槲皮素对胰蛋白酶活性的影响

通过测定槲皮素对胰蛋白酶催化活性、催化反应动力学以及内源荧光光谱的影响,对槲皮素和胰蛋白酶相互作用特性进行研究.结果表明:槲皮素对胰蛋白酶催化活性有明显的抑制作用,当槲皮素与胰蛋白酶的摩尔比为44∶1,在37℃反应10min,抑制率达到32.5％;反应时间对两者的作用影响并不明显;槲皮素对胰蛋白酶催化活性的抑制作用属于可逆的竞争性抑制;槲皮素可使胰蛋白酶的内源荧光发生猝灭现象,猝灭常数Kq是4.7415×1012 (mol/L)1·S-1,猝灭类型为静态猝灭,结合位点数N为0.9206.     

原儿茶酸与卵白蛋白的相互作用

原儿茶酸（protocatechuic acid,PCA）是一种分布广泛的天然酚类化合物,也是花色苷、原花色苷等复杂多酚的主要代谢物之一,具有抗氧化、神经保护等功能。采用多光谱技术研究PCA 与卵白蛋白（ovalbumin,OVA）的相互作用及其对ABTS+自由基清除能力的影响。结果显示,PCA 对OVA 本征荧光产生猝灭作用;猝灭常数Ksv 随温度升高而降低,表明相互作用为静态猝灭机制;PCA 与OVA 存在一个结合位点,结合常数约为104 量级;结合属于自发产生的吸热反应,疏水作用是主导作用力;相互作用后Tyr 残基周围微环境极性增加、疏水性降低,Trp 残基所处微环境没有变化。PCA-OVA 复合物ABTS+自由基清除能力较PCA 和OVA 有显著提高（p＜0.05）。因此,PCA 与OVA 的相互作用使OVA 构象发生改变,对ABTS+自由基清除能力具有一定影响。     

杨梅素的半合成及抗氧化活性比较

以显齿蛇葡萄叶中含量丰富且易于提取的二氢杨梅素为原料,采用Algar-Flynn-Oyamada(AFO)反应法和有机碱催化氧化法,合成了杨梅素,并从抑制过氧化物生成和清除DPPH·能力两方面,对杨梅素产品和杨梅素对照品进行了体外抗氧化性能对比研究。结果表明:杨梅素产品对过氧化物的生成具有一定的抑制作用,对DPPH·有较好的清除效果,其抗氧化性能总体上与杨梅素对照品相当,没有显著性差异。     

食用合成色素胭脂红对胰蛋白酶光谱性质的影响

应用荧光光谱法、紫外可见吸收光谱法、傅立叶变换红外光谱和圆二色光谱法,研究了食用合成色素胭脂红与胰蛋白酶的结合性质,明确胭脂红与胰蛋白酶之间的结合常数、结合位点数(n)、作用力类型、结合距离(r)等信息。结果表明,胭脂红对胰蛋白酶内源荧光强度有较强的猝灭能力,荧光猝灭机制属于形成复合物的静态猝灭,由实验计算得出的热力学参数熵变和焓变均为负值,表明氢键和范德华力是驱动胭脂红-胰蛋白酶复合物形成的主要作用力,胭脂红与胰蛋白酶的结合常数达到104mol/L数量级,存在中等强度的亲和力。光谱分析表明胭脂红与胰蛋白酶结合引起胰蛋白酶的氨基酸残基微环境发生改变,胰蛋白酶的二级结构α-螺旋和无规则卷曲含量增加,β-折叠和β-转角的含量降低,多肽链有所收缩。     

L-赖氨酸与3种还原糖美拉德反应产物的理化特性及抗氧化活性

研究还原糖种类和反应时间对美拉德反应产物(Maillard reaction products,MRPs)理化特性和抗氧化活性的影响,采用L-赖氨酸与3种还原糖(D-葡萄糖、D-果糖、D-半乳糖)按浓度比1:1、95℃加热条件进行反应,分别得到0～6h的MRPs,测定MRPs的pH值、吸光度(A294nm和A420nm)、荧光强度、游离氨基含量以及还原能力和ABTS+.清除能力。结果表明:随着加热时间的延长,3个体系的pH值逐渐降低(P<0.05);无荧光中间产物(A294nm)和褐变产物(A420nm)显著增加(P<0.05);荧光强度在加热开始1h内急剧增加随后减小(P<0.05);游离氨基的含量逐渐降低(P<0.05);同时,MRPs的还原能力和ABTS+.清除活性显著增加(P<0.05)。在3种反应体系中,L-赖氨酸与D-半乳糖反应产生的MRPs具有最多的中间产物和最大程度的褐变,以及最强的还原能力和ABTS+.清除能力。由于L-赖氨酸与还原糖反应产生的MRPs具有一定的抗氧化活性和自由基清除能力,所以可以作为一种有效的抗氧化剂应用于食品工业中。     

二氢杨梅素与马铃薯淀粉的相互作用及抗氧化性的研究

利用共糊化法制备二氢杨梅素-马铃薯淀粉复合物,探究二氢杨梅素（dihydromyricetin,DMY）与淀粉间的相互作用及其抗氧化性。利用傅里叶变换红外光谱仪、X射线衍射、核磁共振氢谱仪与电镜扫描探究二者的相互作用机制,比较DMY、马铃薯淀粉及二者复合物对2,2-联苯基-1-苦基肼基（2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH）和2,2′-氨基二（2-乙基-苯并噻唑啉磺酸-6）铵盐[2,2′-amino-di(2-ethyl-benzothiazoline sulphonic acid-6)ammonium salt,ABTS）]阳离子、羟基自由基的清除率。结果表明DMY与马铃薯淀粉发生氢键非共价作用。马铃薯本身的抗氧化性极低,二氢杨梅素-马铃薯淀粉复合物对DPPH、ABTS+自由基的清除率与DMY的清除能力相当。此外,DMY添加量和二氢杨梅素-马铃薯淀粉复合物的羟基自由基清除率呈现浓度依赖关系。综上所述,DMY与马铃薯淀粉发生氢键相互作用,DMY的添加使复合物的抗氧化性显著提高。     

二氢杨梅素-镍配合物的制备及其羟自由基的清除作用

以天然产物藤茶的有效成分二氢杨梅素作为配体,采用加热回流方法,合成二氢杨梅素-镍配合物,用紫外光谱、红外光谱表征配合物.采用Fenton方法研究配体二氢杨梅素及其镍配合物的清除羟基自由基作用.结果合成了二氢杨梅素-镍配合物,颜色为土黄色,二氢杨梅素-镍配合物清除羟基自由基的能力强于配体二氢杨梅素.     

不同二氢杨梅素含量的显齿蛇葡萄提取物的抗菌活性与清除DPPH自由基能力研究

研究不同二氢杨梅素含量的显齿蛇葡萄提取物的抗菌活性与清除DPPH自由基能力。选取17种二氢杨梅素含量不同的显齿蛇葡萄,使用乙醇超声辅助法获得各个样品的提取物;采用药敏滤纸片法和二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)体系分别研究提取物以及相同含量的二氢杨梅素纯品的抗菌活性和清除DPPH自由基能力。结果表明:17种提取物的抗菌活性和清除DPPH自由基能力随着提取物中二氢杨梅素含量的增加而增强,提取物的抗菌活性和清除DPPH自由基能力显著强于相应含量二氢杨梅素纯品。在10mg/m L浓度下,部分提取物的抑菌活性强于二氢杨梅素;对DPPH·清除作用:二氢杨梅素大于全部样品;样品10~17大于VC;样品2~17大于BHT。     

酯化修饰对二氢杨梅素性能的影响

用月桂酰氯对二氢杨梅素进行不同程度的酯化修饰,探讨不同程度的酯化修饰对二氢杨梅素溶解性和抗氧化性能的影响。结果表明：与二氢杨梅素相比,二氢杨梅素酯化物在油中的溶解度提高20～300 倍,并且随着酯化程度加大,二氢杨梅素酯化物在油中溶解度增加。二氢杨梅素酯化物在极性溶剂中清除DPPH 自由基和H2O2 的能力比二氢杨梅素低,酯化物的抗氧化活性随着酯化程度的增加呈下降趋势;在铁离子- 抗坏血酸诱导的卵磷脂过氧化反应体系中,二氢杨梅素酯化物的抗氧化活性明显优于二氢杨梅素,且不受酯化程度的影响,表明二氢杨梅素及其酯化物在卵磷酯脂质体中的抗氧化活性受溶解性和羟基数目双重影响。     

紫甘薯花色素与胰蛋白酶相互作用特性

测定紫甘薯花色素与胰蛋白酶反应前后酶的催化活性、催化反应动力学并采用紫外光谱法、荧光光谱法和红外光谱法研究紫甘薯花色素与胰蛋白酶相互作用特性。结果表明：紫甘薯花色素对胰蛋白酶催化活性有明显的抑制作用,抑制类型为可逆的竞争性抑制,抑制常数Ki＝6.16×10－4 mmol/L,当紫甘薯花色素与胰蛋白酶的物质的量比为140∶1,在 37 ℃反应 15 min,抑制率达到38.61%,而反应时间对催化活性的影响不明显;紫甘薯花色素可使胰蛋白酶的内源荧光猝灭,猝灭类型为静态猝灭,室温下猝灭常数Kq为1.73×1012 L/（mol·s）,结合常数KA为3.88×104 L/mol,结合位点数n为0.86;热力学参数确定两者之间的作用力主要为氢键和范德华力;根据Förster能量转移理论得出它们的结合距离为3.56 nm;红外光谱经过去卷积、二阶导数处理得知与紫甘薯花色素作用后胰蛋白酶的α-螺旋含量降低,β-折叠含量升高。     

二氢杨梅素对4种植物油脂抗氧化作用研究

研究二氢杨梅素(DMY)对植物油脂抗氧化作用。采用紫外可见分光光度计和烘箱强化贮藏法,考察DMY对DPPH自由基清除能力和对山茶油、亚麻籽油、紫苏籽油和油酸的抗氧化作用。结果表明:DMY对DPPH自由基清除能力明显高于TBHQ、BHT、BHA和TP;当抗氧化剂添加量为0.05%时,不同抗氧化剂在山茶油和油酸中抗氧化作用强弱顺序为TBHQDMYBHABHTTP;不同抗氧化剂在紫苏籽油和亚麻籽油中抗氧化作用强弱顺序为TBHQBHABHTDMYTP;DMY还能协助增强其他抗氧化剂的作用;DMY对4种植物油脂抗氧化效果强弱顺序为山茶油油酸亚麻籽油紫苏籽油。     

二氢杨梅树皮素的抗氧化活性研究

以植物油为研究材料，研究了二氢杨梅树皮素(DMY)的抗油脂氧化的能力；pH、溶剂、铁离子到其抗氧化性的影响。结果表明：DMY具有良好的抗油脂氧化的能力，抗氧化效果优于儿茶素、大豆异黄酮、翟根异黄酮，与TBHO的抗氧化效果相近；在0～0．1％的浓度范围内，其抗氧化效果随浓度增加而增强。DMY掘氧化作用的最适pH范围为4～5；乙醇溶的DMY抗氧化作用优于水溶的DMY的抗氧化作用。铁离子对DMY抗氧化性有一定的抑制作用，但可以通过提高DMY浓度得到改善；因此，DMY作为天然抗氧化剂有很好的开发前景。     

配位对二氢杨梅素晶体结构与抗氧化活性的影响

食用植物有效成分的非晶化配位可能会产生新的或更好的药物活性。本实验研究二氢杨梅素(DMY)与Cu配位的优化工艺条件、配位前后DMY的晶体结构和抗氧化活性的变化。结果表明：DMY与Cu配合的最佳工艺条件为40℃、反应时间60min、pH 9.5;配位后DMY的UV-Vis光谱最大吸收峰由292nm红移至332nm;经理论化学计算和FT-IR光谱证实,DMY的4位羰基和5位羟基O原子参与配位;配合物对羟自由基(·OH)的清除能力提高,这可能和配位后DMY出现的非晶化现象有关。     

二氢杨梅素抗氧化机制探讨

二氢杨梅素可开发利用价值极大,它的抗氧化活性更是研究的热点。本研究通过量子化学计算手段和实验醚化处理相结合,确定了二氢杨梅素分子结构的抗氧化活性中心在其B环上的3’、4’、5’位连酚羟基结构,同时也验证了量子化学计算在研究黄酮类物质分子结构与表现性质中的正确预测性和指导性。     

二氢杨梅素生物功效的研究

本实验采用《保健食品检验与评价技术规范》提供的方法,研究了从显齿蛇葡萄茎叶中提取的黄酮类化合物二氢杨梅素的生物功效。实验结果显示:二氢杨梅素毒性很小,其大鼠口服灌胃的最大耐受量为5.0g/kg。二氢杨梅素小鼠灌胃30d后能有效地阻止乙醇导致的肝脏GSH耗竭和MDA升高,能降低TG含量,减轻肝细胞脂肪变性等,该结果表明:二氢杨梅素有较强的抗氧化能力,还能够有效地预防乙醇性肝损伤。因此,二氢杨梅素作为天然的抗氧化剂具有良好的开发前景。     

Tannin fraction from Ampelopsis grossedentata leaves tea (Tengcha) as an antioxidant and α‐glucosidase inhibitory nutraceutical

Leaf of Ampelopsis grossedentata is a new resource of functional foods with healthful properties. Antioxidant and α‐glucosidase inhibitory activities of water extract (made in the style of drinking), tannin fraction (TF) and dihydromyricetin (DMY) from A. grossedentata leaves were evaluated. The main component of TF was identified as gallotannins. DPPH and ABTS radical scavenging activities and reducing power of TF were superior to those of water extract, however, inferior to those of DMY. In no PBS wash protocol of cellular antioxidant activity assay, DMY and TF exhibited similarly, while in PBS wash protocol, the value of TF was higher than that of DMY. In addition, TF possessed the highest α‐glucosidase inhibitory activities (IC₅₀ = 1.94 μg mL^?1), followed by water extract (IC₅₀ = 23.10 μg mL^?1) and DMY (IC₅₀ = 72.21 μg mL^?1). The strong α‐glucosidase inhibitory activity of TF may attribute to the binding capacity to enzymes, as confirmed by fluorescence analysis.     

二氢杨梅素月桂酸酯在猪油中的抗氧化性研究

用月桂酰氯对二氢杨梅素的羟基进行酯化，合成了二氢杨梅素月桂酸酯。并对二氢杨梅素月桂酸酯结构进行了红外光谱表征。通过对二氢杨梅素及二氢杨梅素月桂酸酯在猪油中抗氧化性能比较试验，证实二氢杨梅素月桂酸酯能够持久、稳定地在猪油中发挥抗氧化作用，在猪油中的抗氧化能力比二氢杨梅素强，而二氢杨梅素在猪油氧化后期起到了促氧化作用。通过对二氢杨梅素月桂酸酯在猪油中不同添加量抗氧化试验，得出二氢杨梅素月桂酸酯在猪油中的最佳添加量为1．0mmol/L。