MIF通过调节急性幽门螺杆菌感染介导的炎症反应、自噬和凋亡促进胃癌细胞增殖及细胞周期进展

目的：探究巨噬细胞迁移抑制因子（MIF）在幽门螺杆菌（Hp）感染的胃癌细胞中的表达及MIF对Hp感染的胃癌细胞增殖和凋亡的影响及相关机制。方法：体外培养胃癌细胞系AGS,Western blot检测随Hp感染时间的延长，AGS细胞中MIF蛋白表达变化；siRNA干扰与脂质体瞬时转染技术靶向沉默胃癌细胞中MIF表达，RT-PCR与Western blot检测si-MIF转染效率；Hp感染转染后的胃癌细胞，并将其分为：si-NC组、si-MIF组、Hp+si-NC组、Hp+si-MIF组，MTT检测各组胃癌细胞增殖活力，Annexin V-FITC/PI双染色联合流式细胞术检测各组细胞凋亡率，DCFH-DA法检测各组细胞中活性氧（ROS）含量，JC-1染色观察各组细胞线粒体膜电位水平，Western blot检测各组细胞线粒体自噬信号通路PINK1/Parkin中蛋白PINK1、Parkin和自噬标志蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p62表达，免疫荧光检测各组胃癌细胞中自噬蛋白LC3B与线粒体特征蛋白Mito Tracker的共定位水平。结果：胃癌细胞中MIF蛋白水平随Hp刺激时间延长而逐渐升高，...     

胃癌中MCU的表达及对胃癌细胞转移的作用

目的探讨线粒体钙单向转运蛋白(mitochondrial calcium uniporter, MCU)在胃癌组织中的表达以及对胃癌细胞转移的影响。方法采用免疫组化SP法检测60例原发性胃癌和癌旁组织中MCU的表达;采用免疫荧光法和Western blot法检测20例新鲜胃癌组织及癌旁组织中MCU的表达。采用CCK-8实验检测MCU诱导剂(Spermine)对人胃癌细胞(MGC-803)增殖的影响。应用Transwell和细胞划痕实验检测对照组、Spermine组、siRNA MCU组对MGC-803细胞侵袭和迁移能力的影响。根据不同分组,干预48 h,通过线粒体膜电位检测钙离子,Western blot法检测MCU蛋白的表达水平。结果胃癌组织中MCU表达水平显著高于癌旁组织。细胞实验结果显示,Spermine对MGC-803细胞增殖的影响呈剂量依赖性。Spermine显著增加MGC-803细胞迁移和侵袭能力,siRNA MCU组显著降低细胞侵袭和迁移的细胞数量。线粒体膜电位结果表明,MCU调控胃癌细胞线粒体膜电位钙离子的水平。siRNA MCU组显著降低HIF-1α、TGF-β和增加E-cadherin蛋白的表达。结论 MCU在胃癌组织中高表达并促进胃癌细胞侵袭和迁移,对HIF-1α和TGF-β表达具有调控作用。     

钙网蛋白通过调节线粒体功能和线粒体合酶促进胃癌细胞转移

目的：探讨钙网蛋白(CALR)在胃癌组织中的表达水平及其调节AGS、HGC-27细胞转移的作用机制。方法：收集65例胃癌患者肿瘤组织样本和16例大网膜转移组织样本，采用免疫组织化学法检测胃癌及大网膜转移组织中CALR的表达水平；通过小干扰RNA(siRNA)下调AGS和HGC-27细胞中CALR的表达，通过慢病毒转染技术过表达AGS和HGC-27细胞中的CALR，采用Transwell实验和细胞划痕实验检测CALR表达对AGS、HGC-27细胞侵袭和迁移的影响；采用活性氧(ROS)和线粒体三磷酸腺苷(ATP)荧光探针检测AGS、HGC-27细胞ROS水平和ATP荧光强度；采用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测AGS、HGC-27细胞线粒体膜电位水平；Western blot法检测CALR、肌浆/内质网Ca²⁺转运ATP酶A2(ATP2A2)、ATP酶Na⁺/K⁺转运亚基Beta 3(ATP1B3)和ATP合酶-偶联因子6(ATP5J)的蛋白表达水平；建立胃癌裸鼠腹腔移植瘤模型，探究CALR在体内对HGC-27细胞增殖...     

沉默RalBP1抑制口腔癌细胞增殖、侵袭、间质转化及炎症因子水平

目的：探讨沉默RalBP1对口腔癌细胞CAL27增殖、凋亡、侵袭、间质转化及炎症因子水平的影响。方法：CAL27细胞分别转染3个不同序列（RalBP1-shRNA1、RalBP1-shRNA2及RalBP1-shRNA3）,RT-PCR检测RalBP1 mRNA表达，Western blot检测RalBP1蛋白表达，筛选最佳沉默序列进行后续实验；Western blot检测增殖相关蛋白的表达；EdU检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞凋亡；划痕实验检测细胞迁移；Transwell检测细胞侵袭；Western blot检测间质转化标志物表达；ELISA检测炎症因子含量；RT-PCR检测炎症因子mRNA表达。结果：与shRNA-NC组相比，RalBP1-shRNA1组RalBP1 mRNA及蛋白表达降低最为显著，因此后续实验选用RalBP1-shRNA1组作为沉默组；与shRNA-NC组相比，Ki67、Survivin表达降低，p21表达升高，EdU染色阳性细胞数显著减少，凋亡率显著升高，侵袭细胞数显著减少，划痕闭合率显著降低，VEGF、N-cad、FN表达显著降低，IL-6、IL-1β、iN...     

miR-433-3p靶向HP1BP3抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力

目的：探究微小RNA-433-3p(miR-433-3p)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响，以及miR-433-3p靶向异染色质蛋白1结合蛋白3(HP1BP3)对胃癌细胞的调控作用。方法：将人胃癌细胞系HGC-27和AGS分为阴性对照（NC）mimic组、miR-433-3p mimic组、NC siRNA (si-NC)组和HP1BP3 siRNA (si-HP1BP3)组，分别转染NC mimic、miR-433-3p mimic、si-NC和si-HP1BP3。RT-qPCR检测miR-433-3p在HGC-27和AGS细胞中的表达；CCK-8法和细胞集落形成实验检测细胞增殖；划痕愈合实验检测细胞迁移；Traswell实验检测细胞侵袭；Western blot检测HP1BP3蛋白表达。结果：与NC mimic组相比，miR-433-3p mimic组HGC-27和AGS细胞中miR-433-3p表达升高。过表达miR-433-3p抑制HGC-27和AGS细胞的增殖、迁移和侵袭，抑制HP1BP3蛋白表达；敲减HP1BP3抑制HGC-27和AGS细胞的增殖和迁移。结论：miR-433...     

穿心莲内酯对骨肉瘤143B细胞的抑制作用及其机制

目的:探究穿心莲内脂(AG)对人骨肉瘤143B细胞的抑制作用及其潜在的机制。方法:体外培养人骨肉瘤143B细胞,使用不同浓度(0~20μmol/L)的AG处理143B细胞,分别用结晶紫染色、MTT法和集落形成实验来检测AG对143B细胞增殖的影响。划痕愈合实验检测骨肉瘤143B细胞的迁移能力。Transwell小室实验检测骨肉瘤143B细胞的侵袭能力。Hoechst 33258染色实验和流式细胞术检测AG对骨肉瘤细胞凋亡的影响。不同浓度AG处理后,使用Western blot检测骨肉瘤细胞增殖、迁移侵袭和凋亡相关蛋白的水平。应用Western blot进一步检测Wnt信号通路中的β-catenin及其相关分子c-Myc的表达量。结果:与空白组相比,AG处理组中143B骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显受到抑制(P<0.05),且呈浓度依赖性。迁移侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶9(MMP-9)、波形蛋白(vimentin)和Snail蛋白的水平均下调(均P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2表达量升高,凋亡相关蛋白caspase-3的蛋白水平下降而cleaved caspase-3的蛋白水平升高,同时Wnt信号通路相关蛋白β-catenin和c-Myc的表达水平均明显下调(P<0.01)。结论:穿心莲内酯可能通过抑制Wnt信号通路的活性,从而达到抑制人骨肉瘤143B细胞增殖、迁移和侵袭能力,并且促进其凋亡。     

中药乳浆大戟抑制人胃癌多药耐药细胞增殖迁移侵袭和诱导凋亡的研究

本文旨在研究中药乳浆大戟抑制多药耐药人胃癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用,以及诱导细胞凋亡的作用及其作用通路。用不同浓度的乳浆大戟提取液处理人胃癌多药耐药SGC7901/ADR细胞,MTT试验观察细胞增殖抑制情况,Hochest33528染色荧光显微镜观察凋亡细胞核形态并测定凋亡指数,流式细胞术测定细胞凋亡率,Transwell法检测细胞迁移能力和侵袭能力,分光光度法检测caspase-3和caspase-9的酶活性表达,Western blotting检测细胞色素c的亚细胞分布。结果发现,乳浆大戟提取液对人胃癌多药耐药SGC7901/ADR细胞有明显的增殖抑制作用,该作用具有时间和浓度依赖性。乳浆大戟提取液处理的人胃癌多药耐药SGC7901/ADR细胞,凋亡指数和凋亡率均比对照组显著升高,并有时间和剂量依赖性;但添加了caspase酶抑制剂的细胞,凋亡指数没有明显上升。Transwell法检测显示,乳浆大戟提取液处理后的SGC7901/ADR细胞,迁移能力和侵袭能力显著下降。分光光度法检测发现,乳浆大戟提取液处理后的SGC7901/ADR细胞中,caspase-3和caspase-9表达均增加,与对照组有明显差异。Western blotting检测显示,细胞色素c在线粒体中的分布下降,在细胞质中的分布上升(即细胞色素c从线粒体向细胞质逸出)。研究表明,乳浆大戟提取液具有抑制人胃癌多药耐药SGC7901/ADR细胞增殖、抑制细胞迁移侵袭和诱导细胞凋亡的作用;乳浆大戟提取液诱导细胞凋亡的作用有细胞色素c、caspase-9和caspase-3的参与,提示内源性或线粒体凋亡通路。     

红景天甙通过抑制PI3K / AKT 通路促进人胃癌AGS 细胞凋亡

目的:研究红景天甙对人胃癌AGS细胞凋亡的作用及机制。方法:不同浓度红景天甙处理AGS细胞,CCK-8法检测红景天甙对AGS细胞增殖的影响;Hoechst33342核染色观察凋亡形态学变化,流式细胞术检测凋亡细胞数变化,Western blot检测凋亡蛋白和PI3K/AKT通路蛋白表达变化;PI3K/AKT激动剂胰岛素样生长因子-1(IGF-1)预处理AGS细胞,流式细胞术和Western blot检测AGS细胞凋亡改变。结果:红景天甙呈浓度依赖性抑制AGS细胞增殖,导致细胞核固缩增多,凋亡细胞数增加,抗凋亡蛋白Bcl-2下调,促凋亡蛋白Bax、cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9、cleaved-PARP上调,p-PI3K和p-AKT活性下降;IGF-1干预处理后,明显减弱红景天甙促凋亡效应。结论:红景天甙抑制胃癌细胞增殖,并通过抑制PI3K/AKT信号通路显著促进胃癌细胞的凋亡。     

利多卡因通过LncRNA H19/miR-671-5p分子轴调控胃癌细胞增殖、迁移及侵袭北大核心CSCD

目的:探讨利多卡因对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其对LncRNA H19/miR-671-5p的调控机制。方法:体外培养胃癌细胞AGS,使用不同浓度的利多卡因处理细胞;MTT检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;qRT-PCR检测H19及miR-671-5p的表达量;双荧光素酶报告实验验证H19与miR-671-5p的靶向关系;将pcDNA-H19及其阴性对照pcDNA转染至AGS细胞,使用利多卡因处理细胞,采用上述方法检测细胞增殖、迁移及侵袭;Western blot检测增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67(Ki-67)、增殖细胞核抗原(PCNA)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)的表达量。结果:与Con组相比,利多卡因不同剂量可明显降低细胞活力和Ki-67、PCNA、N-cadherin蛋白水平及H19的表达量(P<0.05),并可减少迁移及侵袭细胞数(P<0.05),提高E-cadherin蛋白水平及miR-671-5p的表达量(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实H19可靶向结合miR-671-5p;H19过表达可明显逆转利多卡因对细胞增殖、迁移及侵袭的作用。结论:利多卡因可能通过抑制H19表达及促进miR-671-5p表达从而抑制胃癌细胞的增殖、迁移及侵袭。     

枸橘苷对胃癌细胞抑制作用及其机制研究

目的:探究枸橘苷对AGS胃癌细胞抑制作用及其机制。方法:MTT实验检测枸橘苷对AGS细胞活力的影响;流式细胞术分析细胞周期分布以及细胞凋亡;细胞核染色分析AGS细胞在枸橘苷处理之后的形态学变化;Western blot检测枸橘苷对AGS细胞中外源性凋亡通路相关蛋白FasL、caspase-8、caspase-3和PARP,以及内源性凋亡相关蛋白Bak、Bcl-xL、Bax和caspase-9蛋白水平的影响。结果:MTT实验表明枸橘苷抑制AGS胃癌细胞活力,并且呈时间、剂量依赖性(P0.05);流式细胞术分析结果表明枸橘苷使细胞停滞在G_1期,凋亡数量增加(P0.05);核染色结果说明,与对照组相比,150μmol/L枸橘苷处理后细胞核明显浓缩,细胞凋亡数量增加;Western blot实验表明枸橘苷上调FasL,激活caspase-8和caspase-3,促使活化的caspase-3底物PARP切割(P0.05),而对线粒体调节的内源性凋亡通路相关蛋白没有影响。结论:枸橘苷通过激活外源性凋亡通路促使AGs细胞凋亡,抑制胃癌细胞增殖,从而发挥抗肿瘤作用,在临床上可能成为治疗胃癌的新型药物。     

lncRNA XIST通过靶向miR-3666调控胃癌细胞增殖、侵袭转移机制北大核心CSCD

目的:探讨lncRNA XIST对胃癌细胞增殖、侵袭转移的影响及分子机制。方法:收集武汉市第四医院30例胃癌患者癌组织及癌旁组织,培养正常胃黏膜上皮细胞MRG-1、胃癌细胞SGC-7901和AGS,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测lncRNA XIST和miR-3666表达水平;通过敲减胃腺癌细胞AGS中lncRNA XIST表达以及下调miR-3666表达水平,分析lncRNA XIST及miR-3666对胃癌细胞的调控作用,将细胞AGS分为si-NC组、si-XIST组、miR-NC组、miR-3666组、si-XIST+antimiR-NC组、si-XIST+anti-miR-3666组;MTT检测细胞增殖情况;Transwell检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测lncRNA XIST和miR-3666的靶向关系。结果:与癌旁组织和正常胃黏膜上皮细胞MRG-1比较,胃癌组织和AGS、SGC-7901细胞中XIST表达水平升高,miR-3666表达水平降低(P<0.05)。敲除lncRNA XIST或过表达miR-3666,AGS细胞增殖能力减弱,迁移和侵袭能力降低,细胞凋亡率升高(P<0.05)。lncRNA XIST靶向调控miR-3666,抑制miR-3666逆转了XIST基因敲除对胃癌AGS细胞增殖、运动性及凋亡的影响。结论:敲除lncRNA XIST可通过上调miR-3666抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡。     

EFNB2对膀胱癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响及其机制

目的 研究EFNB2对膀胱癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移等生物学功能的影响，探讨其作为免疫治疗的可能性。方法 以膀胱癌细胞系T24、5637、J82和UM-UC-3细胞为研究对象，选用人膀胱上皮永生化细胞系SV-HUC-1细胞作为阴性对照。通过慢病毒载体转染shRNA-EFNB2进行敲低实验，然后分别采用qRT-PCR和Western blot检测细胞中EFNB2的mRNA和蛋白表达水平；CCK8和克隆形成实验检测细胞增殖活力；流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率；Transwell和细胞划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力；Western blot检测Bcl2、Bax、Vimentin和E-cadherin的蛋白表达水平。结果 与人膀胱上皮永生化细胞系SV-HUC-1细胞相比，膀胱癌细胞系中EFNB2的表达水平显著增高,其中以T24细胞表达最高(P<0.01)。敲低T24细胞系EFNB2基因表达后，T24细胞增殖活力显著下降(P<0.05)；细胞周期虽然尚未有显著变化，但细胞凋亡率显著增高(P<0.05)，并且抗凋亡蛋白Bcl2表达显著下降（P<0.05）,促凋亡蛋白B...     

重组质粒pEGFP-N1-NPRL2对人胃癌细胞生物学特性的影响

目的:探讨pEGFP-N1-NPRL2真核表达载体对SGC-7901胃癌细胞体外增殖﹑细胞周期、凋亡、侵袭及迁移的影响。方法:构建pEGFP-N1-NPRL2真核表达载体,并进行酶切及测序鉴定。脂质体介导转染入SGC-7901胃癌细胞,应用荧光显微镜、RT-PCR、Western blot法检测NPRL2的基因及蛋白水平情况,CCK8法检测细胞增殖的变化,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率的变化,Transwell实验检测NPRL2对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果:成功构建了pEGFP-N1-NPRL2真核表达载体。重组质粒转染SGC-7901细胞后,通过荧光显微镜观察到绿色荧光的表达,RT-PCR和Westernblot法检测到NPRL2 mRNA及蛋白的表达,CCK8法检测发现NPRL2能够明显抑制肿瘤细胞增殖(P<0.05),细胞周期分析显示NPRL2使细胞停在G0～G1期(P<0.05),细胞凋亡结果显示NPRL2能抑制细胞凋亡(P<0.05),Transwell侵袭和迁移实验显示NPRL2使细胞侵袭迁移能力均降低(P<0.05)。结论:NPRL2可抑制肿瘤细胞的增殖、周期、侵袭及迁移,并促进凋亡。     

GKN2在胃癌细胞增殖、转移中的作用及机制

目的探讨胃动蛋白2(gastrokine 2, GKN2)对胃癌细胞的生长增殖、侵袭、转移的影响及分子机制。方法利用qRT-pCR和Western blot法检测GKN2在胃癌组织中的表达;构建对照细胞株AGS-CON、SGC-7901-CON与GKN2过表达细胞株AGS-GKN2、SGC-7901-GKN2,应用qRT-pCR和Western blot法检测GKN2在各细胞株中的表达变化,RTCA系统和克隆形成实验检测细胞增殖功能,Transwell及划痕实验检测细胞迁移和侵袭功能,并通过Western blot观察GKN2表达变化对PI3K/AKT/PTEN/mTOR信号通路相关蛋白的作用。结果 GKN2在胃癌组织及多株胃癌细胞株中的表达明显低于癌旁组织和正常胃上皮细胞;RTCA系统显示GKN2过表达组的增殖活性明显低于对照组;克隆形成实验结果显示,GKN2过表达组的细胞克隆数和大小明显低于对照组;Transwell及划痕实验结果表明,GKN2过表达组纵向迁移/侵袭数和横向迁移数明显低于对照组。Western blot结果显示,GKN2过表达下调增殖相关蛋白PCNA、Survivin,抗凋亡蛋白BCL-2及转移相关蛋白MMP-7、MMP-9和MMP-2表达水平,而上调Timp2表达水平。Western blot结果亦显示,GKN2影响PI3K/AKT/PTEN/mTOR通路的激活水平,特别是明显上调PTEN的表达。结论 GKN2在胃癌组织及多株胃癌细胞株中呈低表达或表达丢失。GKN2影响胃癌细胞的增殖和转移,可能通过PI3K/AKT/PTEN/mTOR通路促进胃癌的发生、发展。     

CD147通过Akt/mTOR信号通路调控脂肪酸合成对子宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的 探讨CD147的表达对子宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响和潜在的分子机制。方法 分析UCSC数据库BSG基因(编码CD147蛋白)在子宫颈癌中的表达,采用Log-rank test法评估各组表达的预后差异。应用Western blot法检测CD147在Siha、Hela和H8细胞中的表达,通过慢病毒转染Hela细胞下调CD147表达,并验证其转染效率。运用Western blot法检测各组细胞中p-Akt、p-mTOR、ACC1、FASN、E-cadherin和N-cadherin的表达;使用BODIPY染色和脂肪酸试剂盒检测细胞中脂肪酸含量;利用CCK-8、平板克隆和Transwell实验检测细胞增殖、侵袭和迁移能力。sh-CD147组经Akt激动剂(SC79)处理后,Western blot法检测细胞中p-Akt、p-mTOR、ACC1、FASN、E-cadherin和N-cadherin的表达;选用BODIPY染色和脂肪酸试剂盒检测细胞中脂肪酸含量;利用平板克隆实验和Transwell实验分别检测细胞增殖、侵袭和迁移能力。结果 UCSC数据库显示CD147在子宫颈癌中的表达...     

川芎嗪通过调控PI3K/Akt信号通路抑制三阴乳腺癌的增殖侵袭和EMT

目的探讨川芎嗪对三阴乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞增殖、侵袭和EMT的影响及可能机制。方法不同浓度川芎嗪处理MDA-MB-231细胞后,采用CCK8方法检测细胞增殖活性;Transwell法检测细胞的侵袭能力;Western blot检测EMT相关标志物E-cadherin, Vimentin, N-cadherin, Snail的表达变化;裸鼠移植瘤实验观察川芎嗪对瘤体增殖的影响;Western blot检测Akt, p-Akt, PI3K和p-PI3K蛋白的表达。结果 CCK8证实川芎嗪能抑制三阴乳腺癌细胞增殖,且呈现剂量依赖性;裸鼠成瘤实验证实川芎嗪在体内抑制乳腺癌细胞生长;Transwell实验表明川芎嗪可抑制细胞侵袭;Western blot结果显示川芎嗪上调E-cadherin表达,下调Vimentin,Ncadherin和Snail蛋白表达;同时发现川芎嗪显著抑制PI3K和Akt蛋白的磷酸化水平。结论川芎嗪能显著抑制乳腺癌细胞增殖,侵袭和EMT,该作用可能与抑制PI3K/Akt信号通路激活有关。     

下调USP9X表达对胃癌AGS细胞凋亡和侵袭能力的影响

目的:探讨下调X染色体连锁的泛素特异性肽酶9(USP9X)表达对胃癌细胞凋亡和侵袭能力的影响,并探讨其可能的分子机制。方法:将USP9X小干扰RNA(siRNA)和对照siRNA转染胃癌AGS细胞,将细胞分为3组:未处理的AGS组、对照siRNA组和USP9X siRNA组。采用real-time PCR和Western blot检测不同处理组的胃癌AGS细胞中USP9X的mRNA和蛋白表达。CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术和Boyden小室分别检测不同处理组胃癌AGS细胞的凋亡和侵袭能力;Western blot检测凋亡和侵袭相关蛋白的表达水平。结果:USP9X siRNA显著下调胃癌AGS细胞中USP9X的mRNA和蛋白表达水平。USP9X表达下调显著诱导胃癌细胞凋亡,并降低胃癌细胞的侵袭能力。USP9X表达下调显著降低Mcl-1和MMP-2的表达,但明显上调Bax蛋白的表达(P0.05)。结论:USP9X可能是胃癌细胞凋亡和侵袭的关键调控因子。     

miR-26a下调COX-2的表达抑制胃癌AGS细胞增殖和侵袭

目的探讨miR-26a在胃癌组织和胃癌AGS细胞中表达量的改变及其对胃癌AGS细胞增殖和侵袭的影响。方法采用Real-time PCR法检测18例患者胃癌组织及对应的癌旁组织中miR-26a的表达。胃癌AGS细胞分别转染miR-NC和miR-26a,采用Western blot法检测转染前后细胞中COX-2的表达水平,同时采用CCK-8和克隆形成实验检测转染后AGS细胞的增殖和侵袭情况。结果 miR-26a在胃癌组织中的表达明显低于癌旁组织(P0.01);COX-2在乳腺癌组织和细胞中的表达明显高于癌旁组织(P0.01)。转染miR-26a后,胃癌AGS细胞内COX-2的表达量显著下调。CCK-8和克隆形成实验结果显示,过表达miR-26a能明显抑制胃癌AGS细胞的增殖和侵袭(P0.01)。结论 miR-26a抑制胃癌AGS细胞的增殖和侵袭可能与下调COX-2的表达相关。     

干扰circRNA_002178抑制胶质瘤细胞恶性生物学行为

目的：探讨干扰circRNA＿002178对胶质瘤细胞增殖、凋亡、侵袭、炎症反应的影响。方法：RT-qPCR检测临床样本癌组织和癌旁组织中circRNA＿002178的表达；转染分组后采用RT-qPCR检测不同转染序列中circRNA＿002178的表达，筛选干扰效果最佳序列组；CCK8法检测细胞增殖率；克隆形成法检测细胞形成率；流式检测细胞凋亡水平；Western blot检测凋亡相关蛋白的表达水平；RT-qPCR检测VEGF mRNA表达水平；Western blot检测VEGF蛋白表达水平；Transwell检测侵袭；ELISA检测血清炎症因子含量。结果：胶质瘤组织circRNA＿002178表达水平明显高于癌旁组织，选用胶质瘤细胞U-251进行后续实验，选择干扰效果最为显著的circ＿002178-shRNA2组为后续实验干扰组。与shRNA-NC组相比，circ＿002178-shRNA2组胶质瘤细胞凋亡率与克隆形成率明显降低；胶质瘤细胞凋亡率及Bax/Bcl-2蛋白表达明显升高；胶质瘤细胞VEGF及其VEGF mRNA表达明显降低，侵袭细胞数量明显减少；促炎因子IL-6、i...     

miR-205-5p抑制体外胃癌细胞系增殖、迁移和侵袭

目的探讨miR-205-5p靶向RAS致癌家族基因2B(RAP2B)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 RT-qPCR和Western blot检测胃癌细胞AGS、MGC803、MKN-28、SGC-7901和正常胃黏膜细胞GES-1中miR-205-5p和RAS致癌家族基因2B的表达。分别构建过表达miR-205-5p和抑制RAP2B表达的AGS细胞株,采用MTT法检测细胞活力;Transwell小室法检测细胞的迁移及侵袭能力;Western blot检测RAP2B、cyclin D1、MMP-2、MMP-9、GSK-3β和β-catenin蛋白的表达。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-205-5p对RAP2B的靶向作用。结果与正常胃黏膜细胞相比,4种胃癌细胞中miR-205-5p的表达显著降低,RAP2B的表达显著升高(P0.05)。过表达miR-205-5p或抑制RAP2B表达均可显著抑制AGS细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制cyclin D1、MMP-2和MMP-9蛋白的表达(P0.05)。miR-205-5p可负性调控RAP2B的表达。结论 miR-205-5p通过靶向RAP2B抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭。