鸡疟原虫雌配子单克隆抗体的制备和鉴定

对鸡疟原虫雌配子免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取免疫鼠脾细胞ＮＳＩ鼠骨髓瘤细胞融合，筛选出的６株杂交瘤细胞，证明能分泌效价高、特异性强的单克隆抗休 类鉴定为ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ，其中２Ｈ１、６Ｅ２、１Ｇ１、１２Ｄ１株ＭｃＡｂ为抗膜抗体，而３Ｈ１和６Ｃ２株ＭｃＡｂ为非抗膜抗体。     

肝动脉灌注阿霉素毫微粒在荷肝瘤鼠体内的药物分布及药效研究

目的研究阿霉素毫微粒（ＮＡＤＭ）经肝动脉灌注后在荷肝肿瘤鼠体内的药物分布与药效．方法ＳＤ纯系大鼠９０只，建立Ｗ２５６移植性肝癌模型并随机分为６组，每组１５只动物，其中２组供药物分布研究，４组供药效研究．药物分布组经肝动脉以２ｍｇ／ｋｇ药物剂量分别注入ＮＡＤＭ与游离阿霉素（ＦＡＤＭ），每组于给药后１，５，１５ｈ各处死５只大鼠，分别提取血浆、肝、心、脾、肺、肾、肝肿瘤样品，采用反相高效液相色谱荧光检测法测定药物浓度；药效组经肝动脉分别灌注生理盐水（ＮＳ），ＦＡＤＭ、阿霉素加空白毫微粒（ＡＤＭ＋ＮＰ）和ＮＡＤＭ．结果给药后１，５，１５ｈ时ＮＡＤＭ组大鼠肝、脾、肝肿瘤中阿霉素浓度均显著高于ＦＡＤＭ组（Ｐ＜００１），而血浆、心、肺中阿霉素浓度则显著降低（Ｐ＜００１）．与ＦＡＤＭ及ＡＤＭ＋ＮＰ组相比，经ＮＡＤＭ治疗的大鼠生存期显著延长（Ｐ＜００１），对肿瘤生长的抑制更为明显（Ｐ＜００１），肿瘤坏死更广泛，更彻底．结论ＮＡＤＭ经肝动脉给药后改变了阿霉素的体内分布特征，对肝肿瘤表现出明显的靶向性，并显著提高阿霉素的疗效     

对肺动脉平滑肌细胞趋化反应和DNA合成的研究

探讨肺血管平滑肌细胞（ＰＶＳＭＣ）迁移在缺氧性肺血管结构重组中的作用以及缺氧本身对ＰＶＳＭＣ增殖和迁移的影响。方法利用细胞趋化研究方法和３Ｈ－胸腺嘧啶掺入法研究了血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）对培养的新生小牛肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）趋化反应和ＤＮＡ合成的作用，以及缺氧和心钠素（ＡＮＰ）对ＰＤＧＦ这种作用的影响。结果表明缺氧可促进ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣ的趋化反应和ＤＮＡ合成，ＡＮＰ可抑制ＰＡＳＭＣ对ＰＤＧＦ的趋化作用，并抑制ＰＡＳＭＣ的ＤＮＡ合成，鸟苷酸环化酶抑制剂美蓝（ＭＢ）可抑制ＡＮＰ的这种抑制作用。结论研究提示ＰＤＧＦ、ＡＮＰ和缺氧本身对ＰＡＳＭＣ的增殖和迁移有重要作用，这可能对缺氧性肺血管结构重组具有重要意义     

肾综合征出血热病毒结构蛋白致病作用的研究

为阐明肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）发病机制，用免疫组化法检查了３０例患者ＨＦＲＳ病毒的膜蛋白（ＭＰ）、核蛋白（ＮＰ）在外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中的表达情况，同时用放免等技术检测了血浆内皮素（ＥＴ）、Ｐ物质（ＳＰ）和肾功能相关指标。发现ＨＦＲＳ患者从４～５病日起至１３病日，ＰＢＭＣ中均有ＭＰ和ＮＰ表达，但随着病情的好转，其表达强度逐渐减弱。经染色鉴定ＭＰ与ＮＰ阳性细胞主要是单核细胞。入院时ＰＢＭＣ中ＭＰ和ＮＰ表达强度并不相同，ＭＰ的表达强度与血浆ＥＴ／ＳＰ比值、病情及肾脏损伤轻重呈平行关系。提示ＨＦＲＳ病毒能侵犯ＰＢＭＣ并在其中复制，表达病毒结构蛋白，而ＭＰ与ＨＦＲＳ病毒的致病作用相关；病程中血浆ＥＴ／ＳＰ比值升高是使肾损加重的重要因素。     

携带单纯疱疹病毒tk基因的人肝癌特异性逆转录病毒载体的构建(英文)

目的构建携带单纯疱疹病毒ｔｋ基因（ＨＳＶｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体．方法用ＳａｌＩ酶切除逆转录病毒载体ｐＭＮＳＭ内部的ＳＶ４０启动子成为ｐＭＮＭ；从真核表达载体ｐＢＰＧｋｔｋ质粒中用ＢａｍＨＩ酶游离带有磷酸甘油酸激酶基因（ｐｇｋ）启动子调控的ＨＳＶｔｋ片段，克隆到ｐＭＮＭ的ＰＬ位点上，构建成普通型ｐＭＮＰｔｋ逆转录病毒载体；从ｐＧＥＭ．７ＺＡＦＰｅ质粒中用ＥｃｏＲＩ酶游离人甲胎蛋白基因增强子核心序列，克隆到ｐＭＮＰｔｋ的ｐｇｋ启动子上游，构建成人肝癌特异型ｐＭＮＡＰｔｋ逆转录病毒载体．结果酶切鉴定ｐＭＮＰｔｋ和ｐＭＮＡＰｔｋ载体构建正确．结论该载体对肝癌特异性前药转换基因治疗有重要意义．     

HBV感染与肝癌患者血清可溶性IL—2受体及T淋巴细胞亚群的变化及意义

用ＥＬＩＳＡ及ＡＰＡＡＰ法分别检测了３９例乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染者、１５例者ＨＢＶ感染的肝癌患者及２０例正常人的血清可溶性白细胞介素－２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）和外周血Ｔ淋巴细胞亚群结果显示,肝癌及ＨＢＶ感染者（Ｐ〈０．０１）。吕患者及ＨＢＶ感染者ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ４／ＣＤ８与对照相比均有显著差异（Ｐ〈０．０５）,而肝癌与ＨＢＶ感染者相比无显著差异（Ｐ〉０．０５）。提示ＨＢＶ感染者及肝癌     

鸡疟原虫雌配子单克隆抗体的制备和鉴定

用鸡疟原虫雌配子免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取免疫鼠脾细胞与ＮＳＩ鼠骨髓瘤细胞融合，筛选出的６株（３Ｈ１、２Ｈ１、１Ｇ１、１２Ｄ１、６Ｅ２、６Ｃ２）杂交瘤细胞，证明能分泌效价高、特异性强的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）。亚类鉴定为ＩｇＧ１（６Ｃ２，３Ｈ１）、ＩｇＧ２ａ（１Ｇ１，２Ｈ１）、ＩｇＧ２ｂ（６Ｅ２）、ＩｇＧ（１２Ｄ１），其中２Ｈ１、６Ｅ２、１Ｇ１、１２Ｄ１株ＭｃＡｂ为抗膜抗体，而３Ｈ１和６Ｃ２株ＭｃＡｂ为非抗膜抗体。除１２Ｄ１株ＭｃＡｂ与蓝氏贾第鞭毛虫滋养体有交叉反应外，其它各株ＭｃＡｂ与阴道毛滴虫滋养体、杜氏利什曼原虫前鞭毛体、鼠疟原虫和鸡疟原虫红细胞内期均无交叉反应。     

小儿病毒性心肌炎的氧自由基变化及其相关因素

对６１例病毒性心肌炎（ＶＭＣ）患儿检测了ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ、ＭＤＡ。发现ＶＭＣ患儿发病１周内ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ下降,ＭＤＡ升高;经大剂量维生素Ｃ治疗后,ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ、ＭＤＡ于４～６周恢复正常。ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ与ＣＫ－ＭＢ呈负相关;与ＥＦ、ＦＳ呈正相关;ＭＤＡ与ＣＫ－ＭＢ呈正相关,与ＧＳＨ－ＰＸ、ＳＯＤ呈负相关。ＭＤＡ升高与否和心电图ＳＴ－Ｔ改变有关,ＧＳＨ－ＰＸ、ＳＯＤ降低与否和心     

肺心病患者红细胞免疫功能与活性氧关系的研究

目的：探讨肺心病患者红细胞免疫功能。方法：对３０例肺心病急性加重期患者采用化学比色法测定血清超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）及丙二醛（ＭＤＡ），用红细胞酵母菌花环法测定红细胞免疫粘附功能。结果：肺心病急性加重期血清ＳＯＤ下降，ＭＤＡ升高，红细胞膜表面的Ｃ３ｂ受体（ＲＢＣＣ３ｂＲ）下降，红细胞免疫复合物（ＲＢＣＩＣ）升高，与健康对照组比较均具有显著差异（Ｐ＜００５，Ｐ＜００１）。直线相关分析：ＳＯＤ与ＲＢＣＣ３ｂＲ呈显著正相关（Ｐ＜００１），ＭＤＡ与ＲＢＣＣ３ｂＲ呈显著负相关（Ｐ＜００１），ＳＯＤ、ＭＤＡ与ＲＢＣＩＣ无线性相关关系。结论：肺心病急性加重期活性氧的增加是引起红细胞免疫粘附功能下降的一个重要原因。     

丙型肝炎患者LDL-R基因多态性的初步研究

最近确定低密度脂蛋白受体 (ＬＤＬ Ｒ)为ＨＣＶ受体 ,而ＬＤＬ Ｒ的基因突变和单碱基多态性 (ＳＮＰ)种类比较多 ,多数与脂代谢异常有关。现选择ＬＤＬ Ｒ第 13外显子的ＡｖａⅡＳＮＰ位点 ,调查其基因频率与ＨＣＶ感染、发病及预后的关系 ,以阐明ＬＤＬ Ｒ基因突变和 /或ＳＮＰ是否与ＨＣＶ感染和发病有关。从住院和门诊选择ＨＣＶＲＮＡ或 /和ＨＣＶ抗体阳性 ,确诊为丙型肝炎的患者 ,收集血样 82份 ,另选择ＨＢＶ和ＨＣＶ指标全部阴性标本 88份。用ＱＩＡｇｅｎ公司的试剂盒提取基因组ＤＮＡ ,作为模板进行ＰＣＲ扩增。ＰＣＲ产物用Ａｖ…     

肾综合出血热患者外周血单个核细胞中病毒性蛋白和病毒核酸动…

为进一步研究肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）病毒核蛋白（ＮＰ）、膜蛋白（ＭＰ）及病毒知ＨＦＲＳ患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中的动态变化，提示ＨＦＲＳＶ在患者ＰＢＭＣ中感染、增殖及消亡之规则，应用免疫细胞化学测定１８例ＨＦＲＳ患者不同病日的９５份外因单个核中的Ｎｐ和ＭＰ抗原。结果表明：第３病日，即可患者ＰＢＭＣ中检测到ＮＰ和ＭＰ；第３－５病日，病结构蛋白表达较强，６－１０日明显变弱，第１８病是逐渐消失     

特异性抗肝癌噬菌体单链抗体库的构建及鉴定

噬菌体单链抗体（ＳｃＦｖ）弥补了传统ＭｃＡｂ制备繁琐、抗原性强、穿透力弱等不足,为ＨＣＣ临床和基础研究提供新的手段。我们用基因工程技术和噬菌体表面呈现技术构建和筛选特异性抗ＨＣＣ噬菌体ＳｃＦｖ库。 １．材料与方法：（１）抗ＨＣＣ噬菌体ＳｃＦｖ库的构建：应用ＨＣＣ细胞常规免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠,从其脾脏提取ｔＲＮＡ并纯化ｍＲＮＡ,逆转录合成ｃＤＮＡ,ＰＣＲ扩增抗体轻链和重链可变区,应用ｌｉｎｋｅｒ－（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３装配ＳｃＦＶ基因,在其５’端和３’端分别引入内切酶ＳｆｉＩ和ＮｏｔＩ酶切位点,连接…     

肾综合征出血热患者尿液中病毒结构蛋白的检测及意义

为了阐明肾综合片出血热（ＨＦＲＳ）患者尿液中病毒膜蛋白（ＭＰ）。核蛋白（ＮＰ）的消长与病情及预后的关系，探讨ＨＦＲＳ的发病机制，应用免疫酶斑点法（ＩＥＤＡ）对２６例ＨＦＲＳ患者不同病日的１１８份尿液中病毒结构蛋白抗原进行了检测，结果ＨＦＲＳ患者尿液中ＭＰ和ＮＰ抗原在发病初期阳性率最高，以后逐渐下降，且４～７病日尿液中ＭＰ阳性率高于ＮＰ，７病日后两者无明显差别，同时重度患者ＭＰ水平明显高于中度患者，     

过敏性紫癜患者红细胞免疫功能与NK细胞活性的变化

目的 探讨红细胞免疫及天然杀伤细胞（ＮＫＣ）在过敏性紫癜（ＨＳＰ）发病中的可能作用。方法 红细胞免疫采用郭峰法测定２２例ＨＳＰ患者,红细胞Ｃ３ｂ受体花环率（ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ）,与免疫复合物受体花环率（ＲＢＣ－ＩＣＲ）,流式细胞仪与单克隆抗体（ＣＤ１６）测定ＮＫ细胞的活性。并与２０名正常体检儿童对照。结果 ＨＳＰ患者ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ及ＮＫＣ活性低于正常对照组（Ｐ〈０．０１）,ＲＢＣ－ＩＣＲ高于正     

日本血吸虫感染者尿液诊断标志物的电泳筛选及其单克隆抗体的制备和初步应用

目的　筛选日本血吸虫感染者尿液检测探针。方法　采用电泳方法从日本血吸虫感染者尿液筛选诊断标志物,以此为抗原制备ＭｃＡｂ,并用ＥＬＩＳＡ对尿样进行了初步检测。结果　ＰＡＧＥ电泳法筛选到一条分子量约３０ｋＤａ 的糖蛋白带;以此糖蛋白为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠制备单克隆抗体,获得２ 株ＭｃＡｂ － ＮＰ５６ 和ＮＰ５４;用ＮＰ５６ 以间接ＥＬＩＳＡ法检测１０ 份日本血吸虫感染者尿液（ＥＰＧ中位数为６９）,浓缩５０ 倍尿液和原尿分别有９ 份和５ 份呈阳性。结论　本研究制备的ＭｃＡｂ－ ＮＰ５６ 有望作为日本血吸虫慢性病人和轻度感染者尿液的检测探针应用于现场。     

CD+4自然杀伤T细胞在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用

目的 了解ＣＤ４＾＋、ＣＤ８＾＋自然杀伤（ＮＫ）Ｔ细胞在慢性ＨＢＶ感染外周轿中的分布情况,并对其细胞毒性进行分析,阐明其在慢性ＨＢＶ感染中的作用。方法 常规分离外周上核细胞（ＰＢＭＣＳ）,用重组人白细胞介素－１２／２诱导１４ｄ,以鼠抗人ＣＤ４单克隆抗体或抗人ＣｍＡｂ与抗人ＣＤ５６ｍＡｂ分别标记细胞样品,流式细胞术（ＦＣＭ）分析,ＣＤ４＋ＣＤ５６＾＋同时阳性的细胞,即为ＣＤ４＾＋－ＮＫ－Ｔ细胞;Ｃ     

粒/巨噬细胞集落刺激因子及白介素-4增强肝癌患者树突状细胞免疫功能

树突状细胞 (ＤＣ)因其独特的免疫学特性 ,在诱导特异性抗肿瘤细胞免疫中起关键作用 ,细胞因子对ＤＣ免疫功能具调节作用[1] 。我们以粒 /巨噬细胞集落刺激因子(ＧＭ ＣＳＦ)及白介素 4(ＩＬ 4)联合刺激肝癌患者外周血ＤＣ ,研究探讨 ,ＧＭ ＣＳＦ和ＩＬ 4对ＤＣ表面免疫分子ＨＬＡ ＤＲ和Ｂ7 2表达水平及ＤＣ免疫功能的影响。材料和方法本院 1995～ 1996年临床确诊ＣｈｉｌｄＣ级原发性肝癌患者共 10例 ,男 9例 ,女 1例 ,年龄为 2 8～ 5 6岁 ,平均 48岁 ,均未接受任何抗肿瘤治疗。ＧＭ ＣＳＦ、ＩＬ 4、抗ＣＤ3 单克隆抗体(ＭｃＡｂ)及抗…     

CD28/CD80和CD2/CD58活化PBLs作用肝癌细胞的表型分析与TCR Vβ基因亚家族的优势取用

目的　采用抗ＣＤ２８ ,ＣＤ８０ ,ＣＤ２ 及ＣＤ５８ 分别刺激健康人ＰＢＬｓ 后作用肝癌细胞,对作用前后ＰＢＬｓ 的表型变化及ＴＣＲＶβ基因亚家族的表达水平进行探讨．方法　用ＦＡＣＳ 分析作用肝癌细胞前后ＰＢＬｓ 表型变化,并用ＲＴＰＣＲＳｏｕｔｈｅｒｎ 印迹分析其ＴＣＲ Ｖβ１ ～２０ 的表达水平及特征．结果　健康人ＰＢＬｓ 作用肝癌细胞后ＣＤ３ 和ＣＤ８ 分子表达比作用前明显增高,而ＣＤ４ 分子无显著变化． 健康人ＰＢＬｓ 分别加ＩＬ２ , ＰＨＡ, 抗 ＣＤ３ 和 ＣＤ３ ＋ ＣＤ２８ , ＣＤ２８ ＋ ＣＤ８０ ,ＣＤ２ ＋ ＣＤ５８ 作用肝癌细胞（ＢＥＬ７４０２） 前表达水平平均约５ ％ ,作用ＢＥＬ７４０２ 后表达水平约１３ ％ ～２５ ％ ,其特征为Ｖβ７增高．结论　在癌抗原的参与下,ＭｃＡｂ 共刺激的Ｔ 细胞活化,ＴＣＲ接受ＡＰＣ 提呈的相应抗原的刺激,具有该ＴＣＲ 的淋巴细胞迅速增殖而成为针对抗原的Ｔ 细胞克隆,发挥其识别和杀伤癌细胞的作用．     

冠状动脉狭窄时某些血管活性物质的变化

１３只麻醉开胸犬，分级缩窄冠状动脉左旋支，直到血流中断。临床分３组：对照组、冠心病（ＣＨＤ）组、急性心肌梗塞（ＡＭＩ）组。均测定血浆心钠素（ＡＮＰ）、内源性洋地黄样物质（ＥＤＬＳ）、醛固酮（Ａｌｄｏ）、血浆肾素活性（ＰＲＡ）、血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ），动物实验还增加左心功能检测。结果显示，实验性冠状动脉血流（ＣＢＦ）减少时心功能进行性减退；肾素－血管紧张素－醛固酮系统（ＲＡＡＳ）激活；ＡＮＰ分泌增加；ＥＤＬＳ减少。ＡＭＩ患者早期ＲＡＡＳ激活，ＡＮＰ增加，ＥＤＬＳ无改变，恢复期ＡＮＰ降低而ＥＤＬＳ增加。探讨了血管活性物质变化和机制，以及ＡＭＩ时应用血管紧张素转换酶抑制剂及外源性ＡＮＰ的意义。     

扩张型心肌病HLA－DRB_1基因多态性的研究

借助聚合酶链反应（ＰＣＲ）／序列特异性引物（ＳＳＰ）技术对４２例扩张型心肌病（ＤＣＭ）患者和１６８例正常对照者进行人类白细胞抗原（ＨＬＡ）－ＤＲＢ１基因型分析。结果发现ＤＣＭ组ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊１１基因频率与对照组比较明显增高（２６．１９％对１３．１％，Ｐ＜０．０５），其ＲＲ＝２．３６。其他等位基因频率在ＤＣＭ组与对照组间差异无显著性。提示ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊１１基因可能与ＤＣＭ有关联。