NOD1、SIRT1、IL-1β及 MMP-3与胎膜早破关系的研究 #br#

摘要：目的 探讨胎膜早破（PROM）胎膜组织核苷酸结合寡聚化结构域受体 1（NOD1）及沉默配型信息调节蛋白 1（SIRT1）的表达与羊水中白细胞介素（IL）-1β、基质金属蛋白酶 3（MMP-3）水平的相关性,为深入了解胎膜早破的发 病机制并寻找可能的监测及治疗方法提供指导。方法 90例妊娠妇女分为 3组：足月胎膜早破（tPROM）组、未足月 胎膜早破（pPROM）组及正常足月妊娠（正常对照）组,每组各 30例。胎膜组织 NOD1与 SIRT1表达部位及含量测定 采用免疫组织化学法及 Western blot,羊水中 IL-1β、MMP-3水平检测采用 ELISA方法,分析 NOD1、SIRT1与羊水 IL- 1β及 MMP-3表达的相关性。结果 PROM组 NOD1、IL-1β及 MMP-3表达高于正常对照组（P＜0.05）,SIRT1表达低 于正常对照组（P＜0.05）。pPROM 组 NOD1、IL-1β、MMP-3 表达高于 tPROM 组（P＜0.05）,tPROM 组与 pPROM 组 SIRT1表达差异无统计学意义（P＞0.05）。胎膜组织 NOD1表达与羊水 IL-1β及 MMP-3水平呈正相关（P＜0.01）;胎 膜组织 SIRT1 表达与羊水 IL-1β 及 MMP-3 水平呈负相关（P＜0.01）。结论 胎膜组织中 NOD1 及羊水中 IL-1β 及 MMP-3表达水平升高、胎膜组织中 SIRT1表达水平降低与胎膜早破发生相关,且 4种因子在胎膜早破发病中存在相 关性。     

NOD2、TNF-α、MMP-9及Caspase-3在胎膜早破 发病中的作用及意义

目的 探讨胎膜早破患者胎膜组织核苷酸结合寡聚化结构域受体 2（NOD2）与基质金属蛋白酶-9（MMP- 9）、活化型 Caspase-3蛋白及羊水中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平表达的相关性,为进一步了解胎膜早破的病因学 及治疗途径提供新思路。方法 选择足月胎膜早破、未足月胎膜早破、正常妊娠晚期妇女各 30例,应用免疫组织化 学染色法及蛋白印迹技术检测各组胎膜组织 NOD2、MMP-9及活化型 Caspase-3的蛋白表达部位及水平,ELISA法检 测羊水中 TNF-α水平,并分析四者表达的相关性。结果 胎膜早破组胎膜组织 NOD2、MMP-9、活化型 Caspase-3表 达及羊水 TNF-α水平高于正常妊娠晚期组（P＜0.05）,未足月胎膜早破组 NOD2表达及羊水 TNF-α水平高于足月胎 膜早破组（P＜0.05）,MMP-9及活化型 Caspase-3在足月胎膜早破组胎膜组织中的表达与未足月胎膜早破组相比差 异无统计学意义。胎膜组织中 NOD2表达水平与羊水 TNF-α水平、胎膜组织中 MMP-9及活化型 Caspase-3的表达呈 正相关（均 P＜0.01）。结论 NOD2、TNF-α、MMP-9、活化型 Caspase-3表达水平升高与胎膜早破的发生相关;四者 在胎膜早破发病机制中存在关联。     

胎膜组织中IL-2水平变化与胎膜早破关系的探讨

目的探讨胎膜中Th1因子IL-2水平的变化与胎膜早破的关系。方法免疫组化法检测20例胎膜早破（PROM）孕妇与20例正常孕妇的胎膜组织中Th1因子IL-2表达水平。结果PROM组孕妇胎膜组织中IL-2含量高于正常孕妇组（P〈0.05）,其中,有炎症胎膜早破组IL-2水平高于无炎症胎膜早破组（P〈0.05）。结论PROM孕妇胎膜组织中IL-2水平显著升高,有炎症时IL-2升高水平更加明显。     

白细胞介素-4负调控NF-κB通路抑制炎症反应的机制研究

摘要：目的 探讨白细胞介素（IL）-4 对于脂多糖（LPS）诱导的 Ana-1 细胞髓样分化因子 88（MyD88）/核因子 （NF）-κB信号通路的影响。方法 将小鼠巨噬细胞Ana-1分为LPS组（给予50 μg/L LPS刺激）和LPS+IL-4组（10 μg/L IL-4预培养1 h后,给予LPS 刺激）。在0、0.5、1和2 h时收集细胞培养上清液。采用RT-PCR 检测MyD88和 NF-κB mRNA的相对表达水平;Western blot法检测MyD88、NF-κB总蛋白、NF-κB p65蛋白表达水平;ELISA法检测 NF-κB p65胞核/胞浆比例,以及细胞培养上清液中IL-6和肿瘤坏死因子（TNF）-α含量。结果 随着细胞培养时间 的延长,LPS组MyD88、NF-κB mRNA和蛋白表达水平,NF-κB p65胞核/胞浆比例,IL-6和TNF-α水平均呈逐渐升高 的趋势（P＜0.05）;而 LPS+IL-4 组 MyD88 mRNA 表达水平无明显变化（P＞0.05）,MyD88 蛋白表达水平、NF-κB mRNA和蛋白表达水平、NF-κB p65胞核/胞浆比例、IL-6和TNF-α水平则均呈先升高后降低的趋势（P＜0.05）;LPS+ IL-4组MyD88 mRNA和蛋白表达水平、NF-κB p65胞核/胞浆比例、IL-6和TNF-α水平在1 h和2 h时显著低于LPS组 （P＜0.05）,而2组不同时间点NF-κB mRNA和蛋白表达水平比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 IL-4发挥 抗炎作用可能与抑制MyD88/NF-κB信号通路活化有关,IL-4可下调促炎细胞因子IL-6和TNF-α的表达。     

MMP-9、CollagenIII 在胎膜组织中的表达及意义简

目的探讨基质金属蛋白酶．9（MMP-9）、CollagenⅢ在胎膜组织中的表达及其与胎膜早破之间的关系。方法应用免疫组化分别检测20例足月胎膜早破（tPROM）、20例未足月胎膜早破（pPROM）、10例早产和10例正常足月分娩患者胎膜组织标本中MMP-9、CollagenⅢ的表达,分析其相关性及其与胎膜早破的关系。结果胎膜早破组胎膜组织中,MMP-9的阳性表达率为90％,高于对照组（P〈0．01）。胎膜早破组CLO—Ⅲ的阳性表达率为30％,低于对照组P〈0．05）,MMP-9的表达与CollagenⅢ的表达呈负相关（r=-0．612,P〈0．05）。结论MMP-9的高表达及CollagenⅢ的减少可能与胎膜早破的发生有关。     

锌指蛋白A20对大鼠急性重症胰腺炎LPS-TLR4信号通路的影响

目的 研究锌指蛋白A20对大鼠急性重症胰腺炎LPS-TLR4信号通路的影响.方法 采用5％牛磺胆酸钠溶液胰胆管注射诱发急性重症胰腺炎（SAP）大鼠模型,24只大鼠按数字表法随机分为三组.A组（假手术组）、B组（SAP模型组）、C组（SAP＋ LPS组）,每组8只.免疫组织化学法检测胰腺组织TLR4、NF-κBp65和p38MAPK的水平.结果 与A组相比,B、C组胰腺组织中锌指蛋白A20表达明显下降（t=17.234、19.698,均P＜0.05）,而TLR4、NF-κBp65和p38MAPK表达均明显增加（t=15.909、20.432、16.543、18.629、22.105、19.006,均P＜0.05）.C组与B组相比锌指蛋白A20表达明显下降（t=14.894,P＜0.05）,而TLR4、NF-κBp65和p38MAPK表达均明显增加（t=14.047、15.582、17.070,均P＜0.05）.结论 SAP时胰腺锌指蛋白A20的表达减少,对LPS-TLR4通路的抑制作用减弱,使胰腺损伤加重.     

白细胞介素-6及C反应蛋白检测对预测胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎的意义

目的 探讨检测母血白细胞介素-6（IL-6）及C反应蛋白（CRP）对因胎膜早破（PROM）而导致的绒毛膜羊膜炎（CMA）早期预测的意义.方法 采集胎膜早破孕妇的血清测定IL-6及CRP含量,并对产妇的胎盘及胎膜采样进行病理检查.结果 （1）PROM合并CMA者,母血IL-6、CRP含量明显升高（P＜0.01）.（2）随着破膜时间的延长,母血IL-6及CRP的水平明显升高（P＜0.01）.（3）母血IL-6≥11 ng/L、CRP≥10 mg/L为预测诊断PROM合并早期CMA的阳性率高.结论 母血IL-6及CRP水平的监测对PROM合并CMA有一定的早期诊断意义.     

C反应蛋白和白细胞介素-6与胎膜早破绒毛膜羊膜炎的关系

目的探讨胎膜早破孕妇血清及羊水中白细胞介素-6（IL-6）和血清中C反应蛋白（CRP）含量与绒毛膜羊膜炎的关系。方法胎膜早破孕妇40例（胎膜早破组）及正常孕妇40例（对照组）各取羊水及肘静脉血5ml,经离心处理后取上清液及血清,检测其血清IL-6和CRP含量,以及羊水中IL-6含量,同时2组均取胎膜行病理检查。结果胎膜早破孕妇血清IL-6和母血CRP含量水平均较对照组高,尤其是以羊水中IL6水平升高更为敏感（P〈0.05）。绒毛膜羊膜炎患者18例,其血清、羊水中IL-6和血清CRP含量水平均明显高于非绒毛膜羊膜炎患者（P〈0.05或P〈0.01）。结论胎膜早破孕妇血清、羊水中IL-6和血CRP水平对诊断绒毛膜羊膜炎有临床应用价值。     

MIF和IL-6与胎膜早破关系的研究

目的探讨胎膜早破时巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在胎膜的表达和母血中白细胞介素-6(IL-6)的水平及其二者与绒毛膜羊膜炎之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测60例足月胎膜早破(PROM)分娩组和40例足月非PROM分娩组胎膜中MIF的分布和表达,采用ELISA法检测两组孕妇血清IL-6含量,采用HE染色的方法确诊绒毛膜羊膜炎。结果 PROM组胎膜MIF表达和母血IL-6含量明显高于对照组。PROM组胎膜MIF表达和母血IL-6含量随着破膜时间延长升高。PROM绒毛膜羊膜炎组胎膜MIF表达和母血IL-6含量明显高于PROM非绒毛膜羊膜炎组。结论 MIF和IL-6在胎膜早破的发病机制中起着重要的作用,MIF及IL-6与绒毛膜羊膜炎关系密切。     

孕妇血清一氧化氮水平与胎膜早破和绒毛膜羊膜炎的关系

目的 探讨血清NO水平与胎膜早破(PROM)及绒毛膜羊膜炎的关系.方法 将78例胎膜早破孕妇按照实际情况分为早产合并胎膜早破(pPROM)组33例和足月胎膜早破(tPROM)组45例,50例临产前剖宫产的胎膜完好孕妇为正常对照组,分析比较3组血清NO水平,观察3组发生绒毛膜羊膜炎的情况及绒毛膜羊膜炎患者血清NO水平.结果 pPROM组和tPROM组血清NO水平相近,均高于正常对照组,差异有统计学意义[(85±26)μmol/L、(83±21)μmoL/L比(60±16)μmoL/L,P＜0.05];pPROM组和tPROM组绒毛膜羊膜炎发生率高于正常对照组,差异有统计学意义[33.3%(11/33)、31.1%(14/45)比4.0%(2/50)];绒毛膜羊膜炎患者血清NO水平明显高于非绒毛膜羊膜炎患者,差异有统计学意义[(109±39)μmol/L比(73±33)μmol/L,P＜0.05].结论 血清NO水平的增高可能预示绒毛膜羊膜炎及胎膜早破的存在.

Abstract：

Objective To study the relationship between the level of nitric oxide(NO) in blood and premature rupture of membranes (PROM) and chorioamnionitis. Methods The 78 cases of premature rupture of membranes were divided into two groups according to the actual situation. The group of preterm premature rupture of membranes (pPROM) included 33 patients and the full-term premature rupture of membranes (tPROM) group had 45 patients. Fifty intact membranes' pregnant women who chose cesarean section before labor were selected as the normal control group. The levels of serum NO and the occurrence of chorioamnionitis were analyzed and compared among the three groups. Results The blood serum NO level was similar in PROM group and tPROM group but higher than that of the normal control group[(85 ±26)μmol/L, (83±21)μmol/L vs (60 ±16)μmol/L, P＜0.05]. The incidence of chorioamnionitis in PROM group and tPROM group was higher than that of the normal control group. The blood serum NO level of chorioamnionitis group was higher than that of the non-chorioamnionitis group [(109 ± 39)μmol/L vs (73 ± 33) μmol/L, P＜0. 05]. Couclusion The level of blood serum NO may predict PROM and chorioamnionitis.     

Toll样受体4在棕榈酸诱导RAW264.7巨噬细胞 炎症反应中的作用及机制

目的 探讨 Toll 样受体 4（TLR4）在棕榈酸诱导 RAW264.7 巨噬细胞炎症反应中的作用及可能机制。方 法 观察正常对照组（正常饮食）和高脂饲料组（高脂饮食诱导肥胖小鼠模型）C57BL/6J 小鼠血清自由脂肪酸（FFA） 水平及内脏脂肪组织炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和单核细胞趋化蛋白-1（MCP- 1）的表达;采用棕榈酸（150 μmol/L 组和 300 μmol/L 组）刺激小鼠 RAW264.7 巨噬细胞,观察这 2 组和空白对照 （Control）组、无 FFA 牛血清白蛋白（BSA）组的 TNF-α、IL-6 和 MCP-1 的表达和分泌,同时检测 TLR4 的蛋白表达和 核因子-κB（NF-κB）的激活情况;利用 siRNA 干扰实验抑制 TLR4,观察在 Control 组、BSA 组、棕榈酸（300 μmol/L） 组、棕榈酸（300 μmol/L）+Control siRNA 组、棕榈酸（300 μmol/L）+TLR4 siRNA 组中棕榈酸诱导巨噬细胞炎症因子的 表达和分泌。结果 高脂饲料组体质量和 Lee’s 指数高于正常对照组,血清中 FFA 水平升高,内脏脂肪组织中 TNF-α、IL-6 和 MCP-1 的表达明显增加（P＜0.05）。与 BSA 组比较,棕榈酸 150 μmol/L 组和棕榈酸 300 μmol/L 组 炎症因子 TNF-α、IL-6 和 MCP-1 的表达和分泌均明显增加,TLR4 和 NF-κB p65 磷酸化蛋白水平均增加（P＜0.05）。 与 BSA 组比较,棕榈酸 300 μmol/L 组 NF-κB p65 的核转运水平和细胞内水平明显升高（P＜0.05）。TLR4 被抑制 后,棕榈酸+TLR4 siRNA 组的 TLR4、TNF-α、IL-6 和 MCP-1 的 mRNA 表达和分泌水平明显低于棕榈酸组（P＜ 0.05）。结论 TLR4 可能参与棕榈酸诱导的 RAW264.7 巨噬细胞炎症反应,诱导炎症因子 TNF-α、IL-6 和 MCP-1 的释放,且其介导的炎症反应与 NF-κB 的激活有关。     

宫颈病变组织中PKR与NF-κB p65的表达与磷酸化观察

【摘要】 目的 探讨宫颈病变组织内蛋白激酶R（PKR）、核因子（NF）-κB p65的表达及磷酸化的意义,高危型人乳头状瘤病毒（hsHPV）对两者表达及磷酸化的影响,以及三者的关系。 方法 以67例宫颈癌、149例宫颈上皮内瘤样病变（CINⅠ~Ⅲ）、15例正常人宫颈组织为观察对象。检测各组hsHPV阳性表达情况,采用免疫组化SP法检测组织内PKR、磷酸化型PKR（p-PKR）、NF-κB p65和磷酸化型NF-κB p65（p-NF-κB p65）在上述分组中的表达。 结果 231例中hsHPV阳性136例,阴性95例。胞浆中PKR、p-PKR在hsHPV阳性组的表达低于hsHPV阴性组（27.2%和11.0%vs41.1%和21.1%,χ²分别为4.858、4.371,均P＜0.05）,在胞浆和胞核中NF-κB p65、p-NF-κB p65在hsHPV阳性组的表达高于hsHPV阴性组（46.3%、25.7%、22.8%和12.5%vs32.6%、14.7%、11.6%和4.2%,χ²分别为4.345、4.048、4.729、4.650,均P＜0.05）;在胞浆和胞核中NF-κB p65（+）组PKR的阳性表达率低于NF-κB p65（-）组（25.5%vs38.0%和20.4%vs36.3%,χ²分别为3.898、4.396,P＜0.05）,p-NF-κB p65（+）组在胞浆中PKR的阳性表达率低于pNF-κB p65（-）组（19.0%vs36.0%,χ²=4.462,P＜0.05）。结论 hsHPV可能抑制PKR的表达及磷酸化而促进NF-κBp65的表达及磷酸化,NF-κB p65的表达及磷酸化对PKR的表达可能有抑制作用;三者间的调节作用可能与宫颈癌的发生发展有关。     

Toll样受体4在胎膜早破中的表达及意义

目的：探讨Toll样受体4（TLR4）在胎膜早破中的表达及意义。方法选择100例早产胎膜早破孕妇设为PPROM组,100例足月胎膜早破孕妇设为PROM组,100例足月正常孕妇作为对照组,采用免疫组织化学法检测胎膜破裂口处胎膜组织TLRs的分布与表达。结果胎膜组织中TLR4的表达, PPROM组与PROM组比较差异无统计学意义;PROM组与对照组比较差异有统计学意义;PPROM组与对照组比较差异有统计学意义。结论 Toll样受体4在胎膜早破孕妇中高表达,为胎膜早破的早期诊断提供更敏感的信号指标。     

白藜芦醇对H2O2 及TGF-β2诱导人小梁网细胞的影响及机制探讨

摘要： 目的 观察过氧化氢 （H2O2 ） 及转化生长因子 （TGF） -β2 诱导人小梁网细胞 （HTMCs） 后对纤维连接蛋白（FN）、 胶原蛋白 1 型 （COL1）、 核因子 （NF） -κB P65 蛋白和白细胞介素 （IL） -1β基因表达的影响及白藜芦醇 （RSV） 的干预作用。方法 （1） 选取汇合度 70%～80%的 HTMCs 分为 5 组。实验组于无血清培养基中分别加入浓度为 150、 300、 450、 800 μmol/L 的 H2O2 处理, 对照组的培养基中不加 H2O2。Western blot 法检测各组 FN、 COL1、 NF-κB P65、 NF-κB P65 磷酸化 （P-NF-κB P65） 蛋白的表达, 实时定量 PCR 法检测 IL-1β基因的表达。（2） HTMCs 细胞分为 3 组。对照组以不含 H2O2 及 RSV 的无血清培基处理, H2O2 组以 300 μmol/L 的 H2O2 处理, H2O2+RSV 组同时加入 300 μmol/L 的 H2O2 及 25 μmol/L 的 RSV 处理。检测各组上述蛋白和基因的表达情况。免疫荧光检测各组 NF-κB P65 在 HTMCs 中的定位。（3） HTMCs 细胞分为 3 组。对照组以不含 TGF-β2 及 RSV 的无血清培基处理, TGF-β2 组以 5 μg/L 的 TGF-β2 处理, TGF-β2+RSV 组为同时加入 5 μg/L 的 TGF-β2 及 25 μmol/L 的 RSV 处理。检测各组上述蛋白和基因的表达情况。结果 （1） 与对照组比较, 150、 300、 450、 800 μmol/L 组 FN 和 P-NF-κB P65 蛋白表达水平均增高, 300、 450、 800 μmol/L 组 COL1 蛋白和 IL-1β基因表达水平增高 （P < 0.05）, 其他指标比较差异均无统计学意义。（2） H2O2 组较对照组 FN、 COL1、 P-NF-κB P65 蛋白和 IL-1β基因表达水平均增高, 而 H2O2+RSV 组较 H2O2 组上述指标均降低, H2O2+RSV 组较对照组仅 IL-1β降低 （P < 0.05）。对照组仅细胞质表达 NF-κB P65, H2O2 组细胞胞质及核中均有 NF-κB P65 表达, 且核中表达较多; H2O2+RSV 组细胞胞质中表达 NF-κB P65 较核中多。（3） TGF-β2 组较对照组 FN、 COL1、 P-NF-κB P65 的蛋白和 IL-1β基因水平表达均增高 （P < 0.05）, TGF-β2+RSV 组较 TGF-β2 组上述指标均降低 （P < 0.05）。 结论 H2O2 和 TGF-β2 能上调 HTMCs 的 FN、 COL1、 P-NF-κB P65 蛋白及 IL-1β基因的表达, 可能参与青光眼的发生发展过程。RSV 能抑制H2O2和 TGF-β2对HTMCs 的影响, 对青光眼发挥一定的保护作用。     

H2S对尿源性脓毒血症肾损伤的影响

【摘要】目的 探讨硫化氢（H2S）对尿源性脓毒血症肾损伤的影响及其机制。 方法 将30只大白兔随机分成Control组;Sham组;sepsis组;NaHS2.8umol/kg组; NaHS8.4umol/kg组,每组6只。建立上尿路急性梗阻并感染脓毒血症动物模型。采血行外周血细胞计数分析(WBC)、肾功能(Cr、BUN）。肾组织光学显微镜及透射电子显微镜观察形态结构变化;应用免疫组织化学法检测肾组织TNF-α、IL-10、NF-κB的蛋白表达;亚甲基蓝分光光度计法测肾组织胱硫醚-γ-裂解酶 (cystathionine-γ-lyase, CSE)的活性,采用去蛋白法测定血浆H2S浓度。 结果 sepsis组WBC、Cr、Bun明显高于control组（P＜0.05）,NaHS组WBC、Cr、Bun水平较sepsis组明显下降（P＜0.05）。NaHS组肾病理形态损害较sepsis组改善。sepsis组肾组织TNF-α、IL-10、NF-κB蛋白表达增强(P < 0.05). NaHS 组TNF-α和NF-κB蛋白表达较sepsis组下降,而IL-10表达明显增强 (P < 0.05)。 sepsis组血浆H2S浓度及肾组织CSE活性明显降低(P<0.05)。NaHS 组血浆H2S浓度升高 (P < 0.05),且NaHS 8.4 umol/kg组较NaHS 2.8umol/kg组升高明显。 结论 内源性硫化氢通过抑制NF-κB的表达,下调TNF-α,上调IL-10,减轻尿源性脓毒血症肾损伤。      

母血及羊水中TIM-3、GATA-3水平对胎膜早破合并宫内感染的诊断价值

目的 分析母血及羊水中T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(TIM-3)、GATA结合蛋白3(GATA-3)水平对胎膜早破（PROM）合并宫内感染的诊断价值。方法 选择PROM患者89例作为研究对象，发生宫内感染者42例作为感染组，未发生宫内感染者47例作为未感染组，并选择同期正常足月孕妇45例作为对照组。根据宫内感染严重程度将PROM合并宫内感染患者分成轻度组16例、中度组17例、重度组9例。检测血、羊水中TIM-3、GATA-3mRNA及蛋白水平，比较对照组、未感染组、感染组和不同感染程度孕妇血、羊水中TIM-3、GATA-3 mRNA及蛋白水平，受试者工作特征曲线分析血清及羊水中TIM-3、GATA-3蛋白单独及联合诊断PROM孕妇发生宫内感染的效能。结果 对照组、未感染组、感染组血及羊水中TIM-3 mRNA、蛋白水平依次升高（P<0.05）,GATA-3 m RNA、蛋白水平依次降低（P<0.05）；轻度组、中度组、重度组血及羊水中TIM-3 mRNA、蛋白水平依次升高（P<0.05）,GATA-3mRNA、蛋白水平依次降低（P<0.05）；血清TIM-3、...     

新型冠状病毒非结构蛋白NSP13通过调控IκBα蛋白降解抑制NF-κB信号通路

目的 研究新型冠状病毒非结构蛋白13(NSP13)调控NF-κB信号通路的作用机制。方法 利用GV367-NSP13-FLAG慢病毒感染的方法制备高表达NSP13的A549细胞（A549-NSP13）和A549对照组,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和ELISA检测NF-κB下游细胞因子白细胞介素6(IL-6)和趋化因子5(CCL-5)表达水平;Western印迹法检测NF-κB信号通路P65、磷酸化P65和NF-κB抑制因子α(IκBα)蛋白表达。放线菌酮10 mg·L-1处理细胞0,15,30,45,90和120 min,Western印迹法检测IκBα蛋白半衰期。结果 与A549对照组相比,A549-NSP13细胞检测到FLAG标签蛋白条带,且NSP13 mRNA表达显著上调（P<0.01）,表明A549-NSP13细胞系构建成功。与A549对照组相比,A549-NSP13细胞IL-6 mRNA和蛋白表达水平（P<0.01）及CCL-5 mRNA和蛋白表达水平（P<0.05,P<0.01）均显著降低;磷酸化P65蛋白表达下降（P<0.01）,而...     

鬼针草总黄酮通过ERK1/2/NF-κB通路减轻局灶性脑缺血大鼠认知功能障碍

摘要：目的 探讨鬼针草总黄酮（TFB）对局灶性脑缺血大鼠认知功能的影响及可能的作用机制。方法 72只大 鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组（1 mg/kg尼莫地平）、低剂量TFB组（25 mg/kg）、中剂量TFB组（50 mg/kg）、 高剂量TFB组（100 mg/kg）,每组12只。采用改良线栓法建立局灶性脑缺血大鼠模型。Morris水迷宫实验检测大鼠 学习和记忆能力,尼氏染色观察大鼠海马组织病理结构变化,酶联免疫吸附法检测海马组织脑源性神经营养因子 （BDNF）、神经生长因子（NGF）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量,Western blot 检测海马组织细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）1/2、p-ERK1/2、核转录因子（NF）-κB p65和p-NF-κB p65蛋白表达。 结果 与假手术组比,模型组大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,海马组织BDNF和NGF含量均降低,IL-1β、 IL-6和TNF-α含量以及p-ERK1/2和p-NF-κB p65蛋白表达水平均升高（P＜0.05）。与模型组比,第2天之后高剂量 TFB组和阳性对照组大鼠平均逃避潜伏期均降低（P＜0.05）,中、高剂量TFB组和阳性对照组大鼠穿越平台次数增 加,海马组织BDNF和NGF含量升高（P＜0.05）,IL-1β、IL-6和TNF-α含量以及p-ERK1/2和p-NF-κB p65蛋白表达 水平均降低,具有剂量依赖性（P＜0.05）。阳性对照组和高剂量TFB组大鼠各检测指标比较差异无统计学意义（P＞ 0.05）。结论 TFB可改善局灶性脑缺血大鼠的认知功能,其作用机制可能与抑制ERK1/2/NF-κB信号通路的传导 有关。     

水通道蛋白1与羊水量的关系

目的 研究水通道蛋白1(AQP1)与羊水量关系.方法 运用免疫组织化学法分别检测20例羊水过少(A组)、17例羊水过多(B组)、22例羊水正常(C组)的胎盘、胎膜组织中AQP1的表达;同时每组随机抽取10例用免疫印迹法分别检测胎盘、胎膜组织中AQP1的蛋白表达量.结果 AQP1主要在羊膜上皮细胞、平滑绒毛膜细胞滋养细胞、胎盘合体滋养细胞和血管内皮细胞的胞浆中表达.免疫组织化学法结果显示,AQP1在A、B和C组胎膜的表达强度分别为(5.82±1.33)、(7.94±1.85)和(6.75±1.25)(P<0.01);免疫印迹法结果显示,AQP1在胎膜的表达强度分别为(13.35±3.33)、(19.51±2.84)和(16.21±2.45)(P<0.01).胎膜AQP1蛋白表达最随着羊水量的增加相应上调.结论 胎膜中AQP1的表达随着羊水量的增多而增加.AQ21在胎膜的上调节可能促进了羊水的跨膜转运.     

塞来昔布对急性肺损伤大鼠肺组织NF-κB和iNOS的影响

【摘要】目的探讨脂多糖（LPS）所致大鼠急性肺损伤时环氧化酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对肺组织的核因子-κB（NF-κB）p65和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响。方法将60只大鼠随机分为对照组、LPS组、治疗组和塞来昔布组,每组15只。LPS组尾静脉注射LPS（5mg/kg）复制急性肺损伤模型;治疗组注射LPS复制急性肺损伤模型后30min用塞来昔布灌胃（20mg/kg）;塞来昔布组不造模,于相同时间点用相同剂量塞来昔布灌胃;对照组不造模、不给药,给等量的生理盐水;各组均于3h后放血处死动物。采用蛋白质印迹（Western blot）和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法分别检测肺组织COX-2、NF-κB p65、iNOS蛋白及NF-κB p65、iNOS mRNA的表达。结果LPS组与对照组相比COX-2、NF-κB p65和iNOS蛋白及NF-κB p65、iNOS mRNA表达均显著升高（P<0.01）;治疗组NF-κB p65、iNOS mRNA和蛋白表达较LPS组明显降低（P<0.01）。结论选择性COX-2抑制剂塞来昔布对急性肺损伤大鼠有保护作用。