HPLC-FT-ICR MS法研究中药大花红景天在阿尔茨海默模型大鼠血中的移行成分

目的研究中药大花红景天在阿尔茨海默病模型大鼠血中的移行成分。方法选用雄性SD大鼠,双侧海马注射Aβ1-42致阿尔茨海默症(Alzheimer's disease,AD)模型,造模后次日开始灌胃给予大花红景天(2.24 g·kg^-1),连续给药28 d,采用Morris水迷宫定向航行试验考察大鼠的空间学习记忆能力;利用HPLC-FT-ICR-MS方法研究大花红景天醇提取物灌胃给药后的大鼠血浆样品的基峰离子流色谱图、提取离子流色谱图及二级质谱图等信息。通过对比空白血浆和给药血浆中各个色谱峰的保留时间、精确质量数、二级碎片等特征,确认其在AD模型大鼠血浆中的移行成分。结果在模型大鼠血浆中共检测到42个与大花红景天相关的化学成分,包括19个原形化学成分和23个相关的代谢产物。结论本研究为阐明中药大花红景天治疗AD的药效物质基础提供了实验依据。     

基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS技术分析痔血安合剂的化学成分与小鼠口服后的入血成分

目的:运用超高效液相串联四极杆-静电场轨道阱高分率质谱分析技术分析鉴定痔血安合剂的化学成分，以及小鼠灌胃后主要入血成分。方法:取健康雄性C57/BL6J小鼠9只，分为空白组(3只)和痔血安合剂组(6只),空白组灌胃超纯水，痔血安合剂组按27.2 mL·kg^-1剂量灌胃痔血安合剂，分别在给药后1,3 h各处理3只，收集血清，采用蛋白沉淀的方法进行样品前处理。色谱分离采用Acquity UPLC BEH C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.7μm),以0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相体系，梯度洗脱。质谱采用正负离子一级全扫描/数据依赖二级扫描模式(Full MS/dd-MS²),一级全扫描设置分辨率70 000,二级设置分辨率17 500,隔离窗口1 m/z,归一化碰撞能量(NCEs)为10%、20%和40%采集原方及血清样本数据。经Xcalibur 3.0软件获取色谱保留时间以及母离子和碎片离子信息，通过对照品比对、文献参考相关等成分检测信息，实现对痔血安合剂化学成分及入血原型的鉴定。结果:该研究从痔血安合剂中...     

抗肿瘤化合物LWK-34的药动学研究及其体内代谢分析

目的：测定抗肿瘤化合物LWK-34经灌胃和注射给药后在大鼠体内血浆的浓度变化,并分析其在大鼠体内的可能代谢产物,为该化合物的成药性评价及后续化合物结构修饰提供基础。方法：大鼠在给药后不同时间点剪尾采血,采用高效液相色谱-串联质谱法（LC-MS）检测大鼠体内LWK-34的血药浓度,GraphPad Prism 7.0软件绘制药时曲线,并用DAS 2.0软件进行动力学参数拟合,计算主要的药动学参数。同时建立超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MS）技术对比分析空白血浆和血浆样品的总离子流图,结合UNIFI代谢产物预测、筛查软件,对经大鼠灌胃后的代谢产物进行分析。结果：LWK-34体内吸收较慢且消除速率快,口服生物利用度较低,仅为3.38%。同时,通过对比分析血浆样品与空白血浆总离子流图,共推测出5个可能的代谢产物。结论：这是较为系统地对LWK-34进行药动学和体内代谢产物鉴定的报道,通过参考药动学数据及推导出的可能代谢产物,为深入了解LWK-34的体内代谢规律及后期结构修饰提供依据。     

基于HPLC-DAD的产康乐颗粒入血成分鉴定及含量测定

目的: 通过对产康乐颗粒进行血清药物化学研究,初步阐明产康乐颗粒的药效物质基础。方法: SD大鼠灌胃给药后,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)测定含药血清样品的HPLC色谱图,通过与空白样品的HPLC色谱图进行对比分析,获得血中移行成分信息,并对主成分进行定量分析。结果: 产康乐颗粒HPLC色谱图中可检出20个血中移行成分,其中5个成分可能为代谢成分,15个成分为机体直接吸收入血,包括绿原酸、黄芩苷和6-姜辣素(含量分别为:16.26,0.49,0.41μg·mL^-1)。结论: 通过该方法的研究,为阐明产康乐颗粒的药效物质基础提供科学依据。     

银杏叶中银杏萜内酯的高效液相色谱—电喷雾电离—质谱分析

目的:用高效液相色谱-电喷雾电离-质谱(HPLC-ESI-MS)法对银杏叶中银杏萜内酯进行分析。方法:利用LC-ESI-MS法对银杏叶样品进行了初步研究。液相色谱条件为色谱柱:Inertsil ODS 3,流动相:甲醇-水(36:64),流速1mL·min~(-);质谱为ZMD Micromass电喷雾质谱仪。结果:得到了样品总离子流和选择离子流图,及相应色谱峰的ESI-MS质谱图,对其进行了解析,鉴别出白果内酯及银杏内酯A、B、C、J。结论:本方法快捷、简单和准确。     

都梁丸的血清药物化学研究

目的对都梁丸的入血成分进行分析研究,探讨都梁丸的药效物质基础。方法采用偏头痛模型小鼠,灌胃给药制得含药血清和空白血清,通过比较都梁丸、酒炖白芷和川芎体外供试品及含药血清样品和空白血清样品的HPLC色谱图,根据保留时间及对照品,明确都梁丸给药后血中移行成分。结果都梁丸给药后,在血清中共有22个移行成分,其中18个成分为原形入血成分,4个成分为原型成分的代谢产物,经对照品确认了12种原型成分。结论这22个血中移行成分可能是都梁丸在体内直接作用的药效物质,为深入研究其作用机制、质量控制标准及剂型改革提供了科学依据。     

多奈哌齐对脑组织及血液中乙酰胆碱酯酶活性的影响

目的研究多奈哌齐单次给药对乙酰胆碱酯酶(AChE)活力的影响以及其与脑组织AChE活力变化的相关性。方法受试小鼠随机分为对照组和多奈哌齐组。对照组(n=8)生理盐水0.2 mL/10 g灌胃,于给药后于2 h取血、取脑;多奈哌齐组(7亚组,每组8只)于多奈哌齐灌胃后于0.5、1、2、4、8、12和24 h各时间点取血、取脑。采用AChE测定试剂盒测定全血、血浆及脑组织AChE活性,考马斯亮蓝试剂盒测定脑组织匀浆蛋白含量。结果与对照组比较,多奈哌齐各亚组全血、血浆中AChE的活力改变无统计学意义(P>0.05);各亚组脑匀浆AChE活力改变无统计学意义(P>0.05),但2 h亚组脑匀浆中AChE活力改变显著(P<0.05)。提示全血和血浆AChE活力改变与脑组织AChE活力变化并无显著关联。结论多奈哌齐0.625 mg/kg单次给药后2 h脑组织AChE活力显著降低,但对血液AChE活性无显著影响,且血液中酶活力变化与脑组织酶活力变化无显著关联。     

UPLC-Q-TOF/MS法分析岩大戟内酯B在大鼠体内的代谢产物

目的:分析岩大戟内酯B在大鼠体内的代谢产物,预测其代谢途径。方法:将大鼠随机分为空白组(灌胃0.5%羧甲基纤维素钠溶液)和给药组(灌胃岩大戟内酯B,100 mg/kg),每组8只。分别收集给药后0~12、>12~24、>24~36 h的粪便,给药后0~2、>2~8、>8~12、>12~24、>24~36、>36~48 h的尿液以及给药后1、2、8、12、24、36 h的血液样品,分别以超声提取法、固相萃取法、蛋白沉淀法处理后,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)联用技术和Analyst?TF 1.7.1、PeakView?2.2等软件联合分析、鉴定各样品中的代谢产物。结果与结论:从大鼠粪便中共检测到原型药物和7个代谢产物,从尿液和血液样品中分别检测到1、2个代谢产物。岩大戟内酯B灌胃后在大鼠体内经Ⅰ相的开环、脱水、氧化、脱氧、加氢反应等途径代谢;未检测到Ⅱ相代谢产物。     

结核性脑膜炎对莫昔沙星透过血脑屏障的影响研究

目的:以莫昔沙星为模型药物探讨结核性脑膜炎对血脑屏障通透性的影响。方法:21只小鼠尾静脉注射结核分枝杆菌菌悬液14d建立结核性脑膜炎模型;于造模成功后第2天取健康、模型小鼠灌胃给予莫昔沙星(100mg·kg-1),连续给药5d,每日1次,考察末次给药后24h内小鼠血浆和脑组织中血药浓度及药动学参数;取造模后小鼠按模型组(0.5%羧甲基纤维素钠)、治疗组(莫昔沙星,100mg·kg-1)、阳性对照组(利福平,20mg·kg-1)分别灌胃给予相应药物,每日1次,给药5d停2d,连续给药56d,考察第57天小鼠脑组织中活菌数量。结果:与健康小鼠比较,模型小鼠脑组织中莫昔沙星AUC0～24(hP<0.05)、Cmax、t1/2增加,血浆中无明显变化;与模型组比较,治疗组、阳性对照组小鼠脑组织中活菌数明显减少(P<0.05)。结论:在结核性脑膜炎存在情况下,莫昔沙星透过血脑屏障的量增加,对结核性脑膜炎模型小鼠有杀菌作用,作用与利福平相当。     

益可颗粒对正常及糖尿病模型小鼠的降糖作用研究

目的:观察益可颗粒对正常和实验性高血糖小鼠血糖水平的影响。方法:正常小鼠连续灌胃给药15d后,利用血糖试纸检测不同剂量益可颗粒对正常小鼠血糖影响;腹腔注射四氧嘧啶制备糖尿病小鼠模型,实验随机分为7组,每组10只小鼠,即正常对照组、模型对照组,阳性对照组、联合用药组、益可颗粒高剂量组(6.0g/kg)、益可颗粒中剂量组(3.0g/kg)及益可颗粒低剂量组(1.0g/kg),连续灌胃30d后,以血搪试纸测定小鼠空腹血糖。结果:三个剂量的益可颗粒连续灌胃给药15天,均不影响正常小鼠的血糖和体重;6.0g/kg益可颗粒组连续灌胃给药30d,可明显降低四氧嘧啶诱发的高血糖小鼠血搪。结论:益可颗粒不降低正常小鼠血糖,可降低实验性糖尿病小鼠的血糖。     

Pharmacokinetics and tissue distribution of a water-soluble flavonol triglycoside, CTN986, in mice

The pharmacokinetics and bioavailability of CTN986, a highly water-soluble flavonol triglycoside that has shown interesting antidepressant effects, were determined in mice after intravenous ( I. V.), intraperitoneal ( I. P.) and oral administrations. Concentrations of CTN986 in the biological samples were determined by a validated LC/MS/MS method. Non-compartmental methods were used to perform pharmacokinetic data analysis. The dose-dependent pharmacokinetics of CTN986 was characterized after I. V. administrations (0.16, 0.4 and 1.0 mg/kg) to mice. There was no significant difference in clearance (CL) with increasing dose [252.66 +/- 42.82 mL/h (0.16 mg/kg) versus 241.73 +/- 14.93 mL/h (1.0 mg/kg)] after I. V. administrations. The absolute bioavailability of CTN986 after I. P. and oral administrations was 96.57 % and 1.31 %, respectively. CTN986 was found to distribute widely in the internal organs of mice 10 min after oral dosage, with tissue concentrations in the order of duodenum, stomach, small intestine, kidney, lung, liver, brain, heart and spleen (from the highest to the lowest). In conclusion, CTN986 could be absorbed and extensively distributed into tissues as its intact form in mice.     

褪黑激素抑制小鼠吗啡戒断反应并降低血浆、脑组织中NO含量

目的观察褪黑激素(MT)对小鼠吗啡戒断反应及血浆、脑组织中NO含量的影响。方法定量吗啡sc,建立小鼠吗啡依赖模型;纳洛酮ip催瘾。用褪黑激素连续ig 3 d。根据小鼠戒断反应中出现跳跃反应的潜伏期、跳跃次数、体重丢失评定戒断反应强度。用硝酸还原酶法检测血浆和脑组织中NO含量。结果用褪黑激素ig可明显延长小鼠吗啡戒断跳跃反应的潜伏期、减少跳跃次数, 对体重丢失也有所改善。MT可抑制由戒断反应引起的血浆和脑组织中NO含量的升高。结论褪黑激素可抑制小鼠吗啡戒断反应并降低由戒断反应引起的血浆和脑组织中NO含量的升高。     

Kinetic and pharmacological studies on estazolam in mice and man

After i.v. and oral doses of estazolam (5 mg/kg) to mice, the drug was rapidly cleared with a beta half-life (t1/2 beta) of 0.7 h. The active metabolite, 1-oxo-estazolam, was present in traces in mouse plasma and brain. Its elimination t1/2 (beta), determined after i.v. injection of 1-oxo-estazolam (5 mg/kg) to mice, was similar to that of the parent drug in both plasma and brain. After a single oral dose of estazolam (4 mg) to four human volunteers the drug was rapidly absorbed and reached maximum plasma concentrations in one to three hours. Elimination t1/2 of estazolam in humans was 19 h. The metabolite was undetectable in human plasma after either single or multiple doses of estazolam. These results, together with the finding that 1-oxo-estazolam was less effective than estazolam, in terms of ED50 and brain concentrations necessary to antagonize leptazol convulsions and disrupt rota-rod performance in mice, indicate that the metabolite does not contribute significantly to the pharmacological effects of its parent drug.     

Penetration of oseltamivir and its active metabolite into the brain after lipopolysaccharide‐induced inflammation in mice

Objectives Oseltamivir phosphate is used for the treatment of influenza virus infections. Recently, oral intake has been associated with abnormal behaviour. The present study examined the brain penetration of oseltamivir phosphate and oseltamivir carboxylate, its active metabolite, during inflammation. Methods Male C57BL/6 mice were given three i.p. injections of lipopolysaccharide (LPS) or saline. We studied the concentration of Evans blue (a marker of blood–brain barrier function) and oseltamivir phosphate and its active metabolite in the brain and plasma. Key findings The brain‐to‐plasma ratio of Evans blue compared with saline‐treated control mice increased significantly with LPS dose. LPS‐induced inflammation increased the permeation of drugs through the blood‐brain barrier. The concentration of oseltamivir phosphate in both brain and plasma was 2‐fold higher in mice treated with LPS than in control mice. Although the plasma concentration of the active carboxylate was not significantly altered by inflammation, the brain concentration was increased 2.7‐fold in mice treated with LPS compared with control mice. Conclusions Administration of oseltamivir phosphate in the presence of inflammation increased the brain concentration of both parent drug and active metabolite, which may explain the central nervous system side‐effects observed with this agent.     

吡非尼酮的动物急性毒性

目的:研究一种新的抗纤维化药物吡非尼酮(PFD)的急性毒性。方法:观察一次性ip、igPFD对小鼠的急性毒性反应和死亡情况,一次性igPFD对大鼠和犬的急性毒性反应及死亡情况。结果:PFD的LD50分别为:1112mg/kg(小鼠ig);561mg/kg(小鼠ip);1221mg/kg(大鼠ig);Beagle犬igPFD的最大耐受剂量>1520mg/kg。结论:PFD对动物有一定的急性毒性作用,但属于低毒。     

果糖二磷酸钠对动物缺氧及急性脑缺血的保护作用

研究口服果糖二磷酸钠（ＦＤＰ）对动物缺氧及急性脑缺血的作用。方法：采用密闭、断头、结扎双侧带迷走神经颈总动脉等方法,观察ＦＤＰ对缺氧及急性脑缺血小鼠的影响;采用结扎双侧颈总动脉的方法,观察ＦＤＰ对急性脑缺血大鼠的影响。结果：ＦＤＰ可显著延长密闭、断头、结扎双侧带迷走神经颈总动脉后小鼠的死亡时间;可明显抑制结扎双侧颈总动脉大鼠的脑指数、脑含水量和血清磷酸肌酸激酶的增高,对脑血管通透性和血清乳酸脱氢酶的增高有抑制趋势,但作用不明显。结论：口服ＦＤＰ对动物缺氧及急性脑缺血有保护作用。     

盐酸去氢骆驼蓬碱胶囊兔体内药物动力学及生物利用度研究

目的　研究盐酸去氢骆驼蓬碱胶囊在兔体内的药物动力学及其生物利用度。方法　采用反相高效液相色谱法测定家兔血浆药物浓度。结果　家兔灌胃给盐酸去氢骆驼蓬碱胶囊后血浆药物浓度在 4.73 h左右达峰值(1 .5 2 7mg· L-1) ,消除半衰期为 4.73 h,灌胃给胶囊剂的生物利用度为 1 7.1 4%。结论　家兔灌胃给盐酸去氢骆驼蓬碱吸收迅速 ,但生物利用度较低     

硫酸头孢噻利小鼠血浆与脑组织药动学研究

目的 采用HPLC研究硫酸头孢噻利小鼠血浆以及脑组织的药动学。方法 ICR小鼠单次静脉注射头孢噻利1 200 mg·kg^-1,于给药后不同时间点采集小鼠血浆以及脑组织,HPLC分别测定其含量,采用DAS 3.1软件计算血浆以及脑组织内的药动学参数并比较分析。结果 硫酸头孢噻利血浆、脑组织中的主要药动学参数t1/2分别为0.202,0.261 h;Ke分别为3.424,2.651;Cmax分别为1 984.654,18.728 μg·mL^-1;AUC0-t分别为998.075,10.119 μg·h·mL^-1;MRT0-t分别为0.904,1.945 h。结论 小鼠单次尾静脉注射硫酸头孢噻利后,在脑组织内快速分布,两者t1/2相近,但在脑组织内滞留时间较长。     

国产吗氯贝胺的抗抑郁作用

研究国产吗氯贝胺对抑郁动物模型和单胺氧化酶－Ａ（ＭＡＯ－Ａ）活性的影响。吗氯贝胺５、１０、２０ｍｇ·ｋｇ－１（ｉｇ）可显著对抗利血平（２．８ｍｇ·ｋｇ－１，ｓｃ）引起的大鼠眼睑下垂，其抑制率分别为６０％，８０％与９０％。在小鼠获得性“绝望”实验中，吗氯贝胺５，１５，２５ｍｇ·ｋｇ－１（ｉｇ）可明显缩短小鼠６ｍｉｎ内不动时间。本研究尚证实，吗氯贝胺６，１２，２４ｍｇ·ｋｇ－１（ｉｇ）可抑制小鼠脑组织中ＭＡＯ－Ａ活性，并与剂量呈明显依赖关系。一次给予小鼠２４ｍｇ·ｋｇ－１（ｉｇ），２ｈ后吗氯贝胺对ＭＡＯ－Ａ活性的抑制作用达高峰（７４．７％），４ｈ后ＭＡＯ－Ａ活性开始有所恢复，于用药后１６ｈ活性已基本趋于正常。