类风湿关节炎患者外周血单核细胞Toll样受体2的表达及意义

目的观察类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞Toll样受体2(TLR2)的表达变化与疾病活动程度和临床指标的关系,探讨RA的发病机制。方法27例活动期RA患者、20例非活动期RA患者及18名正常对照,采用流式细胞术检测外周血单核细胞表面TLR2的表达,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内TLR2 mRNA的表达。结果活动期RA患者外周血单核细胞TLR2的表达水平显著高于缓解期RA患者及正常对照,而缓解期RA患者TLR2与正常对照相比,差异无统计学意义。RA患者外周血单核细胞TLR2的表达与疾病活动评分(DAS)、血清C反应蛋白(CRP)及血沉(ESR)相关,而与类风湿因子(RF)及抗环瓜氨酸肽(抗CCP)抗体无明显相关性。结论活动期RA患者外周血单核细胞TLR2表达增高,且TLR2的表达与疾病活动指标密切相关。活动期RA患者存在着固有免疫系统的活化,TLR2的高表达可能促进了外周血单核细胞的活化。     

慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞TLR4水平与干扰素临床疗效的关系

目的观察慢性乙型肝炎(CHB)患者应用干扰素(IFN)治疗前后外周血单核细胞Toll样受体4(TLR4)表达及血清IL-6水平的变化。方法用流式细胞仪检测65例CHB患者(CHB组)、30例健康人(对照组)IFN治疗前后外周血单核细胞表面TLR4的表达,ELISA法检测血清白细胞介素-6(IL-6)水平。结果 CHB组外周血单核细胞TLR4表达水平及血清IL-6水平均较对照组明显升高(P<0.05或<0.01)。IFN治疗后,随着患者乙肝病毒载量下降,外周血单核细胞TLR4水平及血清IL-6水平均呈下降趋势。结论 TLR4可能与CHB发病有关,IFN抗病毒治疗可降低外周血单核细胞TLR4水平。     

类风湿关节炎患者外周血辅助性T细胞9及白细胞介素-9的变化及临床意义

目的 观察类风湿关节炎(RA)患者外周血中辅助性T细胞9(Th9)及血清中白细胞介素(IL)-9的变化,探讨其与RA临床表现的相关性及其可能的免疫学发病机制.方法 收集36例RA患者和22名健康对照者,RA患者根据病情活动度不同分为病情重度活动组22例、病情中度活动组14例.流式细胞仪检测患者和健康对照者外周血中Th9细胞的变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测RA患者及健康对照者血浆中IL-9等细胞因子的水平.采用t检验、Spearman相关分析进行统计学分析.结果 RA患者外周血中Th9比例显著高于健康对照组[分别为(0.99±0.50)％,(0.21±0.08)％,P＜0.01];RA患者重度活动组的Th9表达率显著高于中度活动组[分别为(1.18±0.52)％,(0.69±0.25)％,P＜0.01].RA患者外周血IL-9水平高于健康对照[分别为(1.06±0.42) pg/ml,(0.69±0.13) pg/ml,P＜0.01],重度活动组的RA患者IL-9水平[( 1.37±0.47) pg/ml]高于中度活动组[(0.94±0.30) pg/ml],差异有统计学意义(P＜0.05).RA患者外周血Th9的表达与疾病活动指数(DAS )28、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、关节压痛数、关节肿胀数及类风湿因子(RF)滴度、IL-9的水平呈正相关;RA患者IL-9的水平与DAS28、ESR、关节压痛数、关节肿胀数呈正相关.结论 RA患者外周血Th9细胞比例及血浆中IL-9水平显著升高,且与疾病活动度及相关炎症指标明显相关,提示Th9及IL-9参与RA的发病及病情发展.     

A型行为者外周血单核细胞Toll样受体4及白细胞介素水平与颈动脉粥样硬化的关系

目的探讨A型行为得分、外周血单核细胞先天固有免疫系统Toll样受体4(TLR4)和下游炎症因子变化与罹患动脉粥样硬化的关系。方法依据颈动脉超声检查结果将研究对象分为颈动脉粥样硬化组(n=275)和健康对照组(对照组,n=301)。采用明尼苏达多相人格调查表(MMPI)2 A型行为量表评定行为类型(≥11分为A型)。流式细胞术测定外周血CD14~+单核细胞表面TLR4表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清肾上腺素和去甲肾上腺素、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素18(IL-18)水平。结果颈动脉粥样硬化组A型行为检出率高于对照组(58.68%比24.64%,P0.01)。颈动脉粥样硬化组血清肾上腺素、去甲肾上腺素水平高于对照组[(17.53±9.98)比(6.83±5.16)μg/L,(863.62±240.58)比(441.17±194.05)ng/L;均P0.01]。颈动脉粥样硬化组患者单核细胞TLR4表达及IL-6和IL-18水平高于对照组[(14.07±3.54)%比(9.81±3.42)%,(301.87±18.43)比(274.44±13.79)ng/L,(450.39±28.66)比(364.28±34.78)ng/L;均P0.05]。无论是颈动脉粥样硬化组还是对照组,A型行为者单核细胞TLR4、血清IL-6和IL-18、肾上腺素和去甲肾上腺素水平均高于非A型行为者。多因素Logistic回归分析发现:男性、年龄、高血压、心血管病家族史、A型行为、敌意得分、TLR4表达、血清IL-6和IL-18水平是罹患颈动脉粥样硬化的独立影响因素。结论颈动脉粥样硬化患者交感神经活化程度高于健康人;A型行为者交感神经活化程度、单核细胞TLR4蛋白表达及血清炎症水平高于非A型行为者;A型行为、单核细胞TLR4蛋白表达及血清炎症水平与罹患颈动脉粥样硬化存在相关性。     

活动性类风湿关节炎调节性T细胞程序性细胞死亡蛋白-1/程序性死亡配体1表达及与临床指标的相关性

目的探讨程序性细胞死亡蛋白-1/程序性死亡配体1(PD-1/PD-L1)在活动性类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血调节性T细胞表面表达变化及临床意义。方法用流式细胞术分别检测62例活动期RA患者外周血CD4~+CD25~+T细胞和CD4~+CD25~-T细胞群PD-1和PD-L1的阳性率,并设立39例健康体检者作为健康对照组,分析PD-1/PD-L1与实验室各指标和病情活动性的相关性。结果 PD-1在24例高度活动组和38例中低度活动组RA患者CD4~+CD25~+T细胞的表达水平分别为[(2.27±0.56)%和(1.83±1.08)%],高于健康对照组(1.42±0.49)%,差异有统计学意义(P0.01)。PD-L1在高度活动组和中低度活动组RA患者CD4~+CD25~+T细胞的表达水平分别为[(2.06±0.62)%和(1.83±0.63)%],亦高于健康对照组(0.80±0.43)%,与对照组相比差异有统计学意义(P0.001)。PD-1在CD4~+CD25~+T细胞表达水平与DAS28呈正相关(r=0.477,P0.01),PD-L1在CD4~+CD25~-T细胞表达水平与DAS28无相关性(r=0.078,P=0.549)。结论 PD-1/PD-L1在活动性RA患者调节性T细胞表达存在差异,其与DAS28相关性提示PD-1/PD-L1信号通路可经调节性T细胞调控参与RA的发生。     

英夫利西单抗对类风湿关节炎患者外周血单核细胞CD147表达的影响

目的 探讨抗肿瘤坏死因子-α人鼠嵌合单克隆抗体英夫利西单抗(infliximab)治疗前后类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞CD147表达的变化.方法 30例经甲氨蝶呤(MTX)治疗至少3个月病情仍处于活动期的RA患者按3:1:1比例由计算机程序产生随机分配方案分为A、B、C 3组,A组接受为期14周的英夫利西单抗(3 mg/kg)治疗;B组接受为期6周的英夫利两单抗(3 mg/kg)治疗;C组接受为期14周的安慰剂治疗.治疗期间继续口服原剂量的MTX.流式细胞术检测RA患者外周血CD14+单核细胞CD147平均荧光强度水平(MFI)变化,并观察其与临床相关指标的关系.数据采用SPSS 13.0软件进行单因素方差分析、Spearman相关分析和Kruskal-Wallis秩和检验.结果 ①治疗前RA患者外周血CD14+单核细胞CD147 MFI为(101±25),健康志愿者为(78±18),差异有统计学意义(P=0.019).RA患者外周血CD147 MFI与病情活动指标DAS28(r=0.471,P=0.000)、红细胞沉降率(ESR)(r=0.371,P=0.000)、C反应蛋IQ(CRP)(r=0.249.P=0.010)、晨僵持续时间(r=279,P=0.010)呈正相关.②3组患者治疗后外周血CD14+单核细胞CD147 MFI均有下降,第18周与基线相比,A组平均改变差值(-26.9±21.7)、B组平均改变差值(-35.4±15.5)与C组平均改变差值(-10.0±6.0)相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 活动期RA患者外周血CD14+单核细胞CD147表达增高;与单用MTX相比,英夫利西单抗联合MTX治疗CD147 MFI表达下降更明显.     

糖尿病神经病变患者单核细胞TOLL样受体4的表达及其与血浆肿瘤坏死因子α、白介素6的相关性研究

目的研究T2DM伴糖尿病神经病变患者外周血单核细胞TOLL样受体4(TLR4)的表达及其与促炎因子TNF-α、IL-6的相关性。方法将研究对象分为正常组(NC,n=44),T2DM组(n=44),T2DM神经病变组(n=44)。分离和提取外周血单核细胞,流式细胞术和RT-PCR检测单核细胞表面TLR4蛋白和mRNA;ELISA检测血浆TNF-α和IL-6。结果 T2DM神经病变组HbA_1 c[(9.09±-1.62)%vs(8.36土1.10)%vs(5.30±0.89)%]、单核细胞TLR4蛋白[(42.02±9.69)%vs(31.27±6.87)%vs(11.96±5.54)%]和TLR4 mRNA[(2.98±1.06)vs(1.74±0.47)vs(1.12±0.52)]、血浆TNF-α[(8.75±3.14)vs(6.27土3.64)vs(3.19±1.17)Pg/m1]、IL-6[(3.63±1.81)vs(2.60±1.14)vs(1.54±0.58)pg/ml]水平均高于T2DM和NC组(P0.01);T2DM神经病变组TLR4蛋白与TNF-α、IL-6呈正相关(r=0.631,P0.0001;r=0.447,P=0.0023)。结论糖尿病神经病变患者单核细胞TLR4参与机体炎症反应,与糖尿病神经病变的发生发展密切相关。     

类风湿关节炎患者血清白细胞介素-4水平与间质性肺疾病的关系

目的明确类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清中白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)的水平及其与RA继发间质性肺疾病(interstitial lung disease,ILD)的关系,探讨RA及RA继发ILD的发病机制及相关因素。方法选择RA患者62例,其中单纯RA患者31例,RA伴发ILD患者31例;健康对照者30例。应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组血清中IL-4水平,同时比较各组实验室指标免疫球蛋白(Ig)G、IgA、IgM、γ-球蛋白、类风湿因子(RF)、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)及关节肿痛数的差异,并进行相关性分析。结果 RA组血清IL-4水平为(61.87±41.36)pg/ml,健康对照组血清IL-4水平为(25.48±14.28)pg/ml,两组相比较差异有统计学意义(P<0.05);RA继发ILD组血清IL-4水平(92.70±32.01)pg/ml较单纯RA组(30.05±24.45)pg/ml明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。总RA组血清IL-4水平较健康对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);RA继发ILD组血清IL-4水平较单纯RA组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-4可能参与RA的发病,且在RA并发ILD的发生发展中起一定作用。     

陷阱因子3在类风湿关节炎患者血清及外周血单核细胞中的表达研究

目的 研究类风湿关节炎(RA)患者血清及外周血单核细胞中DcR3的表达情况.方法 选取已确诊的60例类风湿因子(RF)(+)的RA患者并按照DAS28评分将其分为RAa组和RAb组,以30名体检健康者作为对照,酶联免疫吸附试验( ELISA)法检测各组血清可溶性陷阱因子3(DcR3)的表达情况.同时荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)检测各组外周血单核细胞中DcR3的表达情况.采用t检验和X2检验进行统计学分析.结果 DcR3血清表达水平在DAS28＞2.6的RAb组为(264+72) ng/ml较健康对照组为(48±39) ng/ml明显升高(r=0.251,P＜0.05).而在DAS28＜2.6的RAa组则没有差异.DcR3基因的扩增倍数在RAb组为23.5±5.4,健康对照组为8.3±3.6,差异具有统计学意义(r=0.336,P＜0.05).结论 DcR3在RA患者血清及外周血单核细胞中表达增高,而其血清表达水平在风湿活动较高的患者则更加明显.     

血脉通颗粒对动脉粥样硬化小鼠外周血单核细胞TLR4、IL-6、TNF-α的影响

目的 观察血脉通颗粒对动脉粥样硬化（AS）小鼠外周血单核细胞Toll样受体4（TLR4）表达及血浆白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平的影响.方法 选择apo E基因敲除（apo E-/-）小鼠,采用高脂饮食法建立AS模型;造模成功后随机分为血脉通组和对照组,每组11只.血脉通组给予血脉通颗粒3.808 mg/（g·d）灌胃,对照组给予相同剂量生理盐水灌胃.6周后处死,眼眶静脉丛采血.采用RT-PCR法检测小鼠外周血单核细胞TLR4 mRNA,流式细胞术测算单核细胞表面TLR4平均荧光强度,ELISA法检测小鼠血浆IL-6和TNF-α.结果 血脉通组外周血单核细胞中TLR4 mRNA的相对表达量为0.22 ±0.07,TLR4荧光强度为25.45±8.30,血浆IL-6、TNF-α水平分别为（10.86 ±4.41）、（36.94±9.46） pg/mL;对照组分别为34.04 ±7.31、0.31±0.09及（18.24±8.21）、（52.82±13.78） pg/mL;两组比较,P均＜0.05.小鼠血浆IL-6、TNF-α水平与单核细胞表面TLR4的表达均呈正相关（r =4.86、0.509,P均＜0.05）.结论 血脉通颗粒可降低AS小鼠单核细胞TLR4表达和血浆IL-6、TNF-α水平,这可能是其抑制血管炎症、治疗AS的机制之一.     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP