血浆（1-3）-β-D-葡聚糖检测儿童深部真菌感染诊断的临床研究

目的探讨血清（1-3）-β-D-葡聚糖检测对深部真菌感染的诊断价值。方法对46可疑真菌感染儿童应用MB-80微生物动态快速检测系统及GKT-5MSet动态真菌检测试剂盒定量检测血清中（1-3）-β-D-葡聚糖的含量,比较其与真菌培养法的差异。结果 46例可疑深部真菌感染儿童,真菌培养法20例阳性,阳性率为43.5%;血清（1-3）-β-D-葡聚糖检测法阳性28例,阳性率60.9%,血清（1-3）-β-D-葡聚糖检测法阳性率明显高于真菌培养法（=8.0000,P=0.0047）。深部真菌感染培养阳性组血清（1-3）-β-D葡聚糖含量为（86.46±23.68）pg/ml,深部真菌感染培养阴性组血清（1-3）-β-D-葡聚糖含量为（38.24±19.35）pg/ml,20例健康对照组两法均为阴性,深部真菌感染组血清（1-3）-β-D-葡聚糖浓度明显高于正常对照组（F=117.8,P=0.0000）,而且深部真菌感染培养阳性组血清（1-3）-β-D-葡聚糖浓度亦明显高于深部真菌感染培养阴性组（t=-5.5375,P=0.0000）。结论血清（1-3）-β-D-葡聚糖检测较传统的真菌培养法简便、快速、阳性率高,可用于儿童深部真菌感染的早期快速诊断。     

检测（1，3）-β-D-葡聚糖在老年肺癌侵袭性肺部真菌感染中的临床价值

目的：探讨血浆（1,3）-β-D-葡聚糖（BG）在老年肺癌侵袭性肺部真菌感染（IPFI）中的临床价值。方法老年肺癌合并感染患者65例,根据诊断分3组：侵袭性肺部真菌感染20例（ A组）、混合性肺部感染（真菌＋细菌）22例（B组）、细菌性肺部感染23例（C组）,另设健康对照组20例（D组）。 A、B、C组患者于入院第1、3天采集静脉血,A、B组患者于抗真菌治疗第3、7、10、14、17、21、24天采集静脉血,D组采集静脉血1次,检测和分析各组的BG浓度。结果 A组和B组患者中感染白假丝酵母菌26例（61．91％）;IPFI感染组（ A组、B组）的BG含量均显著高于非IPFI感染组和健康组（C组、D组）（P＜0．01）;双份血浆标本BG试验阳性在A组和B组患者中的敏感性及阴性预测值均较单份血浆标本 BG试验阳性下降,但其特异性及B组患者中的阳性预测值则有所升高。与治疗前比较,A组治疗第10、14、17、21、24天血浆的BG含量均显著降低（P＜0．05）,B组治疗第14、17、21、24天血浆的BG含量均显著降低（P＜0．01）。结论血浆BG检测对于老年肺癌IPFI患者具有早期、快速诊断和动态监测治疗效果的价值。     

花木蓝根中新的3-硝基丙酰基吡喃葡萄糖

目的研究花木蓝Indigofera kirilowii根的化学成分。方法采用液-液萃取、硅胶柱色谱、重结晶等方法分离纯化，根据核磁共振谱、质谱等鉴定化合物的结构。结果从花木蓝根的乙醇提取物中分离鉴定了以下化合物：3，4-二-O-（3-硝基丙酰基）-D-吡喃葡萄糖α-和β-端基异构体约3：1的混合物（Ⅰ和Ⅱ）、ononin（7-hydroxy-4’-methoxyisoflavone-7-O-β-D-glucopyranoside，Ⅲ）和6-O-（3-硝基丙酰基）-D-吡喃葡萄糖α-和β-端基异构体约1：1的混合物（Ⅳ和Ⅴ）。结论化合物Ⅰ和Ⅱ为新化合物，化合物Ⅲ为首次从木蓝属植物中分离得到，化合物Ⅳ和Ⅴ为首次从花木蓝中分离得到。     

氯吡格雷关键中间体S-（＋）-（2-噻吩乙胺基）（2-氯苯基）乙酸甲酯的合成研究

目的研究氯吡格雷的中间体（S）-（＋）-（2-噻吩乙胺基）（2-氯苯基）乙酸甲酯的合成。方法以（S）-邻氯苯甘氨酸甲酯的酒石酸盐、噻吩乙醇对甲苯磺酸酯等为原料,经中和、亲核取代反应合成目标化合物,考察溶剂、缚酸剂、原料比对产率的影响。结果目标化合物经。H—NMR,^13C—NMR确证化学结构,确定了最佳实验条件为原料比（氨基酸酯：磺酸酯）为2：1、溶剂为乙腈、缚酸剂为磷酸氢二钾,产率达到80％,纯度高达99％。结论本研究为（S）-（＋）-2-噻吩乙胺基-2-氯苯基乙酸甲酯的工业化生产提供了较为合理的工艺路线,也为氯吡格雷生产提供了合格的原料。     

健康人红细胞Na~＋－K~＋ATP酶、Ca~（2＋）－Mg~（2＋）ATP酶活性

用生物化学法及荧光法测定了成年人、老年人的红细胞Ｎａ＋－Ｋ＋ＡＴＰ酶、Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋ＡＴＰ酶活性及胞浆游离Ｃａ２＋。结果显示：老年前期组Ｎａ＋－Ｋ＋ＡＴＰ酶及Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋ＡＴＰ酶活性均显著低于成年人组（Ｐ＜０．０５），而胞浆游离Ｃａ２＋浓度明显高于成年人组（Ｐ＜０．０５）。老年组的两个ＡＴＰ酶活性均较老年前期组低，胞浆游离Ｃａ２＋浓度高于老年前期组。上述三个指标的随龄性变化以老年前期组最明显，特别是女性。     

肾病综合征患者血浆细菌内毒素及（1,3）-β-D-葡聚糖定量检测与临床意义

目的：研究肾病综合征患者检测血浆中细菌内毒素和（1,3）-β-D-葡聚糖的临床意义。方法：选择2009年2月～2011年2月住院的肾病综合征患者42例,检测患者血浆中的细菌内毒素,并分析其与肌酐及尿素的相关性,分析（1,3）-β-D-葡聚糖对于肾病综合征患者真菌感染诊断的敏感性和特异性。结果：内毒素与尿素及肌酐均具有明显的正相关性（r=0.928,P〈0.01;r=0.989,P〈0.01）。随着内毒素的升高,肾功能逐渐下降,（1,3）-β-D-葡聚糖对于肾病综合征患者真菌感染诊断的敏感性和特异性分别为83.33%、93.75%,远远高于其他两种诊断方法。结论：肾病综合征患者（1,3）-β-D-葡聚糖和细菌内毒素的检测对改善患者预后,降低死亡率具有重要的临床意义。     

高血糖对非胰岛素依赖型糖尿病患者红细胞（Ca~（2＋）－Mg~（2＋））－ATP酶的影响

为了解高血糖对非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者红细胞膜（Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋）－Ａｒｐ酶的影响，采用改良的Ｈａｎａｈａｎ和Ｌｕｔｈｒａ法测定了红细胞膜（Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋）－ＡＴＰ酶活性。结果表明，ＮＩＤＤＭ患者红细胞膜（Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋）－ＡＴＰ酶活性降低，且与空腹血糖、糖化血红蛋白、果糖胺及红细胞变形指数呈负相关，后者与红细胞内Ｃａ２＋浓度呈正相关。说明（Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋）－ＡＴＰ酶活性下降时，红细胞变形能力降低，可能与患者红细胞膜蛋白的过度糖化及细胞内Ｃａ２＋浓度的增高有关。     

1，4-二（3-溴丙酰基）哌嗪的合成及结构确证

1，4-二(3-溴丙酰基)哌嗪是一种烷化剂类抗血液病药，据文献报道，它对红细胞增多症、血小板增多症和慢性粒细胞白血病有明显治疗作用，但毒性亦较大。此实验的目的是在合成1，4-二(3-溴丙酰基)哌嗪的基础上，继续合成其衍生物，并进行抗癌活性对比实验，以期获得低毒高效的药用化合物。     

（＋）—伪麻黄碱向（—）—麻黄碱的转化

目的：研究用“一步法”由（＋）－伪麻黄碱向（－）－麻黄碱的转化 。方法：加入等摩尔量的乙肝作催进剂,以冰醋酸为溶剂,回流反应１．５－４h。结果：（＋）－的麻黄碱以８０％－８５％的产率转化为（－）－麻黄碱。结论 本方法步骤少,操作简单,时间短,转化率高,后处理简便,成本低,易于工业在生产,具有良好的经济效益和社会效益。     

外源性神经节苷脂GM_3对Ca~（2＋）－ATP酶及红细胞胞浆Ca~（2＋）－浓度的影响

研究神经节苷脂ＧＭ３（简称ＧＭ３）对部分纯化的人红细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶的作用和对完整兔红细胞浆［Ｃａ２＋］的影响。结果表明：外源性ＧＭ３对Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶的作用呈浓度依赖性双相调节即浓度为１～６．５μｍｏｌ／Ｌ时抑制酶活性，浓度大于６．５μｍｏｌ／Ｌ时激活酶活性；ＧＭ３不影响钙调素（ＣａＭ）对酶的激活；ＣＭ３对兔红细胞浆［Ｃａ２＋］也呈浓度依赖性双相调节即在ＧＭ３浓度低于６９μｍｏｌ／Ｌ时［Ｃａ２＋］有不同程度升高，浓度大于６０μｍｏｌ／Ｌ时则降低［Ｃａ２＋］。     

真菌（1，3）-β-D-葡聚糖检测在早期诊断ICU肺侵袭性真菌感染中的临床价值

目的探讨真菌(1,3)-β-D-葡聚糖检测(G试验)在早期诊断ICU肺侵袭性真菌感染(IFI)中的临床价值。方法选择2014年1月～2017年1月入住浙江省湖州市中心医院呼吸重症监护病房(RICU)和急诊重症监护病房(EICU)108例怀疑为肺部侵袭性真菌感染患者,根据出院时临床诊断分为IFI组(42例)和非IFI组(66例),使用G试验检测两组患者入院当天的真菌(1,3)-β-D-葡聚糖浓度,并与传统的真菌培养方法比较。结果 IFI组G试验值为(78.7±32.1)pg/mL,明显高于非IFI组(9.6±4.2)pg/mL,差异有统计学意义(P0.01);IFI组患者中,G试验阳性率高达81.0%,高于真菌培养检验方法(66.7%),但差异无统计学意义(P0.05);血浆G试验诊断IFI的灵敏度为81.0%、特异度为92.4%、阳性预测值为87.1%、阴性预测值为88.4%,而真菌培养方法的灵敏度为66.7%、特异度为80.3%、阳性预测值为68.3%、阴性预测值为79.1%。结论血浆(1,3)-β-D-葡聚糖检测(G试验)具有快速、准确、简易等特点,在ICU肺IFI早期诊断中具有较突出的临床价值。     

反相高效液相色谱法测定Ca~（2＋），Mg~（2＋）－ATPase活力的方法

应用反相ＨＰＬＣ方法测定了大鼠心肌Ｃａ２＋，Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力。高效液相色谱条件：Ｗａｔｅｒｓ－４８０高效液相色谱仪，ＷａｔｅｒｓＣ－１８高效反相色谱柱，流动相为０．０６６７ｍｏｌ／ＬＫＨ２ＰＯ４／Ｋ２ＨＰＯ４缓冲液（ｐＨ５．９２），流速１．５ｍｌ／ｍｉｎ，柱压３０００Ｐａ，检测波长２５４ｎｍ。方法简便，快速，灵敏度高，重复性好。     

GOD－Fe~（3＋）－CNS~－法测定血清葡萄糖方法研究

提出了一种测定血糖浓度的新方法，该法基于在ＧＯＤ存在下葡萄糖被氧化产生等量双氧水，又在Ｆｅ３＋，ＣＮＳ－存在下双氧水氧化还原型罗丹明Ｂ生色，分光光度法测定溶液对光的吸收，从而确定血糖浓度。方法的线性范围为血糖浓度０～２２０ｍｍｏｌ·Ｌ－１，灵敏度为血糖浓度０．５５ｍｍｏｌ·Ｌ－１，变异系数为４．１％，回收率为９８．３％。     

重组体pcDNA3．1（＋）－tyr的构建及在小鼠NIH3T3细胞中的表达

【目的】克隆酪氨酸酶基因(tyr)，构建pcDNA3．1( )-tyr真核表达重组体，并导人NIH3T3细胞表达。【方法】用RT-PCR法从小鼠B16黑色素瘤细胞中克隆tyr全长cDNA片段，利用DNA重组技术将其定向插入真核表达质粒pcDNA3．1( )的T7启动子下游，并用脂质体法导入NIH3T3细胞，RT-PCR，酪氨酸酶活性测定及多巴染色法检测tyr的表达。【结果】成功克隆1．74kb的全长tyr cDNA片段，经测序证实与GenBank所报道的序列完全一致，tyr准确克隆人pcDNA3．1( )的多克隆位点，RT-PCR及酪氨酸酶活性测定等方法检测到转染了重组体的NIH3T3细胞中有tyr的表达。【结论】本实验成功构建了pcDNA3．1( )-tyr真核表达重组体，并成功导入NTH3T细胞中表达.     

（1→3）-β-D-葡聚糖在支气管哮喘合并真菌感染中的应用研究进展

支气管哮喘并发真菌感染的患者日益增多,如果不及时诊断并给予有效地治疗,可导致病情迁延甚至死亡。（1→3）-β-D-葡聚糖抗原的检测,是目前诊断真菌感染的常用的微生物学检测方法,与传统的真菌培养相比,可快速得到结果,其敏感性和特异性均达到85%以上。虽然（1→3）-β-D-葡聚糖抗原的检测也有一定的假阴性和假阳性结果,但其对临床工作的指导作用不容忽视。     

4-乙酰氨基-3-（3-戊氧基）苯甲酸的合成

目的改进可能具有抗流感病毒活性的化合物4-乙酰氨基-3-（3-戊氧基）苯甲酸的合成方法。方法以间羟基苯甲酸为原料,经酯化、硝化、催化氢化、烷基化、酰化及水解6步反应制备4-乙酰氨基-3-（3-戊氧基）苯甲酸。结果甲酯化收率86.9%;硝化反应采用硝酸/乙酸酐混酸作硝化试剂,收率23.5%;硝基还原用质量分数5%钯-碳作催化剂催化氢化,收率95.8%;烷基化反应中先使酚羟基与氢化钠成盐,然后再与3-溴戊烷反应,收率44.4%;酰化反应用DMAP作催化剂,采用向碎冰上倾倒反应液使产物析出的后处理方法,收率82.8%;酯水解中改用丙酮做溶剂,反应时间由15h缩短至4h,收率86.8%。各中间体和目标化合物结构经1H-NMR确证。结论改进的反应条件缩短了反应时间,简化了后处理步骤,为今后该类流感药物的研发奠定了基础。     

芦丁、槲皮素对已受到Fe~（2＋）和Cu~（2＋）氧化修饰的低密度脂蛋白的抑制

以反映低密度脂蛋白（ＬＤＬ）氧化修饰程度的硫代巴比妥酸反应物质（ＴＢＡＲＳ）及荧光物质含量为指标，研究了芦丁、槲皮素对已受到Ｆｅ￣（２＋）和Ｃｕ￣（２＋）氧化修饰ＬＤＬ的抑制作用。结果表明：槲皮素、芦丁对已受到Ｆｅ￣（２＋）氧化修饰ＬＤＬ有明显的抑制作用，芦丁优于槲皮素；而对已受到Ｃｕ￣（２＋）氧化修饰的ＬＤＬ，槲皮素显示了较为显著的抑制作用，芦丁只具有轻微的作用。     

金属铜配合物Cu（Ⅱ）1-羟基-3-（2-环氧基）吨酮的体外抗肿瘤作用

摘要：目的探讨金属铜配合物Cu（Ⅱ）1-羟基-3-（2-环氧基）吨酮（Cu-HOX）的体外抗肿瘤作用。方法采用噻唑蓝比色法测定Cu—HOX对卵巢癌细胞3AO、食管鳞癌细胞ECA109、肺癌细胞GLC-82、胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制作用;应用流式细胞仪检测药物对3AO细胞周期和凋亡的影响。结果Cu-HOX呈浓度依赖性的抑制3AO、ECA109、GLC-82、SGC-7901细胞生长,作用72h的半抑制浓度（IC50）依次为8．0、〉50、6．7和9．0μg／mL,其中以Cu-HOX和卡铂对3AO细胞IC50的比值最小,说明Cu—HOX对3AO的敏感性明显强于卡铂。作用24、48、72hCu—HOX呈浓度、时间依赖性的抑制3AO细胞生长,作用明显强于卡铂。3．125-25μg／mL使3AO细胞S期增加而G1期减少,引起细胞凋亡。结论Cu—HOX在体外具有抗肿瘤作用,其中对3AO细胞的敏感性最高,其机理为阻止细胞于S期和诱导细胞调亡。     

N-（噻唑-2-基）-[1-（4-氯苄基）吲哚-3-基]草酰胺的合成及抗肿瘤活性

【目的】研究N-（噻唑-2-基）-[1-（4-氯苄基）吲哚-3-基]草酰胺的合成方法,探讨抗肿瘤活性。【方法】以吲哚为原料,经3步反应合成了新的吲哚草酰胺化合物,结构经质谱及核磁共振谱证实。用MM法评价它的体外抗肿瘤活性。【结果】合成了N-（噻唑-2-基）-[1-（4-氯苄基）吲哚-3-基]草酰胺及其衍生物。前者对HeLa的半数抑制率IC50为1-20μmol,SKOV3为6．55μmol;其衍生物对HeLa的半数抑制率IC50为3．65μmol,SKOV3为4．87μmol。【结论】N-（噻唑-2-基）．[1-（4-氯苄基）吲哚-3-基]草酰胺及其衍生物均具有强效的抗肿瘤活性。     

2-（3-羧基-1-丙酰氨基）2-脱氧-D-葡萄糖对裸鼠食管癌影响的实验研究

目的:研究2-(3-羧基-1-丙酰氨基)2-脱氧-D-葡萄糖(COPADG)对食管癌裸鼠的抗肿瘤作用.方法:建立人食管癌裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、COPADG组、氟尿嘧啶组(5-FU)和联合组(CF).观察动物一般情况、体重、肿瘤质量和肿瘤体积大小,计算抑瘤率,检测外周血细胞(PBC)和.结果:COPADG组、CF组和5-FU组肿瘤生长明显受到抑制,与对照组比较有显著性差异(p<0.01),抑制率分别为54.16%、73.91%、38.78%.5-FU组和CF组PBC均减少、ALT和IAST上升,与对照组、COPADG组比较有显著性差昴(P<0.05),CF组较轻微,与5-FU组比较差异有显著性;对照组和COPADG组比较差异无显著性.结论:COPADG有抑制食管癌裸鼠肿瘤生长的作用,且无明显毒副作用.