腹足纲Helix pomatia βC-血清蛋白的功能单位d,e和f中一个半胱氨酸-组氨酸之间硫醚桥键的鉴定

对腹足纲软体动物罗曼蜗牛Helix pomatia的氧运输蛋白（βc-血清蛋白）的功能单位d，e和，中的一个半胱氨酸-组氨酸之间的硫醚桥键进行了研究。以该βc-血清蛋白为载体，通过限制性胰蛋白酶水解，产生片段a—c，ef，以及功能单位d，g，和h。以片段ef降解后的产物为研究对象，通过亲合色谱的分离纯化，得到功能单位P和f。通过对羧甲基化功能单位d的胰蛋白酶和链霉蛋白酶水解，得到一个含有硫醚桥键的4肽。同样在吡啶乙基化功能单位e和f的胰蛋白酶水解产物中也分离得到一个含有相同硫醚桥键的小肽。因此一个半胱氨酸-组氨酸之间硫醚桥键的存在似乎是腹足纲软体动物罗曼蜗牛Helix pomatia氧运输蛋白（βc-血清蛋白）功能单位的一个共有的特征。     

链霉菌I08A1776产生的水溶性链丝菌素

目的分离纯化链霉菌I08A 1776发酵液中的水溶性抗耐药结核活性成分。方法利用离子交换、反相和亲水作用等多种色谱技术进行分离纯化,通过现代波谱学方法鉴定活性成分结构。结果分离得到3个水溶性活性成分,其结构分别确定为链丝菌素E(1)、Nβ-乙酰链丝菌素E(2)和Nβ-乙酰链丝菌素D(3)。链丝菌素E(1)对结核分枝杆菌H37Rv和临床分离耐药株的MIC值为0.25~1.0μg/mL。结论首次利用亲水作用色谱分离纯化微生物发酵液中的水溶性活性化合物。亲水作用色谱在微生物水溶性次级代谢产物的分离纯化中具有广阔的应用前景。链丝菌素E具有较强的体外抗耐药结核分枝杆菌活性。     

大肠杆菌发酵液中唾液酸的提取

大肠杆菌发酵液经超滤和乙醇沉淀获得聚唾液酸粗品，在80℃水浴、pH2的条件下水解3h，中和，离心后，上清液用离子交换色谱分离纯化，冷冻干燥后得到唾液酸成品，纯度达98．1％。     

CESI-MS/MS和NanoLC-MS/MS技术对促红细胞生成素中糖肽的分析

目的:使用无鞘液毛细管电泳-质谱联用(CESI-MS/MS)和纳升液相色谱-质谱联用(NanoLCMS/MS)2种方法,对高糖基化蛋白促红细胞生成素(EPO)的糖肽进行分析,并对2种方法的分析结果进行对比。方法:以EPO为研究对象,还原烷基化后用胰蛋白酶进行酶切,酶切得到的肽段利用CESIMS/MS和NanoLC-MS/MS检测方法进行分离鉴定。CESI-MS/MS分析方法:采用熔融的石英毛细管,以10%醋酸水溶液为背景电解质,在34.5 kPa压力下进样60 s,分离电压为30 kV,同时施加正向压力6.9kPa;离子源温度为50℃,喷雾电压为1650 V,MS扫描范围为m/z 350~1250,MS/MS扫描范围为m/z 100~1500。NanoLC-MS/MS分析方法:采用YMC C₁₈色谱柱,以含0.1%甲酸的水溶液(A)-含0.1%甲酸的乙腈溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速5μL·min^-1;离子源温度300℃,喷雾电压为+5500 V,MS扫描范围为m/z 350~1250,MS/MS扫描范围为m/z 100~1500。将采集到的质谱数据导入到软件BiopharmaView^TM3.0中进行搜库检索,对糖肽进行鉴定。结果:采用CESI-MS/MS方法可以单独鉴定到32条糖肽,采用NanoLC-MS/MS方法可以单独鉴定到40条糖肽;通过2种方法可以共鉴定到84条糖肽,共涉及56种糖型。对比2种方法的结果,发现对于EPO糖肽的分析,CESI-MS/MS方法可以鉴定到更多的含唾液酸的糖肽,并表现了更优异的分离效果。此外,CESI-MS/MS方法鉴定出的糖肽分子量范围更宽,可以有效分析NanoLC-MS/MS方法中未鉴定到的高分子量糖肽。结论:在糖蛋白的分析中,通过糖肽水平的分离和鉴定,可以获得糖基位点和糖基序列的信息。CESI-MS/MS方法和NanoLC-MS/MS方法提供了互补的分析结果,其联合使用可鉴定出更多种类的糖肽,为糖蛋白的研究中糖肽水平的分析提供了更全面的解决方案。     

基于色谱技术对淫羊藿成分及指纹图谱研究

目的 通过对心叶淫羊藿的乙酸乙酯萃取物进行人脐静脉内皮细胞生物色谱的识别，再进行分离纯化及化学成分研究，建立指纹图谱，为心叶淫羊藿活性物质筛选提供基础。方法 (1)首先是利用生物色谱技术对心叶淫羊藿提取物进行研究。(2)在生物色谱指导下用现代分离技术对心叶淫羊藿萃取物中的化学成分进行层析分离和结构鉴定，得到七个单体化合物。(3)用高效液相色谱法建立心叶淫羊藿指纹图谱。结果 用生物色谱技术对心叶淫羊藿活性成分进行了快速分离筛选纯化，鉴定出淫羊藿活性化合物。结论 此方法简便有效，为开发淫羊藿类的功能食品奠定理论基础。     

蚯蚓纤溶酶新组分的分离纯化及部分性质

采用以大豆胰蛋白酶抑制剂为配基的亲和色谱分离蚯蚓纤溶酶，以DEAE-纤维素-52离子交换柱色谱和制备电泳纯化各单组分。结果表明新组分8、9、10都是能水解纤维蛋白的糖蛋白。组分8是一种纤溶酶原激活剂，有2个亚基，Mr为25．5k和17．8k；组分9仅一条肽链，Mr为33．6k；组分10含有Mr为18．7k和10．9k的2个亚基。组分9、10均兼有纤溶酶原激活活性和直接纤溶活性。     

固元胶囊多糖的分离纯化与初步结构研究

目的 对固元胶囊多糖的分离纯化与初步结构研究.方法 用高效分子排阻色谱(HPSEC-ELSD)法分析纯度、相对分子质量分布以及用高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法测定单糖组成.结果 得到了固元胶囊结构的初步信息;要得到固元胶囊进一步的结构信息,可采用甲基化、部分以水解等得到糖链结构片段,通过核磁共振仪等仪器分析法得到其高级结构信息.结论 对固元胶囊多糖的分离纯化与初步结构研究能为固元胶囊的质量标准提供依据.     

白唇竹叶青蛇(Trimeresurus albolabris)毒降纤酶的分离纯化以及性质

目的从白唇竹叶青蛇(T.albolabris)毒中分离纯化无出血作用的降纤活性组分,探讨其理化性质及部分生物功能。方法用DEAE-SephadexA-25,SephadexG-100和CM-SephadexC-50三步色谱法进行分离纯化。SDS-PAGE和HPLC鉴定其纯度和相对分子质量,平板法测定其降纤活性。结果从白唇竹叶青蛇毒中分离纯化获得单一的降纤组分,能迅速水解纤维蛋白原或纤维蛋白原Aα链,缓慢水解Bβ链,而对γ链无作用,SDS-PAGE鉴定其相对分子质量为56000。EDTA能抑制其纤维蛋白原水解活性,而PMSF、β-巯基乙醇对其活性无影响,提示该组分为单链α金属蛋白酶。结论从白唇竹叶青蛇毒中分离纯化得到1种无出血作用且降纤活性强的新蛇毒降纤酶。     

石杉碱甲的分离纯化工艺

目的:研究一种石杉碱甲的工业化分离纯化工艺,以达到批量生产之目的。方法:通过对石杉碱甲理化性质的分析,以中性氧化铝为填料对石杉碱甲粗品进行柱色谱分离纯化,采用薄层色谱-柱色谱考察了各因素的影响,以石杉碱甲回收率和含量为考察指标,寻找最佳工艺参数。结果:柱色谱最佳分离条件为:洗脱剂体系为氯仿-甲醇(v/v)=100∶5,100∶10,流速为3mL.min-1,柱床体积比为25∶1,进料量为10 mL,柱温为室温,在此条件下石杉碱甲回收率达97.6%,含量达99.2%。结论:该工艺条件能够在简单的条件下实现石杉碱甲批量分离纯化,具有工业应用价值。     

快速蛋白液相色谱法纯化威廉环毛蚓纤溶酶及其活性研究

摸索威廉环毛蚓纤溶酶的分离纯化工艺和研究蚯蚓纤溶酶(earthw fibrinolytic enzyme，EFE)体内外的抗栓溶栓活性。通过提取，分步盐析，再经AKTAbasic蛋白快速液相色谱进一步纯化，得一组有纤溶活性的同工酶，其中一种比活较大达2000IU／mg。药理试验表明该酶有明显的抗拴溶栓活性。     

红车轴草的化学成分研究

目的对红车轴草全草化学成分进行分离鉴定。方法采用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、重结晶，制备薄层等方法进行分离纯化，通过理化常数测定和光谱分析鉴定其化学结构。结果分离得到9个化合物，分别鉴定为香草醛（vanillin，Ⅰ），山柰酚（kaempferol，Ⅱ），鹰嘴豆芽素A（biochaninA，Ⅲ），德鸢尾素（irilone，Ⅳ），芒柄花素（formononetin，Ⅴ），鹰嘴豆芽素A-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（biochanin.A-7-O-β-D-glucopyranoside，Ⅵ），大豆素（daidzein，Ⅶ），（-）maackiain（Ⅷ），β-谷甾醇（β-sitosterol，Ⅸ）。结论化合物Ⅰ、Ⅱ为首次从该属植物中分离得到。     

毛菊苣中山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对照品的制备研究

目的建立维药毛菊苣中山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对照品的制备分离方法。方法取毛菊苣药材醇提浸膏的乙酸乙酯萃取部位上样于硅胶柱色谱分离,收集黄酮苷富集流份,继续用凝胶柱色谱及制备HPLC进行分离纯化,通过NMR、MS等波谱方法鉴定化合物结构,经TLC、HPLC-UV及MS联用等技术进行质量分数检测。结果制备分离得到2个化合物分别鉴定为山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(1)和山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2),质量分数均大于98%,其中2为首次从该属植物中分离得到。结论该法制备得到的2个黄酮苷类对照品符合中药化学对照品的相关技术要求,为药材毛菊苣和含毛菊苣的成方制剂的质量控制及药效物质基础研究提供化学对照品。     

壳聚糖固定化胰蛋白酶亲和层析抑肽酶的条件及影响因素

利用壳聚糖固定化胰蛋白酶作为亲和吸附剂从牛肺中直接分离纯化抑防酶。该方法在适当的温度（35℃）、pH值（pH1．5）、离子强度（1．0mol／LKCI）以及吸附条件（176FIP／g）下，纯化的抑肽酶活性回收率达83％，比活可达5000kIU／mg以上。     

Intercedenol A,B,二色桌片参皂苷降解的两个新三萜苷元

目的 研究二色桌片参皂苷苷元的结构。方法 采用15％硫酸水解二色桌片参总皂苷制备二色桌片参皂苷的苷元，应用多种色谱技术进行分离纯化，根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果 分离并鉴定了2个三萜类化合物：3β-羟基-16β-乙酰氧基-9，22E，24-三烯-海参烷（Ⅰ），3p羟基-16β乙酰氧基-8，22E，24-三烯-海参烷（Ⅱ）。结论 2个化合物均为新化合物。     

西兰花种子中分离纯化萝卜硫素及残留溶剂的方法学验证

目的 介绍了一种从西兰花种子中分离纯化天然萝卜硫素高效、低成本方法。方法 该方法包括种子自溶后的溶剂萃取、柱色谱分离和半制备高效液相色谱纯化。经MS、¹H-NMR、¹³C-NMR谱对纯化后的化合物进行了表征。结果 与传统的液-液萃取法相比，柱色谱分离法从西兰花种子中提取萝卜硫素的收率更高为(69.02±1.1)%。以SinoChrom ODS-BP柱为半制备高效液相色谱柱，以甲醇-水(体积比1∶4)为流动相，最大装载量小于60 mg,流量应控制在9 mL·min^-1,可以获得纯度为95%的萝卜硫素。经HPLC、MS、¹H-NMR、¹³C-NMR检测，结果表明，所得样品为目标化合物，且无有机溶剂残留。结论 建立了一种分离纯化西兰花种子中萝卜硫素的方法。本方法经济、高效，有实用价值。     

七叶皂苷A、B的制备液相色谱法分离和结构确证

目的 建立制备型高效液相对β-七叶皂苷钠原料进行分离纯化制得七叶皂苷A(escin Ia)和七叶皂苷B(escin Ib)的方法.方法 采用制备色谱柱waters HRC18;以乙腈-1%醋酸(28∶72)为流动相;流速为42mL·min-1,检测波长为220nm.结果 用紫外、红外、质谱和核磁共振法确证结构,经分析型HPLC检查,纯度达98.0%以上.结论 该法可靠、准确,适合于七叶皂苷A、B的制备、分离、纯化.     

滁菊花中黄酮类化学成分的分离与鉴定

目的 研究滁菊花的化学成分。方法 采用大孔树脂、硅胶、聚酰胺柱色谱分离纯化，经理化常数和谱学方法鉴定结构。结果 分离鉴定了8个化合物，分别为香叶木素、芹菜素、木犀草素、槲皮素、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷。结论 8个化合物均为首次从该植物中分离得到。     

榼藤子含硫酰胺类化学成分的研究(英文)

为研究榼藤子[Entada phaseoloides(L.)Merr.]种仁的化学成分,利用正反相硅胶柱色谱、制备HPLC分离纯化,通过现代波谱学技术鉴定结构。从70%乙醇提取物的正丁醇萃取部位分离得到4个含硫酰胺类化合物,分别为entadamideA-β-D-glucopyranosyl-(1→3)-β-D-glucopyranoside(1)、entadamideA(2)、entadamideA-β-D-glucopyranoside(3)和clinacosideC(4)。化合物1为新化合物,化合物4为首次从该属中分离得到。     

棒柄花叶中胡椒酚-β-D-吡喃葡萄糖苷候选对照品的制备研究

目的:研究胡椒酚-β-D-吡喃葡萄糖苷候选化学对照品的制备方法及其质量标准，为含胡椒酚-β-D-吡喃葡萄糖苷药材及其相关产品的质量控制提供参考。方法:利用硅胶柱色谱和反相制备高效液相色谱对棒柄花叶的乙醇提取物进行分离纯化，分别以薄层色谱法和高效液相色谱法对胡椒酚-β-D-吡喃葡萄糖苷进行纯度检查和含量测定，并通过UV、IR、MS、¹H-NMR、¹³C-NMR等对其进行结构确证。结果:从棒柄花叶中分离、纯化出胡椒酚-β-D-吡喃葡萄糖苷候选对照品C₁₅H₂₀O₆,其紫外最大吸收波长为273 nm,高分辨质谱结果为HESI-MS m/z 319.113 95[M+Na]⁺,薄层色谱检验结果显示供试品为单一斑点，高效液相色谱法纯度测定质量分数W>98.0%。结论:所建立的制备方法简单，制备出的胡椒酚-β-D-吡喃葡萄糖苷对照品符合中药化学对照品的相关要求，可作为棒柄花叶药材和含胡椒酚-β-D-吡喃葡萄糖苷产品质量控制以及中药药效物质基础用的化学对照品。     

马蹄莲中植物甾醇成分的分离与结构鉴定

目的:研究马蹄莲中的植物甾醇成分。方法:应用多种色谱手段进行分离纯化,通过UV、IR、~1H NMR、~(13)C NMR、GC- MS等技术鉴定化合物的结构。结果:分离得到3个甾醇化合物,分别为β-谷甾醇(1)、豆甾醇(2)和菜籽甾醇(3)。结论:化合物β-谷甾醇、豆甾醇、菜籽甾醇均系首次从该植物中分离得到。