米非司酮对人早孕绒毛及蜕膜中骨桥蛋白和绒毛膜促性腺激素-β表达的影响

目的:探讨米非司酮对早孕绒毛及蜕膜中骨桥蛋白(OPN)和绒毛膜促性腺激素-β(β-hCG)表达的影响。方法:采用免疫组化半定量法检测米非司酮药物流产(n=20)和人工流产(n=20)的早孕绒毛及蜕膜中的OPN(骨桥蛋白)和β-hCG的表达。结果:OPN和β-hCG在早孕妇女绒毛组织和蜕膜组织中的表达米非司酮组均显著低于手术流产组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:米非司酮可能抑制了早孕绒毛及蜕膜中OPN和β-hCG的合成,进而影响胚泡着床和胎盘的形成,使妊娠难以维持,最终流产。     

凝集素受体WGA、RCA和ECL在米非司酮流产绒毛及蜕膜组织中表达的研究

目的:通过麦胚凝集素(WGA)受体、蓖麻凝集素(RCA)受体和鸡冠珊瑚树凝集素(ECL)受体在米非司酮流产的绒毛及蜕膜组织中的表达,探讨米非司酮的抗早孕机理。方法:以生物素标记的凝集素WGA、RCA和ECL为探针,应用亲和组织化学染色法检测3种凝集素受体在米非司酮流产组(实验组)和人工流产组(对照组)早孕绒毛及蜕膜组织上皮细胞及其间充质细胞的分布。结果:实验组WGA受体、RCA受体和ECL受体在蜕膜组织上皮细胞的表达比对照组均显著降低(P0.01)。实验组ECL受体在绒毛上皮的表达显著低于对照组(P0.01),实验组WGA和RCA受体在绒毛上皮细胞的表达与对照组无显著差异(P0.05)。实验组3种凝集素受体在绒毛及蜕膜的间充质细胞的表达,与对照组无显著差异(P0.05)。结论:米非司酮可能通过下调蜕膜上皮组织中WGA受体、RCA受体和ECL受体的表达,阻碍胚胎发育而导致流产。     

自然流产蜕膜及绒毛组织中钙网蛋白的表达及意义

目的:检测早期自然流产蜕膜及绒毛组织中钙网蛋白(CRT)和凋亡蛋白酶Caspase-3的表达及定位,初步探讨其在早期自然流产过程中的作用及相关性。方法:正常早孕者和早期自然流产者(先兆流产组、稽留流产组)行负压吸引人工流产术,取蜕膜及绒毛组织,HE染色比较其形态学变化,免疫荧光法检测CRT及Caspase-3的表达,统计学分析其相关性。结果:(1)CRT及Caspase-3在早期自然流产蜕膜及绒毛组织中表达高于正常早孕组;(2)稽留流产组蜕膜及绒毛组织中CRT及Caspase-3的表达均高于先兆流产组;(3)CRT与Caspase-3呈正相关。结论:CRT及Caspase-3异常表达可能参与早期自然流产的发生机制。     

Ang-1、Ang-2和AS在稽留流产患者血清和蜕膜组织中的表达及意义

目的:检测血管生成素1(Ang-1)、血管生成素2(Ang-2)及血管抑素(AS)在稽留流产(MA)患者血清和蜕膜组织中的表达,对血管生成的影响,探讨其与稽留流产的关系。方法:选取稽留流产患者62例和同期自愿要求终止妊娠的正常孕妇60例。酶联免疫吸附法检测患者血清中Ang-1、Ang-2和AS水平免疫组化法检测蜕膜组织中Ang-1、Ang-2、AS及CD31表达,计数两组微血管密度(MVD)。结果:稽留流产患者血清中Ang-1、Ang-2表达水平低于对照组,AS表达水平高于对照组,但差异无统计学意义。稽留流产患者蜕膜组织中Ang-1、Ang-2、CD31表达水平明显低于对照组(P<0.01或P<0.05),AS表达水平明显高于对照组(P<0.01)。对照组患者蜕膜组织中Ang-1、Ang-2表达水平与CD31呈正相关(r=0.535,r=0.466,P<0.01),Ang-1、Ang-2、CD31表达水平与AS呈负相关(r=-0.395,r=-0.506,r=-0.460,P<0.01或P<0.05);稽留流产患者蜕膜组织中Ang-1、Ang-2表达水平与CD31呈正相关(r=0.678,r=0.473,P<0.01),Ang-1、Ang-2、CD31表达水平与AS呈负相关(r=-0.610,r=-0.402,r=-0.491,P<0.01或P<0.05)。结论:蜕膜组织中Ang-1、Ang-2、AS表达与血管生成密切相关,Ang-1、Ang-2的低表达及AS的高表达参与稽留流产胚胎血管生成障碍。     

HIF-1α和VEGF在稽留流产患者血清和绒毛中的表达研究

目的探讨缺氧诱导因子(HIF)-1α和血管内皮生长因子(VEGF)在稽留流产患者血清和绒毛中的表达及二者的相关性。方法采用酶联免疫吸附试验和免疫组化SP法分别测定55例稽留流产患者(流产组)和45例正常早孕孕妇(对照组)血清和绒毛中HIF-1α和VEGF的表达水平。并将稽留流产组按有无明确原因分为有原因组和无原因组,同时根据胚胎死亡后稽留宫内时间分为<2周组、2～4周组和>4周组。结果流产组患者血清中HIF-1α和VEGF水平分别为(316.2±117.4)ng/L和(33.8±5.5)ng/L,对照组分别为(417.1±120.0)ng/L和(50.7±52.7)ng/L,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);流产组患者绒毛中HIF-1α和VEGF的表达量分别为3.0±2.1和3.6±1.9,对照组分别为6.2±3.4和6.8±3.6,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示,流产组和对照组血清中HIF-1α和VEGF的表达成呈正相关(r=0.565,P<0.05;r=0.549,P<0.05),两组绒毛中HIF-1α和VEGF的表达呈正相关(r=0.352,P<0.05;r=0.457,P<0.05)。但稽留宫内时间<2周组、2～4周组和>4周组三组血清和绒毛中HIF-1α和VEGF的表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 HIF-1α和VEGF在血清和绒毛中的低表达可能是导致稽留流产的重要原因之一。     

绒毛中表皮生长因子受体和血管内皮生长因子的表达对早孕绒毛血管生成的影响及与稽留流产的关系

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达对早孕绒毛血管生成的影响及与早孕稽留流产的关系。方法应用免疫组织化学方法检测30例稽留流产(稽留流产组)及30例早孕人工流产(早孕人工流产组)绒毛EGFR、VEGF的表达及绒毛的微血管密度(MVD),并分析相关因子的相关性。结果稽留流产组绒毛的MVD(7.03±1.72)比早孕人工流产组(14.74±1.66)显著降低(P0.01)。稽留流产组绒毛的EGFR表达水平(0.42±0.14)表达比早孕人工流产组(0.49±0.07)低(P0.05),稽留流产组绒毛的VEGF表达水平(0.47±0.12)表达比早孕人工流产组(0.60±0.12)低(P0.01)。Pearson相关分析显示在早孕人工流产绒毛及稽留流产绒毛中EGFR与VEGF的表达呈正相关,EGFR的表达与MVD呈正相关,VEGF表达与MVD呈正相关。结论绒毛组织中EGFR和VEGF的表达与绒毛血管生成状况密切相关,EGFR和VEGF低表达参与了稽留流产的绒毛血管的形成障碍。     

米非司酮对早孕蜕膜及绒毛中雌孕激素受体的影响

目的　探讨米非司酮对早孕蜕膜及绒毛中雌激素受体 (ER)、孕激素受体 (PR)的影响。方法　取正常早孕人工流产、口服米非司酮并米索前列醇 (米索 )后各 15例患者的蜕膜及绒毛 ,应用单克隆抗体链霉菌抗生物素蛋白 -过氧化酶 (SP)免疫组织化学方法及CHAMPION系列数字图像处理系统观察ER、PR的变化。结果　人工流产组蜕膜ER阳性细胞百分比为 (6 1 13± 4 75 ) % ,PR为 (6 1 33± 5 45 ) % ;米非司酮并米索组蜕膜ER为(33 40± 2 6 4) % ,PR为 (33 78± 4 12 ) % ,两组差异有显著性 (P <0 0 0 5 )。人工流产组绒毛ER阳性细胞百分比为 (38 81± 4 31) % ,PR为 (31 13± 4 78) % ,而米非司酮并米索组绒毛ER、PR均无表达。结论　米非司酮可使早孕蜕膜及绒毛中ER、PR下降 ,可能与药物流产后子宫出血时间长有关     

米非司酮药流时整合蛋白β3和细胞间粘附分子-1在蜕膜与绒毛内的表达

为了解米非司酮与米索前列醇对早孕流产的蜕膜、绒毛中整合蛋白 (Integrin)β3和细胞间粘附分子 1 (Intercellular adhesion molecule,ICAM 1 )的影响 ,应用流式细胞定性定量分析技术测定了 1 0例采用米非司酮与米索前列醇终止早孕妇女的蜕膜与绒毛组织中整合蛋白β3和 ICAM 1水平 ,并以 1 0例负压吸引人工流产者为对照。结果显示 :蜕膜与绒毛组织整合蛋白 β3和 ICAM 1均较对照组明显降低。实验组蜕膜组织整合蛋白 β3与 ICAM 1分别为 1 9.1± 5.0 1 %和 2 0 .6 1± 6 .51 % ,对照组分别为 2 9.3 1± 5.2 6和 2 6 .6 9± 6 .1 1 ;实验组绒毛组织整合蛋白β3与 ICAM 1分别为 2 1 .3 2± 4 .3 8%和 2 0 .2 9± 6 .4 9% ,而对照组则为 3 1 .3 1± 7.85和 2 8.6 9± 7.98。结果提示整合蛋白β3及 ICAM 1可能与维持早孕有关 ,米非司酮影响蜕膜、绒毛组织中整合蛋白 β3及 ICAM 1的表达 ,可能参与药物抗早孕机制。     

基质金属蛋白酶3及其抑制剂3在子痫前期患者胎盘中的表达

目的:通过检测子痫前期患者胎盘组织中基质金属蛋白酶3(MMP-3)及其抑制剂3(TIMP-3)的表达,以探讨两者的关系及其在子痫前期发病中的作用。方法:收集34例子痫前期患者(子痫前期组)及32例正常晚期妊娠妇女(正常对照组)的胎盘组织,用免疫组化法检测MMP-3及TIMP-3在胎盘组织中的表达。同时进行HE染色,选取5个高倍视野,计数绒毛血管数。结果:①MMP-3和TIMP-3在胎盘组织的蜕膜细胞和绒毛滋养细胞均有表达。②子痫前期组胎盘蜕膜细胞和绒毛滋养细胞中MMP-3的表达均显著低于对照组(P<0.01)。TIMP-3在子痫前期组胎盘蜕膜细胞和绒毛滋养细胞中的表达量均显著高于对照组(P<0.01)。③子痫前期组胎盘绒毛血管密度明显低于对照组(P<0.01)。结论:子痫前期患者胎盘中MMP-3与TIMP-3的表达情况与正常晚期妊娠妇女存在差异,提示妊娠妇女胎盘组织中MMP-3和TIMP-3的表达水平变化可能与子痫前期的发生、发展相关。     

缺氧诱导因子(HIF)-lα在稽留流产患者绒毛中的表达

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在稽留流产中的作用。方法:经B超及β-hCG动态监测证实为稽留流产患者50例,其中不明原因组30例,有原因组20例;根据胚胎停止发育后稽留宫内时间不同又分为A组、B组和C组,分别为胚胎停止发育≤2周、3-4周和≥5周。选取同时期经B超证实为活胎,因非意愿妊娠在门诊要求行人工流产的早孕妇女20例为对照组。应用免疫组织化学方法比较各组绒毛组织中HIF-1α的表达。结果:HIF-1α的表达主要位于绒毛滋养细胞胞浆和胞核;与正常早孕妇女绒毛组织相比较,稽留流产患者绒毛组织中HIF-1α表达明显降低(P<0.05);但A、B、C组间HIF-1α表达无统计学差异(P>0.05)。结论:HIF-1α在绒毛组织中的低表达可能是导致稽留流产的原因之一。     

GRIM-19在胚胎停育患者绒毛组织中表达及其作用机制的研究

目的:探讨干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因(gene associated with retinoidinterferon-induced mortality-19,GRIM-19)与胚胎停育的关系及作用机制。方法:选择50例胚胎停育患者为实验组,50例非意愿妊娠要求行人工流产的正常早孕患者为对照组。用免疫组织化学法对绒毛组织中GRIM-19进行定位检测;采用Western blotting和Real-time PCR检测绒毛组织中GRIM-19蛋白和mRNA水平。应用荧光探针JC-1测定绒毛细胞线粒体跨膜电位,AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡率。采用GRIM-19-siRNA转染技术使HTR-8/SVneo细胞低表达GRIM-19,并测定转染后细胞线粒体跨膜电位与细胞凋亡率。结果:GRIM-19在所有患者绒毛中均有不同程度的表达,与对照组相比,实验组绒毛中GRIM-19蛋白和mRNA的表达量降低,差异有统计学意义(P0.01)。实验组绒毛细胞线粒体膜电位较对照组降低,细胞凋亡率显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。转染后HTR-8/SVneo细胞线粒体膜电位明显降低、细胞凋亡率升高,较转染前均有统计学差异(P0.05),且线粒体膜电位与细胞凋亡率之间存在着明显的负相关性(r=-0.754,P0.01)。结论:GRIM-19在早期妊娠中起重要作用,而GRIM-19的低表达可能通过影响线粒体功能,增加细胞凋亡参与了胚胎停育的发生、发展。     

Treg和Th17在原因不明性复发性流产发病中作用的探讨

目的:探讨原因不明性复发性流产(URSA)患者和正常孕妇间Treg和Th17细胞因子的表达差异。方法:选择URSA患者20例为研究组,正常早孕妇女20例为正常对照组,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测两组蜕膜组织及外周血中Foxp3、ROR-γt、IL-17A及EBi3 mRNA的表达,酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中IL-17A及IL-35的含量。结果:URSA组蜕膜及外周血中Th17因子(ROR-γt、IL-17A)的表达均显著高于正常对照组(P=0.000),而Treg因子(Foxp3、EBi3)的表达均显著低于正常对照组(P=0.000)。两组蜕膜中各因子表达量均显著高于外周血(P<0.05)。正常孕妇组蜕膜中Foxp3、ROR-γt、EBi3 mRNA的表达与外周血中的表达显著相关(P=0.000、0.007、0.000,r=0.901、0.612、0.943);URSA组仅ROR-γt mRNA在蜕膜及外周血的表达存在相关性(P=0.012),且相关系数不佳(r=0.548<0.75)。URSA组、正常对照组血清中IL-17A含量分别为(16.120±4.155)pg/ml、(5.460±2.036)pg/ml,IL-35含量分别为(11.525±2.262)pg/ml、(31.515±3.473)pg/ml,差异显著。结论:Treg和Th17细胞因子在URSA患者和正常孕妇间存在显著差异,表明Treg和Th17细胞比例失调可能在原因不明性复发性流产的发病中起一定作用。     

血管内皮生长因子（VEGF）及其可溶性受体在早期复发性流产患者中的表达及临床意义

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）及其可溶性受体（silt．1）与复发性流产（RSA）的相关性。方法：应用酶联免疫吸附试验（ELIsAl技术和免疫组织化学方法分别检测30例RSA患者血清和绒毛中VEGF及silt-1的表达情况,并以同期因非意愿妊娠要求行人工流产术的正常早孕妇-k-（n=30）为对照,比较VEGF及silt-1表达的临床意义。结果：RSA组血清VEGF（2637．50±2145．09ng／L）、silt—l蛋白（13796．67±ll917．08ng／L）表达水平均高于对照组（分别为982．67±675．47ng／L和3540．67±2989．80ng／L）（P〈O．051：RSA组绒毛组织vEGF和silt-1的表达阳性率（分别为76．7％和96．7％）均高于对照组（分别为50．0％和66．7％）（P〈O．05）。结论：RSA患者血清和绒毛中VEGF、silt-1表达程度升高,可能是导致孕早期胚胎停育的原因之一。     

基质细胞衍生因子-1(SDF-1)表达与复发性流产的关系

目的:探讨复发性流产(recurrent spontaneous abortions,RSA)患者血清及滋养细胞中基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor 1,SDF-1)表达与流产的关系。方法:应用酶联免疫吸附试验及荧光定量聚合酶链反应方法检测RSA患者血清及绒毛组织中SDF-1 mRNA的表达(n=36),同期选取因非意愿妊娠7~9周行人工流产患者的血清及绒毛(n=36)作为对照组。结果:RSA患者血清及滋养细胞中SDF-1蛋白及mRNA的表达均显著低于正常妊娠者,差异有统计学意义(P0.01)。结论:RSA患者SDF-1蛋白及mRNA低表达与流产发生关系密切。     

长效促性腺激素释放激素激动剂降调后促性腺激素启动时间对IVF/ICSI-ET结局的影响

目的:探讨长效促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)降调节后促性腺激素(Gn)的启动时机对体外受精/卵胞质内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)结局的影响。方法:对接受IVF/ICSI-ET治疗的710个新鲜周期进行回顾性分析,根据GnRH-a降调节时间分组:14~15 d者为A组,16~17 d者为B组,≥18 d者为C组。分析和比较3组在年龄、不育年限、Gn使用天数、Gn使用剂量、启动日血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌激素(E2)水平、hCG注射日内膜厚度、获卵数、可移植胚胎数、种植率、临床妊娠率、流产率的差异。另根据月经周期Gn启动时间分组:在月经周期第3~7日者为Ⅰ组,月经第8日及以后者为Ⅱ组。分析和比较组间上述临床指标的差异。结果:A组的Gn用量为32.4±11.4支,Gn使用天数为12.5±1.9 d,显著大于B组(30.9±11.6支;10.8±2.5 d)、C组(30.5±11.5支;10.8±2.3 d),差异有统计学意义(P均0.05)。但Gn用量、Gn使用天数B组与C组间无统计学差异(P均0.05)。Gn不同启动时间的3组间在种植率、临床妊娠率及流产率方面无统计学差异(P均0.05);Ⅰ组、Ⅱ组的种植率、临床妊娠率、流产率相比较,差异亦无统计学意义(P均0.05)。结论:适当延长GnRH-a降调节天数有利于降低Gn用药剂量及用药时间,但是Gn启动时间对临床结局无显著影响。     

Expression of vitamin D and vitamin D receptor in chorionic villous in missed abortion

Abstract

The contemporary world despite its enough developed medicine and generally highly enlightened population faces a great problem of vitamin, micro-element and nutrient deficiency turning to become the XXI century pandemic. Along with that significant growth of interest can be seen towards vitamin D importance for reproductive physiology. The fact is that vitamin D receptors (VDR) have been detected in women's ovarium tissue, fallopian tubes, decidua and placenta. Some recent years studies have proven that vitamin D may act as immune regulator during implantation. During early pregnancy the trophoblast release vitamin D, which produces anti-inflammatory reaction and also induce decidual tissue growth for successive pregnancy. It was a comparison between the expression of Vitamin D and VDR in chorionic villous in cases of normal pregnancy and missed abortion groups. 64 samples of chorionic villous were taken: 32 from missed abortion and 32 from the induced abortion group. Abortive material was taken from two groups of women residing in North-West region of Russia: missed abortion and pregnancy terminated at woman's wish (induced abortion); 6–12 weeks of gestation, singleton pregnancy. Immune histochemical examination showed homogenous distribution of vitamin D and VDR expression in syncytiotrophoblasts, cytotrophoblasts and chorion villus stroma.Vitamin D expression relative area was 10,3% which is statistically different from the induced abortion group – 15,4% (p<0,01). VDR expression analysis showed its homogenous distribution in chorionic villus structures in both groups. High VDR expression was detected in chorion villus stromal components. In missed abortion group, the morphometry results showed distinctly lower relative area of vitamin D expression against the comparison group (35,9?±?1,8; 56,1?±?2,4 p?<?0,01). Also in missed abortion group, positively significant correlation has been determined between the level of vitamin D in blood and VDR relative area expression (r?=?0,412). In missed abortion group, definite vitamin D and VDR expression decrease was detected compared to the induced abortion group. The results witness vitamin D importance for pregnancy progress.     

白介素β1及凝血酶降低孕早期蜕膜细胞同源框A10基因的表达

目的:探讨炎症及出血导致流产的作用机制。方法:选择复发性流产(RSA)及正常妊娠孕6~10周的蜕膜组织各10例,并在体外分离培养正常妊娠的蜕膜细胞,加入雌、孕激素、白介素β1(IL-β1)及凝血酶处理后,用实时荧光定量RT-PCR及Western blotting检测RSA患者、正常妊娠者蜕膜组织及培养处理的各组蜕膜细胞内的同源框A10(HOXA10)的表达情况。结果:1HOX A10基因在孕早期蜕膜细胞中有表达;与正常妊娠者相比,RAS患者蜕膜组织HOXA10的表达明显下降(P0.05)。2雌、孕激素处理组的蜕膜细胞HOXA10 mRNA的表达显著增加(P0.05),是未处理组的9.5倍。3进一步加入IL-β1或凝血酶后,HOXA10 mRNA表达显著下降(P0.05);与雌、孕激素组相比,分别下降89.5%和74.9%。结论:1 HOXA10基因在孕早期蜕膜细胞中有显著表达,在RAS患者中的表达显著下降。2雌、孕激素促进HOXA10的表达,而IL-β1及凝血酶抑制HOXA10的表达。     

旋动式人工流产术临床观察

目的:观察旋动式人工流产术用于终止早期意外妊娠的临床结局。方法:因非意愿妊娠要求人工流产的孕38~60 d健康孕妇360例,随机分为旋动组和吸宫组,每组180例,分别用旋动式、负压吸引式人工流产器终止妊娠。观察宫颈扩张及疼痛情况、手术时间、出血量、完全流产率及抽样病理检查等项目。结果:旋动组对宫颈张开程度的要求、疼痛感较吸宫组明显减小;旋动式手术时间(6.0±1.1 min)远少于吸宫组(7.9±2.5 min),P<0.01,其它项目差异无统计学意义。病理结果示旋动组组织损伤小于吸宫组。结论:旋动式流产术几乎无需扩张宫颈,明显减轻疼痛,无负压产生,损伤小,安全有效。     

1450例人工流产女性实施流产后服务的随访研究

目的:对流产后服务(post-abortion care,PAC)进行临床实践和评价。方法:1 450例因非意愿妊娠在计划生育门诊自愿进行人工流产者,在流产后接受相关的流产后服务,比较患者流产前的一般情况、接受流产后服务用的避孕方案及其相应副作用、坚持避孕方案的时间、重复人工流产的发生率及间隔时间等。结果:所有接受PAC的患者术后均立即采用了避孕措施,术后首月主要采用的避孕方式为口服避孕药(n=573)、屏障避孕(n=551)、曼月乐(n=287)及普通IUD(元宫药铜IUD、活性γ型IUD、TCu220IUD、吉妮致美IUD等)(n=39)。随访12个月后曼月乐组100%坚持使用,普通IUD组使用人数则由最初的39例增至83例,比流产术后增加了1倍以上,主要由原口服避孕药组转入。口服避孕药组的坚持使用率为46.4%。所有坚持随访的女性均未发生随访期间意外妊娠。坚持避孕的各组中,起始有痛经、点滴阴道出血、漏服、环位置下移等不适,均遵医嘱来院处理;随访3个月后各组的不适症状均明显缓解;随访6个月后各组均无不适主诉。结论:科学系统的优质PAC能有效防范重复流产发生,保证避孕效率,从而保护女性的生殖健康。