微波提取茯苓多糖的工艺研究

目的:利用微波技术,最大程度的提取茯苓多糖.方法:首先对微波提取温度、提取时间、溶媒量及微波功率进行单因素考察,确定最佳的因素范围,而后对以上4种因素进行正交试验设计,优化得到微波提取茯苓多糖的最佳工艺.结果:茯苓的最佳提取工艺为:温度80℃,提取40 min,溶媒量1∶30,微波功率600 W.结论:该方法提取速度快,效率高,工艺稳定,重复性好.     

不同切制法对茯苓中茯苓多糖含量的影响

目的研究不同切制方法切制茯苓后茯苓多糖的含量,从而确定茯苓的最佳切制工艺;方法对茯苓采用鲜切法和传统切制方法,通过茯苓多糖的含量确定其最佳切制工艺;结果将茯苓的含水量控制在42％左右时为切制茯苓最佳切制工艺。此时切制的茯苓饮片茯芩多糖含量最高;结论该工艺参数合理,方便可行,重复性好、茯苓鲜切法较传统方法中茯苓多糖含量高。     

白术茯苓汤调控脾虚大鼠血管活性肠肽总多糖的提取工艺研究

目的研究白术茯苓汤总多糖的提取工艺。方法通过单因素实验及正交实验确定提取总多糖的优化条件，用分光光度法测定总多糖的含量。结果白术茯苓汤总多糖提取的最佳条件是：料液比为1：30、提取时间为2．0h、提取次数为3次、温度90℃．在此条件下测得白术茯苓汤中总多糖含量为48．25mg／g．结论该方法简便、快速、准确，适用于该复方中总多糖的含量测定。     

云南不同产地茯苓中多糖的含量测定

分别用水和稀碱为溶剂提取茯苓多糖,用硫酸-苯酚法测定云南9个不同产地茯苓样品的水溶性多糖和碱溶性多糖的含量。结果表明：云南不同产地的茯苓中水溶性多糖最高达7．03％,最低为3．27％,碱溶性多糖最高达92．72％,最低为65．85％．云南不同产地的茯苓中多糖含量有明显差别。研究结果为评价云南茯苓药材的质量及种植奠定基础。     

茯苓多糖提取方法研究进展

目的：综述近年来茯苓多糖提取工艺的研究进展。方法：主要对近十年来有关茯苓多糖提取工艺的文献进行综述。结果：介绍了茯苓多糖5种提取分离方法。结论：为茯苓多糖的提取分离提供参考,展望了茯苓多糖有效成分提取分离的应用前景。     

考察不同因素对茯苓佐剂多糖提取的影响

目的 考察提取温度、料液比、提取时间、提取次数、药材粒径及搅拌方式等因素对茯苓粗多糖及其疫苗佐剂多糖的影响.方法 提取温度选择20~100℃;料液比选择1:5~1:20;提取时间选择1~6 h;提取次数选择1~3次;药材粒径选择原饮片50目;选择静止和搅拌模式.采用苯酚-硫酸法测定糖含量,高效液相-凝胶过滤法测定多糖相对分子质量,PMP衍生-毛细管电泳法测定单糖组成.结果 ①控制提取温度应<70℃;②料液比在1:7.5~1:15之间;③提取时间可为2 h;④提取次数不超过2次;⑤原饮片需要粉碎提取,可为20目;⑥搅拌有利于活性多糖的溶出.结论 提取温度、提取次数和搅拌方式对茯苓多糖影响明显,药材粉碎有利于佐剂多糖浸出.     

茯苓多糖的提取分离方法研究

目的探讨茯苓多糖的提取及纯化方法。方法将新鲜茯苓进行粉碎、脱脂、水提、碱提等步骤提取纯化茯苓多糖。结果经过提取纯化可以得到茯苓多糖，并不合蛋白杂质。结论该方法简便易行，为进一步研究茯苓多糖水解特性，抗肿瘤的药理作用和制剂优化提供依据。     

羧甲基茯苓多糖脂质体的制备及其包封率的测定

目的制备羧甲基茯苓多糖脂质体,并测定羧甲基茯苓多糖脂质体的含量和包封率,初步探讨最佳包封的药量。方法采用薄膜分散法制备羧甲基茯苓多糖脂质体,离心分离法测定羧甲基茯苓多糖脂质体的包封率。结果离心法所得羧甲基茯苓多糖脂质体检测浓度线性范围为1～100 mg/L。羧甲基茯苓多糖脂质体的最佳包封的药量为50 mg/L,包封率为37.99%。结论羧甲基茯苓多糖脂质体的制备需要分别处理,不同浓度的羧甲基茯苓多糖脂质体有不同的包封率,测定过程中需按要求进行,明确最佳包封药量。     

茯苓皮与茯苓块中多糖含量测定

目的：比较两种商品茯苓中多糖含量,指导临床用药。方法：以茯苓多糖得率作为指标,采用硫酸-苯酚法测定。结果：茯苓块中多糖含量（12．35％）高于茯苓皮（10．64％）。结论：临床用药时,首选茯苓块。     

茯苓多糖对受照射肿瘤细胞自由基的影响

目的：观察茯苓多糖对受照射的肿瘤细胞及细胞培养上清液自由基相关指标的影响。方法：加不同剂量茯苓多糖的K562白血病细胞在^60Coγ射线15Gy照射后，立即收集上清液和细胞样本检测自由基的变化。结果：受照后细胞培养上清液中活性氧(ROS)含量和丙二醛(MDA)含量有明显的升高，加药后有所降低但仍高于未照射组(P≤0．05)，超氧化物歧化酶(SOD)浓度在受照射及加入多糖后无明显变化规律；细胞中活性氧含量及MDA在受照射后增加，加入茯苓多糖后活性氧含量仍继续升高，而MDA有所降低但仍明显高于未照射组，SOD活性在受照射后有所下降，加药后SOD活性有所升高但仍低于未照射对照组(P≤0．05)。结论：茯苓多糖对γ射线照射引起肿瘤细胞中自由基活性的增高无显著影响，由此推测茯苓多糖对正常细胞辐射防护作用的同时基本不会影响放疗的效果。     

不同转移倾向肿瘤亚株细胞内的微核观察

为了探讨恶性肿瘤转移与微核现象间的关系,本实验首次运用微核试验(MT)检测了小鼠腹水型肝癌(N_(22))及其肺转移倾向亚株(H_(22)SP_(10))、淋巴结转移倾向亚株(N_(22)SL_(10))。小鼠子宫颈癌(U_(14))及其肺转移倾向亚株(U_(14)AP_(11))瘤细胞内的微核。比较了经活体筛选的上述亚株与未经筛选的原瘤株的微核细胞率(MNF)、总微核率,结果上述两项指标H_(22)SP_(10)及H_(22)SL_(10)均显著高于H_(22)(P值分别为<0.002、<0.005;<0.005、<0.001);U_(14)AP_(11)也显著高于U_(14)(P分别为<0.001、<0.001),而H_(22)SL_(10)与H_(22)SP_(10)(P>0.05、>0.05)。它表明在异质性N_(22)及U_(14)细胞群体中具有器官倾向性转移的细胞染色体畸变较重,可能为肿瘤演进的结果。     

双胸蚯蚓溶栓酶对沙鼠缺血额叶皮质超微结构及离子的影响

采用结扎沙土鼠双颈总动脉20分钟后恢复血流制做脑缺血再灌注模型。应用透射电镜对额叶皮质超微结构进行观察,并采用电镜能谱技术对神经元随机检测Na~十Ca~卄等离子含量。结果表明,缺血的对照组神经元Na~十明显增高达16.43,而缺血后腹腔注入双胸蚯蚓溶栓酶的实验组显著下降为13.02,接近正常组的11.47;Ca~卄正常组为1.03,对照组增高达3.81,而实验组下降为2.44。同时实验组超微结构的损伤性改变明显轻于对照组。     

大豆皂甙和人参茎叶皂甙对糖尿病大鼠血SOD和LPO的影响

本实验取雄性Wistar大鼠,分四组,即正常组,糖尿病组(DM组),人参茎叶皂甙(GS)+DM组(简称GS组),大豆皂甙(SS)+DM组(简称SS组)。观察其血糖、SOD、LPO的变化,结果,DM组血糖明显升高,GS组和SS组,血糖明显下降。DM组SOD含量明显减少,GS和SS使DM大鼠的SOD含量明显增加。DM组LPO含量增高,而GS组和SS组的LPO含量均明显降低。提示了GS和SS能通过自身调节增加DM大鼠SOD的含量,降低LPO,清除自由基,减轻了自由基的损伤作用,对DM大鼠有一定的防治作用。     

高效液相 (HPLC) 荧光法同时测定人血浆中4种硫醇物的浓度

 目的  建立同时测定人血浆中半胱氨酸(cysteine,Cys)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、半胱氨酰甘氨酸(cysteinylglycine,CysGly)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)等4种硫醇物的高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)。方法  血浆经磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)稀释后,用三(2-羧乙基)膦盐酸盐［tris-(2-carboxyethyl)-phosphine hydrochloride,TCEP］还原,用三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)溶液进行蛋白沉淀,再用7-氟苯呋咱-4-硫酸铵盐(7-fluorobenzofurazan-4-sulfonic acid ammonium salt,SBD-F)进行衍生化反应,荧光检测器检测。色谱条件:色谱柱为Kromasil C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm),柱温29 ℃;流动相为甲醇:0.1 mol/L醋酸盐缓冲液(pH=4.5,3.5∶96.5,V/V),流速为0.8 mL/min,等度洗脱。激发波长385 nm,发射波长515 nm。采用外标法定量。结果  Cys、Hcy、CysGly和GSH的线性范围分别为50~800 μmol/L、4~64 μmol/L、10~160 μmol/L和2.5~40 μmol/L。Cys、Hcy、CysGly和GSH的最低检测浓度分别为2.5 μmol/L、1.0 μmol/L、1.0 μmol/L和1.0 μmol/L。各组分日内、日间精密度RSD均<12 %。平均回收率为95.01 %~116.17 %。结论  该方法具有检测时间短、灵敏性高、精密度和准确度好的特点,适用于临床人血浆中硫醇物浓度的常规检测。     

高效液相色谱法检测人血浆中咖啡因及其3种去甲基代谢产物

以８－氯茶碱作为内标，利用高效液相色谱同时测定人血浆中咖啡及其３种去甲基代谢产物－－副黄嘌呤、可可碱和茶碱的方法。这４种物质可以在一个固定相柱子上被同时分离；流动相为甲；０．１ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钠（３０：７０）（Ｖ／Ｖ）；流速：０．８ｍｌ／ｍｉｎ；紫外检测器，波长２７４ｎｍ。实验表明这４种物质的最小检出量均在７５ｎｇ／ｍｌ，并具有较好的线性、重复性及较高回收率。     

5种生物碱胃癌多药耐药逆转剂的筛选及机制研究

目的 研究骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱对肿瘤细胞多药耐药性（MDR）的逆转作用及机制。方法 以胃癌亲本细胞系SGC-7901和MDR细胞系SGC-7901/VCR为细胞模型,采用MTT法检测上述5种生物碱的细胞毒活性及对MDR的逆转效果;用流式细胞仪检测MDR逆转效果最好的贝母素乙对肿瘤细胞内阿霉素（ADR）蓄积的影响;Western blotting法检测P-糖蛋白（P-gp）的表达;Hoechst荧光染色和细胞免疫荧光法检测贝母素乙诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡情况。结果 骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱均能不同程度地抑制SGC-7901和SGC-7901/VCR细胞的增殖,在非毒剂量下贝母素乙能够显著提高SGC-7901/VCR细胞对ADR的敏感性及细胞内ADR的浓度,降低P-gp表达。贝母素乙联合5-氟尿嘧啶（5-FU）给药可诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡,凋亡细胞cleaved caspase-3呈高表达。结论 贝母素乙具有作为胃癌MDR逆转剂的潜力,其逆转耐药的机制可能与下调P-gp表达和诱导细胞凋亡有关。     

不同转移倾向小鼠肝癌瘤株与冰切组织体外作用的实验研究

本实验利用小鼠腹水型肝癌(H_(22))的肺转移倾向亚株(H_(22)SP_(10))与淋巴结转移倾向亚株(H_(22)SL_(10))和小鼠的心、肺、肝、肾、淋巴结冰切组织于体外混合培养,观察了不同转移能力的肿瘤细胞与正常组织间的相互作用。于混合培养24、48h后,计数冰切组织上粘附的肿瘤细胞,肝、肾、淋巴结上粘附的H_(22)细胞多于其它脏器。H_(22)SP_(10)主要粘附于肝、肾、肺,而H_(22)SL_(10)则主要粘附于淋巴结,几乎不粘附于肺组织。混合培养后的生长曲线表明加入的正常组织对三种瘤细胞生长具有不同作用,加入的五种组织对H_(22)生长均有促进作用,加入心、肝、肾组织使H_(22)SP_(10)细胞于培养48h之前呈递增趋势,而加入肺、淋巴结组织使H_(22)SP_(10)细胞生长数低于对照组,加入心脏组织96h后H_(22)SL_(10)细胞数开始高于对照组,而加入其它组织均使H_(22)SL_(10)细胞数低于对照组。该结果表明在活体中呈器官倾向性转移的瘤细胞在体外具有与相应组织特异性粘附的能力,而且这些细胞与不同宿主组织间存在不同相互作用。     

反相高压液相色谱与荧光分光光度计朕机检测儿茶酚胺类物质

本文就高效液相与荧光分光光度计联机检测多巴胺、去甲肾上腺素、肾上腺素的方法加以论述。     

孕周与母儿血甲状腺激素含量的关系

目的：观察不同孕周与母儿血甲状腺激素的关系。方法：应用放射免疫分析法对67例中、晚期妊娠要求引产患者，10例早产及78例孕足月自然分娩患者进行了母血及胎儿脐静脉、脐动脉血中TSH、T3、T4的测定。结果：TSH值在母血及胎儿血中随着孕周的增加而增加．T3值在胎儿血中与母血中比较，显示低T3血症，T4值接近正常母体水平。结论：测定母血中的甲状腺激素，可动态观察不同孕周甲状腺激素变化，可及时发现胎儿低甲血症。     

胰岛素降糖反应延迟机理的初步探讨

本文对10例IDDM病人皮下注射胰岛素后作了7.5小时动态观察,测定了BG、FI、G、F和GH。基础BG高者,胰岛素最大降糖作用延迟,降糖过程中,GH的升糖效应最敏感,G和F升高与血糖回升时间相一致,在BG高者,呈延迟反应。这种延迟反应可能是由于血糖高,使到达刺激后二种升糖激素分泌阈值所需的时间延长有关。