甲氧虫酰肼对棉铃虫解毒酶活力的亚致死效应研究

采用亚致死剂量(LC40浓度)的甲氧虫酰肼处理棉铃虫抗甲氧虫酰肼种群(R)和同源敏感种群(S)3龄初幼虫48 h,测定了3～6龄期幼虫体内多功能氧化酶(MFO)、酯酶(EST)和谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)的比活力变化。结果发现:经亚致死剂量甲氧虫酰肼处理后,S种群EST比活力除4龄幼虫外均有所升高,且仅在3龄期升高明显;GSTs比活力在5龄幼虫体内显著升高,其他龄期无明显变化;MFO比活力在6龄幼虫体内表现为降低,其他龄期无显著变化。对于R种群,3龄和6龄幼虫体内EST比活力显著降低,各龄期的GSTs和MFO比活力均显著降低。空白对照R种群3～6龄期幼虫的GSTs比活力均高于S种群;EST比活力仅3龄幼虫显著高于S种群;MFO的比活力仅5龄幼虫显著高于S种群。研究表明:棉铃虫对甲氧虫酰肼的抗性与GSTs比活力增大关系较为密切;LC40浓度的甲氧虫酰肼可诱导敏感种群EST和GSTs活力升高,而使抗性种群3种酶的活力受到抑制。     

小菜蛾不同亚细胞层羧酸酯酶的性质研究

本文对采自不同地区的小菜蛾种群幼虫不同亚细胞层羧酸酯酶 (Car E)的活性分布及性质进行了研究。结果表明 ,敏感品系和抗性种群 Car E活性亚细胞分布没有明显差异。不同种群各亚细胞层 Car E活性以线粒体层分布最高 ,占 34%～ 52 % ;微粒体层最低 ,占 7%～ 16 %。抗性种群线粒体层 Car E活性明显高于敏感品系。各种群以上清液层 Car E与 α- NA的亲和力最高 ,且各种群间没有明显差异。云南、北京、武汉、宣化种群(F0 )线粒体层 Car E与 α- NA的亲和力最低。测定的六个种群线粒体层 Car E与 α- NA的亲和力大小依次为 :AVMs抗性品系 (F16) >云南种群 >武汉种群 >台湾敏感品系 >宣化种群 (F0 ) >北京种群     

草地螟发育阶段对伞裙追寄蝇的寄生效果

伞裙追寄蝇是草地螟、黏虫等重大农业害虫的优势寄生性天敌，对害虫种群数量的调控起着不可忽视的作用。本文研究了不同龄期草地螟对伞裙追寄蝇寄生效果的影响，为伞裙追寄蝇的室内扩繁和田间应用提供依据。在温度（25±1）℃，相对湿度（65±5）%，光周期14L：10D实验室条件下研究了伞裙追寄蝇对草地螟2、3、4、5龄幼虫及5龄期不同日龄幼虫的寄生效果，5龄期不同日龄幼虫对寄蝇的发育适合度。结果表明：伞裙追寄蝇对2～5龄草地螟幼虫都有寄生行为，但对5龄草地螟幼虫的寄生率（68.89%）显著高于其他龄期；且寄生5龄幼虫的羽化率最高（73.88%）。伞裙追寄蝇寄生能力随寄主日龄呈现先升高而后下降趋势，其中5龄后2～3日龄寄生率（74.44%）、羽化率（78.76%）均最高，子代发育历期最短，产卵量最高，为最适寄生阶段，说明室内扩繁伞裙追寄蝇寄主选择以5龄期2～3日龄草地螟幼虫为宜。     

氯虫苯甲酰胺亚致死剂量对棉铃虫生长发育和解毒酶活性的影响

在室内采用培养基混药法测定氯虫苯甲酰胺亚致死剂量(LC10、LC25和LC50)对棉铃虫生长发育和体内3种解毒酶系的影响。结果表明:各剂量处理3龄幼虫48h后饲养,各处理组当代(F0)3～6龄幼虫历期均比对照组延长0.2～3.8d,但成虫平均历期比对照组缩短0.8～2.5d,子代(F1)1～6龄幼虫历期均比对照组延长0.2～2.6d,成虫平均历期比对照组缩短0.1～0.5d;各剂量处理后,各处理组F0代3～6龄幼虫和蛹的体重、F1代4～6龄幼虫和蛹的体重均比对照组减轻,且剂量越大,体重减轻越显著;各处理组F0代种群趋势指数分别比对照组下降了16.27%、58.51%和71.17%,F1代分别下降了13.66%、52.61%和66.63%;各处理组F0代3～6龄幼虫体内的羧酸酯酶(CarE)和细胞色素P450O-脱乙基酶(P450-ECOD)比活力均高于对照组,其中6龄幼虫这两种酶比活力分别比对照组提高了5%～16%和23%～66%,但各处理组谷胱甘肽硫转移酶(GSTs)比活力均低于对照组,其中6龄幼虫GSTs比活力分别比对照组降低了16.23%、58.51%和71.17%。表明在LC10～LC50剂量范围内,氯虫苯甲酰胺处理棉铃虫3龄幼虫的亚致死剂量越高,其生长发育受抑制越显著,P450-ECOD和CarE比活力上升越高,GSTs比活力下降也越大。     

甜菜夜蛾GSTs1基因mRNA表达特征及氯虫苯甲酰胺对其表达量的影响

采用实时荧光定量RT-PCR测定了甜菜夜蛾幼虫不同龄期、3龄幼虫不同组织和不同部位GSTs1基因mRNA的相对表达量以及低剂量氯虫苯甲酰胺对甜菜夜蛾3龄幼虫GSTs1基因mRNA相对表达量的影响.结果表明:不同龄期甜菜夜蛾幼虫GSTs1基因相对表达量有差异,其在3龄期的相对表达量最高且是5龄期的7.4倍,1龄时期的相对表达量次之;3龄幼虫的GSTs1基因在脂肪体的mRNA相对表达量高于体壁、中肠及马氏管,胸部的相对表达量高于头部和腹部;使用0.05 mg/L氯虫苯甲酰胺处理甜菜夜蛾3龄幼虫,GSTs1基因相对表达量是未处理组的2.31倍.研究结果为进一步研究氯虫苯甲酰胺在甜菜夜蛾体内的代谢与GSTs1基因的关系提供参考.     

黑河地区大豆胞囊线虫生防放线菌的初步筛选

于2014年和2015年将黑河大豆主产区采集的大豆根系土样采用稀释分离法分离获得放线菌186株,通过测定其发酵液对大豆胞囊线虫胞囊孵化及2龄幼虫活性的抑制作用,筛选获得6株对大豆胞囊线虫有强烈抑制作用的生防菌株。结果表明,其中XFS-4对大豆胞囊线虫胞囊孵化的相对抑制率最高达到92.59%,XFS-5和CL-4相对抑制率分别为88.45%和86.71%,与对照差异显著;XFS-4处理的2龄幼虫校正死亡率达到93.95%,活性最高,XFS-5、CL-4和BJ-4对2龄幼虫校正死亡率均在70%左右,均与对照差异显著。     

四种非寄主植物精油对小菜蛾的生物活性

为寻找小菜蛾Plutella xylostella绿色防控方法，于室内测定辣蓼、迷迭香、芸香和紫苏4种非寄主植物精油对小菜蛾的生物活性。结果表明，辣蓼植物精油对小菜蛾2龄幼虫的毒杀作用最强，24、48和72 h时的致死中浓度LC50分别为2.18、1.78和1.46μg/μL，芸香植物精油次之；当芸香植物精油浓度为15μg/μL时，小菜蛾3龄幼虫的选择拒食率最高，作用24 h和48 h时分别为100.00%和92.84%，而在10μg/μL浓度下作用24 h和48 h时非选择拒食率达到最高值，分别为65.72%和42.72%；在4种植物精油中，芸香植物精油对小菜蛾3龄幼虫的生长抑制作用最明显，相对生长率最低，为-34.72%，生长抑制率最高，为133.74%，辣蓼植物精油的生长抑制效果次之，迷迭香和紫苏植物精油的抑制作用相对较差；小菜蛾雌、雄成虫对4种植物精油均表现出一定的触角电位反应和驱避活性，其中，芸香植物精油的驱避效果最明显；气相色谱-质谱分析结果显示，芸香植物精油的主要成分为β-石竹烯、（+）-α-蒎烯和β-蒎烯。表明芸香植物精油对小菜蛾具有显著的生物活性，具备开发为小菜蛾靶标...     

1-脱氧野尻霉素对美国白蛾生长发育和解毒酶活性的影响

为揭示美国白蛾Hyphantria cunea对含1-脱氧野尻霉素（1-deoxynojirimycin,DNJ）寄主植物的适应机制,用含不同浓度DNJ的人工饲料饲喂美国白蛾幼虫,测定饲喂后美国白蛾幼虫的死亡率、生长发育指标、营养效应指标和体内解毒酶活性。结果表明,浓度0.125%~2.000% DNJ处理6 d后,美国白蛾5龄幼虫死亡率显著高于对照,最高达52.50%。DNJ对美国白蛾的亚致死浓度LC₂₅和半致死浓度LC₅₀分别为0.41%和1.80%。0.5% DNJ处理后美国白蛾幼虫总发育历期延长20.75%,幼虫总存活率、化蛹率、雄雌比和单雌产卵量均显著低于对照。浓度0.125%~2.000% DNJ处理后美国白蛾幼虫相对取食量较对照显著升高,而食物转化率、食物利用率和相对生长率却低于对照,且随着DNJ浓度升高均逐渐降低。DNJ能诱导美国白蛾5龄幼虫中肠内细胞色素P450酶、谷胱甘肽S-转移酶、ATP结合盒转运蛋白3种解毒酶的活性,但每种酶的诱导模式不同。表明美国白蛾幼虫可能通过调节食物利用策略和激活解毒代谢等途径对一定浓度的DNJ产生生理适应。     

转双价基因抗虫棉对斜纹夜蛾实验种群的影响

室内应用中棉所45、中棉所41两种转双价基因棉品种与对照品种中棉所23的顶端展开的第4张叶片，分别饲喂斜纹夜蛾Spodoptera litura幼虫，考察对幼虫、蛹、成虫的影响，编制并分析实验种群生命表，明确上述两种转双价基因棉对斜纹夜蛾的抗性作用。研究结果表明，两种转双价基因棉除中棉所41饲喂斜纹夜蛾2龄幼虫死亡率极显著高于中棉所23外，其他龄期幼虫死亡率、化蛹率及幼虫成蛾率均无显著差异；除中棉所41饲喂的斜纹夜蛾初孵幼虫历期显著长于中棉所23、5龄幼虫显著短于中棉所23，两种转双价基因棉饲喂的4龄幼虫历期显著短于中棉所23、蛹重显著轻于中棉所23外，其他龄期幼虫、蛹期、成虫产卵前期、产卵期、平均产卵量和雌成虫寿命均无显著差异。中棉所45、中棉所41和中棉所23饲喂斜纹夜蛾的净增长率（R。）分别为l86．872l、236．7585、264．2246；世代平均周期（T）分别为45．6706、43．2262、46．8908；内禀增长率（rm）分别为0．1145、0．1265、0．1189；周限增长率（λ）分别为1．1213、1．1348、1．1263；种群加倍时间（DT）分别为6．0537、5．4794、5．8297；种群趋势指数（Ⅰ）分别为237．70、315．24、319．28。综合分析中棉所45、中棉所41对斜纹夜蛾抗性不明显。     

溴氰菊酯对麦穗鱼谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)的影响

研究了溴氰菊酯不同浓度、不同处理时间对麦穗鱼体内谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)活性的影响,同时测定了麦穗鱼不同组织中谷胱甘肽S-转移酶对低浓度溴氰菊酯处理的反应特点。结果表明,处理48 h后,高浓度(0.009 mg/L)组对肝中GSTs活性的抑制率达到43.7％,对鳃中GSTs活性的抑制率达54.3％;而低浓度组(0.001 mg/L)对鳃中GSTs活性有一定的诱导作用。亚致死剂量的溴氰菊酯(3.0×10-4mg/L)处理96 h后,对卵巢的诱导活性最高,其GSTs活性是对照的2.43倍,但对肝、鳃、肾、肠的诱导作用均较低。溴氰菊酯对麦穗鱼不同组织GSTs活性诱导的时间效应和强度不同。     

Host plant induction of glutathione S-transferase in the fall armyworm

The influence of various host plants on glutathione S-transferase activity was studied in the fall armyworm, Spodoptera frugiperda (J. E. Smith). Fall armyworm larvae were maintained on a semidefined artificial diet until the end of the fifth instar. The newly molted sixth instar larvae were then fed fresh leaves of various host plants for 2 days prior to glutathione S-transferase assays using 3,4-dichloronitrobenzene as substrate. The order of the midgut glutathione S-transferase activity of larvae after the worms fed on these plants was: mustard > turnip > cowpeas > peanuts > cotton > corn > cucumber > potato > Bermudagrass > millet > sorghum > soybeans. The difference in the transferase activity between soybean- and mustard-fed larvae was 10-fold. Kinetic study revealed a quantitative, but no qualitative difference in the glutathione S-transferase between soybean- and cowpea-fed larvae. Monoterpenes, such as α-pinene, β-pinene, menthol, and peppermint oil, had no effect on the enzyme. Cowpea-fed larvae were more tolerant of the insecticides diazinon, methamidophos, and methyl parathion than soybean-fed larvae were. These new observations help explain what has been happening in the field and might be of use in the development of pest management programs.     

多杀霉素亚致死浓度对棉铃虫幼虫生理及代谢的影响

为明确田间使用多杀霉素亚致死浓度对棉铃虫Helicoverpa armigera幼虫的影响,用含多杀霉素亚致死浓度LC₂₅的人工饲料持续饲喂棉铃虫3龄幼虫,并对饲喂后其体重、取食量、累计蛹化率、蛹发育历期和蛹重等生长发育及脂肪体内甘油三脂（triglyceride,TG）含量和相关基因SREBP、FAS和HSL表达情况进行测定。结果表明,多杀霉素对棉铃虫的亚致死浓度LC₂₅为0.21 mg/kg;多杀霉素亚致死浓度处理4~6 d后,棉铃虫3龄幼虫体重分别为0.065、0.263和0.329 g,较对照显著降低;处理6 d后,其取食量为0.082 g,较对照显著降低;处理4~7 d后,其累计化蛹率分别为60.90%、63.20%、65.50%和65.50%,较对照显著降低。多杀霉素亚致死浓度处理后,棉铃虫蛹发育历期由对照9.89 d显著延长至10.74 d,单头蛹重为0.274 g,显著低于对照的0.324 g;其脂肪体TG含量较对照显著降低。多杀霉素亚致死浓度处理24~72 h后,参与脂肪酸合成信号通路中重要基因SREBP和FAS的相对表达量较对照均显著下调,而参与脂肪代谢的重要基因HSL则较对照显著上调。     

丁布胁迫对亚洲玉米螟氧化还原系统的影响

为探明丁布胁迫对亚洲玉米螟氧化还原系统的影响,采用酶活力测定方法和实时荧光定量PCR技术,研究了取食丁布含量差异显著的3个玉米品种登海662、浚单20和隆玉602叶片及模拟其叶片丁布含量的人工饲料后,玉米螟3龄幼虫氧化还原系统主要酶活性和谷氧还蛋白(Grx)mRNA转录表达的变化。结果显示:取食3个玉米品种叶片24 h后,亚洲玉米螟幼虫过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性均显著高于对照,且在3个品种处理间差异显著,由大到小依次为登海662(118.30 U/mg和182.19 U/mg)、浚单20(107.13 U/mg和90.02 U/mg)和隆玉602(77.54 U/mg和93.59 U/mg)。取食浚单20可显著促进幼虫脂肪体Grx的表达,取食登海662可显著促进其中肠Grx的表达;取食模拟登海662叶片丁布含量的人工饲料12 h后,幼虫脂肪体中Grx表达量高于对应玉米叶片饲喂处理,而中肠部位则低于对应玉米叶片饲喂处理;取食模拟浚单20的结果与模拟登海662相反。表明亚洲玉米螟氧化还原系统在防御丁布胁迫过程中发挥着重要作用。     

注射大肠杆菌后草地贪夜蛾高龄幼虫的免疫应激反应

为采用生物技术防控草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda的扩散为害,对草地贪夜蛾5龄和6龄幼虫注射浓度为1×109CFU/mL的大肠杆菌Escherichia coli菌液,并以注射等量磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)和未做任何处理(CK)为对照,24 h后测定幼虫体重、集结数和酚氧化酶(phenoloxidase,PO)活性。结果显示,注射大肠杆菌菌液24 h后,草地贪夜蛾5龄和6龄幼虫体重均受到抑制,其体重分别为0.170 g和0.411 g,均显著低于CK的0.181 g和0.484 g;注射大肠杆菌菌液24 h后,草地贪夜蛾5龄和6龄幼虫集结数分别为135.0、338.4个索引集结数(the indexed nodules,INs),前者极显著低于后者,且均显著高于CK和PBS处理,分别为0.4、10.2个INs和0.3、10.9个INs;注射大肠杆菌菌液24 h后,草地贪夜蛾5龄幼虫PO活性为0.156 ABS·min-1·mg-1,显著高于CK和PBS处理,分别为0.046 ABS·min-1·mg-1和0.066 ABS·min-1·mg-1,但草地贪夜蛾6龄幼虫的PO活性为0.050 ABS·min-1·mg-1,显著低于CK和PBS处理,分别为0.066 ABS·min-1·mg-1和0.069 ABS·min-1·mg-1,且草地贪夜蛾5龄幼虫的PO活性显著高于6龄幼虫的PO活性。表明细菌侵染后草地贪夜蛾不同高龄幼虫的免疫应激反应存在差异,而这种差异可能受幼虫生长发育及细胞免疫和体液免疫功能之间权衡现象的影响。     

几种生态因子对银纹夜蛾实验种群的影响

本文以主要质量指标对比了用人工半合成饲料与天然饲料饲养银纹夜蛾的结果，表明人工半合成饲料明显优于天然饲料。研究了幼虫饲养密度对存活的影响，四龄末幼虫存活率与一龄幼虫密度呈抛物线关系，化蛹率、蛹重与五幼虫密度呈直线下降关系，相对湿度、夜间光照强度、食物等对成虫生殖有显著影响。     

植物次生物质对棉铃虫谷胱甘肽S-转移酶和乙酰胆碱酯酶的影响

分别用含０．０１％的芸香甙,槲皮素２－十三烷酮的人工饲料连续饲养棉铃虫Ｈｅｌｉ－ｃｏｖｅｒｐａａｒｍｉｇｅｒａＨｕｂｎｅｒ１～７代,测定不同处理的棉铃虫种各谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）和乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）的活性变化以及幼虫对杀虫剂的反应,以单独人工饲料养的各种作对照,芸香甙Ｆ１代对甲基硫磷的耐药性提高３倍,槲皮素Ｆ１,Ｆ２代和２－十三烷酮Ｆ１代对甲基对硫磷的耐药性有所提高,对灭多威和溴氰菊酯     

烟碱和芸香苷对斜纹夜蛾药剂敏感性及相关酶活性的影响

以在人工饲料中添加植物次生物质的方法,研究了取食不同含量烟碱、芸香苷的斜纹夜蛾Spodoptera litura 3龄幼虫对银纹夜蛾核多角体病毒(AucaNPV)、氟虫腈及多杀菌素的敏感性,同时测定了各处理组幼虫体内羧酸酯酶和谷胱甘肽转移酶的活性。结果表明:烟碱能明显提高斜纹夜蛾对3种药剂的敏感性,且与剂量成正相关;低浓度的芸香苷可增加试虫对药剂的敏感性,但随其剂量的升高敏感性降低。两种次生物质均能不同程度地抑制斜纹夜蛾羧酸酯酶的活性,但可诱导谷胱甘肽转移酶的活性。     

Induction of microsomal oxidases by host plants in the fall armyworm,Spodoptera frugiperda (J. E. Smith)

Larvae of the fall armyworm (Spodoptera frugiperda (J. E. Smith)) were maintained on a semidefined artificial diet until the end of the fifth instar and the newly molted sixth-instar larvae were then fed fresh leaves of various host plants for 2 days prior to microsomal oxidase assays. The order of the midgut aldrin epoxidase activity of larvae after feeding on these plants was: corn > Bermuda grass > cotton > cowpeas > cabbage > peanuts > sorghum > alfalfa > millet > soybean. The ratios of aldrin epoxidase, p-nitroanisole O-demethylase, and p-chloro-N-methylaniline N-demethylase activities for soybean- and corn-fed larvae were 4.5, 6.3, and 2.7-fold, respectively. The induction was affected by the age and developmental stage of the corn plant with mature leaves from old plants being more active. Higher epoxidase activities were also observed in mature larvae reared on corn plants since egg stage as compared with those on soybean plants. Monoterpenes such as α-pinene, β-pinene, limonene, menthol, and peppermint oil were found to induce the midgut epoxidase activity. Corn-fed larvae were more tolerant of the insecticides methomyl, acephate, methamidophos, diazinon, trichlorfon, monocrotophos, permethrin, and cypermethrin than soybean-fed larvae.     

棉铃虫V-ATP酶亚基A基因克隆及表达谱分析

为探索棉铃虫Helicoverpa armigera液泡型ATP酶(vacuolar-type proton ATPase,V-ATP酶)亚基A对棉铃虫生长发育的影响及其在Bt杀虫机制中的作用,采用PCR结合RACE技术克隆了棉铃虫V-ATP酶亚基A基因序列,通过实时荧光定量PCR技术测定了其在棉铃虫不同发育历期和幼虫肠道不同组织中的表达量;并比较了4龄幼虫取食含Cry1Ac蛋白饲料后中肠中该基因表达量的变化。结果显示,棉铃虫V-ATP酶亚基A基因全长2 578 bp(Gen Bank登录号KP090287),开放阅读框1 863 bp,编码621个氨基酸。V-ATP酶亚基A高度保守,不同物种间氨基酸序列同源性大于90%。V-ATP酶亚基A在棉铃虫整个生育期都有表达,在4龄幼虫体内表达量最高,是卵期的3.00倍;在幼虫肠道不同组织中,中肠中表达量最高,是后肠中的2.65倍。4龄棉铃虫幼虫取食含Cry1Ac蛋白的人工饲料后,中肠V-ATP酶亚基A的表达受到抑制,表达量为对照的0.39~0.81倍。表明V-ATP酶亚基A基因可能参与棉铃虫的生长发育和代谢过程,并可能与抵御Cry1Ac的毒杀作用有一定关系。     

Activity of abamectin against larval stages of Spodoptera littoralis boisduval and Heliothis armigera hübner (Lepidoptera: Noctuidae) and possible mechanisms determining differential toxicity

Marked changes in the relative toxicity of topically-applied abamectin were found between larval instars of Spodoptera littoralis, toxicity decreasing up to the fifth instar but increasing over 500-fold (at LD₅₀ level) in the sixth instar. By contrast, the toxicity of abamectin remained constant from fifth to sixth instar Heliothis armigera and there was an increase in the toxicity of two chemically unrelated insecticides, malathion (4-fold) and lambda-cyhalothrin (2.5-fold), from fifth to sixth instar S. littoralis. Prior topical application or injection of the microsomal oxidase inhibitor, piperonyl butoxide (PB) increased the toxicity of abamectin (6–8 and 16-fold respectively) against fifth instar S. littoralis, while topically-applied PB increased the proportion of radioactivity present as abamectin in the ventral nerve cord of this instar following topical application with [³H]abamectin. Topically-applied PB also enhanced the toxicity of abamectin against third (4-fold) and fourth instar (5-fold) S. littoralis but had no significant effect on sixth instar S. littoralis, fifth instar H. armigera, or on the toxicity of malathion and lambda-cyhalothrin against fifth instar S. littoralis. Topical application of the esterase inhibitor, S,S,S-tributyl phosphorothioate (DEF) significantly increased the toxicity of abamectin at the LD₅₀ level (3-fold) against fifth instar S. littoralis. The toxicity of injected abamectin against fifth instar S. littoralis was greater (20-fold) than with topical application but injected abamectin was less toxic (2-fold) against sixth instar S. littoralis and had no significant effect on fifth instar H. armigera. It is suggested that differential toxicity of abamectin is due in part to greater metabolism and reduced penetration in fifth instar S. littoralis than in sixth instar S. littoralis or fifth instar H. armigera.