海带岩藻多糖的抗脂质过氧化作用研究

用稀酸浸提和乙醇沉淀的方法提取海带岩藻多糖(Laminaria japonica fucoidan,LJF).采用体外实验研究LJF-2对H2O2诱导红细胞氧化溶血的抑制作用以及对小鼠肝匀浆脂质过氧化的保护作用,以此来评价LJF-2的抗脂质过氧化作用效果;结果表明,LJF-2对H2O2诱导的小鼠红细胞氧化溶血以及小鼠肝匀浆脂质过氧化具有明显的保护作用,且与浓度呈一定的量效关系.当浓度为0.54g/L时,对H2O2诱导红细胞氧化溶血的抑制率为50.32％,对小鼠肝匀浆脂质自发性过氧化的抑制率为28.24％.表明LJF-2具有显著的体外抗氧化活性.     

酸提香菇多糖的分离纯化及结构鉴定

本文研究了用盐酸水溶液从香菇柄中提取并分离纯化得到一种香菇多糖SP2,运用凝胶柱层析和滤纸电泳进行纯度鉴定,通过高效凝胶渗透色谱法测定分子量及其分布,利用紫外可见光谱法、气相色谱法、红外光谱法、X-射线衍射法、DSC热分析、高碘酸氧化法、Smith降解法和刚果红实验分析香菇多糖SP2的结构。分析研究表明SP2具有典型的多糖显色反应后的特征吸收峰,组成相对均一,相对分子量分布范围较窄,重均分子量为5.203×104 u;单糖组成为甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其组成摩尔比为0.32:58.6:2.82;经高碘酸氧化和Smith降解后表明SP2中C-C单键有1→2键、1→3键和1→6键,且比例为9.43:5.44:1;SP2是一种含有吡喃环的糖蛋白缀合物,不能形成单晶,为无定型形态,在分子之间无较强的作用力存在,且具有螺旋结构。本研究结果为阐明香菇多糖的构效关系提供依据。     

铁皮石斛多糖的流体性质与凝胶性质分析

以铁皮石斛多糖(DOP)为研究对象,通过流变与FT-IR方法,考察多糖质量浓度、温度、体系pH值及金属离子种类与浓度对铁皮石斛多糖的流体性质及凝胶性质的影响。结果表明:在不同质量浓度、温度、金属离子和pH值条件下,DOP水溶液表现出剪切稀释现象。DOP水溶液的黏度随DOP质量浓度的增加而增大;在5~75℃范围,DOP水溶液的黏度随温度的升高而降低;Na⁺的添加显著提高了DOP溶液的黏度,K⁺、Ca²⁺、Al³⁺可降低溶液的黏度,黏度变化趋势与金属离子浓度和价态有关。DOP水溶液在pH 2.0~6.8范围具有良好的稳定性,在碱性条件下,DOP水溶液的黏度显著增加。具体而言,当pH>10.0时,DOP溶液形成真正的凝胶。FT-IR结果显示,凝胶现象可能与1735,2935,2881 cm^-1处吸收峰的变化有关。上述结果表明,DOP水溶液具有独特的流体性质和凝胶性质,研究结果对铁皮石斛多糖的制备和加工具有一定的参考价值。     

羧甲基玛咖多糖制备及抗氧化性研究

通过水提醇沉淀法从玛咖粉末中提取了玛咖多糖,采用氢氧化钠-氯乙酸反应体系,以异丙醇为溶剂对玛咖多糖进行羧甲基化,经Sevage法脱除蛋白、透析得到固体羧甲基玛咖多糖,产物有良好的水溶性。紫外光谱显示羧甲基玛咖多糖水溶液在260～280nm处未见核酸和蛋白质的特征吸收峰;红外光谱表明羧甲基玛咖多糖在1600cm-1出现-COO特征吸收,并具有典型的多糖吸收峰,结构中存在β-型糖苷键;灰度法测定羧甲基玛咖多糖的取代度DS为0.618。同时抗氧化能力测定结果表明玛咖多糖羧甲基化前后均可清除利用Fenton反应由Fe2+-H2O2体系产生的羟自由基,且羧甲基化后玛咖多糖对羟自由基的清除能力增强。     

魔芋葡苷聚糖及其与大豆分离蛋白凝胶化作用的DSC研究

利用DSC研究了魔芋葡苷聚糖、大豆分离蛋白及两者的混合物凝胶在升、降温过程中的热效应变化。结果表明,在升温过程中,单独的魔芋葡苷聚糖(15％)在水溶液中或加入弱碱或强碱性凝固剂后所形成的凝胶均表现出放热效应;而单独的大豆分离蛋白水溶液(15％)所形成的凝胶没有产生热效应,但加入0.1mol／L的NaoH后却产生了明显的放热效应。对于魔芋葡苷聚糖与大豆分离蛋白所形成的混合凝胶,在碱性条件下,随魔芋葡苷聚糖含量的增加其放热温度升高,但大豆分离蛋白含量较高的凝胶,在高于85℃处有较强的放热效应;而在弱碱(0.1mol／L的Na2CO3)条件下,KGM(≥13％)含量较高的凝胶产生放热效应,其它凝胶基本没有热效应产生。实验还表明,所有的凝胶样品在降温过程中基本没有出现吸热和放热峰,表明所形成的凝胶为热不可逆凝胶。     

灰叶马尾藻多糖的提取及其生物活性

采用NaOH水溶液对灰叶马尾藻(Sargassum cinereum)进行超声浸提,通过Sevag法脱蛋白、柱层析,分离得2种浅黄色海绵状水溶性马尾藻多糖SP1、SP2。在质量浓度2g/100mL NaOH水溶液中80℃超声1h,再在80℃恒温水浴4h,得最高多糖产率为13.4%。SP1、SP2苯酚-硫酸显色反应呈阳性,紫外扫描、电泳检测表明多糖纯度较好;凝胶渗透色谱测得SP1、SP2分子质量分别约为36、77kD,红外光谱显示SP1、SP2有硫酸基、羧基和α-D-半乳吡喃糖的特征吸收峰。以电子自旋共振技术研究SP1、SP2抗氧化活性,10mg/mL的SP1、SP2对羟自由基(OH)的清除能力分别为87.2%、61.5%;SP1、SP2均具有较强的抑制人前髓白细胞(HL60)生长的作用,而SP2抗癌活性更高。     

铁皮石斛多糖的凝胶特性表征

为探究不同因素对铁皮石斛多糖凝胶特性的影响,研究多糖浓度、成胶温度、碱和离子对铁皮石斛多糖凝胶特性、持水性、乙酰基含量等的影响,通过差示扫描量热仪(DSC)、傅里叶红外光谱仪(FTIR)、X射线衍射仪(XRD)对多糖的性质进行表征。结果表明,多糖质量浓度从5 mg/mL增加到25 mg/mL时,其凝胶强度从70.87 g增加到206.39 g,持水性从78.52%增加到94.25%;在温度达到40 ℃时,凝胶强度达到最大为129.29 g,对应的持水性也最大为90.58%;随着不同碱(NaOH、Na2CO3、KOH、K2CO3)质量浓度的升高,凝胶强度均先持续增加后降低,凝胶的持水性均逐渐降低,在同等碱添加量条件下,形成的凝胶强度大小顺序为Na2CO3>K2CO3>NaOH>KOH;电解质方面,钠离子可以提高凝胶的强度和持水性,而尿素会显著降低凝胶的强度和持水性。FTIR图谱表明:乙酰基的吸收峰强度随Na2CO3添加量的升高而降低。多糖的脱乙酰程度与碱含量有关。XRD结果表明:其衍射峰强度与碱的添加量有关,表现为碱添加量越高,衍射峰越强。DSC结果表明:随着碱量的增多,水吸收峰的峰值温度升高,峰的热焓值增大。凝胶形成机理可能与乙酰基的水解促进多糖分子间的相互作用有关。     

电场对魔芋葡甘聚糖与卡拉胶相互作用的影响

为了研究电场对魔芋葡甘聚糖与卡拉胶相互作用机理的影响,本研究采用5 k V直流高压(氧负离子)处理魔芋葡甘聚糖与卡拉胶粉末,将粉末配制样品进行试验;结果表明:经电场处理9 min的KGM与卡拉胶复合胶的弹性模量G'始终明显大于黏性模量G",此时的凝胶网络富有弹性,分子链缠结贯穿效应明显。KGM与卡拉胶复合胶在频率扫描范围内,弹性模量G'明显大于黏性模量G",表明此时已经具有一定强度的凝胶网络结构;当多糖浓度为1%,魔芋葡甘聚糖与卡拉胶的共混比例为1:4时,凝胶强度达到最大值;电场处理时间为6 min时,凝胶强度最大;在75℃下加热30 min的凝胶强度最大;进行傅里叶红外光谱扫描,从红外吸收谱图中,吸收峰仅有强度的变化,未检测到新的吸收峰,说明电场处理未能显著改变其化学结构,引起性质的显著变化。     

油松花粉多糖分离纯化及初步结构鉴定

采用水提法从油松花粉中提取多糖,用DEAE-纤维素52柱色谱和Sephaeryl S-200凝胶柱色谱进行分离纯化,获得2种均一组分D11和D31.经过Sephaeryl S-300凝胶柱色谱进行纯度鉴定,表明D11和D31是均一多糖,用凝胶过滤法测定D11分子量为76468u,紫外光谱证明D11不含蛋白质,红外光谱表明D11中含有多糖类物质的特征吸收峰.     

水溶性蛋白聚糖AP-1的分离纯化和鉴定

利用人工栽培的姬松茸子实体干品 ,经热水提取 ,乙醇沉淀 ,蛋白酶法和Sevag法相结合去蛋白 ,H2 O2 脱色 ,DEAE SephadexA 2 5和SephadexG 2 0 0柱纯化 ,得到姬松茸蛋白聚糖AP 1 .葡聚糖凝胶柱层析分析表明 ,该蛋白聚糖为均一物质 ,相对分子质量为 1 2 4 0 0 0 .紫外扫描表明有核酸和蛋白质的特征吸收峰 .红外扫描显示有典型的多糖吸收峰 .纸层析和气相色谱分析表明 ,其单糖组成为葡萄糖、甘露糖、半乳糖以及核糖 ,其物质的量之比 (摩尔比 )为 1 .1 9∶0 .56∶0 .4 3∶0 .54.     

鼠李糖乳杆菌胞外多糖S2的原子力显微镜观察

胞外多糖S2是从鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）KF5的发酵乳中分离纯化得到的高分子质量组分。采用原子力显微镜（atomic force microscopy,AFM）对胞外多糖S2在水溶液中的表观形貌进行观察。结果表明：不同质量浓度的胞外多糖S2经AFM成像,得到了不同形貌多糖分子聚集行为的图像。随着胞外多糖S2质量浓度的降低,多糖分子之间的作用力减弱,外貌发生从膜状、岛屿状、网格状到单链/双链结构的变化。当胞外多糖S2质量浓度为50 ng/mL时,多糖分子间形成网状结构,说明胞外多糖S2具有多分支的化学结构。当胞外多糖S2质量浓度为10 ng/mL时,多糖分子在水溶液中呈柔性链,形成无规卷曲的构象,进一步验证了由高分子稀溶液理论推断的无规卷曲构象的结论。     

毛葱水溶性多糖的超声波微波协同法提取工艺优化及结构分析

以毛葱为原料,利用超声波微波协同法提取毛葱水溶性多糖。以多糖得率为考察指标,在单因素试验的基础上,通过响应面分析方法确定毛葱水溶性多糖提取的最佳工艺为液料比17∶1(mL/g)、超声波功率360 W、微波功率200 W、协同时间16 min,此条件下毛葱水溶性多糖得率为(11.92±0.13)%。溶解性实验结果表明:该毛葱水溶性多糖可溶于水,不溶于有机溶剂;显色反应实验结果表明:该毛葱水溶性多糖含有糖醛酸,但不含淀粉及酚类物质。紫外光谱分析显示该毛葱水溶性多糖无明显的核酸和蛋白质的特征吸收峰,傅里叶变换红外光谱分析显示该毛葱水溶性多糖具有多糖类的特征吸收峰。高效凝胶渗透色谱法分析该毛葱水溶性多糖的重均分子质量,可初步得出该毛葱水溶性多糖不是由均一组分构成的。     

小分子苦瓜多糖MCPⅡa的纯化及结构分析

利用酶解结合水溶醇沉提取水溶性的苦瓜多糖（Momordica charantia polysaccharide,MCP）,经Sevag法除蛋白、DEAE-纤维素离子交换、Sephadex G-100凝胶过滤获得活性多糖MCPⅡa。由高效凝胶渗透色谱检测可知MCPⅡa为均一多糖,平均分子质量为13.0 kD,单糖组分分析显示其单糖组成为鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖、木糖和阿拉伯糖（各组分物质的量比为12∶3.05∶19.89∶5.95∶56）。傅里叶红外光谱、核磁共振及刚果红实验发现其存在C1、C2、C3、C5连接,在水溶液中具有稳定的β-三股螺旋构象,扫描电镜下显示其为菱形晶体颗粒。     

鹰嘴豆非淀粉多糖的分离纯化及结构表征

提取鹰嘴豆中的粗多糖,通过酶处理和Sevag法除去多糖中的淀粉和蛋白质,经DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-75凝胶柱分离纯化分别得到鹰嘴豆非淀粉中性多糖和酸性多糖,并通过紫外光谱、气相色谱、红外光谱、扫描电镜测定其性质和单糖组成。结果表明：鹰嘴豆非淀粉多糖在260 nm和280 nm波长处均无吸收峰,表明两种多糖均不含核酸、蛋白质以及肽类等;气相色谱测定表明鹰嘴豆非淀粉中性多糖单糖组成的物质的量比为鼠李糖∶岩藻糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶半乳糖∶葡萄糖=2.48∶1∶3.92∶0.87∶32.82∶18.79∶28.06,鹰嘴豆非淀粉酸性多糖单糖组成物质的量比为鼠李糖∶岩藻糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶半乳糖∶葡萄糖=2.22∶1∶3.92∶2.10∶5.92∶15.99∶8.57（均以岩藻糖为标准）;红外光谱测定表明二者均有多糖的特征吸收峰;扫描电镜显示鹰嘴豆非淀粉中性多糖呈线形结构而鹰嘴豆非淀粉酸性多糖呈卷曲的片状结构。     

荞麦蜂花粉多糖的分离纯化及结构鉴定

本文对荞麦蜂花粉多糖进行了分离纯化及结构分析鉴定。以荞麦蜂花粉为原料,采用水提醇沉法提取粗多糖,采用木瓜蛋白酶-Sevag法、DEAE-52纤维素柱层析法对其进行分离纯化。通过紫外光谱、气相色谱、高效液相色谱及红外光谱等技术对多糖结构组成进行分析。结果表明:荞麦蜂花粉多糖经柱层析分离得到三种多糖组分即WFPP-N、WFPP-1、WFPP-2,紫外光谱分析三个组分多糖均不含有蛋白、核酸等杂质;荞麦蜂花粉多糖主要由阿拉伯糖(Ara)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、鼠李糖(Rha)、木糖(Xyl)、甘露糖(Man)组成,不同组分中各单糖百分含量比不同;WFPP-N、WFPP-1分子量测定分别为1.96×104、2.24×104 Da,WFPP-2中含有两个多糖组分其分子量分别为2.40×104、4.38×103 Da;红外光谱表明三种多糖组分均具有多糖的特征吸收峰。本文从荞麦蜂花粉多糖中分离得到的三种组分,对其结构进行了分析鉴定,为今后研究荞麦蜂花粉多糖的功能活性提供参考。     

甘谷红芪酸性多糖的纯化及结构初探

本实验主要采用水提醇沉法提取甘谷红芪多糖,首先用DEAE-Sepharose Fast Flow 阴离子交换柱层析进行分离得到其中的一种酸性多糖,后者再经 Sepharose 6B Fast Flow凝胶层析纯化后浓缩、透析、冷冻干燥。琼脂糖凝胶电泳显色证明该组分为均一性多糖,再经过紫外、红外光谱分析以及酸水解产物薄层分析,分析结果表明该酸性多糖为杂多糖,其组成单糖可能分别为：木糖、葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸、氨基葡萄糖盐酸盐或氨基半乳糖盐酸盐、葡萄糖醛酸内酯或半乳糖醛酸内酯,并且含有硫酸根。     

双孢菇菇柄多糖柱层析纯化及单糖组成

以双孢菇菇柄为试材,首先对经超声提取得到的菇柄多糖进行柱层析分离纯化,然后对柱层析得到的多糖组分别采用紫外光谱和柱层析进行纯度分析,并进行红外光谱分析和单糖组成分析。结果表明,脱蛋白双孢菇菇柄多糖经DEAE Sephadex A-25柱层析纯化共得到4个组分,收集其中两个较多的组分(蒸馏水和0.1 mol/L NaCl洗脱组分),经紫外光谱扫描无核酸和蛋白质,经Sephadex G-200柱层析鉴定均为单一峰。所得两种多糖组分经FT-IR红外光谱分析,均含有多糖特征吸收峰,且均为吡喃糖环β-异构体的多糖。菇柄蒸馏水洗脱多糖组分由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖组成,0.1 mol/L NaCl洗脱组分是由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖、氨基葡萄糖、氨基半乳糖组成。     

Sulfation,structural analysis,and anticoagulant bioactivity of ginger polysaccharides

In this study, ginger polysaccharide (GP), ginger polysaccharide 1 (GP1), and ginger polysaccharide 2 (GP2) from ginger were firstly modified by sulfation. Fourier transform infrared, and nuclear magnetic resonance spectra investigation of sulfated ginger polysaccharide (SGP), sulfated ginger polysaccharide 1 (SGP1), and sulfated ginger polysaccharide 2 (SGP2) revealed that the sulfation successfully occurred with the characteristic absorption peak of polysaccharide. Congo red experiment showed that triple helical structure existed in SGP and SGP1, but random coils existed in SGP2. SGP, SGP1, and SGP2 all showed a rough and rugged surface with plenty of small pores. The blood clotting time of SGP2 or SGP at 2 mg/mL in activated partial thromboplastin time (APTT) assay was 41.42 or 38.01 s, respectively, which were approximately 1.33- and 1.22-fold longer than that of the physiological saline. Compared to the saline control group, prothrombin time (PT) was increased by 1.22-fold with the addition of GP at 2 mg/mL. However, no clotting inhibition phenomenon was observed in thrombin time test even at the concentrations that APTT and PT were obviously prolonged. It indicated that GP2, SGP2, and SGP inhibited the intrinsic pathway of coagulation, but GP inhibited both the intrinsic and extrinsic pathways of coagulation. Hence, ginger polysaccharides might be used as anticoagulants and therapeutic reagents for thrombosis.