褐藻多糖硫酸酯的生物活性与提取技术研究进展

褐藻多糖硫酸酯是一类含岩藻糖和硫酸基的生物多糖,主要来自于海带、巨藻、泡叶藻、墨角藻等海藻。本文综述了该物质的多种生物活性及其在提取、分离纯化方面的新进展。     

葱白多糖的降血脂功能及对酒精肝预防作用的研究

研究了葱白多糖对大鼠血脂水平的影响以及对小鼠脂肪肝的预防作用。在研究多糖的降血脂功能试验中,设对照组和葱白多糖低、中、高剂量组,分别为100、200、400 mg/kg(以体重计),连续给大鼠灌胃30 d后取尾血,测定血清TC、TG和HDL-C的含量。结果表明:多糖降血脂效果优于血脂康,且高剂量组降血脂效果优于低剂量组;高剂量组对大鼠TG降低显著、对TC降低不显著;各剂量组均对HDL-C升高显著。在研究多糖对小鼠酒精肝预防作用的试验中,设对照组和葱白多糖低、中、高剂量组(剂量同上),连续给小鼠灌胃30 d后,测定肝脏MDA、血清TG和GSH的含量。结果表明:多糖对酒精肝预防作用较水飞蓟素弱;高剂量组对TG降低显著、对GSH升高显著;各剂量组均对MDA降低显著。由此看来,葱白多糖对大鼠有降血脂功能,对小鼠的酒精肝预防作用较弱。     

海带中褐藻糖胶研究进展

褐藻糖胶是从海带等褐藻中提取的一类硫酸酯多糖,具有多种生理活性;近年来,褐藻糖胶已成为无污染、健康的药物和"蓝色食品"开发利用的热点之一.介绍褐藻糖胶的分布、组成、结构、性能、提取分离、硫酸基检测方法及应用前景.     

4种大型褐藻类菌胞素氨基酸的提取工艺优化及鉴定

类菌胞素氨基酸（mycosporine-like amino acids,MAAs）是小分子、水溶性代谢产物,广泛存在于大型褐藻中。以羊栖菜、海带、马尾藻和裙带菜4种大型褐藻为原料,采用单因素和正交试验验,分析提取温度、提取时间、提取次数和液料比对MAAs提取率的影响。结果表明,提取温度、提取时间和液料比对4种大型褐藻MAAs得率影响较大。对于羊栖菜、海带、马尾藻和裙带菜MAAs提取而言,适宜提取温度、提取时间和液料比依次为40、45、45℃和40℃;2、2、2 h和 3 h;25、20、25 mL/g和 20 mL/g,MAAs得率分别可达到 31.40%、46.71%、8.29%和 21.92%。通过对 4种大型褐藻MAAs提取物进行紫外波长扫描、高效液相色谱和质谱测定,并参考研究报道,鉴定它们中MAAs组成,主要包括palythine、palythenic acid、porphyra-334和shinorine。同时,根据palythine等4种类菌胞素氨基酸单体化合物（mycosporine-like amino acid,MAA）摩尔消光系数,可计算出4种大型褐藻MAAs提取物中MAA含量。其中,羊栖菜和马尾藻中palythenic acid含量较高,是此种MAA的理想来源。该文提出了羊栖菜、海带、马尾藻和裙带菜MAAs优化提取工艺,并第一次明确此4种大型褐藻MAAs组成。     

可食性褐藻纤维素的分离纯化与结构分析

以我国主要可食性褐藻海带和裙带菜为对象,对其中的纤维素成分进行分离纯化,并分析纤维素的结构属性。海带的纤维素含量明显高于裙带菜,二者纤维素的提取率分别达原料干质量的5.59%及2.61%。通过酸水解-高效液相色谱分析及傅里叶变换红外光谱分析,提取的纤维素的纯度分别达99.86%及98.91%。海带纤维素的平均聚合度为813,高于裙带菜纤维素的315。粉末X射线衍射分析揭示了2种褐藻纤维素均具有天然高度结晶性结构,结晶度指数分别达72.06%和71.48%,与市售高等植物来源微晶纤维素的水平相当。对X射线衍射图谱的进一步解析表明:褐藻纤维素的结晶性区域以单链三斜晶系(Iα)为主,显著区别于高等植物纤维素的双链单斜晶系(Iβ)为主的结构。研究结果以期为优质膳食纤维资源的开发提供参考。     

马尾藻岩藻聚糖硫酸酯纯化及降血脂功能研究

以亨氏马尾藻为原料,运用超声波浸提工艺提取得到的岩藻聚糖硫酸酯(SPF),采用乙醇分级沉淀法纯化后经脱脂、脱蛋白得到初级纯化的岩藻聚糖硫酸酯,喂食高血脂症的小鼠,探讨其降血脂的功能。结果表明:亨氏马尾藻岩藻聚糖硫酸酯高、中、低3个剂量组的降血脂效果都优于药品对照脂必妥的降血脂效果,并且以高剂量的降血脂效果最佳,能够极显著(P0.01)的降低总胆固醇、低密度脂蛋白、甘油三酯的含量,能显著(P0.05)提高高密度脂蛋白的含量,且高于空白组;能显著降低动脉硬化指数,动脉粥样硬化指数AI1和AI2都有极显著影响(P0.01)。说明亨氏马尾藻初级岩藻聚糖硫酸酯多糖具有明显的降血脂功能。     

茶多酚肉碱复方制剂降血脂的实验研究

探讨茶多酚肉碱复方制剂对高脂血症模型大鼠血脂水平的影响。采用高脂饲料喂养SD大鼠建立预防性高脂血症模型,将实验大鼠分成正常对照组、模型对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。连续灌胃给药45 d,观察茶多酚肉碱复方制剂对高脂血症大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的影响。结果表明,与正常对照组比较,高脂饲料连续喂养45 d后,模型对照组大鼠血清TG和TC显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,给药45 d后,1)低剂量组大鼠血清TG未见显著性降低(P>0.05),中剂量组和高剂量组血清TG极显著地降低(P<0.01);2)低剂量组大鼠血清TC显著降低(P<0.05),中高剂量组大鼠血清TC极显著降低(P<0.01);3)各剂量组大鼠血清HDL-C无显著性差异。茶多酚肉碱复方制剂具有辅助降血脂的作用。     

厚叶海带岩藻聚糖硫酸酯分离纯化及其体外肿瘤抑制活性研究

本研究以日本厚叶海带(Kjellmaniella crassifolia)中提取的岩藻聚糖硫酸酯(Fuciodan)为原料,采用DEAESepharose Fast Flow弱阴离子交换柱层析分离纯化,通过苯酚-硫酸法和氯化钡-明胶法检测各组分中多糖及硫酸根(SO_4~2)含量,MTT法分析50、200、800μg/m L的日本厚叶海带岩藻聚糖硫酸酯粗品(F)及分离组分对肝癌细胞Hep G2、肺癌细胞A549和结肠癌细胞HT-29细胞存活率影响。研究结果表明,DEAE-Sepharose Fast Flow弱阴离子交换柱对粗品F的分离纯化效果良好,可以得到5个组分(F-0、F-1、F-2、F-3和F-4);组分F-4多糖与SO_4~(2-)含量最高,分别为64.25%和26.32%。MTT实验结果显示,岩藻聚糖硫酸酯粗品及各分离组分对三种肿瘤细胞均具有肿瘤抑制活性,不同组分对HepG2、A549、HT-29的最低细胞存活率分别为67.69%、56.03%和27.56%。基于以上研究结果,表明日本厚叶海带岩藻聚糖硫酸酯具有很大的发展潜力,开发成为一种有效的天然抗肿瘤药物。     

从裙带菜叶、茎中提取褐藻多糖硫酸酯的最佳工艺条件及性质比较研究

采用单因素分析法考察从裙带菜叶、茎中提取褐藻多糖硫酸酯(SP)的最优提取条件,并进行比较分析,结论为:裙带菜叶和茎的最佳提取条件分别为:90℃、6h、80倍加水量、pH=6和90℃、6h、60倍加水量、pH=5,并对叶提和茎提SP进行理化性质研究,结果表明,叶提SP和茎提SP的理化性质相似,其主要性质指标“硫酸根 多糖”含量,茎提SP高于叶提SP,分别为71.8%和61.3%。     

羊栖菜褐藻糖胶的结构表征及其抗氧化活性

为研究羊栖菜褐藻糖胶的结构及其抗氧化活性,以羊栖菜为原料,经CaCl₂溶液提取、DEAE-Sepharose fast flow分离纯化得到褐藻糖胶组分SFP-2。采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)、化学法、高效液相法(HPLC)以及傅里叶变换红外光谱法(IR)对多糖的纯度、分子量、理化性质、单糖组成以及官能团进行测定,并通过测定DPPH自由基清除活性、超氧阴离子清除活性、ABTS+自由基清除活性、亚硝酸盐清除活性和还原力,对多糖的体外抗氧化活性进行了评价。结果表明,SFP-2分子量均一,为707.0 kDa;总糖含量为66.9%,蛋白含量为3.1%,硫酸基含量为21.2%,不含糖醛酸;SFP-2主要由岩藻糖和半乳糖构成,还含有少量的甘露糖和氨基葡萄糖;红外光谱显示,SFP-2具有硫酸化多糖常见官能团的特征吸收峰;上述结果表明SFP-2是一种不含糖醛酸的硫酸化岩藻聚糖。SFP-2具有良好的清除DPPH自由基、超氧阴离子、ABTS+自由基、亚硝酸盐活性,其EC₅₀分别为8.94、8.30、16.04、9.87 mg/mL,且具有一定的还原能力。因此,SFP-2是一种不含糖醛酸的,抗氧化活性良好的羊栖菜褐藻糖胶。     

羊栖菜褐藻糖胶的分级纯化和结构分析

从浙江洞头产羊栖菜中提取得到的褐藻糖胶,经DEAESepharoseCL 6B柱层析得F1、F2和F33个组分,F3又经SepharoseCL 6B柱层析得F31、F32和F333个级分.经凝胶过滤色谱检测,F31、F32和F33为均一组分.化学组成分析表明,这5个级分均为岩藻糖、半乳糖和甘露糖等糖基组成的杂多糖,并含有硫酸酯、糖醛酸以及少量的蛋白质,相对分子质量范围为2.5×104～9.5×105.F33中氮的质量分数为2%,氨基酸分析和紫外扫描表明氮大部分可能来自核酸.F32的硫酸酯对碱基本稳定,表明大部分硫酸酯位于单糖残基的垂直位置.     

超声波法提取裙带菜中褐藻多糖硫酸酯的工艺研究

利用超声波法从裙带菜(Undaria pinnatifida)中提取褐藻多糖硫酸酯(FSP),以多糖提取率为指标,通过单因素和正交优化实验确立了提取FSP的最佳工艺条件,并与传统热水提取法进行了比较。结果表明,100倍加水量、在1 000 W功率下超声处理20 min能得到最大的多糖提取率。采用优化工艺,FSP得率(16.87%)、纯度(74.19%)和硫酸基含量(10.22%)比传统水提法分别提高了23.59%、30.92%和13.94%,色素和蛋白等杂质的析出减少,是一种良好的提取多糖方法。     

南瓜多糖对四氧嘧啶型糖尿病小鼠血糖和血脂的影响

研究南瓜多糖对正常小鼠和四氧嘧啶型糖尿病小鼠血糖和血脂的影响.对正常小鼠灌胃高低两个剂量(200、400 mg/kg)的南瓜多糖水溶液,对四氧嘧啶造模成功的小鼠随机分为模型对照组、南瓜多糖组(400 mg/kg的PP)和优降糖组(15 mg/kg的优降糖),以灌胃给药.对两种类型小鼠的处理均设立正常对照组,给予等体积的生理盐水,测定小鼠空腹的血糖、胰岛素、TC、TG、LDL-C、HDL-C的含量.结果表明,高剂量的南瓜多糖对正常小鼠的降血糖和降血脂效果优于低剂量.南瓜多糖使糖尿病小鼠的血糖与模型对照组相比极显著降低,胰岛素极显著升高,TC、TG、LDL-C显著降低.HDL-C极显著升高,并且南瓜多糖的降血糖降血脂效果与优降糖相比无显著差异.     

复方海带代餐粉的辅助降血脂作用

目的：通过建立高脂血症大鼠模型对富含膳食纤维和不饱和脂肪酸的复方海带代餐粉进行辅助降血脂作用研究。方法：采用SD雄性大鼠,设空白对照组、模型对照组和复方海带粉高、中、低3个剂量组：6.58,3.29,1.65 g/kg（分别相当于人体推荐量的10,5,2.5倍）,空白对照组饲喂基础饲料,其他组饲喂高脂饲料,3个剂量组灌胃给予相应浓度的复方海带粉混悬液,4周后,测定血清总胆固醇（Total cholesterol,TC）、甘油三酯（Triglyceride,TG）、低密度脂蛋白胆固醇（Low density lipoprotein,LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（High density lipoprotein,HDL-C）水平,并计算动脉粥样硬化指数（Atherosclerosis index,AI）。结果：3组剂量的复方海带粉均能降低大鼠血清TC（低剂量组P＜0.05,中、高剂量组P＜0.01）、TG（P＜0.05）和LDL-C水平（低剂量组P＜0.05,中、高剂量组P＜0.01）,提高HDL-C水平（中、高剂量组P＜0.01）,且存在一定的剂量依赖关系;同时,还能有效抑制高脂大鼠动脉粥样硬化指数的升高（P＜0.01）。结论：复方海带代餐粉具有较好的辅助降血脂及抗动脉粥样硬化作用。     

金花茶多糖的降血脂功能研究

运用超声波浸提工艺对金花茶多糖进行提取,并通过除蛋白、透析对粗多糖进行初步分离,以初步分离后的多糖喂食高血脂症的小鼠,探讨其降血脂的功能.结果表明:金花茶多糖的高、中、低3个剂量组均能极其显著地降低高血脂症小鼠血清中的TC、TG和LDL-C水平,提高HDL-C/TC比值.灌胃2周后,金花茶组小鼠血清的TC水平均可达到正常组水平,且效果优于血脂康胶囊.结果表明金花茶多糖具有明显的降血脂功能.     

岩藻多糖—助力中国临床营养发展的新元素

岩藻多糖(Fucoidan),是一种水溶性海洋多糖膳食纤维,富含L-岩藻糖(L-Fucose)及硫酸酯基团(Sulfate ester group),是褐藻特有的生理活性物质之一。最早是由瑞典科学家Kylin在褐藻(海带、昆布、裙带菜等)中发现的,当海藻的叶片与茎部受到巨浪或者海砂伤害时,褐藻叶片分泌一种黏滑物质—岩藻多糖,阻止细菌入侵;当海水退潮使海藻暴露于空气中时,岩藻多糖强大的保水性能,可以保持海藻的湿润,防止叶片变干死亡,延长海藻寿命。     

杏仁肽对高脂血症大鼠辅助降血脂的功能研究

目的 探究杏仁肽对高脂血症模型大鼠是否具有辅助降血脂作用。方法 采用高脂饲料形成大鼠混合型高脂血症动物模型,将健康雄性40只SD大鼠随机分为5组,分别为空白对照组、高脂血症模型组和杏仁肽低、中、高剂量组(0.4、0.8和1.6 g/kg BW)。空白对照组每日给予维持饲料,其余各组每日给予高脂饲料。连续经口给予受试物30d,测定大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)含量。结果 模型对照组和空白对照组比较,大鼠血清TG、TC及 LDL-C水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05),判定混合型高脂血症动物模型成立。与模型对照组比较,杏仁肽低剂量组血清TC降低,差异具有统计学意义(P<0.05),同时杏仁肽各剂量组血清TG水平不显著高于模型对照组(P>0.05),杏仁肽各剂量组血清HDL-C水平不显著低于模型对照组(P>0.05)。结论 在一定剂量下,杏仁肽具有辅助降血脂功能。     

海带岩藻聚糖硫酸酯对小鼠的免疫调节作用

目的:采用免疫学评价方法,研究海带岩藻聚糖硫酸酯对小鼠免疫功能的调节作用。方法:以海带粗多糖为原料,采用酸提取、离子交换和自由基氧化降解法制备得到不同的岩藻聚糖硫酸酯组分。KM小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组和海带岩藻聚糖硫酸酯组分F-2、Fa和Fb的低、中、高剂量组。除正常组外,其余皮下注射氢化可的松造成免疫低下模型后灌胃。海带岩藻聚糖硫酸酯F-2、Fa和Fb组小鼠分别灌胃F-2、Fa和Fb不同剂量多糖溶液(分别为25、50、100mg/(kg.d)),阳性对照组灌胃盐酸左旋咪唑(20mg/(kg.d)),进行免疫指标的测定。结果:F-2、Fa和Fb组均能显著提高免疫低下小鼠的脾脏质量/体质量比值,提高血清溶血素含量和提高腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力,且F-2和Fa组能增强迟发型变态反应能力,但Fb组对迟发型变态反应能力无显著性影响。结论:海带岩藻聚糖硫酸酯对免疫低下小鼠具有较好的免疫调节作用,且中、低分子质量的岩藻聚糖硫酸酯对免疫低下小鼠的免疫调节作用没有显著性差异。     

三鹿降血脂奶粉调节血脂作用的研究

观察了三鹿降血脂奶粉调节血脂的作用。用Wistar品系雄性大鼠60只随机分为6组,全部饲以高脂饲料,在此基础上分别饲以蒸馏水、普通奶粉及3个不同剂量的降血脂奶粉。实验期45d,实验前后测量体重,并采用酶法测定血清总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。结果表明,实验前后的各组大鼠体重均明显增加,但各实验组间无显著性差异(P>0.05)。处理组大鼠血清TG水平显著低于对照组(P<0.05或P<0.01);高剂量降血脂奶粉组大鼠血清HDL-C水平显著高于对照组(P<0.05);各组大鼠血清TC水平则未见有显著性差异。结论,三鹿降血脂奶粉对实验大鼠体重无影响,但可以显著降低TG并可显著升高HDL-C水平。     

海带提取物对免疫力低下小鼠的免疫调节作用

目的:考察海带提取物对免疫力低下小鼠的影响,探讨海带提取物的免疫调节作用。方法:用环磷酰胺制备免疫力低下小鼠模型,并将昆明种小鼠随机分为空白组、模型组、低、高剂量海带提取物组和阳性药物(脾氨肽)组。记录小鼠活动量、体重变化,计算脾脏系数、胸腺系数,检测各组IL-6和TNF-α血清水平。结果:与模型组比较,海带提取物在4.5 mg/g、13.5 mg/g剂量均可使小鼠体质改善、体重增长;海带提取物高剂量组的脾脏系数增高,而低剂量组的胸腺系数增高;高、低剂量组的白介素6(IL-6)均有所增高,而低剂量组的α肿瘤坏死因子(TNF-α)血清水平显著降低。结论:海带提取物能增强免疫低下小鼠的体质;同时可以提高小鼠的脾腺系数和胸腺系数,显示其在不同剂量分别调节体液免疫和细胞免疫的作用;海带提取物降低TNF-α而升高IL-6水平意味着其具有一定的抗炎症和调节Th1/Th2免疫平衡的作用。