解淀粉芽孢杆菌NCPSJ7对小鼠的急性毒性评价

解淀粉芽孢杆菌NCPSJ7是1株具有广谱抗真菌活性的生防细菌,同时能够分泌具有广谱抗菌特性的胞外抗菌脂肽类物质。为了研究该菌株及其胞外抗菌物质的生物安全性,测定了该菌株菌悬液以及胞外抗菌物质粗提液对实验小鼠的急性经口毒性,以及小鼠的肝功能和血常规指标。结果显示,按0.8 mL/10 g体重给小鼠灌胃解淀粉芽孢杆菌NCPSJ7菌株菌悬液(2.5×108 cfu/mL)及抗菌物质粗提液(蛋白浓度为3.0 mg/mL)后观察15 d,供试鼠的饮水、进食、运动等行为均未受影响,无明显中毒现象,未出现死亡,肝功能及血常规指标和蒸馏水组没有显著差异。NCPSJ7菌株菌悬液及其胞外抗菌物质粗提液对小鼠的安全性较高,具有进一步研究开发的价值。     

不同浓度臭氧水对苹果轮纹菌的杀灭效果

以致使贮藏苹果腐败的主要真菌苹果轮纹菌为研究对象,通过离体和载体试验研究了不同浓度臭氧水处理对苹果轮纹病菌的杀灭效果。研究结果表明,离体试验中,不同浓度臭氧水对苹果轮纹病菌均有一定杀灭效果,其中浓度为1.2mg/L的臭氧水对苹果轮纹菌作用5min后的杀菌率可达80.96%;载体试验中,浓度为1.2mg/L臭氧水处理可显著抑制该病菌在苹果果实上的发病率和病斑直径的扩展。     

枯草芽孢杆菌SH7 抑菌蛋白产生的最佳发酵条件及温室防效

枯草芽孢杆菌SH7可抑制烟草青枯病菌的生长,利用硫酸铵沉淀法从发酵液中提取抑菌蛋白质,测定其对烟草青 枯病菌抑菌活性,从而确定抑菌蛋白产生的最佳培养基和培养条件。本实验产生抗菌蛋白的最佳培养基为NA液体培养基, 最佳发酵条件为：pH 6.0,26 ℃,装液量100 mL,170 r/min振荡培养96 h。粗抑菌蛋白在pH为9.0和10.0时,其抑菌活性仍 保持为86%, 88%,对碱稳定;在100 ℃和121 ℃处理20 min,其抑菌活性仍保持为83.1%, 68.0%,具有良好的热稳定性。在 温室内,抗菌蛋白粗提液对烟草青枯病可取得70.8%的防效。     

芦荟粗提液对红富士苹果常温贮藏保鲜的影响

为了研究芦荟粗提液对红富士苹果常温贮藏条件下保鲜及生理的影响,采用黄酮含量分别为0.02,0.035,0.05 mg/m L的芦荟粗提液浸泡5 min,然后装入厚度为0.03 mm的苹果专用保鲜袋中常温【20±1℃】贮藏。以清水浸泡为对照。试验结果表明:芦荟粗提液处理能够较好地抑制苹果贮藏过程中呼吸强度和乙烯释放量,降低呼吸和乙烯峰值,有效延缓相对电导率和丙二醛含量的上升。同时在一定程度上诱导了过氧化物酶、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性的增加,增强了果实自身的抗逆性。芦荟粗提液处理能够较好地抑制红富士苹果常温贮藏期间的生理变化,降低膜脂过氧化程度,对保持果实品质、缓后熟衰老具有较好的作用。以黄酮含量为0.05 mg/m L的芦荟粗提液处理效果最好。     

海带内生菌HSN2胞外蛋白对粉红单端孢霉的影响

HSN2是分离自海带的具有抑菌活性的内生细菌,其蛋白具有抑菌活性。为确定该胞外蛋白对粉红单端孢霉的抑制效果,采用体外拮抗法检测其对粉红单端孢霉菌丝生长和孢子萌发的影响,并研究在苹果伤口中注入的蛋白对粉红单端孢霉的抑制作用和预防效果。结果表明:HSN2胞外蛋白对粉红单端孢霉菌丝生长和孢子萌发具有抑制效果;苹果体内研究表明,HSN2胞外蛋白浓度越大,伤口腐烂直径越小,浓度达1 000μg/m L时,对粉红单端孢霉引起的腐烂抑制效果最佳;越早接入胞外蛋白的苹果,其腐烂程度越小。该试验结果为将HSN2胞外蛋白开发为新型抗菌剂提供了试验依据。     

花生抗真菌蛋白的纯化及活性鉴定

利用亲和色谱Affi-gel和葡聚糖凝胶色谱SephadexG-75从花生种子中分离出一种抗真菌蛋白。试验结果表明:此种纯化的抗真菌蛋白对植物致病菌苹果轮纹病菌(Physalosporapiricola)、棉花枯萎病菌(Fusariumoxysporum)、瓜果腐霉病菌(PythiumapHanidermatum)的生长具有明显抑制作用。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定达到电泳纯,分子质量为34.4kDa。还原和非还原状态下的此抗真菌蛋白均显示单一区带,说明该抗真菌蛋白为单倍体蛋白。     

鹿蹄草素对苹果轮纹病菌的抑制作用及其超微结构的研究

为探讨鹿蹄草素对苹果轮纹病菌的抑制活性及作用机理,采用倍比稀释法测定鹿蹄草素最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),扫描和透射电镜观察鹿蹄草素对苹果轮纹病菌超微结构的影响.结果表明,鹿蹄草素对苹果轮纹病菌具有较强的抑菌活性,其最小抑菌质量浓度为0.078 mg/mL,最小杀菌质量浓度为0.156mg/mL.用扫描电镜观察,菌丝扭曲变形,菌丝体之间相互粘连,细胞壁破裂,表面出现絮状凝集物,部分菌丝断裂、消融、干瘪、空腔.用透射电镜观察,细胞壁明显变薄,胞内空腔增多,细胞内部组成紊乱,原生质大量外泄,细胞结构遭到严重破坏,最终菌体崩解死亡.     

植物内生菌011粗提液对番茄采后保鲜效果的影响

本文以湘粉1号番茄为试材,研究了植物内生菌011粗提液对番茄保鲜效果的影响。试验结果表明,贮藏25 d后,粗提液处理显著降低了番茄采后腐烂率,与无菌水对照组比较,其腐烂率降低了52.17%。在整个贮藏期间,粗提液处理延缓了番茄果实的质量损失率,显著减小了番茄果实的维生素C(Vc)、还原糖、可溶性蛋白以及可滴定酸含量的降低,较好的维持了番茄果实的风味,显著抑制了丙二醛(MDA)的积累和超氧阴离子自由基(O2-.)的上升,保持了细胞膜的完整性;显著提高了抗逆性酶过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性。因此,011粗提液能较好的保持番茄的营养价值和商业价值,显著提高番茄的贮藏效果,为果蔬采后生物防治和贮藏保鲜提供了理论参照。     

中草药提取液对几种果蔬采后病原真菌的离体抑制作用研究

为寻找天然果蔬防腐剂,在离体条件下,采用生长速率法研究了17种含有抗茵成分的中草药提取液对几种果蔬采后病原真菌的抑制效应.结果表明:17种中草药提取液对苹果轮纹病菌(Physalospora piricola)、链格孢茵(Alternaria alternata)、褐腐病菌(Monilinia fructicola)的抑制效果强弱不同,其中2号黄连对3种病原菌的抑制作用最好,抑制率达到85%以上;其次是8号黄柏、1号鹿蹄草、4号苦参,抑制率也达到60%以上.     

二氧化氯采前处理对红富士苹果的保鲜

研究采前使用二氧化氯(ClO2)处理在红富士苹果冷藏条件下的防腐保鲜效果,探讨ClO2对红富士苹果的防腐保鲜效果机理。分别用质量浓度0、20、50、80mg/L ClO2溶液采前处理“红富士”苹果,定期测定果实采后生理指标,并在贮藏末期观察统计其腐烂指数。适宜质量浓度的ClO2采前处理对果实表面的菌落清除效果较好,可有效抑制冷藏期间果实硬度和可滴定酸含量的下降,降低苹果呼吸速率、乙烯释放速率和腐烂指数,无明显抑制果实质量减少的作用,提高了过氧化物酶(peroxidase,POD)和苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonialyase,PAL)的活性。通过不同质量浓度处理效果的比较,确定适宜的ClO2处理质量浓度为50mg/L,此处理条件对红富士苹果具有明显的防腐保鲜效果,可有效延长贮藏期。     

海洋假单胞菌GY-1菌株的抗菌作用及其胞外抗菌蛋白的分离纯化

采用对峙培养法和牛津杯法测定海洋假单胞杆菌(Pseudomonas) GY-1菌株和发酵液的抑菌作用。结果表明：GY-1菌株和发酵液对小麦根腐病菌(Bipolaris sorokiniana)、禾谷镰刀病菌(Fusarium graminearum)、菠菜早疫病菌(Alternaria solania)、斑点落叶病菌(Alternaria alternata)、油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)和小麦叶枯病菌(Alternaria tenuis Nees)等植物病原真菌有较强的抑制作用。发酵液采用硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow柱层析、Sephadex G-75凝胶层析,以小麦根腐病菌为指示菌进行活性追踪和SDS-PAGE电泳纯度跟踪检测,纯化出一种对小麦根腐病菌具有明显抗菌作用的抗菌蛋白,其分子质量约为70.9kD。     

植物源抗烟草花叶病毒活性物质的初步筛选

利用半叶枯斑法,测定了13科18种植物蛋白粗提液对烟草花叶病(TMV)的抑制效果。结果表明,不同植物蛋白粗提液对TMV侵染心叶烟的抑制效果存在差异,6种植物蛋白粗提液对TMV的抑制效果达到50%以上,其中菠菜和合欢最高,分别达到了97.44%和96.92%。进一步通过(NH4)2SO4盐析,对菠菜和合欢蛋白粗提液抗病毒活性成分进行了初步分离,并测试(NH4)2SO4盐析的不同蛋白组分对TMV的抑制效果。结果显示,菠菜蛋白粗提液盐析后的两个蛋白组分都表现出很高的抗病毒活性,而合欢蛋白粗提液只在40%~80%饱和度盐析的蛋白组分具有较强的抗病毒活性。     

灵芝不同培养基发酵液粗提物抑菌活性研究

采用不同培养基对灵芝进行液体发酵培养,研究其发酵液粗提物对植物病原真菌抑菌活性。结果表明,3种不同培养基的灵芝发酵液粗提物,对不同植物病原真菌的抑菌活性存在差异性。其中1#培养基的灵芝发酵液粗体物对苹果炭疽病菌、小麦根腐病菌和西瓜枯萎病菌具有显著的抑菌活性;2#培养基的灵芝发酵液粗提物对番茄早疫病菌的抑制作用明显;而3#培养基的灵芝发酵液粗提物对小麦根腐病菌具有较强的抑制作用。由此可见,不同培养基的灵芝发酵液对各种植物病原菌表现出不同的抑菌活性,揭示培养基成分的不同可能对灵芝发酵液的抑菌活性物质的产生有着重要的影响。     

枯草芽孢杆菌CCTCC M207209对食源性病原菌的抑制作用

采用杯碟法、对峙培养法和平板对扣法分别检测了枯草芽孢杆菌CCTCC M207209的活菌菌碟、无菌体发酵液、多糖提取液、蛋白质粗提液及其挥发性气体产物对金黄色葡萄球菌、肠球菌、化脓链球菌、大肠杆菌、沙门氏菌等食源性病原菌的抑制作用。结果表明,枯草芽孢杆菌CCTCC M207209的活菌菌碟和发酵液对所有参试病原菌均有显著抑制作用;蛋白质粗提液对除化脓链球菌以外的所有病原菌有显著抑制作用;挥发性气体产物对所有病原菌均无抑制作用;所有抑菌活性物质对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强,初步确定其为蛋白类物质。     

壳聚糖复合解淀粉芽孢杆菌对扩展青霉生长的控制效果研究

目的:为探讨壳聚糖对病原菌的抑制作用及对拮抗菌的影响,以期为拮抗菌Bacillus amyloliquefaciens BA-16-8应用于苹果采后的防腐保鲜提供理论基础。方法:以日本红富士为实验材料,采用体外及体内实验方法,研究不同浓度的壳聚糖对扩展青霉(Penicillium expansum)的抑制作用及解淀粉芽孢杆菌BA-16-8对扩展青霉产毒的影响。结果:浓度2%的壳聚糖溶液抗P.expansum和青霉病的能力最强,且不会影响拮抗菌B.amyloliquefaciens BA-16-8的生长。拮抗菌B.amyloliquefaciens BA-16-8的菌悬液及无细胞发酵液均可抑制P.expansum,且菌悬液的处理效果要优于无细胞发酵液。抑制产毒实验结果表明,B.amyloliquefaciens BA-16-8菌悬液及其无细胞发酵液均可显著抑制P.expansum发酵液中展青霉素的积累,但对单纯的展青霉素并无降解作用。结论:B.amyloliquefaciens BA-16-8同壳聚糖联合作用可抑制扩展青霉的活性及产毒能力。     

类芽孢杆菌YS-1粗提液对南丰蜜橘贮藏效果的影响

本文以南丰蜜橘"小果97-2"为研究对象,利用类芽孢杆菌Paenibacillus brasilensis YS-1粗提液处理果实,科力鲜500倍水溶液和清水处理为对照,研究它们在冷藏(5±1℃)条件下对南丰蜜橘果实采后生理生化及贮藏效果的影响。结果表明,YS-1粗提液与科力鲜对意大利青霉的离体抑菌圈直径分别为20.20 cm和51.12 cm;冷藏100 d后,YS-1粗提液处理的果实腐烂率和失重率分别为20.67%和3.75%,显著低于清水对照,高于科力鲜;同时,YS-1粗提液处理使南丰蜜橘果实TSS、总糖和Vc含量峰值提高至15.70%、19.57%和24.58%,减缓了贮藏后期南丰蜜橘果实TSS、总糖和TA含量的下降,有效保持了果实贮藏品质。此外,YS-1粗提液处理在贮藏中后期可以抑制果实丙二醛的积累和呼吸作用的增强,提高果实SOD、POD以及PAL活性。表明YS-1粗提液处理能有效保持南丰蜜橘果实贮藏品质,提高果实的抗病能力,减缓果实的衰老。     

黑豆胰蛋白酶抑制剂的纯化及性质研究

目的:分离、纯化一种黑豆胰蛋白酶抑制剂,并进行酶学性质及其生物学性质研究,为其生物活性蛋白的研究提供依据。方法:采用硫酸铵分级沉降、弱阳交换色谱CM-Sephadex C-50、亲和色谱Affi-gel和SDS-PAGE等方法分离、纯化和鉴定;以BANPA为底物,检测BSTI对胰蛋白酶的抑制活性。结果:从黑豆种子中分离到一种胰蛋白酶抑制剂,命名为BSTI。SDS-PAGE和阴离子高效液相色谱鉴定表明该蛋白具有相当高的纯度。其相对分子质量为20 kD,等电点为5.6。当抑制剂与酶的物质的量比达到1时,使酶完全失活。在温度65℃以下以及经pH 2～10处理后,BSTI活性几乎不受影响。BSTI对植物致病菌苹果轮纹病菌、瓜果腐霉病菌和白菜黑斑病菌具有较强的抑制作用,而对甜瓜枯萎病菌和葡萄灰霉病菌无抑制作用。结论:本文分离、表征到一种具有抗菌活性的新型胰蛋白酶抑制剂,可以使用离子交换层析柱进行分离、纯化。     

洋葱伯克氏菌Burkholderia contaminans抗菌蛋白分离纯化及生物学特性分析

洋葱伯克氏菌（Burkholderia contaminans）从杏果实表面分离,实验证明其对果蔬采后多种病原真菌具有较强的抑制作用。为了进一步揭示其抑菌机理,通过菌体裂解、硫酸铵分级盐析、纤维素DE-52阴离子交换柱层析及Sephadex G-100凝胶过滤柱层析,得到一种具有抗菌活性的蛋白。经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）检测结果表明,该蛋白呈单一条带,其分子质量约为17.6?kDa。粗提蛋白溶液具有一定热稳定性,在不同pH值条件下稳定,对有机试剂、紫外照射、蛋白酶不敏感。50?mg/mL的Tween-80处理粗提液,活性比对照增加了12.5%,对还原剂SDS和二硫苏糖醇敏感。     

绿色木霉菌代谢产物抑制芒果炭疽菌特性研究

目的:研究绿色木霉菌代谢产物抑制芒果炭疽菌的特性.方法:采用体外抑菌试验研究绿色木霉菌代谢产物最适抑菌浓度以及温度、pH值、柠檬酸对其抑菌作用的影响.结果:绿色木霉菌浓缩发酵液稀释1.25倍的溶液抑菌率最高;培养前期(48 h前)温度18～28℃,培养后期(48 h后)温度升高到38℃,分段控制培养温度可有效发挥绿色木霉菌发酵液对炭疽菌的抑制作用;培养基pH 5～7时绿色木霉菌发酵液抑菌效果最好;将3％的柠檬酸溶液添加到PDA培养基中,对绿色木霉菌发酵液的抑菌作用有增强效果,抑菌作用强且持久.结论:绿色木霉菌代谢产物显著抑制了炭疽病菌的生长.本研究结果为绿色木霉菌代谢产物抑制芒果采后炭疽菌控制技术提供了试验依据.     

中草药提取液与淀粉复合膜在晚大新高梨的应用研究

为探讨中草药提取物与淀粉复合膜对晚大新高梨贮藏效果的影响,采用菌丝生长速率法探讨中草药提取物对引起梨轮纹病和梨黑星病两种贮藏病害病原菌的抑制作用,并探讨中草药提取液与淀粉复合膜对晚大新高梨贮藏效果的影响。结果表明:中草药以虎杖、黄苓和苦参等3种抑菌材料为原料的提取混合液对引起采后梨常见的贮藏病害梨轮纹病和梨黑星病害有一定抑制作用,而且随着提取液浓度的增加,抑制作用越强。中草药提取液和淀粉复合膜涂膜处理能延长晚大新高梨的贮藏寿命,使果实内呼吸强度、硬度和Vc含量变化明显低于对照组,延缓果实的物质消耗,减少果实与贮藏环境的物质交换,由于中草药中活性成分的作用抑制病原菌生长,减少果实腐烂;膜的特性及其对果实酶的诱导作用,有效抑制果实的呼吸强度,提高SOD活性,从而达到保鲜目的。