99mTc-EGFR-McAb用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像研究

目的:评价99mTc标记的表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)单克隆抗体(Monoclone antibody,McAb)用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像(Radioimmunoimaging,RII)效果,并进行相关比较分析.方法:①建立荷人肺腺癌裸鼠动物模型;②采用99mTc直接标记法标记抗EGFR的单克隆抗体,并对标记抗体的特性进行鉴定;③利用99Tc-EGFR-McAb进行荷人肺腺癌裸鼠模型的RII及体内分布研究.结果:99mTc对EGFR-McAb的标记率为91.5%±3.8%,标记抗体比活度为(2.8±0.2)MBq/μg,放射化学纯度为96.5%±3.2%.放射免疫显像结果显示,99mTc-EGFR-McAb对肿瘤组织有较高的亲和性,通过感兴趣区(Regional interest,ROI)技术测得T/NT比值为2.74±0.5,明显高于对照组(P＜0.05).标记抗体的体内分布结果与显像结果基本一致.结论:99mTc-EGFR-McAb用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像能得到较理想的靶/非靶比值,EGFR是肺腺癌放射免疫显像研究值得推荐的目标抗原.     

131Ⅰ标记抗PeroxiredoxinⅠ肺腺癌噬菌体抗体在荷瘤裸鼠体内的分布及其对肿瘤生长的抑制作用

目的 研究抗Peroxiredoxin Ⅰ(Prx Ⅰ)肺腺癌相关单链抗体体外对肺腺癌细胞的增殖抑制;观察131I标记抗体在肺腺癌裸鼠模型体内分布、靶向显像及体内抑瘤作用.方法 放射性核素计数法测定单链抗体细胞内摄水平;MTT法及流式细胞仪检测单链抗体抑制肺腺癌A549细胞生长情况;免疫印迹法检测单链抗体作用于A549细胞后对细胞内Prx Ⅰ表达水平的影响.放射性核素131Ⅰ标记纯化抗体,进行荷瘤裸鼠体内分布、SPECT放免显像及病理切片观察抑瘤作用.结果 单链抗体干预后细胞Prx Ⅰ蛋白表达水平较对照组下降(P＜0.05).体内分布研究表明单链抗体与肺腺癌组织有效结合.荷瘤裸鼠尾静脉注射131Ⅰ标记抗体48 h后,瘤/血和瘤/肌肉放射性比值均达到最大值4.06±0.13和5.17±0.97.SPECT示抗体注射后48 h T/NT值明显高于12 h、24 h和72 h(F均＞86,P均＜0.01).治疗4周后,131Ⅰ标记抗体治疗组肿瘤体积为(0.68±0.17)cm3,质量为(1.58±0.21)g,抑瘤率56.8%,与对照组比较有统计学差异.结论 抗Prx Ⅰ肺腺癌单链抗体能有效抑制肺腺癌细胞生长,131I标记单链抗体在体内能抑制肿瘤生长.     

~(131)I标记抗Peroxiredoxin I肺腺癌噬菌体抗体在荷瘤裸鼠体内的分布及其对肿瘤生长的抑制作用

目的研究抗Peroxiredoxin I(PrxI)肺腺癌相关单链抗体体外对肺腺癌细胞的增殖抑制;观察131I标记抗体在肺腺癌裸鼠模型体内分布、靶向显像及体内抑瘤作用。方法放射性核素计数法测定单链抗体细胞内摄水平;MTT法及流式细胞仪检测单链抗体抑制肺腺癌A549细胞生长情况;免疫印迹法检测单链抗体作用于A549细胞后对细胞内PrxI表达水平的影响。放射性核素131I标记纯化抗体,进行荷瘤裸鼠体内分布、SPECT放免显像及病理切片观察抑瘤作用。结果单链抗体干预后细胞PrxI蛋白表达水平较对照组下降(P<0.05)。体内分布研究表明单链抗体与肺腺癌组织有效结合。荷瘤裸鼠尾静脉注射131I标记抗体48h后,瘤/血和瘤/肌肉放射性比值均达到最大值4.06±0.13和5.17±0.97。SPECT示抗体注射后48hT/NT值明显高于12h、24h和72h(F均>86,P均<0.01)。治疗4周后,131I标记抗体治疗组肿瘤体积为(0.68±0.17)cm3,质量为(1.58±0.21)g,抑瘤率56.8%,与对照组比较有统计学差异。结论抗PrxI肺腺癌单链抗体能有效抑制肺腺癌细胞生长,131I标记单链抗体在体内能抑制...     

131I-抗-VEGF McAb荷瘤膀胱癌裸鼠放射免疫显像的实验研究

目的探讨131I-sc-7269放射免疫显像诊断人膀胱癌的可行性.方法 Iodogen法标记抗-VEGF McAb(sc-7269);SPECT仪行荷人浸润性膀胱癌裸鼠移植瘤模型131I-sc-7269放射免疫显像.结果 131I-sc-7269荷瘤裸鼠放射免疫显像(RII)移植瘤最佳显像时间为注入标记抗体后96h.结论实验结果提示,131I-sc-7269可以放射免疫显像诊断实验性膀胱癌,为应用131I-sc-7269显像诊断人膀胱癌的临床研究提供了实验依据.     

~(99)Tc~m-EGFR-McAb及~(99)Tc~m-CD44-McAb单独及联合用于荷人肺腺癌裸鼠的显像研究

目的 评价99Tcm-EGFR-McAb及99Tcm-CD44-McAb单独及联合应用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像效果.方法 建立荷人肺腺癌裸鼠动物模型;采用直接法99Tcm标记抗EGFR和CD44的单克隆抗体,运用柱层析法对标记抗体分离、纯化,并对标记、纯化后的抗体特性进行鉴定;利用99Tcm-EGFR-McAb及99Tcm-CD44-McAb单独及联合进行倚人肺腺癌裸鼠显像及体内分布研究.结果 99Tcm对EGFR-McAb和CD44-McAb的标记率分别为(91.5±3.8)%、(92.3±4.1)%,标记抗体比活度分别为(2.8±0.3)MBq/μl、(2.9±0.5)MBq/μl,放射化学纯度分别为(96.5±2.8)%、(96.2±3.1)%.放射免疫显像结果显示,肿瘤组织对2种标记抗体均有较高的摄取,2种标记抗体联合使用肿瘤部位的放射性浓聚明显高于2种标记抗体单独使用,通过ROI技术测得T/NT值分别为(5.58±0.46)、(2.72±0.22)、(2.30±0.18).标记抗体的体内分布规律与显像结果一致.结论 99Tcm-EGFR-McAb、99Tcm-CD44-McAb用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像能得到较理想的靶/非靶比值,2种标记抗体的联合应用,可在一定程度上提高靶/非靶比值,优于一种标记抗体的单独使用.     

131I标记多肽K237用于前列腺癌荷瘤裸鼠显像的实验研究

目的研究将放射性核素131I标记多肽K237用于前列腺癌荷瘤裸鼠显像的可行性。方法按Iodogen法用131I标记多肽K237,用薄层层析法(TLC)测定标记率及放射化学纯度,经Sephadex G25柱凝胶过滤法分离纯化,获得标记率大于95%的131I-K237注射液。体外培养前列腺癌LNCap细胞株,构建LNCap荷瘤裸鼠动物模型,经尾静脉注射131I-K237,于特定时间处死、取肿瘤及主要脏器,测定各组织的放射性百分注射剂量率,研究荷瘤裸鼠体内131I-K237的生物分布。对荷瘤裸鼠尾静脉注射5.55Mbq131I-K237 1、2、4和8h后,分别用SPECT/CT仪显像,考察最佳显像时间。结果131I标记多肽K237的标记率为(73.7±3.2)%,经Sephadex G25柱分离纯化后,放射化学纯度为(96.7±0.6)%;LNCap前列腺癌荷瘤裸鼠体内131I-K237分布显示:30min和1、2、4、8、12、24h的T/NT比值分别是2.08和2.28、2.45、2.68、3.04、3.97、4.41。荷瘤裸鼠显像结果表明,1h时即可见肿瘤隐约显影,4h肿瘤显影最清晰。结论131I-K237的制备与显像操作简易,用于前列腺癌荷瘤裸鼠显像效果理想,有望成为一种新的针对前列腺癌的肿瘤显像剂。     

抗HIF-1α肺腺癌人源单链抗体的制备和放射免疫显像

目的 利用噬菌体抗体库技术制备特异性的抗缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor,HIF-1α)肺腺癌人源单链抗体(scFv),并用于荷人肺腺癌裸鼠体内放射免疫显像(radioimmunoimaging,RII)研究.方法 利用噬菌体抗体库技术筛选特异性抗HIF-1α肺腺癌人源scFv,并将其感染大肠杆菌HB2151,进行scFv的可溶性表达.接种肺腺癌A549细胞复制荷瘤裸鼠模型,尾静脉注射131I标记可溶scFv,于注射后24、48、72 、120 h进行SPECT平面静态检查,观察肿瘤内放射性浓聚情况,用感兴趣区(region of interest,ROI)技术分析T/NT值,取平面静态检查肿瘤显影清晰时进行SPECT/CT图像融合.结果 经鉴定证实制备出特异性的抗HIF-1α肺腺癌人源scFv,荷瘤裸鼠体内RII结果 显示131I-可溶scFv可以选择性地积聚于肿瘤组织,肿瘤区放射性浓聚、T/NT值均在72 h达到高峰,利用ROI技术得到的T/NT值此时最大可达3 19.72 h时融合图像肿瘤显像良好,图像清晰.结论 成功制备特异性抗HIF-1α肺腺癌人源scFv,131I标记后荷人肺腺癌裸鼠RII肿瘤显影良好.     

ABCG2特异性肺腺癌单链抗体的裸鼠体内放免显像及其抑瘤作用

目的 观察ABCG2特异性肺腺癌单链抗体(scFv)在裸鼠体内的放免显像和代谢动力学特征,并探讨其对肿瘤生长的作用.方法 采用不同浓度梯度scFv处理肺腺癌细胞后,Western blot检测ABCG2靶蛋白表达量的变化;CCK-8检测细胞增殖能力改变并绘制生长曲线;流式细胞术检测细胞凋亡和周期变化;放射性核素131I标记抗体后行裸鼠体内生物分布和SPECT/CT放免显像研究;进一步建立移植瘤模型检测scFv的体内抑瘤能力.结果 scFv干预肺腺癌细胞后导致ABCG2蛋白表达水平较对照组显著降低,并明显抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞(P＜0.05).裸鼠体内生物分布和放免显像结果显示该scFv具有良好的代谢动力学特征,表现为高效、快速的肿瘤靶部位特异性结合及体内清除能力.结论 肺腺癌ABCG2 scFv具有良好的放免显像效果,并显示出较好的代谢动力学、亲肿瘤和抗肿瘤特性,对肿瘤的生长有抑制作用.     

131I标记抗VEGF单抗在荷瘤膀胱癌裸鼠体内的生物学分布

目的研究131I-sc-7269在荷人膀胱癌裸鼠体内的生物学分布特性.方法 (1)Iodogen法标记抗-VEGF McAb(sc-7269),SephadexG-50柱层析分离纯化制备131I-sc-7269,体外细胞结合分析检测标记抗体的免疫活性;(2)荷瘤裸鼠131I-sc-7269体内分布实验.结果 (1)131I-sc-7269比活度为1.00MBq/μg(放射性浓度为18.30MBq/ml),放射性化学纯度为96.20%.体外131I-sc-7269与T24细胞结合率为59.12%;(2)体内分布实验显示131I-sc-7269在肿瘤组织中浓聚的峰时为注入标记抗体后96h,此时各组织T/NT比值为最高.结论 131I-sc-7269动物模型肿瘤/膀胱放射性峰时出现在96h,比值高达6.44,为应用131I-sc-7269放射免疫显像诊断人膀胱癌的实验和临床研究奠定了一定的实验基础.     

抗人胆管癌相关抗原单克隆抗体放射免疫显像的实验研究

目的 检验制备出的抗人胆管癌相关抗原单克隆抗体经同位素标记后用于胆管癌放射免疫显像诊断的特异性。方法 将纯化的抗人胆管癌相关原单克隆抗体经^131I标记后,注射于荷人胆管癌移植瘤的裸鼠体内,研究标记抗体在荷瘤裸鼠体内组织分布,并于不同时相点在SPECT下观察裸鼠移植瘤的放射免疫显像效果。结果 ①裸鼠移植瘤的放射免疫显像效果良好,在各时相点时,以96h时相点显像效果最佳;②注射放射性标记抗体96h后,肿瘤组织有标记抗体特异性浓聚,T/NT比值达到峰值。结论 制备出的抗人胆管癌相关抗原单克隆抗体在人体胆管癌的放射免疫显像诊断中具有良好的应用前景,值得进一步研究。     

^131I标记抗CEA、TPS及混合单抗在荷人乳腺癌裸鼠体内放射免疫显像及生物学分布

目的 研究^131I标记抗CEA、TPS单抗及混合单抗（CEA＋TPS）在荷人乳腺癌裸鼠体内的分布，为放免显像（RII）及临床应用提供依据。方法 荷瘤鼠分为3组，每组尾静脉分别注入^131I标记的抗CEA，TPS及混合单抗3．7MSq／0．1ml，于注射后2，4、48、96、120h行SPELT，于48、96、120h分批处死，测定肿瘤和血、肝、肺等重要脏器的单位放射性比值（T／NT）。结果 标记单抗注射后24～120h内，肿瘤部位出现放射性浓聚，T／NT比值120h最高达21．31。SPECT阳性率分别为50％、58％、91％。结论 混合单抗组在T/NT比值、SPECT阳性率方面明显优于对照组。单抗的混合使用有望成为RⅡ的首选方法。     

18F-FPA的合成及对荷前列腺癌裸鼠的显像研究

目的 探讨显像剂2-18 F-氟丙酸(18 F-FPA)的合成及对荷前列腺癌裸鼠的显像价值.方法 利用CFN-multi-200型多功能药物合成模块自动化合成18 F-FPA,进行质量控制.建立荷PC3前列腺癌裸鼠(16只)和荷22RV1前列腺癌裸鼠(4只)模型,分别进行18 F-FPA显像,并与18F-氟代脱氧葡萄糖(18F-FDG)和11 C-胆碱显像进行对比,评价18F-FPA对前列腺癌的显像价值.将荷PC3前列腺癌裸鼠分为4组进行生物分布测定,计算每克组织百分注射剂量率(％ID/g)和肿瘤与非肿瘤比值.结果 18F-FPA的合成过程约40 min,产率为(38±2)％(未经时间校正),放射化学纯度大于97％,体外稳定性良好.注射18F-FPA后显像,两种荷瘤裸鼠肿瘤均显影清晰,而18 F-FDG和11C-胆碱显像肿瘤仅轻微摄取.荷PC3前列腺癌裸鼠的肿瘤在注射18F-FPA后0.5、1.0、2.0和4.0h的生物分布分别为(6.91±0.72)、(6.99±0.55)、(7.17±0.25)和(6.49士0.74)％ID/g,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 18 F-FPA合成简单,对荷前列腺癌裸鼠有较好的显像效果,有望用于临床前列腺癌的检测.     

131I-antiAFP导向载药纳米粒对肝癌移植瘤的抑制作用

目的 探讨131 I-antiAFP McAb-DOX-BSA-NP对肝癌移植瘤的抑制和杀伤作用.方法 制备131I-antiAFP McAb-DOX-BSA-NP;培养人肝癌细胞株BEL-7402及建立荷瘤裸鼠模型;将成瘤裸鼠模型按随机数字表法分为5组,每组6只.A组:空白对照组(生理盐水);B组:单纯131I核素治疗组;C组:131 I-antiAFP McAb治疗组;D组:131 I-antiAFP McAb-DOX-BSA-NP治疗组;E组:antiAFP McAb-DOX-BSA-NP治疗组.裸鼠瘤周注射治疗,DOX剂量为40 μg/只,131I活度0.2 mCi/只(1 mCi =3.7×107Bq),注射体积为0.2 mL/只.于4、9、14、20 d测量并记录各组裸鼠瘤体体积.同时分别在24、48、96、168 h对放射治疗组(B、C、D组)裸鼠进行SPECT检查.结果 标记产物呈澄清溶液;pH值7.4;放射性化学纯度＞99％,活度浓度3.91 mCi/mL;在0.2 mol/L PB缓冲液中1、2、4h放射性化学纯度分别为97.17％、97.10％、95.22％,稳定性良好.各组裸鼠治疗后肿瘤体积变化及生长抑制率比较:B、C、D、E治疗组较空白对照组肿瘤体积明显减小(P＜0.05);与B、C、E组比较,D组肿瘤生长抑制率最强,差异有统计学意义(P＜0.05).SPECT检查结果显示:24 h时,B、C、D3组瘤区放射性计数值差异无统计学意义(P ＞0.05);48、96、168 h时,131 I-antiAFP McAb-DOX-BSA-NP治疗组(D组)及131 I-antiAFP McAb治疗组(C组)放射性计数值均高于131I治疗组(B组),差异均具有统计学意义(P＜0.05),且随时间延长其差异性越来越显著.结论 单克隆抗体免疫治疗、放射性131I内照射治疗及载药纳米粒缓释化疗联合运用对肝癌移植瘤有显著抗癌效果.     

LOCALIZATION OF 131I-LABELLED ANTI-GLIOMA MONOCLONAL ANTIBODY S2-39 IN HUMAN BRAIN TUMOR TRANSPLANTED IN NUDE MICE*

The Jocalization of i:iI.McAb SZ-39 in human brain tumor nude mice model NHG-I (bearing glioma), NHE-2 (bearing ependymoma) and NHG3 (bearing metastatic adenocarcinoma) was studied with v-imaging autoradiography and radioactivity distri. bution. Satisfactorytumor imaging was obtained in NHG148.163 hoJ ter injection of 131McAb SZ 39 and the d:~f,:smafTeojNT (tumor/normal tissue) value increased i l.0 t0 144.9 times. No tumor imaging was obtained in NHE-2 0r NHC-3 receiving 131I.McAb S2-39 and NHG-1 receiving 131l-normal mouse IgG; the 72 hour TiNT <2. These in vivo studies dcmonstrate the specificity of S2-39 and in- dicatc that it may be used for clinical diagr:tosis and Targctingtrcatment.     

131I标记抗CEA单抗预防人结肠癌肝转移的实验研究

目的 探索早期应用＾１３１Ｉ标记惮朱癌肝转移的可行性。方法 在建立人结肠腺癌习肝转移后，于１５ｍｉｎ、１０、２０ｄ经尾静注射＾１３１Ｉ标记抗ＣＥＡ单抗，于放射免疫疗法后４周和裸鼠死亡时，检查肝转移癌的数目、大小、瘤重、组织不和生存期。结果早期治疗组的肝转移癌数目、大小和瘤重均明显减小，瘤结节内有明显坏死，生存期延长。结论 早期应用＾１３１Ｉ标记抗ＣＥＡ单抗能有效地抑制肝转移癌的形成。     

Localization of human lung cancer xenografts in nude mice using monoclonal antibody

Radiolabeled monoclonal antibodies to human lung cancer were injected into nude mice bearing xenografts; and the biodistribution and tumor localization were studied. Xenografts were able to concentrate radioiodinated McAb. Radioactivities of tumor which were 5.09, 5.79 and 7.57% dose/g respectively 3-5 days after injection were higher than those of blood or organ. Tumor/blood ratios were 1.82-2.36 whereas tumor/organ ratios were more than 2. The localization indices of two McAbs were 3.4-5.6 and less than 1.5 in normal organs. The xenografts were visualized after injection of radiolabeled McAbs. These results have shown that anti-human lung cancer McAbs can specifically localize on xenografts in nude mice and it is possible to use them clinically for imaging of lung cancer.     

^125I标记抗人ADAMl51多克隆抗体在荷胃癌裸鼠体内的生物分布和放射免疫显像

目的研究^125I标记抗人ADAMl5多克隆抗体（^125I-anti-ADAMl5抗体）在荷人胃癌裸鼠体内的生物分布。方法以氯胺T法制备^125I-anti-ADAMl5抗体并测定其在生理盐水和人血清中的稳定性。经荷胃癌裸鼠模型尾静脉注入^125I-anti-ADAMl5抗体后1、4、8、24和48h对裸鼠进行SPECT平面显像,采用感兴趣区（ROI）技术进行半定量分析,计算肿瘤与非瘤组织的放射性计数比值（T／NT）和肿瘤与裸鼠全身的放射性计数比值。于48h显像后处死荷瘤裸鼠,取心、肺、甲状腺和肿瘤等多个脏器组织称重并测量其放射性计数,计算各组织的每克组织百分注射剂量率（％ID／g）。结果^125I-anti-ADAMl5抗体标记率为（75．16d-9．43）％,纯化后放射化学纯度可达（99．44d-O．21）％。经尾静脉注入^125I-anti。ADAMl5抗体后,随时间的延长,T／NT逐渐增高。在48h时肿瘤清晰显影,T／NT可达3．84±0．43。结论^125I-anti-ADAMl5抗体在荷胃癌裸鼠体内具有肿瘤靶向定位能力,能获得良好的放射免疫显像图像。     

Radiolabeling LyP-1 peptide and preliminary biodistribution evaluation in mice bearing MDA-MB-435 xenografts

Background Recent studies have shown the LyP-1 peptide can home to either tumor lymphatics or the tumor cells and be internalized by targeted cells.This study aimed to investigate the possibility of us...     

~(131)Ⅰ标记单抗4C_6在人胰癌裸鼠移植瘤模型中的放免显像研究

应用亲和层析法提纯我室自制的抗胰癌单克隆抗体4C_6,经固相氧化法标记~(131)I,腹腔注入荷人胰癌裸鼠移植瘤模型中。经体外扫描,观察单抗4C_6在不同时间的定位能力及其生物学分布和代谢情况。结果表明:投药后48h～168h,随非瘤组织本底的消减,肿瘤部位有明显的放射性聚集,与对照组全身均匀分布不同;显像最佳时间为投药后120h,此时,T/NT比值除血、甲状腺外,均大于3,与对照组均呈非常显著差异(P<0.01);每g瘤组织的放射性百分比,于投药后120h达6.87%ID/g。结果说明单抗4C_6对胰腺癌具有一定的定位能力,可望用于胰腺癌的临床放免显像定位诊断。