西罗莫司对高脂饮食诱导的NAFLD大鼠外周血Treg/Th17细胞的影响

目的 研究西罗莫司对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠外周血Treg/Th17细胞的影响。方法 随机将60只SD大鼠分为西罗莫司干预组、模型组和对照组,每组20只。采用高脂饮食喂养12周建立NAFLD模型,在造模成功后,在其中20只动物,给予西罗莫司干预2周。采用ELISA法检测血清白介素-10(IL-10)、IL-17和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,使用全自动生化分析仪检测血生化指标,使用FACSVia型流式细胞仪检测外周血Treg和Th17细胞百分比。结果 干预后,西罗莫司干预组血清AST和ALT水平分别为(134.9±15.3)U/L和(109.4±18.2)U/L,显著低于模型组【(151.1±28.9)U/L和(128.9±17.7)U/L,P<0.05】;血清TG、TC和LDL-C水平分别为(0.9±0.3)mmol/L、(2.6±0.8)mmol/L和(3.3±1.2)mmol/L,显著低于模型组【(1.1±0.5)mmol/L、(3.6±1.3)mmol/L和(5.4±1.8)mmol/L,P＜0.05】,而血清HDL-C水平为(1.3±0.5)mmol/L,显著高于模型组【(0.7±0.4) mmol/L,P＜0.05】;血清IL-10水平为(68.9±26.6)pg/ml,显著高于模型组【(37.8±17.2)pg/ml,P＜0.05],而血清IL-17和TNF-α水平分别为(13.2±3.3)pg/ml和(0.7±0.2)ng/ml,显著低于模型组【(22.6±4.0)pg/ml和(1.2±0.4)ng/ml,P＜0.05】;西罗莫司干预组外周血Treg细胞百分比为(4.5±0.7)%,Th17细胞百分比为(1.7±0.6)%,Treg/Th17比值为(2.6±0.7),与模型组比,差异显著【(3.8±0.9)%、(2.8±1.1)%和(1.5±0.7),P＜0.05]。结论 应用西罗莫司干预高脂饮食诱导的NAFLD大鼠能减轻炎症反应,纠正外周血Treg/Th17细胞比值失衡状态,可能有助于阻止NAFLD进展,值得进一步研究。     

硫普罗宁联合多烯磷脂酰胆碱治疗酒精性肝病患者疗效及血清TLR4、MD-2和TGF-β1水平变化

目的 探讨应用硫普罗宁联合多烯磷脂酰胆碱治疗酒精性肝病(ALD)患者的疗效及对血清Toll样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白-2(MD-2)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平的影响。方法 2018年1月～2019年12月我院收治的104例ALD患者,采用随机数字表法分为观察组52例和对照组52例。给予对照组患者多烯磷脂酰胆碱胶囊口服治疗,观察组则在对照组治疗的基础上予以硫普罗宁片口服治疗,两组均连续治疗3个月。采用 ELISA 法检测血清TLR4、MD-2和TGF-β1水平。结果 在治疗3个月末,观察组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平为(34.8±13.9)U/L,显著低于对照组【(73.5±25.1)U/L,P<0.05】,血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平为(43.1±14.2)U/L,显著低于对照组【(89.0±28.6)U/L,P<0.05】,血清总胆红素(TBIL)水平为(15.5±9.7)μmol/L,显著低于对照组【(28.3±12.9)μmol/L,P<0.05】,血清谷氨酰转肽酶(GGT)水平为(53.9±14.2)U/L,显著低于对照组【(82.2±29.1)U/L,P<0.05】;血清总胆固醇(TC)水平为(4.1±0.5)mmol/L,显著低于对照组【(5.4±0.7)mmol/L,P<0.05】,甘油三酯(TG)水平为(1.3±0.6)mmol/L,显著低于对照组【(2.7±1.0)mmol/L,P<0.05】,血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平为(1.2±0.3)mmol/L,显著高于对照组【(1.0±0.4)mmol/L,P<0.05】,血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平为(3.4±0.9)mmol/L,显著低于对照组【(4.1±1.1)mmol/L,P<0.05】;血清TLR4水平为(3.0±0.6)pg/mL,显著低于对照组【(4.2±1.0)pg/mL,P<0.05】,血清MD-2水平为(415.4±128.5)pg/mL,显著低于对照组【(531.7±145.8)pg/mL,P<0.05】,血清TGF-β1水平为(3.4±1.1)pg/mL,显著低于对照组【(5.8±1.6)pg/mL,P<0.05】。结论 应用硫普罗宁联合多烯磷脂酰胆碱治疗ALD患者近期疗效较好,可能与该联合治疗降低了血清TLR4、MD-2和TGF-β1水平,减轻了肝损伤,改善了血脂代谢紊乱有关。     

氧化苦参碱对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏保护作用研究*

目的 观察氧化苦参碱(OMT)干预对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝脏的保护作用。方法 随机将40只SD大鼠分为对照组10只、模型组10只、OMT干预组10只和辛伐他汀干预组10只,采用高脂饮食饲养建立NAFLD模型,自第9 w开始分别给予OMT或辛伐他汀灌胃至16 w。采用ELISA法检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。取肝组织匀浆,检测超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平。结果 OMT干预组大鼠体质量和肝质量分别为(610.3±9.4)g和(11.6±0.7)g,显著低于模型组【分别为(631.8±13.9)g和(13.9±0.6)g,P<0.05】;血清ALT和AST水平分别为(78.9±7.0)U/L和(120.4±11.3)U/L,显著低于模型组【分别为(96.7±11.4)U/L和(183.1±25.9)U/L,P<0.05】;血清TC、TG和LDL水平分别为(2.0±0.2)mmo/L、(2.2±0.1)mmo/L和(1.0±0.1)mmo/L,显著低于模型组【分别为(2.4±0.2)mmo/L、(2.8±0.2)mmo/L和(1.2±0.2)mmo/L,P<0.05】;血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平分别为(6.4±1.8)pg/ml、(63.7±8.5)pg/ml和(13.9±1.9)pg/ml,显著低于模型组【分别为(13.9±8.4)pg/ml、(149.8±12.0)pg/ml和(36.5±2.9)pg/ml,P<0.05】,而血清IL-10水平为(42.3±2.0)pg/ml,显著高于模型组【(18.9±1.9)pg/ml,P<0.05】;肝组织匀浆SOD和GSH水平分别为(22.3±2.1)μg/mg和(26.0±2.1)U/mg,显著高于模型组【分别为(17.5±1.9)μg/mg和(15.8±1.8)U/mg,P<0.05】,而MDA水平为(17.9±2.2)nmol/mg,显著低于模型组【(23.8±2.7)nmol/mg,P<0.05】。结论 氧化苦参碱可有效保护NAFLD大鼠肝功能,降低血脂水平,可能与其抗炎和抗氧化应激作用有关。     

非酒精性脂肪性肝炎患者血清成纤维细胞生长因子-21和脂联素水平变化及其临床意义探讨

目的 探讨非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者血清成纤维细胞生长因子-21(FGF21)、脂联素(APN)和胰岛素抵抗水平变化及其临床意义。方法 2 018年7月～2019年8月我院就诊的41例NASH患者和41例同期健康人群,检测空腹血糖(FBG)和空腹胰岛素(FINS),计算稳态模型胰岛素抵抗(HOMA-IR)指数,采用ELISA法检测血清FGF21水平,采用放射免疫法检测血清APN水平。结果 NASH患者FBG水平为(8.7±1.6)mmol/L,显著高于健康人【(5.6±0.5)mmol/L,P<0.05】,FINS水平为(30.9±9.8)μIU/mL,显著高于健康人【(12.5±3.6)μIU/mL,P<0.05】,HOMA-IR水平为(1.9±1.1),显著低于健康人【(3.8±2.5),P<0.05】;NASH血清FGF21水平为(279.7±106.4)pg/mL,显著高于健康人【(141.2±62.5) pg/mL,P<0.05】,血清APN水平为(2.9±0.8)μg/mL,显著低于健康人【(4.1±1.0)μg/mL,P<0.05】;10例重度组患者血清FGF21水平为(285.7±116.4)pg/mL,显著高于16例中度组和15例轻度组【分别为(174.5±75.3)pg/mL和(150.7±65.5)pg/mL,P<0.05】,血清APN水平为(2.1±0.5)μg/mL,显著低于中度组和轻度组【分别为(2.6±0.9)μg/mL和(3.0±1.1)μg/mL,P<0.05】,FBG水平为(9.9±2.6)pg/mL,显著高于中度组和轻度组【分别为(7.5±2.1)pg/mL和(6.6±1.5)pg/mL,P<0.05】,FINS水平为(35.9±8.8)pg/mL,显著高于中度组和轻度组【(27.1±4.0)pg/mL和(15.5±3.6)pg/mL,P<0.05】,HOMA-IR水平为(1.5±1.0),显著低于中度组和轻度组【分别为(1.7±1.2)和(2.1±1.0),P<0.05】;17例存在高血压糖尿病或高脂血症的NASH患者血清FGF21水平为(315.7±99.2)pg/mL,显著高于24例无合并症组【(254.2±91.1)pg/mL, P<0.05】,血清APN水平为(2.6±0.7)μg/mL,显著低于无合并症组【(3.1±0.8)μg/mL,P<0.05】。结论 合并有高血压、糖尿病和高脂血症的NASH患者血清FGF21水平升高,而血清APN和胰岛素抵抗指标降低,检测NASH患者血清FGF21、APN和胰岛素抵抗水平,有助于评估患者病情。     

阿托伐他汀联合硫普罗宁治疗非酒精性脂肪性肝病患者疗效初步研究

目的 应用阿托伐他汀联合硫普罗宁治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者,以初步观察疗效及其血清核转录因子κB(NF-κB)、转化生长因子-β(TGF-β)、胰岛素抵抗(IR)和血脂代谢的变化。方法 2016年12月~2019年9月我院收治的NAFLD患者104例,被随机分为对照组52例和观察组52例,分别给予硫普罗宁肠溶片和硫普罗宁肠溶片联合阿托伐他汀钙片治疗,连续观察8周。常规检测血生化指标,计算稳态模型胰岛素抵抗(HOMA-IR)指数,采用ELISA法检测血清NF-κB、TGF-β和脂联素水平,采用放射免疫法检测血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平。结果 在治疗结束时,观察组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平为(27.8±2.5)U/L,显著低于对照组【(43.6±3.0)U/L,P<0.05】,血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平为(22.1±6.3)U/L,显著低于对照组【(46.4±6.9)U/L,P<0.05】,血清谷氨酰转肽酶(GGT)水平为(55.6±9.8)U/L,显著低于对照组【(71.3±10.3)U/L,P<0.05】;血清甘油三酯(TG)水平为(2.4±0.5)mmol/L,显著低于对照组【(3.0±0.4)mmol/L,P<0.05】,血清总胆固醇(TC)水平为(3.6±0.7)mmol/L,显著低于对照组【(4.9±0.5)mmol/L,P<0.05】,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平为(2.6±0.7)mmol/L,显著低于对照组【(3.1±0.6)mmol/L,P<0.05】,而血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平为(1.3±0.2)mmol/L,显著高于对照组【(1.1±0.3)mmol/L,P<0.05】;血清NF-κB水平为(1.2±0.1)pg/mL,显著低于对照组【(2.6±0.2)pg/mL, P<0.05】,血清TGF-β水平为(3.3±1.2)pg/mL,显著低于对照组【(5.7±1.0)pg/mL, P<0.05】,HOMA-IR水平为(2.2±0.4),显著低于对照组【(2.7±0.5),P<0.05】,而血清IGF-1水平为(0.4±0.2)μg/L,显著高于对照组【(0.3±0.1)μg/L,P<0.05】,血清脂联素水平为(11.9±2.1)mg/L,显著高于对照组【(10.7±1.8)mg/L, P<0.05】;治疗期间,观察组不良反应发生率为13.5%,与对照组的9.6%比较无统计学差异(P>0.05)。结论 应用阿托伐他汀联合硫普罗宁治疗NAFLD 患者可短期恢复肝功能指标,降低血清NF-κB和TGF-β水平,改善IR和血脂代谢紊乱,其长期疗效还有待于进一步观察。     

生长抑素通过抑制内质网应激反应减轻肝纤维化小鼠肝损伤研究

目的 观察生长抑素(SST)对肝纤维化(LF)小鼠肝组织内质网应激(ERS)反应的影响。方法 将40只野生型小鼠随机分为对照组、模型组、小剂量SST干预组和大剂量SST干预组,给予小鼠腹腔内注射25% CCl₄ 橄榄油混合制剂制备肝纤维化模型,分别给予大、小剂量的SST进行干预。取肝组织行天狼猩红和免疫组化染色,对肝组织行Ishak评分,采用Western blot法检测肝组织Bcl-2、Bax、Casp-9、BiP和CHOP蛋白表达变化。结果 模型组肝组织炎症活动度评分为(12.2±2.7),显著高于对照组[(1.8±0.8),P＜0.01],肝纤维化程度评分为(5.4±0.5),显著高于对照组[(0.1±0.3),P＜0.01];血清AST 和ALT水平分别为(194.7±35.2)U/L和(121.8±26.6)U/L],均显著高于对照组[分别为(53.8±21.7)U/L和(35.3±12.9)U/L,P＜0.01];大、小剂量SST干预组小鼠肝脏炎症活动度评分分别为(7.7±2.1)和(6.9±1.97),肝纤维化程度评分分别为(4.3±1.0)和(3.9±0.9),较模型组显著改善(P＜0.05);模型组肝组织Bax、Casp-9、BiP和CHOP蛋白相对表达量显著强于对照组([P＜0.01),而SST干预组Bax、Casp-9、BiP和CHOP蛋白相对表达量均显著弱于模型组(F=26.36,F=14.81,F=25.11和F=30.31,P＜0.05)。结论 SST能够改善CCl₄诱导的肝纤维化小鼠肝组织炎症活动和纤维化程度,其机制可能与其抑制了肝组织ERS反应有关。     

抑制TRAF6基因表达对自身免疫性肝炎大鼠肝组织NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响

目的 探讨抑制TRAF6基因表达对自身免疫性肝炎(AIH)大鼠肝组织NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。方法 随机将40只SD大鼠分为对照组、模型组、空载体组和TRAF6 shRNA干扰组,每组10只,采用特异性抗原S-100诱导建立大鼠AIH模型,分别给予生理盐水、转染空载体和转染TRAF6 shRNA处理。采用免疫组化法检测肝组织TRAF6蛋白表达,采用qRT-PCR法检测肝组织TRAF6 mRNA水平,采用ELISA法检测肝组织匀浆白介素1β(IL-1β)和白介素6(IL-6)水平,采用Western blot检测肝组织NF-κB信号通路相关基因蛋白表达。结果 模型组大鼠肝组织TRAF6 mRNA水平为(6.2±0.4),显著高于正常组(1.0±0.2,P＜0.05),而TRAF6 shRNA干预组大鼠肝组织TRAF6 mRNA水平为(1.5±0.2),较模型组显著降低(P＜0.05);模型组大鼠肝组织匀浆IL-1β水平为(60.3±8.1)pg/mL,IL-6水平为(41.5±5.9)pg/mL,均显著高于正常组[(8.9±0.6)pg/mL和(15.6±0.6)pg/mL, P＜0.05];模型组大鼠肝组织IκBα、NF-κB p65、NF-κB p50、p-NF-κB p65和p-NF-κB p50蛋白表达相对水平分别为(1.3±0.1)、(1.6±0.1)、(1.3±0.1)、(1.3±0.1)和(1.1±0.1),均显著高于正常组[分别为(0.3±0.03)、(0.3±0.02)、(0.3±0.03)、(0.3±0.03)和(0.3±0.03),P＜0.05],而抑制了TRAF6表达组大鼠肝组织IL-1β为(31.5±4.0)pg/mL,IL-6为(27.4±4.2)pg/mL,IκBα、NF-κB p65、NF-κB p50、p-NF-κB p65和p-NF-κB p50蛋白表达分别为(1.0±0.1)、(0.9±0.05)、(0.7±0.1)、(0.8±0.1)和(0.5±0.05),均显著低于模型组(均P＜0.05)。结论 抑制TRAF6基因表达可降低AIH大鼠肝内炎症水平,从而能改善肝组织损伤,其机制可能与调节了NF-κB信号通路的活化有关。     

化浊通瘀汤干预非酒精性脂肪性肝病大鼠血清肿瘤坏死因子-α和瘦素的变化*

目的 通过分析化浊通瘀汤干预非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和瘦素(leptin)水平变化,揭示化浊通瘀汤防治NAFLD的机制。方法 将60只SD大鼠随机分为对照组12只和模型组48只,给予高脂饲料建立NAFLD模型,再将模型动物随机分为模型组、大中小化浊通瘀汤处理组和水飞蓟宾处理组,分别给予不同的药物灌胃8 w。采用ELISA法检测血清TNF-α和leptin水平。结果 大、中、小剂量化浊通瘀汤处理组大鼠体质量分别为(566±19.4)g、(577±24.3)g、(585±18.5)g,显著低于模型组;大、中、小剂量化浊通瘀汤处理组血清TNF-α水平分别为(30.7±3.5)pg/mL、(34.1±4.2)pg/mL、(37.0±2.3)pg/mL,显著低于模型组;大、中剂量化浊通瘀汤处理组血清瘦素水平分别为(2.8±0.2)ng/mL和(2.8±0.1)ng//mL,显著低于模型组;与模型组相比,各中药干预组血清AST、ALT、TG、TC、FBG水平均显著下降 (P<0.01)。结论 化浊通瘀汤干预能减轻NAFLD动物肝组织炎症,降低血清TNF-α和瘦素水平。     

E型前列腺素受体4对CCL4诱导的肝损伤小鼠肝组织肝纤维化相关蛋白表达的影响*

目的 探讨E型前列腺素受体4(EP4)在CCL₄诱导的肝损伤小鼠肝纤维化发生过程中的作用。方法 取30只C57BL/6N小鼠,随机分为对照组、模型组和CCL₄联合E7046处理组(n=10),采用CCL₄注射法建立肝损伤模型,分别给予甲基纤维素或EP4特异性拮抗剂E7046溶液灌胃干预。采用Western blot和qPCR检测小鼠肝组织EP4、α-SMA蛋白及其mRNA水平。常规行HE染色、Masson染色和天狼星红染色,鉴定小鼠肝组织病理学变化。结果 模型组小鼠肝组织EP4蛋白表达比对照组显著增高,经E7046干预后,肝组织EP4蛋白表达降低,同样地,模型组小鼠肝组织EP4编码基因Ptger 4 mRNA水平为(3.5±0.1),显著高于对照组【(1.0±0.1),P<0.05】,而CCL₄联合E7046处理组为(2.4±0.2),较模型组显著降低(P<0.05);模型组小鼠血清ALT和AST水平分别为(1753.5±328.6)U/L和(1586.2±204.1)U/L,显著高于对照组(P<0.05),而在CCL₄联合E7046处理组,两种酶水平较模型组显著降低【分别为(885.9±269.6)U/L和(892.4±208.6)U/L,P<0.05】;模型组小鼠肝组织α-SMA表达较对照组增高,而在CCL₄联合E7046组α-SMA水平较模型组降低,模型组小鼠肝组织Acta2和Col1a1 mRNA 水平较对照组显著上调,而CCL₄联合E7046组则较模型组显著降低(P<0.05)。结论 EP4在CCL₄诱导的小鼠肝纤维化发生过程中发挥重要作用,阻断EP4与其配体结合有助于改善肝纤维化。     

熊去氧胆酸联合非诺贝特治疗PBC患者血清TGF-β、IFN-γ和IL-10水平变化*

目的 探讨熊去氧胆酸(UDCA)联合非诺贝特治疗原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者血清转化生长因子-β(TGF-β)、γ-干扰素(IFN-γ)和白介素-10(IL-10)水平的变化。方法 2016年12月～2018年12月我科诊治PBC患者48例,随机将患者分为观察组(n=24)和对照组(n=24)。给予对照组患者UDCA治疗半年,给予观察组UDCA联合非诺贝特口服治疗半年。采用ELISA法检测血清TGF-β、IFN-γ和IL-10水平。使用FibroTouch行肝脏硬度测定(liver stiffness measurement, LSM)。结果 在治疗观察结束时,观察组血清谷丙转氨酶水平为(51.4±23.7)U/L,显著低于对照组【(74.9±21.2)U/L,P<0.05】,谷草转氨酶为(59.5±32.3)U/L,显著低于对照组【(81.3±35.8)U/L,P<0.05】,谷氨酰转肽酶水平为(95.7±31.8)U/L,显著低于对照组【(127.3±50.7)U/L,P<0.05】;观察组血清IFN-γ水平为(57.4±21.3)pg/mL,显著高于对照组【(39.7±23.7)pg/mL,P<0.05】,而血清TGF-β水平为(14.3±4.8)pg/mL,显著低于对照组【(23.6±3.5)pg/mL,P<0.05】;观察组血清免疫球蛋M(IgM)为(2.3±0.4)g/L,显著低于对照组【(3.1±0.9)g/L,P<0.05】, IgG水平为(11.3±1.8)g/L,显著低于对照组【(15.5±1.3)g/L,P<0.05】,IgA水平为(2.7±0.6)g/L,显著低于对照组【(3.5±0.2)g/L,P<0.05】;观察组患者LSM为(10.8±6.5)kPa,与对照组的(9.7±7.7)kPa比,无统计学差异(P>0.05)。结论 熊去氧胆酸联合非诺贝特联合治疗PBC患者可以明显改善血生化指标,可能与抑制了免疫球蛋白水平和提高了血清IFN-γ水平有关,其治疗的远期疗效还有待于观察。     

草质素对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脂肪变和肝内氧化应激的影响

目的 探讨草质素对高脂饮食诱导的脂肪性肝病大鼠肝组织脂堆积和氧化应激的影响。方法 用高脂饮食诱导SD大鼠12周建立非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型,同时给予药物处理组动物草质素20 mg·kg^-1.d^-1和40 mg·kg^-1.d^-1灌胃。检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、低密度脂蛋白(LDL-C)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)含量,检测肝匀浆TG、TC、FFA、丙二醛(MDA)和超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化物酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和血红素氧化酶(HO-1)活性,采用Western blotting法检测肝组织Nrf2、细胞色素P450酶2E1(CYP2E1)和细胞色素P450酶4A(CYP4A)蛋白表达量。结果 模型组大鼠体质量、肝质量和肝指数分别为(499.2±14.1)g、(15.9±0.6)g和(3.2±0.1)%,显著高于对照组;小剂量和大剂量草质素处理组大鼠体质量、肝质量和肝指数均显著低于模型组(P<0.05); 模型组大鼠血清FFA水平为(521.5±52.3) mmol/L],显著高于对照组;大剂量药物处理组大鼠血清FFA水平为(361.5±62.3)mmol/L,显著低于模型组(P<0.05);模型组大鼠肝匀浆SOD、CAT、GSH-Px和HO-1水平分别为(294.2±35.4)U/mg、(19.5±6.4)U/mg、(362.4±104.2)U/mg和(4.1±0.4)ng/mg,均显著低于对照组[分别为(402.3±58.4)U/mg、(42.3±5.2)U/mg、(732.3±134.3)U/mg和(13.2±1.0)ng/mg,P<0.05];小剂量和大剂量组大鼠肝匀浆SOD、GSH-Px和HO-1水平均显著高于模型组(P<0.05);模型组大鼠肝组织Nrf2蛋白相对表达量显著低于对照组,而CYP2E1和CYP4A蛋白相对表达量显著高于对照组(P<0.01);与模型组比,小剂量和大剂量药物处理组肝组织Nrf2蛋白相对表达量显著升高(P<0.01),而CYP2E1和CYP4A蛋白相对表达量显著降低(P<0.05)。结论 草质素可以改善NASH大鼠肝组织脂堆积和氧化应激紊乱,其抗氧化的机制可能与调节Nrf2表达有关。     

余甘子提取物对非酒精性脂肪性肝病大鼠外周血Treg细胞及肝组织LXRα/FAS通路表达的影响*

目的 探讨余甘子提取物对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠外周血Treg细胞及肝组织LXRα/FAS通路表达的影响。方法 将48只SD大鼠随机分对照组、模型组、多烯磷脂酰胆碱及小剂量、中剂量和大剂量余甘子处理组,在造模成功后,给予对照组生理盐水灌胃,给予模型组多烯磷脂酰胆碱处理,另给予不同剂量的余甘子灌胃处理,连续给药6周。采用ELISA法检测血清TNF-α、IL-17和IL-10水平,使用流式细胞术检测血CD4⁺IL-17⁺和CD4⁺CD25⁺Treg细胞百分比,采用WB法检测肝组织LXRα和FAS蛋白表达。结果 与模型组比,大剂量余甘子提取物处理组肝组织病理学损伤显著改善,血清ALT、AST、TC、TG水平显著降低(P<0.05);血清TNF-α和IL-17水平显著降低,分别为(34.7±0.9)pg/ml和(3.2±0.2)pg/mL,而IL-10水平显著升高,为(4.8±0.2)pg/mL(P<0.05);大剂量余甘子处理组CD4⁺IL-17⁺百分比为(1.1±0.6)%,显著低于模型组[(1.9±0.4)%,P<0.05],CD4⁺CD25⁺Treg百分比为(1.5±0.6)%,显著高于模型组[(0.9±0.2)%,P<0.05];小、中、大剂量余甘子提取物处理组肝组织LXRα和FAS蛋白表达显著减弱[分别为(1.8±0.1)和(2.0±0.2),P<0.05]。结论 余甘子提取物可改善NAFLD大鼠肝组织病理学损伤,可能与其对炎性细胞因子、Th17/Treg细胞和LXRα/FAS通路因子的表达产生了某种影响有关。     

白藜芦醇对部分肝切除术大鼠肝再生和肝组织NK细胞活性的影响*

目的 探讨白藜芦醇(RES)对肝部分切除大鼠肝组织自然杀伤(NK)细胞活性和肝再生的影响。方法 随机将90只SD大鼠分为对照组、小剂量白藜芦醇和大剂量白藜芦醇处理组,各组30只,分别经尾静脉注射生理盐水、白藜芦醇10 g.kg^-1·d^-1和20 g.kg^-1·d^-1,连续5 d,然后行70%肝脏切除术。检测肝脏再生指数,使用流式细胞术测定肝组织NK细胞百分率,采用⁵¹Cr释放法测定NK细胞杀伤活性,采用蛋白印迹法检测肝组织增殖细胞核抗原(PCNA)和CyclinD1蛋白表达。结果 在24 h和48 h,大剂量白藜芦醇处理组大鼠肝脏再生指数分别为(1.89±0.04)和(2.45±0.07),显著大于小剂量白藜芦醇处理组【(1.59±0.06)和(2.12±0.05),P<0.05】或对照组【(1.43±0.03)和(1.92±0.05),P<0.05】;大剂量白藜芦醇处理组大鼠NK细胞百分率分别为(24.62±1.36)%和(25.47±1.19)%,显著高于小剂量白藜芦醇处理组【(22.21±1.98)%和(22.36±1.78)%,P<0.05】或对照组【(17.36±1.78)%和(18.65±1.69)%,P<0.05】;大剂量白藜芦醇处理组大鼠NK细胞杀伤活力分别为(48.48±2.69)%和(49.01±2.78)%,显著高于小剂量白藜芦醇处理组【(41.88±2.65)%和(42.32±2.58)%,P<0.05】或对照组【(28.32±2.36)%和(30.12±2.36)%,P<0.05】;大剂量白藜芦醇处理组大鼠肝组织PCNA和CyclinD1蛋白相对表达量显著强于小剂量白藜芦醇处理组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RES可以促进肝部分切除术大鼠肝再生,可能与增强了NK细胞活性和相关蛋白表达有关。     

沙格列汀干预非酒精性脂肪性肝病合并2型糖尿病大鼠肝组织AMPK/mTOR-TFEB自噬信号通路蛋白表达变化*

目的 探讨沙格列汀干预非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)合并2型糖尿病(T2DM)大鼠对肝组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-转录因子EB(TFEB)自噬信号通路蛋白表达的影响。方法 将42只大鼠随机分为对照组、模型组和沙格列汀干预组,每组14只。采用高脂饲料喂养和链脲佐菌素腹腔注射构建NAFLD合并T2DM模型。在建模成功后,分别给予沙格列汀或生理盐水灌胃8 w。采用放射免疫法检测空腹胰岛素(INS,使用全自动生化分析仪检测空腹血糖(FPG),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。采用Western bloting法检测肝组织p-AMPK、mTOR、TFEB和自噬标记物LC3B-II蛋白表达。结果 沙格列汀处理组大鼠体质量、肝质量和肝脏指数分别为(341.53±5.15)g、(11.06±0.49)g和(3.32±0.25)%,显著低于模型组【分别为(353.27±8.74)g、(12.77±0.84)g和(3.67±0.18)%,P<0.05】;FPG、INS和HOMA-IR水平分别为(9.45±0.71)mmol/L、(7.92±0.34)mIU/L和(3.44±0.36),显著低于模型组【分别为(13.97±0.92)mmol/L、(14.57±0.84)mIU/L和(9.03±0.91),P<0.05】;TC、TG、ALT和AST水平分别为(3.79±0.17)mmol/L、(0.81±0.13)mmol/L、(68.76±4.11)IU/L和(54.49±5.21)IU/L,均显著低于模型组【分别为(4.05±0.20)mmol/L、(2.04±0.15)mmol/L、(119.73±3.94)IU/L和(83.27±7.68)IU/L,P<0.05】;肝组织p-AMPK、TFEB和LC3B-II表达分别为(1.13±0.11)、(1.23±0.13)和(1.17±0.12),显著强于模型组【分别为(0.62±0.07)、(0.48±0.05)和(0.37±0.04)】,而mTOR表达为(0.89±0.08),显著弱于模型组【(1.53±0.16),P<0.05】。结论 沙格列汀可能通过调控AMPK/mTOR-TFEB自噬信号通路显著降低NAFLD合并T2DM大鼠血糖和血脂水平,改善肝脂肪变。     

曲美他嗪对急性肝衰竭小鼠肝组织NOX2和NOX4表达的影响

目的 探讨曲美他嗪对急性肝衰竭小鼠肝组织NOX2和NOX4表达的影响。方法 随机将65只C57BL/6小鼠分为对照组、模型组、小、中、大剂量曲美他嗪处理组和还原型谷胱甘肽处理组,除模型组15只外,其他组均为10只。采用D-氨基半乳糖联合脂多糖腹腔注射建立急性肝衰竭模型。取肝组织匀浆检测丙二醛(MDA)和过氧化物酶(CAT)含量,采用RT-PCR法和Western blot法分别检测肝组织还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶( NOX2/4) mRNA水平和蛋白表达。结果 模型组血清ALT、AST和肝匀浆MDA水平分别为(121.4±3.7)U/L、(208.9±27.4)U/L和(51.0±20.5)nmol/mg,均显著高于对照组【分别为(35.3±3.2)U/L、(49.9±4.4)U/L和(14.1±5.2)nmol/mg,P＜0.05】,而模型组肝匀浆CAT水平为(51.7±16.8)U/mg,显著低于对照组【(110.2±33.7)U/mg,P＜0.05】;模型组NOX2/4 mRNA和蛋白相对水平分别为(8.2±2.0)/(1.2±0.1)和(2.6±0.1)/(1.3±0.1),均显著高于对照组【分别为(1.0±0.2)/(0.5±0.1)和(1.0±0.1)/(0.4±0.1),P＜0.05】,中、大剂量曲美他嗪处理组血清ALT和AST及肝匀浆MDA水平分别为(86.4±1.00)U/L、(154.0±6.2)U/L和(22.5±1.9)nmol/mg及(81.1±1.5)U/L、(134.7±5.3)U/L和(20.1±3.7)nmol/mg,均显著低于模型组【分别为(121.4±3.7)U/L、(208.9±27.4)U/L和(51.0±20.5)nmol/mg,P＜0.05】,肝匀浆CAT水平分别为(99.4±15.5)和(102.3±15.5),均显著高于模型组【(51.6±16.8),P＜0.05】;肝组织NOX2/4 mRNA及蛋白相对表达量分别为(5.6±0.2)/(0.7±0.0)和(5.2±1.4/0.6±0.1)及(1.7±0.2)/(0.7±0.2)和(1.5±0.1)/(0.6±0.2),均显著低于模型组【(8.2±2.0)/(1.2±0.1)和(2.6±0.1)/(1.3±0.1),P＜0.05】。结论 曲美他嗪可能通过下调肝组织NOX2/4表达减轻氧化应激损伤,改善D-Galn/LPS诱导的急性肝衰竭小鼠肝损伤。     

区段肝蒂肝切除术治疗肝胆管结石患者疗效及其血清白三烯B4和肝组织一氧化碳的变化*

目的 探讨采取区段肝蒂肝切除术治疗肝胆管结石患者的疗效及其血清白三烯B4(LTB₄)、肝组织一氧化碳(CO)和外周血T淋巴细胞亚群的变化。方法 2015年1月～2019年12月我院普外科收治的肝胆管结石患者60例,随机分为观察组30例和对照组30例,分别采取区段肝蒂肝切除术和超声引导下肝切除术治疗。采用ELISA法测定血清LTB₄水平,术中,在腹部切口接气腹管,以便携式CO测定仪的探头直接测定肝组织CO浓度。结果 观察组术中出血量为(351.7±104.2)mL,显著低于对照组【(492.6±153.8)mL,P<0.05】,引流量为(279.8±79.2)mL,显著低于对照组【(361.7±113.7)mL,P<0.05】;血清LTB₄水平为(22.6±11.7)ng/L,显著低于对照组【(43.5±12.2)ng/L,P<0.05】,肝组织CO水平为(41.3±5.8)ppm,显著低于对照组【(65.5±4.3)ppm,P<0.05】;观察组并发症发生率为23.3%,显著低于对照组的50.0%(P<0.05)。结论 采取区段肝蒂肝切除术可有效降低肝胆管结石患者术中出血量和术后引流量,术后恢复快,可能与降低了术中炎症反应有关。     

蓝莓花青素干预肝硬化大鼠肝组织凋亡蛋白表达的变化*

目的 研究蓝莓花青素干预肝硬化大鼠肝组织凋亡蛋白表达的变化。方法 随机将30只大鼠分为对照组、模型组和实验组。采用二乙基亚硝胺腹腔注射法制备肝硬化模型,在其中一组给予蓝莓花青素灌胃干预,在实验第8周末,取血和肝组织。采用Western blot法检测肝组织c-caspase-3、Bax和Bcl2蛋白表达,取肝组织匀浆检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果 组织病理学检查提示,肝硬化模型制备成功;模型组动物血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β(TGF-β)水平分别为(579.87±20.37)U/L、(428.58±18.25)U/L、(2.56±0.18)ng/L和(2.12±0.15)ng/L,显著高于对照组 [分别为(102.47±3.25)U/L、(104.45±3.87)U/L、(0.81±0.05)ng/L和(0.92±0.07)ng/L,P<0.05],而经过蓝莓花青素处理后,动物血清上述指标显著降低【分别为(371.89±14.72)U/L、(148.71±6.34)U/L、(1.73±0.11)ng/L和(1.45±0.12)ng/L,P<0.05],模型动物血清白蛋白水平为(30.69±2.58)g/L,显著低于对照组【(37.68±3.08)g/L,P<0.05】, 蓝莓花青素处理组升高至【(34.71±3.34)g/L,P<0.05];模型组肝组织匀浆MDA水平为(0.49±0.11)μmol/L,显著高于对照组【(0.06±0.01)μmol/L,P<0.05】,SOD水平为(0.34±0.09)U/mg,显著低于对照组【(0.98±0.21)U/mg,P<0.05】,而蓝莓花青素处理组肝组织匀浆MDA水平显著降低至【(0.17±0.03)μmol/L,P<0.05】,SOD水平显著升高至【(0.71±0.19)U/mg,P<0.05】;模型动物肝组织Bcl-2表达量为(0.48±0.03),而Bad和c-caspase-3表达量分别为(1.50±0.18)和(1.41±0.17),分别较对照组显著降低或升高【分别为(1.76±0.18)、(0.41±0.02)和(0.28±0.01),P<0.05】,而经过蓝莓花青素处理动物肝组织Bcl-2表达显著增强,Bad和c-caspase-3表达显著减弱【分别为1.47±0.14)、(0.64±0.05)和(0.50±0.05),P<0.05]。结论 蓝莓花青素能够降低二乙基亚硝胺诱导的肝硬化大鼠肝组织氧化应激损伤,调节凋亡蛋白表达,抑制肝细胞凋亡,达到保护肝功能的作用。     

柴胡皂苷a通过影响PPARα信号通路对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脂肪变的保护作用*

目的 研究柴胡皂苷a(SSa)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝脂肪变的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法 将46只大鼠随机分为对照组、NAFLD组、SSa干预组和SSa联合GW6471干预组,建立NAFLD模型,分别以生理盐水或SSa或SSa联合信号通路抑制剂GW6471灌胃或腹腔注射干预。采用Western blotting法检测肝组织5-单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、p-AMPK和抗过氧化物增殖物活化受体α(PPARα)蛋白表达,检测空腹血糖(FBG),空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果 NAFLD组大鼠FBG、FINS和HOMA-IR分别为(10.2±1.2)mmol/L、(24.2±2.3)mU/L、(11.0±2.1),显著高于对照组【分别为(4.7±0.5)mmol/L、(15.3±2.1)mU/L和(3.2±0.4),P<0.05】,而SSa干预组上述指标显著低于模型组【分别为(6.3±0.7)mmol/L、(18.6±2.5)mU/L和(5.2±0.6),P<0.05】,SSa联合GW6471干预组显著高于SSa干预组【分别为(8.1±1.0)mmol/L、(21.7±2.8)mU/L和(7.8±0.9),P<0.05】;模型组肝指数、肝组织TC、TG和FFA含量分别为(3.3±0.3)%、(0.8±0.1)mmol/g、(1.1±0.1)mmol/g和(543.6±62.7)mmol/g,显著高于对照组【分别为(2.2±0.2)%、(0.3±0.1)mmol/g、(0.5±0.1)mmol/g和(406.5±58.9)mmol/g,P<0.05】,SSa干预组上述指标均显著低于NAFLD组,SSa联合GW6471干预组上述指标均显著高于SSa干预组(P＜0.05);SSa干预组和SSa联合GW6471干预组肝组织脂滴显著减少,其中SSa组脂滴少于SSa联合GW6471组;NAFLD组大鼠肝组织PPARα蛋白相对表达量和p-AMPK/AMPK比值均显著低于对照组(P＜0.05),而SSa干预组肝组织PPARα蛋白和p-AMPK/AMPK比值均显著升高(P＜0.05),SSa联合GW6471干预组肝组织两指标均显著降低(P＜0.05)。结论 SSa可改善NAFLD大鼠肝脂肪变程度,可能与激活了PPARα信号通路和抑制了胰岛素抵抗有关。     

超声引导下微波消融治疗早期泡型肝包虫病患者疗效初步研究*

目的 探讨采用超声引导下微波消融治疗早期泡型肝包虫病患者的疗效。方法 2018年6月～2019年10月我院诊治的早期泡型肝包虫病患者50例,采用随机数字表法将患者分为对照组(n=25例)和观察组(n=25例)。在对照组,采用常规开腹手术,在观察组,采用超声引导下微波消融治疗,术后随访1年。结果 观察组治疗总有效率为92.0%,显著高于对照组的80.0%(P<0.05);术后1 w,观察组血清总胆红素水平为(16.7±1.6)μmol/L,与对照组【(14.2±1.4)μmol/L,P>0.05】比,差异无统计学意义,血清丙氨酸氨基转移酶水平为(140.8±52.4)U/L,显著低于对照组【(194.7±63.2)U/L,P<0.05】,血清GGT水平为(95.1±10.2)U/L,显著低于对照组【(102.4±11.3)U/L,P<0.05】,而血清ALB水平为(35.7±3.4)g/L,显著高于对照组【(32.9±3.5)g/L,P<0.05】;在随访期间,观察组并发症发生率为4.0%,显著低于对照组的36.0%(P＜0.05)。结论 采用超声引导下微波消融治疗早期泡型肝包虫病患者可获得很好的临床疗效,可显著降低并发症发生率,值得临床进一步研究。