14%。结论:本方法精密可靠,可作为石榴汁中没食子酸、石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸4种多酚成分的检测方法。     

石榴皮多酚体外抗脂质过氧化作用研究

为研究石榴皮多酚的抗脂质过氧化作用及起关键作用的成分,采用3个脂质过氧化研究体系,即卵黄体系、低密度脂蛋白体系和大鼠肝脏匀浆体系,利用硫代巴比妥酸法测定了石榴皮多酚纯化物、安石榴苷标准品和鞣花酸标准品对体外金属离子诱导性脂质过氧化的抑制作用。结果表明:安石榴苷,鞣花酸和石榴皮多酚纯化物均能有效抑制体外金属离子诱导的脂质过氧化,并且具有良好的剂量效应关系,其抗脂质过氧化的能力强弱顺序依次是:安石榴苷>鞣花酸>石榴皮多酚纯化物>茶多酚,说明安石榴苷是石榴皮多酚中抗脂质过氧化的的关键物质。     

响应面优化石榴皮安石榴苷提取工艺及其抗氧化活性研究

为研究石榴皮安石榴苷的超声提取工艺及体外抗氧化活性,在单因素试验的基础上,采用响应面方法（response surface methodology,RSM）,研究乙醇浓度、提取时间、料液比、超声功率及提取次数对提取石榴皮中安石榴苷含量的影响,优化安石榴苷的超声辅助提取工艺;通过测定其对DPPH自由基、羟基自由基（·OH）、超氧阴离子自由基（·O2-）和ABTS+自由基的清除能力,对安石榴苷提取物的体外抗氧化活性进行研究。结果显示,乙醇浓度和提取时间均对安石榴苷的含量有显著影响,其中乙醇浓度影响最大,料液比影响最小,最佳工艺条件为：乙醇浓度63%、料液比1∶26（g/mL）、超声功率200 W、提取时间40 min,提取1次,在此条件下安石榴苷含量达到（88.16±0.10）mg/g。体外抗氧化试验结果表明,安石榴苷提取物对DPPH自由基、·OH、·O2-和ABTS+自由基的IC50分别为101.0、227.0、341.6、35.81 μg/mL。其抗氧化活性均在一定浓度范围呈剂量效应关系。     

石榴皮多酚的提取、制备及其应用研究进展

石榴皮作为一种可再生资源,其含有丰富的多酚,在食品中具有广阔的应用前景。该文对石榴皮多酚的提取、纯化、检测和应用研究现状进行综述;并介绍石榴皮中最重要的两种多酚——安石榴苷和鞣花酸的研究现状,特别是对安石榴苷的水解、鞣花酸的提取及制备等进行详细阐述;并以大白鼠为模型,阐明安石榴苷体内代谢的一般途径。     

石榴皮安石榴苷提取工艺及抗氧化活性研究

以石榴皮为研究对象,用毒害小的乙醇溶液为提取溶剂,以安石榴苷为分离目标,用高效液相色谱法检测安石榴苷含量,采用Box-Behnken中心组合设计原理设计试验,应用响应面法优化提取工艺条件,通过考察·OH、O_2~-·、DPPH·清除能力,评价提取物的体外抗氧化性。响应面法优化结果显示,安石榴苷提取的最优条件为:乙醇浓度60%,料液比1:25(g/mL),提取温度60℃,提取时间6 h;在此条件下进行验证,安石榴苷的提取量可达到70.89g/kg,各因素对安石榴苷提取的影响顺序为:乙醇浓度提取温度提取时间料液比;自由基清除试验显示,安石榴苷粗提物可以较好地清除·OH、O_2~-·、DPPH·,且对各自由基清除能力明显高于石榴皮原料。     

石榴皮多酚对脂变L-02肝细胞HMG-CoA还原酶mRNA表达的影响

研究了石榴皮多酚纯化物、安石榴苷和石榴鞣花酸对脂变L-02肝细胞胆固醇合成限速酶HMG-CoA还原酶mRNA表达的影响;采用MTT法筛选石榴皮多酚适宜浓度;体积分数50%胎牛血清的RPMI-1640培养基与L-02肝细胞孵育48 h建立脂肪变性肝细胞模型;实验分为正常组、模型组和治疗组,治疗组加入不同浓度的受施物,继续培养48 h,采用RT-PCR法检测不同受施物对脂变L-02肝细胞HMG-CoA还原酶mRNA表达的影响;结果显示:石榴皮多酚均能呈剂量依赖性地减弱脂变L-02肝细胞mRNA表达,且以100μg/mL的安石榴苷标品抑制作用最强;表明石榴皮多酚降肝细胞总胆固醇作用是通过降低HMG-CoA还原酶mRNA表达实现的,安石榴苷是石榴皮多酚中降血脂的主要活性形式。     

石榴皮多酚对脂变L-02肝细胞胆固醇合成的影响及机制探究

研究了石榴皮多酚纯化物、安石榴苷和石榴鞣花酸对脂变肝细胞胆固醇合成的影响及机制;采用MTT法筛选石榴皮多酚适宜浓度,体积分数50%胎牛血清的RPMI-1640培养基与L-02肝细胞孵育48 h建立脂肪变性肝细胞模型;实验分为正常组、模型组和治疗组,治疗组加入不同浓度的受试物,继续培养48 h,油红O染色定性观察细胞形态和脂滴堆积,高效液相色谱法定量检测细胞内胆固醇含量;紫外分光-速率法检测HMG-CoA还原酶活性变化;结果显示石榴皮多酚均能成剂量依赖性地减少细胞内脂滴的积累、减少细胞内总胆固醇的含量,同时抑制HMG-CoA还原酶的活性,其中以100μg/mL的安石榴苷标品效果最佳。表明石榴皮多酚具有降低肝细胞内总胆固醇的作用,可能是通过抑制HMG-CoA还原酶活性实现的,安石榴苷是石榴皮多酚中降血脂的主要活性形式。     

石榴皮多酚抗肿瘤活性及其机制研究进展

现代研究表明,石榴皮多酚在预防和治疗癌症方面都表现出了良好的生物学活性,安石榴苷和鞣花酸作为其主要成分也分别具有良好的抗肿瘤活性。本文就近年来国内外对石榴皮多酚、安石榴苷和鞣花酸的抗肿瘤活性和机制研究进展进行综述,以期为石榴资源的充分利用提供参考。     

石榴皮多酚分离纯化及对脂肪酸合成酶抑制作用的研究

以总多酚质量分数、吸附率、解吸率为指标,进行石榴皮总多酚的分离纯化研究,并通过反相高效液相色谱（reverse phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC）法测定石榴皮多酚中的鞣花酸、安石榴苷、绿原酸、槲皮素和表儿茶素质量分数。同时研究石榴皮多酚纯化物对脂肪酸合成酶的抑制作用。结果表明：石榴皮多酚纯化的最佳条件为采用D101大孔树脂,石榴皮溶液进柱质量浓度为10 mg/mL,流速为2 BV/h,清洗用水5 BV,乙醇洗脱剂的体积分数为70%,用量为5.5 BV;纯化后石榴皮多酚质量分数为71.64%,较纯化前多酚质量分数49.31%有明显提高;纯化后石榴皮多酚中安石榴苷、鞣花酸、绿原酸、槲皮素和表儿茶素质量分数分别为46.91%、9.44%、0.53%、0.75%、0.32%。石榴皮多酚提取物对脂肪酸合成酶的半最大效应浓度（concentration for50% of maximal effect,EC50）为0.72 mg/mL,说明石榴皮多酚对脂肪酸合成酶具有较好的抑制作用。     

石榴籽中多酚的醇提取工艺优化

运用正交试验对石榴籽多酚的乙醇提取条件进行了优化。研究了提取温度、提取时间、乙醇体积分数和料液比四因素对石榴籽多酚提取效果的影响。结果表明石榴籽多酚的最佳提取条件:提取温度60℃,提取时间120min,乙醇浓度60%,料液比1∶20。在最佳提取条件下的石榴籽多酚得率为2.431mg/g干物质。     

响应面法优化树莓鞣花酸提取工艺及其体外抗氧化活性

本研究旨在通过微波辅助提取法确定树莓鞣花酸的最佳提取工艺,并对其抗氧化活性进行研究。以红树莓为实验原料,使用乙醇提取溶剂,采用微波辅助溶剂法提取红树莓中鞣花酸,通过单因素试验与响应面试验优化红树莓中鞣花酸提取工艺,利用高效液相色谱(HPLC)法对鞣花酸进行分析测定,并对其抗氧化性进行研究。结果表明:响应面试验优化出最佳提取条件为:提取时间1.8 min、提取温度60 ℃、乙醇浓度50%、液料比19:1、微波功率411 W,此条件下测得鞣花酸提取量为(82.75±1.05) mg/100 g,高于传统盐酸水解法在最佳提取条件下所测树莓鞣花酸提取量。实际结果与理论预测高度吻合,因此本实验得到的最优条件准确可靠有参考应用价值。微波辅助溶剂法所得鞣花酸对羟自由基清除能力、清除DPPH自由基能力都显著高于传统盐酸水解法所得鞣花酸对羟自由基清除能力,清除DPPH自由基能力,说明微波辅助溶剂提取法,不但提取时间短暂,提取溶剂用量少,而且更好的保护了树莓鞣花酸的抗氧化活性,可为树莓鞣花酸工业生产提供一定参考。     

超声处理对石榴皮多酚提取效果的影响

石榴皮是一种易获得的、廉价的,但含有丰富多酚的废料。采用超声辅助提取法从石榴皮中提取多酚,优化工艺参数并利用高效液相色谱法(HPLC)测定石榴皮中多酚的成分和含量,同时研究了石榴皮表面在超声处理下的变化。研究结果表明,在超声条件下,用水作为溶剂有更高的多酚得率,比甲醇等有机溶剂提取效果更好。在优化条件,即液固比(mL∶g)为60∶1,超声功率为400 W和超声时间为25 min时,多酚的最佳得率为39.30 mg/g(以没食子酸为标准),高于传统溶剂提取法的得率(32.58 mg/g)。HPLC分析得到石榴皮多酚中安石榴苷含量最高,其次是石榴皮鞣素,并且超声处理能较大地强化提取效果。石榴皮表面显微观察证明,超声能够显著破坏石榴皮表面而影响植物组织完整性,使多酚更多地释放出来。     

马铃薯皮中绿原酸提取工艺优化

以马铃薯皮作为原料,对其所含有的抗氧化物质绿原酸进行提取工艺条件优化。采用乙醇回流法,以绿原酸得率为指标,考察料液比、乙醇体积分数、提取温度、回流次数对提取工艺条件的影响,采取正交试验确定最佳提取工艺条件。结果表明,马铃薯皮中绿原酸粗提的最佳工艺条件为料液比1∶10（g/mL）、乙醇体积分数85%、提取温度97 ℃、回流3 次,在最佳工艺条件下,绿原酸的得率为2.229 mg/g。体外抗氧化活性实验表明,绿原酸具有良好的抗氧化性。     

Purification,antioxidant activity and protein-precipitating capacity of punicalin from pomegranate husk

Punicalin is a kind of ellagitannin, existing in pomegranate husk, and has shown remarkable biological activities. A rapid and large-scale separation method of punicalin from pomegranate husk was established, using medium pressure liquid chromatography (MPLC). The optimal mobile phase consisted of 5% methanol and 0.1% (v/v) TFA in water, and the optimal loading amount and flow rate were 1.0 g and 80 ml/min, respectively. Under this condition, 339 mg of 95.9% punicalin could be obtained in 40 min. 59.7 mg of 78.0% gallic acid could be separated simultaneously. This method was practical for industrial utilisation of pomegranate husk. Afterwards, the antioxidant and protein-precipitating capacities of the purified punicalin, together with punicalagin, were evaluated. Results showed that punicalin had strong antioxidant activity, and it exhibited a low affinity for protein. This suggested that the antioxidant of punicalin would not be greatly masked by tannin–protein precipitation in application, and hence confirmed punicalin to be a promising antioxidant.     

响应面试验优化超声波辅助提取圆叶葡萄鞣花酸和总酚工艺

以圆叶葡萄Noble皮和籽为原料,使用丙酮提取溶剂（丙酮-水-盐酸体积比70∶29∶1）,采用超声波辅助提取圆叶葡萄中以鞣花酸为主的多酚类化合物。在单因素试验的基础上,利用响应面试验优化圆叶葡萄皮中鞣花酸和总酚提取工艺,建立数学回归模型,并分析双因素间的交互作用。结果表明,影响圆叶葡萄皮中鞣花酸和总酚含量的显著因素为料液比、提取时间和超声功率,得到的最佳提取工艺条件为料液比1∶30（g/mL）、提取时间28 min、超声功率616 W,此条件下鞣花酸和总酚含量分别为616.21 μg/g和15.06 mg/g（以没食子酸当量计,鲜质量）。用响应面试验对圆叶葡萄中鞣花酸和总酚提取进行优化,可得到最佳工艺条件,验证结果与理论预测拟合度高,可为实际生产提供理论依据。     

闪式提取红茶中茶黄素的工艺研究

探讨了闪式提取红茶中茶黄素的工艺。以茶黄素得率为指标,在单因素实验基础上,选取乙醇浓度、提取时间、料液比、提取次数为影响因素,利用正交试验对提取工艺进行优化。结果表明,闪式提取茶黄素的最佳工艺条件为:乙醇浓度60%,提取时间80s,料液比1:20(g/mL),提取次数2次。在此条件下,茶黄素得率为(4.98±0.05)mg/g。与传统加热回流法相比,闪式提取法得率提高7.56%,乙醇用量减少31.43%,提取时间大大缩短。闪式提取是一种快速有效提取红茶中茶黄素的方法。     

响应面法优化蚕豆多酚超声辅助提取工艺

为了研究超声波辅助提取蚕豆多酚的最佳工艺条件,在单因素实验的基础上,选取乙醇体积分数、料液比、提取时间、pH为自变量,多酚提取量为响应值,根据Box-Benhnken实验设计原理,采用四因素三水平的分析法对蚕豆多酚提取量进行优化。结果表明,超声波辅助提取蚕豆多酚的最佳工艺条件为:乙醇体积分数45%、料液比1:25 (g/mL)、提取时间20 min、pH5,此条件下蚕豆多酚提取量最高为(2.03±0.16) mg/g d.w.,与预测值(2.06±0.23) mg/g d.w.相近,说明该优化方法合理可行。     

龙眼核多酚提取工艺的正交试验优化及其分离纯化与结构表征

采用正交试验设计优化龙眼核多酚的提取条件。在单因素试验的基础上,以乙醇体积分数、料液比、提取时间、提取温度为自变量,以龙眼核多酚提取量为考察指标,经过四因素三水平正交试验得出龙眼核多酚提取的最佳工艺条件：乙醇体积分数40%、料液比1∶20（g/mL）、提取温度70 ℃、提取时间90 min。在该条件下龙眼核多酚提取量为36.15 mg/g。通过对4 种树脂静态吸附及解吸性能的比较,确定D3520型树脂为龙眼核多酚分离纯化的理想树脂,洗脱剂乙醇体积分数为40%时,树脂对多酚的解吸率最高。采用傅里叶变换离子回旋共振质谱（Fouriertransform ion cyclotron resonance mass spectrometry,FT-ICR-MS）对龙眼核多酚结构进行初步分析,结果表明,龙眼核多酚主要成分为以鞣花酸及其衍生物为主的小分子质量水解单宁。通过核磁共振、紫外光谱和红外光谱对FT-ICR-MS中2 种丰度很高的物质进行分析,确定其分别为鞣花酸和(S)-flavogallonic acid,后者为鞣花酸的衍生物。     

石榴籽多酚提取工艺研究

采用正交试验对石榴籽多酚的提取工艺进行研究。结果表明：温度和料液比对石榴籽多酚提取率的影响较为显著。石榴籽多酚的最佳提取条件为：提取溶剂50% 乙醇、浸提温度50℃、提取时间2.0h、料液比1:20,在该条件下石榴籽多酚提取量可达12.07mg/g。     

超声波提取接骨草花中乌索酸的工艺研究

利用超声波辅助提取法提取接骨草花中乌索酸。通过考察乙醇浓度、固液比、超声波时间对提取乌索酸得率的影响,设计正交实验,得出最佳提取工艺。结果表明各因素对提取乌索酸的影响依次为乙醇浓度>固液比>超声时间。最佳提取工艺是乙醇浓度为80%,固液比为1∶60g/mL,提取时间为45min。在此条件下,乌索酸在盛花期中得率为0.83%,在花蕾期中得率为0.81%。