痰热清注射液对慢性髓系白血病K562细胞增殖的抑制作用

目的观察痰热清注射液对慢性髓系白血病K562细胞增殖的抑制作用。方法将痰热清注射液倍比稀释成1：2、1：4、1：8、1：16、1：32、1：64、1：128、1：256、1：512共9个浓度组,分别处理增殖期慢性髓系白血病K562细胞,镜下观察不同时间点各浓度组细胞生长情况,应用CCK-8法检测细胞增殖能力,绘制生长曲线,计算抑制率和半数抑制浓度（IC50）。结果痰热清注射液能明显抑制K562细胞增殖,细胞倍增时间为24h,1：2至1：8稀释浓度组的细胞毒性大,细胞基本死亡;抑制作用呈剂量和时间依赖性,IC50约为1：55稀释浓度。结论痰热清注射液对K562细胞具有抑制作用,这为临床应用痰热清注射液治疗血液肿瘤并发感染提供了实验基础。     

山茱萸总皂甙对K562细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察山茱萸总皂甙（TSCO）对慢性髓系白血病细胞株K562 增殖的抑制作用.方法 用乙醇溶剂回流法提取TSCO,HPD-100大孔吸附树脂对提取液纯化;用MTT法检测不同浓度TSCO对K562细胞增殖的抑制作用;用Hoechst33342/PI荧光染色法检测细胞凋亡情况;比色法测定凋亡相关蛋白Caspase-3活性.结果 TSCO能够抑制K562细胞的增殖,且随着药物浓度（12.5、25、50、100 和200 μg/ml）增大和培养时间（24 h、48 h和72 h）的延长,对K562细胞活性的抑制作用逐渐增强;不同浓度的TSCO处理72 h后,K562细胞出现典型凋亡的三期形态学改变,可见胞体缩小、核染色质聚集、胞浆浓缩、核固缩、核碎裂,还可见膜包裹的凋亡小体;细胞凋亡率随着药物的浓度的增大而升高;TSCO作用72 h后K562细胞的Caspase-3活性明显增高.结论 TSCO能抑制K562细胞增殖,促进K562细胞凋亡,其作用随着作用时间和药物浓度的增加而增强;TSCO诱导K562细胞凋亡的作用可能与Caspase-3的表达增加有关.     

PTK787对K562细胞增殖及细胞周期作用的影响*

目的:观察酪氨酸激酶抑制剂PTK787对K562细胞增殖、细胞周期的作用,探讨PTK787抗急性髓系白血病的作用机制.方法:应用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)观察不同浓度PTK787在不同时间对K562细胞增殖作用的影响;用流式细胞仪检测浓度PTK787对K562细胞周期的抑制作用.结果:随着PTK787浓度增加与作用时间延长,K562细胞的增殖抑制率逐渐升高.同一时间不同浓度组之间比较,或者同一浓度不同时间组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05),其中PTK787作用48 h,以浓度320μmol/L对细胞抑制率最强.随着PTK787浓度增加,G1期细胞比例逐渐升高,S期细胞比例逐渐下降,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:PTK787可以抑制K562增殖,阻止K562细胞由G1期向S期转化,从而达到抗白血病的作用.     

青蒿素CQ-189对K562细胞增殖的抑制作用研究

目的 探寻可有效抑制人白血病细胞恶性增殖,为抗肿瘤药物的开发提供理论和实验依据.方法 以人白血病K562细胞为研究对象,柔红霉素为对照,采用MTT比色法考察AACQ-189对人白血病细胞生长的抑制作用.结果 柔红霉素0.038～0.300 mg/L与AACQ-189 1.562～25.000mg/L分别作用于K562细胞24 h、48 h后,均对K562细胞生长表现出不同程度的抑制作用,随着药物浓度增加、作用时间延长,抑制作用越明显.AACQ-189的抑制率可达90％以上.结论 AACQ-189有望成为有效的抗白血病治疗药物.     

小分子酪氨酸激酶抑制剂AG-490对人慢性髓系白血病急变细胞株K562细胞增殖凋亡的影响

目的探讨酪氨酸激酶抑制剂AG-490对人慢性髓系白血病急变细胞株K562细胞的增殖及凋亡的影响。方法采用MTT法观察AG-490在体外对人慢性髓系白血病急变细胞株K562细胞增殖的影响,光学显微镜下观察AG-490对K562细胞形态的变化,流式细胞术检测AG-490对K562细胞凋亡及细胞周期的影响,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及实时荧光定量PCR技术检测AG-490作用后K562细胞bcr/abl融合基因及凋亡相关基因c-myc mRNA的表达水平。结果 AG-490可明显抑制K562细胞的增殖,并随药物作用时间的延长和浓度的增加,抑制作用越明显（P〈0.05）;AG-490可使细胞周期阻滞于G1期,促使其凋亡（P〈0.05）。AG-490作用于K562细胞48 h后bcr/abl融合基因的表达无明显改变（P〉0.05）,而c-myc的表达水平明显降低（P〈0.05）。结论 AG-490可能通过阻断JAK2信号通路而下调c-myc的表达,使K562细胞阻滞于G1期,从而抑制K562细胞增殖,促使其凋亡。     

硒化壳聚糖对K562细胞的作用及其与NF-КB信号分子的关系

目的:研究硒化壳聚糖对慢性粒细胞白血病细胞株K562增殖的影响,并且探讨这种影响与NF-КB信号分子的关系。方法:MTT法检测硒化壳聚糖对细胞增殖的影响,AO/EB荧光染色用来观察药物对细胞的凋亡作用。Westernblot的方法检测蛋白含量的变化。结果:硒化壳聚糖对K562细胞抑制作用呈量效、时效关系,硒化壳聚糖200mg/L作用48h对K562细胞的抑制率高达90.7±10%;并使细胞出现明显的凋亡现象。Westernblot的实验结果表明硒化壳聚糖使K562细胞NF-КB蛋白含量明显减少,且呈量效关系。结论:硒化壳聚糖可减少进入细胞核内NF-КB的蛋白含量从而下调其下游基因表达,最终抑制K562细胞增殖,诱导细胞发生凋亡。     

丙戊酸钠对K562细胞的增殖抑制作用

目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠(VPA)对慢性髓系白血病细胞株K562的增殖抑制作用.方法:噻唑蓝比色法(MTT法)检测不同浓度VPA对K562细胞增殖的抑制作用;Western Blot法检测K562细胞Bax和Bcl-2蛋白的表达.结果:VPA能显著抑制K562细胞的增殖(P＜0.01),VPA处理K562细胞72h的半数抑制浓度(IC50)为(2.34±0.14)mmol/L;3mmol/L VPA处理K562细胞72h后,Bax蛋白的表达明显升高、Bcl-2蛋白的表达明显降低.结论:VPA可通过上调Bax的表达、下调Bcl-2的表达抑制K562细胞增殖,诱导K562细胞凋亡.     

白山毛桃根提取物对人红白血病K562细胞作用研究

目的研究白山毛桃根提取物对人红白血病K562细胞增殖的抑制作用及其可能的作用机制。方法 MTT法检测白山毛桃根提取物对K562细胞增殖抑制的影响;Hoechst33258染色实验观察白山毛桃根提取物诱导K562细胞凋亡情况;流式细胞仪检测该药物诱导K562细胞凋亡的情况。结果白山毛桃根提取物可以抑制K562细胞增殖,且呈时间和浓度依赖性,对K562细胞的半数抑制率(IC_(50))在24 h、48 h、72 h时分别为31、28、10 mg/ml,形态学观察表明白山毛桃根提取物能诱导K562细胞的凋亡。结论白山毛桃根提取物能抑制K562细胞增殖和诱导细胞凋亡。     

WT1基因特异性siRNA对K562细胞表达及增殖的影响

目的:研究WT1基因特异性小干扰RNA (small RNA interference, siRNA)对K562细胞表达及增殖的影响,为白血病的基因治疗提供新的思路.方法:以慢性粒细胞白血病细胞系-K562为研究对象,化学合成并转染针对K562细胞WT1基因的siRNA,倒置显微镜观察细胞的生长状态及形态学改变;MTT法检测细胞增殖状态;半定量RT-PCR检测siRNA对WT1基因表达的抑制作用;流式细胞仪法检测K562细胞凋亡.结果:siRNA转染K562细胞后, 细胞生长受抑,增殖能力减弱,其增殖抑制作用于转染后48、72 h最明显, 增殖抑制率分别为50.6%和54.1%.半定量RT-PCR显示WT1mRNA表达水平明显低于对照组;WT1 siRNA转染48 h后有42.19 %的K562细胞发生凋亡.结论:WT1基因特异性siRNA可显著抑制K562细胞增殖,促进凋亡,为白血病的基因治疗提供了新的思路.     

苦参碱对K562细胞增殖及凋亡相关分子表达的影响

目的 研究苦参碱对人白血病细胞K562增殖、凋亡的影响及其机制。方法 苦参碱（0.2mg/ml）作用于K562细胞,每日计数白细胞、计算抑制率;流式细胞分析仪检测苦参碱对K562细胞周期的改变及凋亡的影响;电子显微镜观察凋亡细胞形态;Western blot检测BCL－6及增列细胞核抗原（PCNA）表达情况。结果 苦参碱对K562细胞有明显的抑制作用,用药72h的细胞增殖抑制率达69％;用药5d后,G1期细胞明显增多,高达58.5%,68％的细胞发生凋亡。电子显微镜可观察到苦参碱诱导的早、中、晚期K562凋亡细胞;BCL－6表达增强,PCNA表达下降。结论 苦参碱能显著抑制K562细胞增殖、促进其凋亡,其机制可能与细胞增殖周期受阻及PCNA表达下降、BCL－6表达增加有关。     

苦参碱对K562细胞增殖抑制与诱导分化的实验研究

目的：观察苦参碱对K562细胞的增殖抑制和诱导分化作用。方法：以K562细胞为实验对象,采用体外培养技术,通过细胞生长曲线、细胞形态、乳酸脱氢酶（LDH）活性测定方法观察苦参碱的作用。结果：浓度为0．2－0．3mg/ml的苦参碱对K562细胞有明显的增殖抑制与诱导分化作用,实验组细胞的数量,形态和生化代谢都发生了变化。结论：这一结果将对白血病的诱导分化治疗提供有力的实验依据。     

苦参提取液诱导K562细胞分化的研究

利用体外培养技术,以Ｋ５６２细胞为实验模型,通过Ｋ５６２细胞的生长曲线、细胞形态、乳酸脱氢酶活性、血红蛋白测定等,观察了苦参提取液对Ｋ５６２细胞的诱导分化作用。以ＭＴＴ法结合细胞形态探讨苦参提取液作用Ｋ５６２细胞的有效分化浓度及有效作用时间,研究结果表明：１２ｍｇ／ｍｌ浓度的苦参提取液作用Ｋ５６２细胞二天,从形态到代谢都发生了变化。ＬＤＨ活性明显降低;血红蛋白生成;细胞增殖明显受到抑制。电镜形态提示,细胞向似红细胞系、粒细胞系及单核细胞系分化。     

白花蛇舌草提取物体外抑制K562细胞增殖实验研究

目的：观察白花蛇舌草提取物（HDE）体外对人白血病细胞株K562增殖的影响,探讨HDE 用于治疗白血病的作用机制。方法：以白血病K562细胞株为靶细胞,观察不同浓度的HDE对 K562细胞增殖的影响,及胞内线粒体跨膜电位（ΔΨm）的水平;检测低浓度HDE处理前后胞内Sur? vivin、Bcl-2基因表达。结果：HDE（6.4mL/L）能明显抑制K562细胞增殖,且与浓度呈正相关（P< 0.05或P<0.01）。通过流式细胞术对碳氰化合物类亲脂性荧光染料（JC-1）检测发现,HDE能使靶 细胞内ΔΨm降低,且与HDE处理浓度呈负相关;K562细胞经低浓度HDE（3.2mL/L）处理3周后, Survivin、Bcl-2基因表达均低于未经处理细胞的2.7倍和1.6倍。结论：HDE可能通过降低线粒体 跨膜电位,抑制抗凋亡基因的表达,抑制K562白血病细胞增殖。     

阿米福汀对HL-60细胞中survivin表达的影响

目的 探讨阿米福汀（WR-2721，amifostine，AMI）对人髓系白血病细胞HL-60中survivin表达的影响。方法 不同浓度AMI（1，10，1000μmol/L）干预HL-60细胞24，48，72h，用MTT比色法检测细胞的生长抑制作用;用半定量RT-PCR方法检测抑凋亡基因survivin mRNA的表达水平。结果 阿米福汀可显著抑制HL-60细胞的增殖和下调抑凋亡基因survivin的表达水平，且均有明显浓度和时间依赖性。结论 AMI可能通过下调抑凋亡基因survivin的表达，解除其抑制凋亡效应，从而抑制HL-60细胞的增殖。     

几种昆虫抗菌肽对肿瘤细胞(K562)的作用研究

目的研究各种昆虫抗菌肽对肿瘤细胞的作用效果。方法对家蝇(Muscadomestica)幼虫、蛹及德国蜚蠊(Blattellagermanica)、美洲蜚蠊(Periplanetaamericana)若虫采用针刺感染大肠杆菌诱导产生抗菌肽,经研磨、层析提取其抗菌肽,并通过流式细胞仪测定各种抗菌肽对人髓样白血病细胞(K562)的作用。结果①抑菌圈显示所提取的各种抗菌肽均有一定的抑菌作用。所提抗菌肽浓度:家蝇幼虫6.51mg/ml,家蝇蛹4.08mg/ml,美洲大蠊6.93mg/ml,德国小蠊6.71mg/ml。②家蝇幼虫和蛹的抗菌肽对K562有一定的杀伤作用,而美洲蜚蠊和德国蜚蠊不仅不能杀伤K562,在某种程度上还有减少其死亡和促进其生长的作用。结论各种昆虫抗菌肽由于结构不同,因而功能也太不同。     

Study on Taxol in Inhibiting Human Leukemia Cell Proliferation andInducing Apoptosis

Objective: To explore the effects of Taxol in inhibiting human leukemia k562 cell proliferation and inducing apoptosis in vitro. Methods: Human leukemia K562 cells were treated with Taxol of different concentrations for 12-72 hrs. Cell proliferation was evaluated by MTT assay and morphological changes of apoptosis were examined by microscopy. Cell apoptosis was determined by flow cytometry (FCM) and DNA gel electrophoresis. Results: Growth of K562 cells was inhibited by Taxol with an IC50 value of 0. 84μg/ml. Typical nuclear condensation and apoptosis bodies were observed as early as 24 hrs after a 0.5μg/ml Taxol treatment; Apoptotic rate of the Taxol-treated K562 cells increased from 3.7% to 24.0% in 24 hrs. No DNA ladder was observed by DNA gel electrophoresis. Conclusion: Taxol could inhibit K562 cell growth and induce apoptosis in vitro.     

人参皂甙对K562红白血病细胞系的诱导分化作用

本文以K562人类红白血病细胞系为实验模型,研究了人参皂甙对该细胞系的诱导分化作用。结果表明人参皂甙不仅能诱导K562细胞生成血红蛋白,而且可使该细胞产生明显的形态学上的分化。1mg/ml浓度的人参皂甙对K562细胞还有明显的抑制作用。鉴于人参皂甙对于人类红白血病细胞兼有诱导分化和细胞毒作用,提示人参皂甙有可能应用于人类红白血病的治疗。     

蟾蜍毒素粗提物对白血病K562细胞的杀伤作用

目的:观察蟾蜍毒素提取物对白血病K562细胞杀伤作用及对细胞周期的影响。方法:用无水乙醇、二甲基亚砜(DMSO)、PBS缓冲液浸溶中华大蟾蜍的耳后腺及皮下腺分泌物,采用台盼蓝拒染法检测细胞增殖抑制作用,流式细胞仪检测对细胞周期的影响。结果:3种浸液均能抑制K562细胞的增殖,其抑制强度依次为乙醇浸液>DMSO浸液>PBS浸液。5 ng/ml的乙醇浸液、50 ng/ml的DMSO浸液、500 ng/ml的PBS浸液均能使K562细胞发生G2/M期阻滞。结论:蟾蜍毒素粗提物对白血病K562细胞增殖具有明显的抑制作用,并伴有G2/M期阻滞。     

录芝复方剂对K562白血病细胞增殖,分化的影响

用细胞培养、细胞形态学及联苯胺染色法观察中药灵芝复方对Ｋ５６２白血病细胞的增殖抑制及分化诱导作用。结果显示：灵芝复方在一定浓度范围内对正常人骨髓ＣＦＵ－ＭＧ生长有促进作用（Ｐ〈０．０５）,而对白血病细胞系Ｋ５６２细胞才殖表现出剂量和时间依赖性抑制（Ｐ〈０．０５）;在诱导分化剂量下,灵芝复方可促进Ｋ５６２细胞向红系分化。可见,灵芝复方有望成为一种抗白血病中药。