细胞因子调节单个核细胞CD11b抗原表达的实验研究

采用免疫组织化学碱性磷酸酶标记ＡＢＣ－ＡＰ（ＡＢＣ－ＡＰ）法显示，用图像分析仪进行定量分析，研究了白细胞介素－１（ＩＬ－１）、白细胞介素－６（ＩＬ－６）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）对外周血单个核细胞白细胞分化抗原ＣＤ１１ｂ表达的调节作用。结果表明，４种细胞因子中有３种对单个核细胞表面ＣＤ１１ｂ抗原的表达有不同程度的上调作用，强度依次为ＩＬ－６＞ＩＬ－１＞ＴＶＦ；ＩＬ－１还有使ＣＤ１１ｂ抗原在细胞膜上的分布呈集中化的趋势。     

抗CD_3McAb诱导外周血单个核细胞活化增殖的观察

目的：观察抗ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导人外周血单个核细胞（ＨＰＢＭＣ）活化增殖过程中的影响因素及抗ＣＤ３ＭｃＡｂ激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ细胞）免疫学特性的变化。方法：采用ＭＴＴ法和苔盼蓝染色法、ＩＬ－２依赖细胞株（ＣＴＬＬ细胞）增殖实验、ＴＮＦ－α（双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法）试剂盒以及间接免疫荧光法分别检测ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖活性、内源性ＩＬ－２、ＴＮＦ－α的产生及ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＩＬ－２Ｒ等的表达。结果：抗ＣＤ３ＭｃＡｂ对ＨＰＢＭＣ有很强的丝裂原作用，该作用与其诱导浓度、时间及外源性ＩＬ－２的协同作用密切相关。ＣＤ３ＡＫ细胞可产生内源性ＩＬ－２、ＴＮＦ－α，ＩＬ－２Ｒ表达及ＣＤ８＋细胞百分率显著增多。结论：ＣＤ３ＡＫ细胞具有很强的增殖能力，但需要外源性ＩＬ－２的协同作用，增殖细胞以ＣＤ８＋细胞为主。     

抗CD3McAb诱导外周血单个核细胞活化增殖的观察

目的：观察抗ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导人外周血单个核细胞（ＨＰＢＭＣ）活化增殖过程中的影响因素及抗ＣＤ３ＭｃＡｂ激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ细胞）免疫学特性的变化。方法：采用ＭＴＴ法和苔盼蓝染色法，ＩＬ－２依赖细胞株（ＣＴＬＬ细胞）增殖实验、ＴＮＦ－α（双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法）试剂盒以及间接免疫荧光法检测ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖活性，ＩＬ－２，ＴＮＦ－α的产生及ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＩＬ－２Ｒ等的表达。结果：     

细胞因子调节单个核细胞CD11b抗原表达的实验研究

采用免疫组织化学碱性磷酸酶标记ＡＢＣ－ＡＰ（ＡＢＣ－ＡＰ）法显示，用图像分析仪进行定量分析，研究了白细胞介素－１（ＩＬ－１）、白细胞介素－６（ＩＬ－６）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）对外周血单个核细胞白细胞分化抗原ＣＤ１１ｂ表达的调节作用。结果表明，４种细胞因子中有３种对单个核细胞表面ＣＤ１１ｂ抗原的表达有不同程度的上调作用，强度依次为ＩＬ－６〉ＩＬ－１〉ＴＮＦ；ＩＬ－１还有使     

ATG和抗CD_3McAb对再障患者CFU－GM生长的体外影响研究

用ＣＦＵ－ＧＭ半固体琼脂培养技术研究了抗人胸腺细胞球蛋白（ＡＴＧ）和抗ＣＤ３单克隆抗体（ＭｃＡｂ）对１８例再生障碍性贫血（ＡＡ）患者骨髓ＣＦＵ－ＧＭ体外生长的影响。结果表明，１．加入１６．７μｇ／ｍｌＡＴＧ或１：５０抗ＣＤ３ＭｃＡｂ，体外均可增加ＡＡ患者骨髓ＣＦＵ－ＧＭ的集落数（Ｐ＜０．０５），两者的作用无显著差异（Ｐ＞０．０５）。２．ＡＴＧ和抗ＣＤ３ＭｃＡｂ对ＡＡ患者干细胞缺乏型和免疫介导型的作用无显著差异（Ｐ＞０．０５）。用此项技术对ＡＡ患者作药敏试验，并加测外周血ＣＤ８＋、ＤＲ＋细胞比值，可作为选择免疫抑制疗法的参考。     

抗人粒细胞集落刺激因子单克隆抗体的研制

应用杂交瘤技术，用重组人Ｇ－ＣＳＦ（ｒｈＧ－ＣＳＦ）免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，然后将其脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＮＳ－１融合，成功地获得了多种能够分泌抗ｒｈＧ－ＣＳＦ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交癌细胞。对其中的２株杂交瘤细胞２Ａ６和２Ｃ２分泌ＭｃＡｂ的研究表明，它们能够特异性地和ｒｈＧ－ＣＳＦ结合，而与重组的人ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－ＣＳＦ、ＩＬ－２、ＩＬ－２α和ＴＮＦ细胞因子无交叉反应，为抗Ｇ－ＣＳＦ特异性ＭｃＡｂ。这些杂交瘤细胞经反复冻存和复苏后，仍能稳定地分泌ＭｃＡｂ。     

去脑垂体大鼠免疫耐受性诱导及产生机制探讨

为控制垂体移植免疫排斥，利用供体Ｗｉｓｔａｒ大鼠活化脾细胞（ＡＳＣ）和（或）环磷酰胺（ＣＰ）对去垂体ＳＤ大鼠进行免疫耐受诱导，同时检测受体Ｔ细胞亚群，细胞因子及ＭＬＲ，结果，ＡＳＣ５×１０＾７／０．５ｍｌ／周２次或ＡＳＣ联合ＣＰ２０ｍｇ／ｋｇ．ｄ２周，使移植皮片ＭＳＴ明显延长，致耐受体ＣＤ３，ＣＤ４，ＣＤ８细胞以及ＩＬ－２，ＩＬ－６和ＴＮＦ显著低于排斥组。ＭＬＲ显示，受体对特异抗原产生反应。表明Ａ     

肿瘤化疗药物对人LAK细胞活性的影响

用四氮唑（ＭＴＴ）法分别检测顺氨氯铂（ＰＤＤ），丝裂霉素－Ｃ（ＭＭＣ）、阿霉素（ＡＭＤ）、氟尿嘧啶（５－Ｆｕ），阿糖胞苷（Ａｒａ－ｃ），长春新碱（ＶＣＲ）对ＩＬ－２诱导人外周血ＬＡＫ细胞活性的影响，及其与ＬＡＫ细胞对胃癌细胞的相加杀伤作用。①ＭＭＣ、ＡＤＭ、５－Ｆｕ、ＶＣＲ对ＩＬ－２诱导ＬＡＫ细胞活性稍有下降，Ａｒａ－Ｃ能抑制ＩＬ－２诱导ＬＡＫ细胞活性，ＰＤＤ对ＩＬ－２诱导ＬＡＫ细胞活性明显提高。     

活化脐血T细胞和NK细胞的抗原及细胞因子表达研究

目的：比较γＩＬ－２及抗ＣＤ３ｍｃＡｂ＋γＩＬ－２对脐血单个核细胞（ＭＮＣ）的免疫表型及细胞因子的影响。方法：采用间接玫瑰花结法实验测定２３例脐血ＭＮＣ表面的分化抗原,ＥＬＩＳＡ双抗夹心法测定肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）、白介素－６（ＩＬ－６）、白介素－８（ＩＬ－８）。结果：γＩＬ－２及抗ＣＤ３ｍｃＡｂ＋γＩＬ－２激活的脐血ＭＮＣ其分化抗原发生明显变化。１、两组与未活化相比：ＣＤ３＾＋、ＣＤ８＾     

CD3AK细胞的生物学特性及其抗肿瘤作用

用人的外周血单核（ＰＢＭＣ）与抗ＣＤ３单克隆抗体和基因重组的人ＩＬ－２共同培养制备ＣＤ３ＡＫ细胞（ＣＤ３ＭｃＡｂ ａｃｔｉｖａｔｉｖｅｄ ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌｓ），并系统地研究ＣＤ３ＡＫ细胞的生物学特性及其体外抗肿瘤作用。结果表明，ＣＤ３ＡＫ细胞是异质细胞群，前体细胞来源丰富，主要是Ｔ细胞；经期内大量扩增，体外可长期存活，广谱杀瘤活性较低的ＩＬ－２依赖性。ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖机制与其表面高表达Ｉ     

CD3单隆抗体激活人外周血淋巴细胞的实验研究

观察健康人外周血淋巴细胞在体外对抗ＣＤ３单克隆抗体（ＣＤ３ＭｃＡｂ）＋ＩＬ－２ 联合刺激的反应性。结果发现ＣＤ３ＭｃＡｂ能单独激活健康人外周血淋巴细胞，激活浓度范围广泛。ＩＬ－２与ＣＤ３ＭｃＡｂ联合应用有明显协同作用。经ＣＤ３ＭｃＡｂ＋ＩＬ－２刺激后，细胞类型主要是ＣＤ８＾＋细胞。激活后的淋巴细胞ＩＬ－２Ｒ表达明显升高。     

膀胱癌可溶性抗原诱导细胞毒T细胞的实验研究

目的 观察膀胱癌可溶性抗原诱导细胞毒Ｔ细胞生长,为构建膀胱癌疫苗及过继性免疫治疗提供实验基础。方法 提膀胱癌可溶性抗原（ＴＳＡ）,用ＴＳＡ、抗ＣＤ－３单抗、ＩＬ－２联合诱导外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）,动态观察细胞增殖,进行细胞表型分析和细胞因子测定;并与ＩＬ－２诱导的ＬＡＫ细胞,抗ＣＤ－３单抗、ＩＬ－２诱导的ＣＤ３－ＡＫ细胞进行比较。结果 实验组细胞第８ｄ增殖７．５２倍,第１２ｄ增殖２８．９２倍     

IL－6、TNF调节冠心病人单个核细胞CD11b抗原表达的研究

采用免疫组织化学碱性磷酸酶标记ＡＢＣ（ＡＢＣ－ＡＰ）法显示。并用图像分析仪进行定量分析，研究了冠心病人和正常人单个核细胞ＣＤ１１６抗原表达及白介素－６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）对白细胞分化抗原ＣＤ１１６表达的调节作用。结果表明，冠心病人ＣＤ１１６表达高于正常人，ＩＬ－６和ＴＮＦ对ＣＤ１１ｂ均有上调作用，且其对冠心病人ＣＤ１１ｂ的上调作用明显高于正常人，表明冠心病人ＣＤ１１ｂ表达对细胞因子的敏感性增强。     

细胞因子对再生障碍性贫血患者发病的影响

为探讨ＡＡ的免疫发病机制，阐明细胞因子在ＡＡ患者中变化的基础与临床意义，应用ＥＬＩＳＡ法及ＡＰＡＡＰ法对３８例初治ＡＡ患者及２０名正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）培养上清诱生的Ｇ－ＣＳＦ、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＩＦＮα及ＩＬ－８进行检测，同时观察外周血象、Ｔ细胞亚群及ＨＬＡ－ＤＲ表达。结果：ＡＡ患者外周血ＣＤ４减低，ＣＤ８增高，ＣＤ４／ＣＤ８减低或倒置，ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达率增高。ＡＡ患者ＰＢＭＮＣ培养上清中Ｇ－ＣＳＦ阳性率减低，ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＩＦＮα及ＩＬ－８水平增高。Ｇ－ＣＳＦ与ＣＤ４及ＣＤ４／ＣＤ８呈正相关而与ＩＦＮα呈负相关，ＩＬ－６与白细胞数及ＣＤ４呈负相关，ＴＮＦα与ＣＤ８呈正相关而与ＣＤ４／ＣＤ８呈负相关，ＩＬ－８与ＣＤ８及ＨＬＡ－ＤＲ呈负相关，证明细胞免疫功能异常及细胞因子网络失调在ＡＡ发病中起重要作用，激活的ＣＤ８细胞可以抑制造血，多种因素引起的细胞因子紊乱最终引发ＡＡ。     

CD3AK细胞冻融提取液的抗肿瘤活性研究

为研究ＣＤ３ＡＫ细胞冻融提取液的抗肿瘤作用,作者采集正常人外周血分离单个核细胞（ＰＢＭＣ）,先用抗ＣＤ３的单克隆抗体（ＣＤ３ＭｃＡｂ）的ｒＩＬ－２诱导和激活,使之成为ＣＤ３ＭｃＡｂ激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ）,再制备ＣＤ３ＡＫ的冻融提取液,然后进行体内,外抗肿瘤实验。结果;低剂量的ＣＤ３ＭｃＡｂ和ｒＩＬ－２能明显诱导ＰＢＭＣ的活化和增殖;激活后的ＣＤ３ＡＫ细胞冻融提取液可抑制小鼠肝癌实体瘤细胞Ｈ２     

抗P^185McAb的制备,鉴定及其在免疫组化检测的应用

本文以ＨＥＲ－２／ｎｅｕ癌基因表达产物为抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，采用常规淋巴细胞杂交瘤技术立一株稳定分泌抗Ｐ＾１８５ＭｃＡｂ的杂交瘤株５Ｅ１２，ＭｃＡｂ５Ｅ１２属ＩｇＧ亚类，与ＳＫＢＲ－３，Ｔ４７Ｄ乳癌细胞系呈阳性反应，与ＨＴ２９，ＥＣ１０９，ＤＡＣ－１，ＳＰ２／０，成纤维细胞及小鼠ＮＩＨ３Ｔ３等细胞系列呈阴性反应，３０例乳癌组织石蜡切片同时以自制抗Ｐ＾１８５ＭｃＡｂ５Ｅ１２及进口ＭｃＡｂＣ－ｅ     

CD3AK细胞治疗对原发性肝癌患者免疫功能影响的研究

为了观察ＣＤ３ＡＫ细胞对原发性肝癌（简称肝癌）患者免疫功能的影响。采用ＣＤ３ＡＫ细胞治疗６５例不能切除的肝癌患者，分别于治疗前后测定患者Ｔ细胞亚群（ＡＰＡＡＰ法）和血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平（ＦＬＩＳＡ法）。结果ＣＤ３ＡＫ细胞治疗后肝癌患者Ｔ细胞亚群ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋、ＣＤ８＾＋升高，ｓＩＬ－２Ｒ水平下降，统计学有显著性差异（Ｐ〈０．０５）。提示ＣＤ３ＡＫ细胞治疗肝癌对提高     

雷公藤单体T_4对类风湿关节炎患者周围血单个核细胞及滑膜细胞产生肿瘤坏死因子的影响

观察了经雷公藤单体Ｔ_４处理２ｈ后对正常人和类风湿关节炎（ＲＡ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）及ＲＡ患者消化的滑膜单个细胞（ＲＡ－ＤＳＳＣ）分泌ＴＮＦ的影响。在３５ｎｇ／ｍｌ浓度下，正常人ＰＢＭＣ（ｎ＝１０）及ＲＡ－ＰＢＭＣ（ｎ＝６）Ｔ_４处理组产生ＴＮＦ活性水平明显低于对照组（Ｐ＜０．００１）。延长Ｔ_４作用时间至６ｈ，ＲＡ－ＰＢＭＣＴ_４处理组ＴＮＦ活性水平下降更为明显（Ｐ＜０．００１），表明Ｔ_４可抑制ＰＢＭＣ体外产生ＴＮＦ活性水平，其对ＲＡ－ＰＢＭＣ作用不同时间的抑制率分别为２５．５４％及４０．５１％（Ｐ＜０．０１），说明Ｔ_４抑制作用可能与作用时间有关。同时Ｔ_４亦可抑制ＲＡ－ＤＳＳＣ体外产生ＴＮＦ活性水平（Ｐ＜０．０１），提示Ｔ_４有望成为一新的植物性治疗ＲＡ药物。     

SMU1对正常人体外PBMNC功能效应的影响

目的：研究ＳＭＵ１（自制抗ＣＤ３）对正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）的体外功能效应,方法：（地）以ＳＭＵ１６种不同浓度、ＩＬ－２、ＭＣＤ３（丝裂性抗ＣＤ３）孵育ＰＢＭＮＣ,观察细胞密度和形态变化,ＭＴＴ法测定细胞增殖力;（２）分别用ＳＭＵ１０．５ｍｇ／Ｌｆ、５ｍｇ／Ｌ、ＩＬ－２２００ｋＵ／Ｌ培养ＰＢＭＮＣ３ｄ,ＥＬＩＳＡ法测定上清液ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１２、ＩＦＮ－α及Ｇ－ＣＳＦ水平。结     

再生障碍性贫血患者细胞免疫功能及抗T细胞单克隆抗体的免疫调节及造血调控的研究

观察了再生障碍性贫血（ＡＡ）１６５例的淋巴细胞比值，用ＡＰＡＡＰ法和ＥＬＩＳＡ法测定Ｔ１３８例的Ｔ细胞亚群、８９例ＨＩＪＡ－ＤＲ抗原的表达及１６例ＰＢＭＮＣ培养上清的ＴＮＦα水平，用抗Ｔ淋巴细胞单克隆抗体ＳＭＵ３和ＳＭＵ８治疗了ＡＡ患者６３例。结果表明，ＡＡ患者体内细胞免疫功能紊乱，表现为Ｔ细胞亚群比例失衡，ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达增高，ＴＮＦα分泌增加；用ＳＭＵ３、ＳＮＵ８单抗治疗ＡＡ的总有效率为７９．３％，且具有疗效快、副作用小、重复应用仍安全有效等优点。