LC-MS/MS法测定人血浆中紫杉醇的浓度

目的建立一种液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)的方法,测定人血浆中紫杉醇的药物浓度。方法色谱柱:Diamonsil C18柱(50 mm×2.1 mm I.D,粒径5μm,北京迪马公司),流动相:乙腈-水-甲酸(体积比为55.0∶45.0∶0.1),采用沉淀蛋白法,以多反应离子监测(multiple reaction monitoring,MRM)扫描方式进行检测,测定肿瘤患者静脉滴注紫杉醇注射液后血浆中的药物浓度。结果血浆中紫杉醇的药物浓度在20.0⁵ 000.0μg·L-1以内时,其线性关系良好,相关系数r=0.995 4;日内和日间精密度RSD≤13.4%;紫杉醇的平均提取回收率为93.6%5 000.0μg·L-1以内时,其线性关系良好,相关系数r=0.995 4;日内和日间精密度RSD≤13.4%;紫杉醇的平均提取回收率为93.6%¹08.5%,紫杉醇的基质效应为102.4%108.5%,紫杉醇的基质效应为102.4%¹05.4%,紫杉醇在人血浆中主要药动学参数如下:t1/2为(5.1±3.0)h,ρmax为(3.8±0.5)mg·L-1,AUC0-36为(13.2±2.6)mg·h·L-1,AUC0-∞为(13.3±2.8)mg·h·L-1。结论该方法适用于紫杉醇在人体内的药物动力学研究。     

RP-HPLC法测定大鼠血浆中多烯紫杉醇的含量

目的建立大鼠血浆样品中多烯紫杉醇的液-液萃取RP-HPLC测定法。方法大鼠血浆样品经乙腈-氯代正丁烷(体积比为1∶4)提取,以地西泮(diazepam)为内标物,流动相采用水-甲醇-四氢呋喃-氨水(甲酸调pH)系统进行梯度洗脱,流速为1.0 mL.min-1,色谱柱为Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),UV检测波长为232 nm。结果多烯紫杉醇在50~10 000μg.L-1内线性关系良好,定量下限为50μg.L-1,提取回收率为70.2%~79.0%。结论HPLC法适用于大鼠血浆中多烯紫杉醇浓度的测定及药物动力学研究。     

高效液相色谱法测定人血浆中多西紫杉醇浓度

目的:建立血浆中多西紫杉醇浓度的高效液相色谱测定方法。方法:以地西泮为内标,血浆样品经叔丁基甲醚3次提取,采用大连依利特C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱分析柱;流动相为乙腈-水(47∶53);流速为1.0mL.min-1;检测波长为230nm;进样量为50μL。结果:地西泮和多西紫杉醇的保留时间分别是10.9min和13.2min,多西紫杉醇的最低检测质量浓度为20μg.L-1,血浆样品质量浓度在0.25～16.5mg.L-1范围内与峰面积比线性关系良好,回归方程为C=10.117X 0.428,r=0.9998(n=7),提取回收率为87.24%～92.64%(n=5),方法回收率为97.52%～101.44%,日内RSD为3.6%,2.4%,0.79%,日间RSD为3.8%,2.7%,1.4%,且稳定性良好。结论:本方法简便灵敏,干扰小,可用于多西紫杉醇血药浓度的测定。     

天麻素在大鼠体内的药物动力学

目的建立HPLC法测定中药复方天麻头风灵胶囊灌胃后大鼠血浆中天麻素(gastrodin,Gas)的浓度,并研究Gas在大鼠体内的药物动力学。方法Wistar雄性大鼠6只,灌胃给药后不同时间点眼眶采血,血浆样品用体积分数6%高氯酸溶液沉淀蛋白,取上清液进样分析,以间苯三酚为内标物,色谱柱为Diamonsil C18柱(200mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(体积比28∶972),流速为1.0mL·min-1,柱温为35℃,检测波长为221nm。结果Gas质量浓度在25¹0 000μg·L-1内与峰面积呈良好线性关系(r=0.998 1),日间和日内精密度RSD均小于6.5%,提取回收率大于69.4%。主要药物动力学参数为:ρmax=(1 100±283)μg·L-1,tmax=(0.5±0.2)h,t1/2=(0.39±0.07)h,AUC0→t=(1 365±341)μg·h·L-1,AUC0→∞=(1 377±346)μg·h·L-1。结论在考察浓度范围内,Gas在大鼠体内符合线性动力学过程。     

HPLC法测定大鼠血浆中色胺酮的浓度及药代动力学参数

目的建立测定血浆中色胺酮含量的HPLC法,并用于色胺酮在大鼠体内的药代动力学研究。方法采用ODSC18色谱柱(4.6 mm×250 mm),流动相为乙腈∶水(47∶53),流速为1.0 ml.min-1,检测波长为251 nm,柱温30℃,进样量20μl,内标物为桂皮醛。按56 mg.kg-1剂量给大鼠灌胃后,用HPLC法测定给药后不同时刻大鼠血浆中色胺酮的浓度。采用DAS 2.1.1软件分析,计算药动学参数。结果色胺酮在0.0183～1.1712 mg.L-1范围内线性关系良好(r2=0.999),最低定量限为0.02 mg.L-1。回收率大于95.0%,其日内、日间RSD均小于8%。大鼠灌胃色胺酮56mg.kg-1后,♀和♂T12分别为4.314和5.597 h,Tmax分别为5.2和4.6 h,Cmax分别为1.887和2.620 mg.L-1,AUC0→t分别为12.1和14.70 mg.h.L-1。结论本方法操作简便,准确,灵敏度高、重复性好,可用于色胺酮血药浓度检测及药代动力学研究。     

自制多西紫杉醇脂质体在家兔肝组织中浓度的测定

目的:建立以固相萃取-效液相色谱法(SPE-HPLC)测定家兔肝组织匀浆中多西紫杉醇的方法,考察自制多西紫杉醇脂质体家兔耳缘静脉给药24 h后在肝组织中的浓度.方法:以地西泮为内标,家兔肝组织匀浆样品中多西紫杉醇经固相萃取后,采用大连依利特Hypersil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱分析柱,流动相为乙腈-水(47:53),流速1.0 mL·min-1,检测波长230 nm,进样量50μL.家兔耳缘静脉注射给予多西紫杉醇脂质体制剂,剂量为7.5 mg·kg-1,24 h后解剖动物,用所建立的HPIC法测定其肝组织中药物浓度.结果:地西泮和多西紫杉醇的保留时间分别是10.9 min和13.1 min,多西紫杉醇的最低检测质量浓度为5μg·L-1(S/N=3),肝组织样品中多西紫杉醇在0.025 1.5 mg·L-1范围内与峰面积比之间线性关系良好,回归方程为Y=196.42C-0.642 4,γ=0.999 2(n=7),提取回收率为81.36%～86.72%,方法回收率为91.37%～100.34%,日内RSD为2.72%,3.20%,3.55%,日间RSD为4.68%,4.47%,3.52%,且稳定性良好.实测6例多西紫杉醇脂质体在家兔肝组织中的质量浓度为0.039～0.063 mg·L-1.结论:本试验建立的方法简便灵敏,干扰小,重复性好,可实际应用于多西紫杉醇在家兔肝组织中的测定,并作为评价多西紫杉醇脂质体在靶组织分布的方法学依据.     

HPLC荧光和质谱两种检测器测定大鼠血浆及组织中的表阿霉素

目的 建立测定大鼠血浆及组织中表阿霉素浓度的方法.方法 采用RP-HPLC荧光和质谱两种检测器,Lima C18(2)分析柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.01 mol·L-1乙酸铵-乙腈(60:40,甲酸调pH3.5),流速0.6 ml·min-1,样品在碱性条件下,用乙酸乙酯漩涡混合提取浓集后进样,λEx=450 am,λEm=530 nm,质谱以MRM模式测定,内标法定量.结果 荧光检测标准曲线在2.44～2.50×103μg·L-1有良好线性,定量限2.44μg·L-1,日内RSD小于5.0%,日间RSD小于8.6%,方法回收率99%～113%,萃取回收率86.8%～89.7%;质谱检测标准曲线在0.49～2.00×103μg·L-1有良好线性,定量限0.49μg·L-1,日内RSD小于6.5%,日间RSD小于8.7%,方法回收率98～5%.结论 所建方法快速简便、灵敏准确,适用于血浆及组织中表阿霉素的测定及药物动力学研究.     

HPLC法测定人血浆中奥沙普秦含量及其药物动力学

目的建立HPLC法测定人血浆中奥沙普秦(oxaprozin,Oxa)浓度的方法,并研究其在健康受试者体内的药物动力学。方法采用固相萃取法提取样品,以布洛芬为内标物,采用Diamonsil-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-20 mmol·L-1醋酸铵水溶液(pH=3.0±0.2)(体积比为63∶27),流速为1.0 mL·min-1,柱温为30℃,检测波长为280 nm。结果 Oxa在0.5¹50.0 mg·L-1内与峰面积呈良好线性关系(r=0.996 9),日间和日内精密度RSD均小于6.5%,提取回收率大于68.4%。主要药物动力学参数为:ρmax(84±12)mg·L-1,tmax(3.2±1.4)h,t1/2(49±4)h,AUC0→t(2 383±327)mg·h·L-1,AUC0→∞(2 468±346)mg·h·L-1。结论 HPLC法适用于临床测定奥沙普秦在人体中的浓度。     

HPLC检测大鼠血浆中姜黄素的浓度及其药动学研究

目的建立大鼠血浆姜黄素检测的高效液相色谱方法,研究姜黄素的药动学。方法血浆经乙酸乙酯萃取,以ZORBAX SB-C18（4.6 mm×150 mm,5μm）为色谱柱;流动相为乙腈-水-0.1%TFA（50∶30∶20）,流速为1.0 mL.min-1;检测波长为302（0～5.5 min）、426 nm（5.5～7.5 min）。6只SD大鼠,♂,单剂量静脉给予10 mg.kg-1姜黄素,分别在给药后多点尾静脉采血。用该方法检测血浆中姜黄素的浓度;用DAS计算药动学参数。结果姜黄素浓度在0.05～6.00 mg.L-1内线性关系良好（r=0.999 8）;定量下限为0.05 mg.L-1;低（0.10 mg.L-1）、中（1.00 mg.L-1）、高（4.00 mg.L-1）3个浓度的回收率分别为（99.3±5.4）%,（104.2±4.7）%和（99.8±2.0）%;日内RSD分别为4.49%,3.90%和1.72%,日间RSD分别为4.61%,4.27%和2.00%。大鼠姜黄素静脉注射后,姜黄素在大鼠体内符合二室模型;α相和β相消除半衰期分别为0.08 h和0.75 h。结论本方法准确可靠、简便快速,适用于大鼠血浆姜黄素浓度的测定及其药代动力学研究。     

萝芙木中育亨宾大鼠体内药物动力学

目的建立育亨宾在大鼠体内的高效液相色谱测定方法,测定萝芙木中育亨宾在静脉注射后大鼠体内的药物动力学行为。方法采用大连中汇达Hypersil-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-体积分数为0.05%的三乙胺水溶液(体积比为75:25)为流动相,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为280 nm。大鼠静脉注射育亨宾1 mg.kg-1后,于不同时间点眼眶采血,HPLC法测定其血药浓度,经DAS2.1.1版药动学软件处理得到药动学参数。结果大鼠血浆中育亨宾的线性范围为0.10～3.00 mg.L-1(r=0.995 2),定量下限为0.10 mg.L-1。tmax为0.083 h,ρmax为(2.095±0.302)mg.L-1,AUC0-t为(2.423±0.417)g.h.L-1,AUC0-∞为(2.634±0.412)g.h.L-1。Cl为(0.389±0.072)L.h-.1kg-1。结论建立的大鼠血浆中育亨宾含量的HPLC测定方法适合萝芙木中育亨宾大鼠体内的药物动力学研究;育亨宾静脉注射后消除较快。     

蛋白沉淀-HPLC法测定大鼠血浆中多西他赛的含量

目的建立大鼠血浆中多西他赛含量测定的方法。方法采用蛋白沉淀-HPLC法。色谱柱:Hypersil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);沉淀剂:体积分数80%的甲醇;流动相:甲醇-乙腈-水(体积比35∶40∶25);流速:1 mL.min-1;检测波长:233 nm。结果血浆中多西他赛检测方法的线性范围为0.05~50.0 mg.L-1,定量下限为50μg.L-1;血浆中多西他赛的提取回收率为87.80%,日内RSD<5.5%,日间RSD<8.5%。结论本法可用于多西他赛的药物动力学研究。     

HPLC法同时测定舒胆胶囊中4种蒽醌类成分的含量

目的建立同时测定舒胆胶囊中大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚含量的方法,完善现有质量标准。方法采用HPLC法。用Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm)分离,用甲醇-水-磷酸(体积比84∶16∶0.1)进行等度洗脱,流速为1.0 mL.min-1,柱温为35℃,检测波长为254 nm。结果大黄酸质量浓度在0.220 0~4.400 mg.L-1内、大黄素质量浓度在0.162 0~3.240 mg.L-1内、大黄酚质量浓度在0.520 8~10.42 mg.L-1内、大黄素甲醚质量浓度在0.109 2~2.184 mg.L-1内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.999 7、0.999 9、0.999 8、0.999 9;平均回收率分别为100.5%(RSD=0.84%)、100.4%(RSD=0.51%)、100.8%(RSD=0.29%)、99.8%(RSD=0.47%)。结论本方法简便、快捷,结果准确,重复性好,可作为舒胆胶囊的质量控制方法之一。     

HPLC法测定天麻头风灵胶囊中原儿茶酸紫丁香苷和绿原酸的含量

目的 建立同时测定天麻头风灵胶囊中原儿茶酸、紫丁香苷、绿原酸含量的方法。方法 采用HPLC法。色谱柱为Diamonsil C18 柱(200 mm×4.6 mm, 5 μm),流动相为甲醇-乙腈-0.05 %磷酸溶液(体积比20:5:174),流速为1.0 mL·min-1,柱温为 35 ℃,检测波长为 281 nm。 结果 原儿茶酸、紫丁香苷、绿原酸质量浓度分别在2.40~24.0 mg·L-1、5.20 ~ 52.0 mg·L-1、26.6 ~ 266 mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系,r分别为0.999 6、0.999 7、0.999 5,平均回收率分别为101.0 % (RSD=0.86 % , n= 9)、100.3 % (RSD=1.9 % , n= 9) 、 101.5 % (RSD=1.4 % , n=9)。结论 HPLC法可用于天麻头风灵胶囊的质量控制。     

HPLC法同时测定茵山莲颗粒中绿原酸和原儿茶酸的含量

目的建立同时测定茵山莲颗粒中绿原酸和原儿茶酸含量的方法。方法采用HPLC法。色谱柱为DiamonsiL C18柱(4.6 mm×200 mm,5μm),流动相为乙腈-质量分数为0.2%的磷酸水溶液(体积比10∶90),流速为1.0 mL.min-1,柱温为30℃,检测波长为285 nm,进样量为20μL。结果绿原酸与原儿茶酸质量浓度分别在4.80~43.2 mg.L-1、4.08~36.7 mg.L-1内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为101.8%(RSD=1.0%,n=9)和98.5%(RSD=1.4%,n=9)。结论该方法操作简便准确,重复性好,可作为茵山莲颗粒质量控制方法之一。     

RP-HPLC荧光法测定人尿中巴洛沙星的含量

目的建立反相高效液相色谱荧光法测定人尿中巴洛沙星质量浓度。方法采用DiamonsilODS C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),柱温:室温,流动相:乙腈-0.05 mol.L-1KH2PO4缓冲液(体积比为25∶75,三乙胺和H3PO4调pH为3.4),流速:1.0 mL.min-1。尿液样品用0.1 mol.L-1KH2PO4(KOH调pH为7.0)缓冲液稀释100倍,然后与二氯甲烷旋涡混合后,提取有机层,在40℃条件下氮气吹干,残渣用流动相溶解进样,荧光检测器(λex=295 nm,λem=500 nm)检测,以加替沙星作内标,按内标法定量。结果标准曲线在50~6 000μg.L-1内线性良好,最低检测限为10μg.L-1,巴洛沙星及内标的保留时间分别为5.42、4.05 min,日内和日间RSD均小于10.0%,提取回收率和方法回收率分别在93%~96%和98%~108%。结论本法适用于人尿液中巴洛沙星质量浓度测定及药物动力学研究。     

高效液相色谱法测定人血浆中帕瑞昔布和伐地昔布的浓度

目的建立高效液相色谱法测定人血浆中前体药物帕瑞昔布及其产物伐地昔布的浓度。方法色谱柱为Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,流动相为乙腈-水-磷酸(57∶43∶0.01,V/V/V),流速1.0 mL.min-1,检测波长240 nm;内标为塞来昔布。结果帕瑞昔布的线性方程为Y=0.017 8X-0.022 9(r2=0.999 9),线性范围为1～100 mg.L-1。伐地昔布回归方程为Y=0.315 2X-0.005 1,(r2=0.999 8),线性范围为0.05～5 mg.L-1。帕瑞昔布和伐地昔布日内及日间RSD均小于15%,回收率均大于85%。结论本方法灵敏度高、专一性好、操作简单,可同时检测血浆中帕瑞昔布和伐地昔布,能满足药动学研究需要。     

HPLC法测定中药白英中16-妊娠双烯醇酮的含量

目的用HPLC法测定不同来源白英中16-妊娠双烯醇酮含量。方法选用Apollo C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(体积比为60∶40),检测波长为236 nm,柱温为室温。结果16-妊娠双烯醇酮在5.06~45.54 mg.L-1内呈良好线性关系,平均回收率为98.8(RSD=1.7%,n=9);不同来源的白英药材中16-妊娠双烯醇酮的含量有较大差异,购于上海徐汇、上海蔡同德和上海虹桥中药饮片有限公司的白英中的含量质量分数分别为0.16%、0.16%、0.33%。结论该方法可为白英药材质量控制提供定量依据。     

反相高效液相色谱法快速测定利福平血药浓度

目的建立一种HPLC快速测定人体内利福平血药浓度的方法。方法血清经处理后,采用Diamosil C18柱(250mm×4.6mm,5μm)柱,流动相为甲醇-水-醋酸-三乙胺(60:40:0.3:0.4),用茶碱对照品作内标。检测波长254nm。结果利福平质量浓度在0.327～16.3mg·L-1范围内呈良好的线性关系,高中低3种质量浓度的日内RSD(n=5)分别为2.7%,2.2%和1.4%,日间RSD(n=5)分别为4.4%,3.1%和4.1%。方法平均回收率为99.4%。结论本方法灵敏度高,操作简便快速,结果准确可靠,能满足利福平血药浓度的测定。     

HPLC法同时测定泌感颗粒中盐酸小檗碱和槲皮素的含量

目的建立同时测定泌感颗粒中盐酸小檗碱和槲皮素含量的方法。方法采用HPLC法。用Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm)分离,以乙腈-质量分数3%的磷酸溶液(体积比34∶120,用三乙胺调pH至3.0)等度洗脱,流速为1.0 mL.min-1,柱温为30℃,检测波长为360 nm。结果盐酸小檗碱质量浓度在1.04~10.4 mg.L-1内、槲皮素质量浓度在0.400~4.00 mg.L-1内与峰面积呈良好的线性关系,r分别为0.999 9和0.999 8;平均回收率分别为98.5%(RSD=0.92%)和98.8%(RSD=1.43%)。结论HPLC法可作为泌感颗粒的质量控制方法之一。     

HPLC法同时测定舒胆胶囊中芦荟大黄素和延胡索乙素的含量

目的建立同时测定舒胆胶囊中芦荟大黄素和延胡索乙素含量的方法,为完善现有质量标准提供科学依据。方法采用HPLC法。用Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm)分离,以甲醇-pH6.8磷酸盐缓冲液(体积比70∶30)进行等度洗脱,流速为1.0 mL.min-1,柱温为40℃,检测波长为280 nm。结果芦荟大黄素质量浓度在0.130 0~2.600 mg.L-1内、延胡索乙素质量浓度在4.352~87.04 mg.L-1内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.999 7和0.999 9;平均回收率分别为100.0%(RSD=0.81%)和100.1%(RSD=0.33%)。结论本方法简便、快捷,结果准确,重复性好,可应用于舒胆胶囊的质量控制。