塞来昔布联合奥沙利铂对人肺癌裸鼠移植瘤的治疗作用及其作用机制的研究

目的：研究COX-2抑制剂与化疗药物奥沙利铂对人肺癌裸鼠移植瘤生长、Survivin表达和微血管生成的影响。方法：人肺癌A549细胞接种于裸鼠背部皮下,随机分为四组（对照组;奥沙利铂组;塞来昔布组;奥沙利铂和塞来昔布联合用药组）并给予相应的药物。测量肿瘤体积,42天后处死裸鼠,切取移植瘤组织检测COX-2,VEGF,Sur-vivin表达和微血管密度（MVD）。结果：塞来昔布组和奥沙利铂组抑瘤率分别为34.60%和46.70%,奥沙利铂和塞来昔布联合应用组抑瘤率为66.09%。免疫组织化学染色和RT-PCR结果分析显示：奥沙利铂组COX-2,VEGF表达显著高于对照组（P〈0.05）。微血管密度与对照组比较无显著性差异（P〉0.05）。奥沙利铂组Survivin表达低于对照组,塞来昔布组和联合用药组COX-2,VEGF表达和MVD低于对照组（P〈0.05）。结论：塞来昔布可抑制人肺癌裸鼠移植瘤的生长、Survivin表达和血管生成。塞来昔布与奥沙利铂联合应用提高了奥沙利铂的抗肿瘤效果。     

重组人干扰素a2b联合顺铂对骨肉瘤的作用及其对VEGF表达的影响

目的探讨重组人干扰素a2b联合顺铂对骨肉瘤的作用效果及其对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将32只荷瘤裸鼠随机均分为4组:对照组、干扰素a2b组、顺铂组和联合治疗组。分别在接种后第0、5、10、15、20、25、30天记录肿瘤体积变化和抑瘤率;接种后30 d后处死裸鼠,取裸鼠移植瘤测定重量,采用免疫组化法进行CD34标记,用Weidner方法计数微血管密度(MVD);显微镜下检测细胞凋亡情况;ELISA法检测VEGF水平。结果 4组裸鼠成瘤率均为100%。其中,联合治疗组在接种后第10、15、20、25、30天的肿瘤体积显著低于顺铂组和对照组。联合治疗组的瘤体重量显著低于顺铂组和对照组[(0.733±0.054)g vs.(2.326±0.151)g、(2.419±0.166)g],差异均有统计学意义(均P0.05)。联合治疗组MVD值显著低于顺铂组和对照组[(22.86±2.86)vs.(27.45±1.64)、(31.8±3.12)],联合治疗组移植瘤凋亡指数高于顺铂组和对照组[(45.62±4.24)%vs.(9.66±1.15)%、(10.00±1.28)%],差异均有统计学意义(均P0.05)。干扰素a2b组和联合治疗组的VEGF蛋白表达阳性率分别为20.62%、15.45%,低于顺铂组和对照组(59.24%、68.37%),差异有统计学意义(P0.05)。结论重组人干扰素a2b联合顺铂注射能特异性抑制骨肉瘤裸鼠VEGF的表达、血管生成和肿瘤生长,并能促进肿瘤细胞凋亡。     

沙利度胺对人卵巢癌裸鼠皮下种植瘤抑瘤作用的研究

目的：探讨沙立度胺（反应停,酞咪哌啶酮,thalidomide）对卵巢癌裸鼠皮下种植瘤的生长抑制作用。方法：建立20只卵巢癌裸鼠荷瘤模型,随机分为4组,每组5只：沙利度胺组：按200mg·kg-1d-1,0．2ml腹腔内注射。顺铂组：2mg·kg-1d-1,0．2ml腹腔内注射。联用组：顺铂与沙利度胺联合应用（顺铂2mg·kg-1d-1,沙利度胺200mg·kg-1d-1,各0．2ml腹腔内注射）。生理盐水组：每只0．2ml生理盐水腹腔内注射。4组给药方法均为自肿瘤种植成功后瘤体直径平均为0．8cm,开始给药,给药2周,每周2次,总共注射4次。观察各组裸鼠体重、皮下种植瘤瘤体直径均值（MTD）的变化,以及各组裸鼠的行动、对外界刺激的反应、饮食、及瘤体表面皮肤的变化,测量各组肿瘤的大小。结果：沙利度胺组、顺铂组、联用组荷瘤体积明显小于生理盐水组,差异有统计学意义（P〈0．05）,抑瘤率分别为57．47％、42．18％、71．37％。结论：沙利度胺对卵巢癌皮下种植瘤的生长有抑制作用,与传统的化疗药物顺铂联用,可增强化疗药物作用。     

泌乳素诱导蛋白表达下调对三阴性乳腺癌细胞裸鼠体内成瘤影响研究

目的：探讨泌乳素诱导蛋白（prolactininducibleprotein,PIP）表达下调对三阴性乳腺癌（triplenegativebreastcancer,TNBC）MDA-MB453细胞在裸鼠体内成瘤的影响。方法：采用脂质体将PIPsiRNA转染至乳腺癌MDA_MB453细胞,蛋白质印迹法检测PIP的表达下调情况。采用4周龄BALB／c雌性裸鼠,建立乳腺癌MDA-MB-453细胞裸鼠皮下种植瘤模型,瘤内注射siRNA-脂质体混悬液,观察PIPsiRNA对肿瘤生长的影响。采用免疫组织化学法检测肿瘤组织中CyclinDl和VEGF的表达情况。结果：PIP表达下调后,其在裸鼠体内成瘤能力明显降低,肿瘤平均体积空白对照组为（1075±65）mm2,阴性对照组为（1095±72）mm2,实验组为（473±56）mm2,空白对照组与阴性对照组差异无统计学意义,P=0．719,空白对照组与实验组、实验组与阴性对照组差异均有统计学意义,P〈0．001。空白对照组肿瘤平均体质量为（908士86）mg,阴性对照组为（889±64）mg,实验组为（272±30）mg,空白对照组与阴性对照组差异无统计学意义,P=0．738,空白对照组与实验组、实验组与阴性对照组差异均有统计学意义,P〈0．001。肿瘤生长抑制率为71．1％。免疫组化结果显示,PIP表达下调的肿瘤组织中CyclinD1的相对表达量空白对照组为1535±78,阴性对照组为1594±123,实验组为367±72,空白对照组与阴性对照组差异无统计学意义,P=0．472,空白对照与实验组、实验组与阴性对照组差异均有统计学意义,P〈O．001。VEGF的相对表达量空白对照组为4270±558,阴性对照组为4365±324,实验组为1286±292,空白对照组与阴性对照组差异无统计学意义,P=0．758,空白对照与实验组、实验组与阴性对照组差异均有统计学意义,P〈0．001。结论：下调PIP基因表达可明显抑制乳腺癌MDA-MB-453细胞体内成瘤能力,提示PIP可能在乳腺癌发生和发展中发挥重要作用。     

豆蔻提取物对人胃癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响

[目的]观察豆蔻提取物对人胃癌细胞裸鼠移植瘤的生长和对肿瘤血管生成的影响。[方法]建立人胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤模型（n=24）,随机分成4组（n=6）,对照组、豆蔻组、5-Fu组、联合组,各组按设计剂量给药。测定移植瘤体积、瘤重及抑瘤率;用免疫组化法检测各组移植瘤瘤体中血管内皮生长因子（VEGF）和微血管密度（MVD）的表达情况。[结果]豆蔻组、5-Fu组、联合组的瘤重和瘤体积明显低于对照组（P〈0.05）,3组抑瘤率分别为45.83%、66.96%和77.28%。联合组中VEGF表达率和MVD计数明显低于对照组（P〈0.05）。[结论]豆蔻提取物可抑制胃癌移植瘤的生长,与5-Fu联合应用具有协同作用,其作用机制可能与下调VEGF的表达、减少MVD有关。     

CTX小剂量化疗在抗肺癌血管生成中的作用

目的：研究小剂量环磷酰胺（CTX）对肺癌血管生成的影响及其机制。方法：培养人肺腺癌A549细胞，建立裸鼠移植瘤模型，随机分为小剂量CTX组、大剂量CTX组和对照组进行化疗，观察裸鼠体重变化和抑瘤效果，免疫组化检测肿瘤微血管密度（MVD）、缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor 1 alpha，HIF-1α）和VEGF的表达。结果：小剂量组肿瘤生长缓慢，体重减轻等副作用明显小于大剂量组和对照组（P〈0．01或P〈0．05）；与大剂量组、对照组比较，小剂量组MVD、HIF-1α和VEGF表达均明显减少（P〈0．01），且小剂量组移植瘤中HIF-1α和VEGF、HIF-1α和MVD、VEGF和MVD之间均有相关性。结论：与大剂量组和对照组相比，小剂量CTX化疗组能更显著地抑制肺癌血管生成，抑瘤效果更明显，其机制可能与下调HIF-1α蛋白表达有关。     

人canstatin基因治疗人食管癌裸鼠移植瘤的实验研究

背景与目的：Canstatin是一种新内源性血管生成抑制剂,以往的研究显示canstatin能有效的抑制肿瘤的生长,作用甚至强于endostatin。本研究将探讨人canstatin基因对人食管鳞状细胞癌移植瘤模型的抑制作用。方法：应用人食管癌细胞株KYSE150建立移植瘤模型。将裸鼠随机分成3组：腺病毒携带的canstatin基因组（Ad—GFP—canstatin）、腺病毒携带的绿色荧光蛋白组（Ad—GFP）和磷酸盐缓冲液组（PBS）。治疗期间测量皮下移植瘤的长径和短径;30d后处死裸鼠,取下肿瘤行常规病理切片,观察药物的毒性反应;检测肿瘤组织中caspase-3、内皮细胞生长因子受体1（fetal liver kinase-1,Flk-1）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达和微血管密度（microvessel density,MVD）。结果：第二次注射病毒后3d,canstatin基因治疗组肿瘤体积显著小于其余两组（P〈0．05）,治疗第6天抑瘤率达到61％;HE染色显示：各组肿瘤组织中都有坏死．尤其在canstatin基因治疗组坏死更加明显;canstatin基因治疗组caspase-3表达高于空载体组和对照组（P〈0．05）;Flk-1的表达低于空载体组和对照组（P〈0．05）：VEGF的表达3组相比差异无统计学意义（P〉0．05）：canstatin基因治疗组MVD低于空载体组和对照组（P〈0．05）。结论：人canstatin基因对人食管癌移植瘤的生长具有抑制作用,作用机制可能是降低Flk-1的表达进而抑制肿瘤的血管生成,抑制肿瘤的生长。     

瘤内局部注射重组人血管内皮抑制素对小鼠Lewis肺癌抑瘤作用的研究

目的探讨瘤内直接注射重组人血管内皮抑制素（恩度）联合腹腔注射顺铂对Lewis肺癌的抑制效果。方法成功建立小鼠Lewis肺癌移植瘤模型。按体质量将小鼠随机分为生理盐水组、顺铂组、瘤内注射恩度组、顺铂联合腹腔注射恩度组、顺铂联合瘤内注射恩度组5组。治疗后处死小鼠,计算肿瘤体积抑瘤率,用免疫组织化学法测定各组小鼠肿瘤组织血管内皮生长因子（VEGF）的表达水平及微血管密度（microvessel density,MVD）。结果顺铂组、瘤内注射恩度组、顺铂联合腹腔注射恩度组、顺铂联合瘤内注射恩度组的抑瘤率分别为61.8%、24.9%、70.3%、74.3%。免疫组织化学结果显示,顺铂联合瘤内注射恩度组的VEGF表达及MVD计数在各实验组中均最低,与顺铂联合腹腔注射恩度组比较两者差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论经皮穿刺瘤内注射恩度联合顺铂有协同抗肿瘤作用,能有效抑制肺癌的生长及转移,并且相同剂量的恩度,肿瘤内局部注射效果优于腹腔注射。     

TL对人胰腺癌细胞裸鼠移植瘤的治疗作用及抑制血管生成的研究

目的：探讨雷公藤内酯醇（TL）对人胰腺癌细胞SW1990移植瘤的生长及新生血管生成的抑制作用。方法：通过人胰腺癌裸鼠皮下移植实验，观察不同剂量TL对移植瘤生长抑制作用；应用免疫组化和RT-PCR研究裸鼠移植瘤组织VEGF表达变化，计算肿瘤组织微血管密度（MVD）。结果：各实验组（TL0．125、0．25和0．5mg·^-1kg·day^-1）抑瘤率分别达到66．16％、78．14％和89．92％，与对照组相比，肿瘤生长明显受抑，并具有剂量和时间依赖性。对照组和各实验纽瘤组织MVD分别为36．25±8．64、22．75±6．67、17．65±7．11和9．87±3．34（P〈0．01）；TL抑制移植瘤VEGF基因和蛋白表达．且VEGF基因下调与MVD的减少具有相关性（r=0．7424，P〈0．01）．结论：TL具有显著的抗胰腺癌移植瘤作用．其机制可能与抑制肿瘤新生血管生成有关。     

人参皂苷Rg3与顺铂对荷卵巢癌裸鼠免疫功能及肿瘤相关蛋白的影响

[目的]观察人参皂苷Rg3联合顺铂对荷高转移人卵巢癌细胞系HO．8910PM转移瘤裸鼠白细胞介素．2（IL-2）、干扰素-γ（INF-γ）及nm23、血管内皮生长因子（VEGF）及增殖细胞核抗原（PCNA）的影响。[方法]移植瘤裸鼠随机分成6组腹腔给药：荷瘤空白对照组fA组）;不同Rg3浓度药物组：2．5mg／kg（B组）、5mg／kg（C组）和lOmg／kg（D组）;Rg3和顺铂联用组（E组）以及顺铂阳性对照组（F组）。分别测定各组裸鼠转移瘤体积变化、IL-2、INF-γ、nm23、VEGF及PCNA的变化情况。[结果]与A组比较,E组（P〈0．05）和F组（P〈0．01）小鼠血清中IL-2、INF-γ含量均能显著降低;B（P〈0．05）、C、D和E（P〈0．01）组小鼠移植瘤组织nm23的表达均增强。Rg3给药后,小鼠移植瘤组织VEGF、PCNA表达均呈下降趋势。[结论]人参皂苷Rg3和顺铂联用具有协同抗肿瘤及减毒的作用。Rg3可能通过增强mm23的表达．使VEGF及PCNA表达呈下降趋势等多途径产生抗肿瘤作用。     

非小细胞肺癌组织ET-1、VEGF及MVD的表达及相互关系

目的：研究非小细胞肺癌（NSCLC）组织中内皮素-1（ET-1）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达和微血管密度（MVD）,以探讨ET-1、VEGF在肺癌组织血管形成中的调节作用。方法：采用免疫组化和图像分析技术,检测40例NSCLC组织标本中ET-1、VEGF的表达及MVD。结果：ET-1、VEGF在NSCLC组织表达率分别为55％（22／40）、62％（25／40）,显著高于肺良性病变组8％（1／12）、0％（0／12）及正常对照组（0／10）、（0／10）（P〈0．01）;ET-1、VEGF表达阳性组MVD（26．23±3．52、23．40±5．29）显著高于ET-1、VEGF表达阴性组（15．46±4．85、16．40±3．85）;ET-1、VEGF表达和MVD在低、中、高分化癌中存在显著差异[ET-1（0．212±0．031vs0．147±0．015VS0．103±0．032）、VEGF（0．267±0．023VS0．166±0．021vs0．112±0．012）、MVD（26．75±3．20VS23．14±3．38VS16．15±3．22）]（P〈0．01或P〈0．05）;淋巴结转移阳性组ET-1、VEGF表达和MVD值显著高于阴性组[ET-1（0．198±0．037VS0．141±0．032）、VEGF（0．256±0．022VS0．154±0．037）、MVD（27．62±3．58VS17．13±3．13）]（P〈0．01或P〈0．05）。结论：ET-1、VEGF调控肺癌组织血管形成,促进肿瘤的生长和转移。     

顺铂干预小鼠Lewis肺癌的MMP-9、TIMP-1表达及其相关性

背景与目的：肺癌转移是疾病进展和治疗失败的主要原因,基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）、组织金属蛋白酶抑制物-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1）作为调控细胞外基质降解的蛋白与肺癌转移关系密切。本研究观察顺铂对Lewis肺癌MMP-9和TIMP-l表达的影响,并探讨两者的关系和在转移中的作用。方法：建立Lewis肺癌C57BL／6小鼠肿瘤模型,顺铂组予以腹腔内注射顺铂溶液,以正常小鼠和荷瘤小鼠作对照。采用ELISA法和免疫组化法检测MMP-9、TIMP-1在血清和瘤体中的表达。结果：顺铂抑瘤率41．2％,抑制转移率39．0％。荷瘤小鼠瘤体中MMP-9、TIMP-1阳性率均为100％,血清浓度均高于正常对照组（P〈0．05）;顺铂组的血清MMP-9、TIMP-1浓度和瘤体MMP-9阳性率均低于荷瘤对照组（P〈0．05）。血清及瘤体的MMP-9表达、瘤体TIMP-1表达均与瘤重、肺转移数成正相关（P〈0．05）。血清及瘤体的MMP-9表达与TIMP-1表达均成正相关（r=0．617和0．695,P〈0．05）;血清MMP-9／TIMP-1的比值趋向于一个常量,其数值呈正态分布,均数为1．72。结论：Lewis肺癌中MMP-9和TIMP-1均呈高表达,两者与癌细胞的浸润和转移均有关;顺铂对血清MMP-9、TIMP-1浓度和瘤体MMP-9表达的下调作用是其抗转移作用的机理之一。     

重组人干扰素a2b联合顺铂对骨肉瘤的作用及其对VEGF表达的影响

目的探讨重组人干扰素a2b联合顺铂对骨肉瘤的作用效果及其对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将32只荷瘤裸鼠随机均分为4组:对照组、干扰素a2b组、顺铂组和联合治疗组。分别在接种后第0、5、10、15、20、25、30天记录肿瘤体积变化和抑瘤率;接种后30 d后处死裸鼠,取裸鼠移植瘤测定重量,采用免疫组化法进行CD34标记,用Weidner方法计数微血管密度(MVD);显微镜下检测细胞凋亡情况;ELISA法检测VEGF水平。结果4组裸鼠成瘤率均为100％。其中,联合治疗组在接种后第10、15、20、25、30天的肿瘤体积显著低于顺铂组和对照组。联合治疗组的瘤体重量显著低于顺铂组和对照组［(0733±0054)g vs.(2326±0151)g、(2419±0166)g］,差异均有统计学意义(均P<005)。联合治疗组MVD值显著低于顺铂组和对照组［(2286±286) vs.(2745±164)、(318±312)］,联合治疗组移植瘤凋亡指数高于顺铂组和对照组［(4562±424)％ vs.(966±115)％、(1000±128)％］,差异均有统计学意义(均P<005)。干扰素a2b组和联合治疗组的VEGF蛋白表达阳性率分别为2062％、1545％,低于顺铂组和对照组(5924％、6837％),差异有统计学意义(P<005)。结论重组人干扰素a2b联合顺铂注射能特异性抑制骨肉瘤裸鼠VEGF的表达、血管生成和肿瘤生长,并能促进肿瘤细胞凋亡。     

原发陛肾细胞癌螺旋CT多期增强扫描征象与肿瘤血管的相关性研究

目的探讨原发性肾细胞癌（RCC）螺旋CT（SCT）征象与病理、肿瘤微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）表达之间的关系。方法收集经手术及病理证实的RCC30例,术前行SCT平扫及三期增强扫描,标本用免疫组织化学生物素－过氧化物酶复合法（SABC法）染色,检测肿瘤MVD及VEGF的表达。结果SCT多期增强扫描对30例RCC检出率100％,定性诊断正确率100％,术前分期正确率83．33％。MVD平均为（36±12．40）条／视野,VEGF阳性表达率73．33％。MVD与VEGF的表达无相关性（r=0．057,P〉0．05）。SCT征象：直径〉3．0cm组、瘤内有出血坏死组、无假包膜组、有静脉癌栓组,病理核分级、VEGF阳性表达及MVD均高于相对应组（P均〈0．05）。有淋巴结转移组的病理核分级及MVD均高于相对应组（P〈0．05）。CMP期RCC强化的CT值、强化程度分别与MVD呈正相关（r=0．784、P〈0．05,r=0．789,P〈0．05）。结论SCT多期增强扫描是RCC可靠的检查方法,能准确反映其病理学基础;RCC的部分征象与MVD及VEGF的表达有关,可预测RCC的侵袭和转移。     

131I-EGF显像对肺癌荷瘤裸鼠化疗疗效的评价

目的探讨131I-EGF动态显像技术对肺癌倚瘤裸鼠化疗疗效的评价。方法将肺癌细胞株A549种植到BALB／cA—nil裸鼠体内,待移植瘤长至直径0．8～1．2cm时,随机分为4组：空白对照组、实验组（紫杉醇组、顺铂组和联合化疗组）。空白对照组腹腔注射0．1ml生理盐水;紫杉醇组腹腔注射紫杉醇5mg／kg;顺铂组腹腔注射ill@34rag／kg;联合化疗组腹腔注射紫杉醇5mg／kg和顺铂4mg／kg。裸鼠化疗后分别丁即刻和第7、14、21及28犬注射131I-EGF0．5h后开始显像,勾画感兴趣区（ROI）,计算肿瘤／健侧对应部位放射性（T／NT）比值,并测量肿瘤体积。第28天完成显像后,处死裸鼠,测量肿瘤／血液及肿瘤／肌肉放射性比值,计算抑瘤率和131I-EGF的生物学分布。结果肿瘤组织吸收131I-EGF较多,肿瘤／肌肉放射性比值对照组为5．65,高于联合化疗组（1．55,t=9．829,P〈0．01）、紫杉醇组（1．14,t=12．636,P〈0．01）和顺铂组（0．99,t=12．313,P〈0．01）。肿瘤／血液放射性比值对照组为3．15,高于联合化疗组（0．76,t=3．384,P〈0．05）、紫杉醇组（1．22,t=2．826,P〈0．05）和顺铂组（1．22,t=2．713,P〈0．05）。131I-EGF可使肿瘤组织清晰显像,联合化疗组肿瘤体积401．9mm3,与对照组（1134．2mm3）差异有统计学意义（t=9．393,P〈0．01）;紫杉醇组肿瘤体积634．73mm3（t=7．140,P〈0．01）,顺铂组肿瘤体积700．7mm3（t=6．820,P〈O．01）,这2组与对照组差异有统计学意义。各化疗组与对照组间T／NT比值差异有统计学意义（F=1011．251,P〈0．01）。结论化疗效果好的肿瘤,131I-EGF显像示肿瘤体积较小,瘤体内放射性分布较少;而化疗效果差的肿瘤体积逐渐增大,瘤体内放射性分布较多。131I-EGF显像可用于指导倚瘤裸鼠的化疗。     

HIF-1α和VEGF 的表达与肝细胞癌侵袭转移的关系

 目的 探讨HIF-1α、VEGF的蛋白表达与肝细胞癌血管新生及侵袭转移特性之间的关系。方法 采用免疫组化SP法检测肝细胞癌、癌旁肝组织和正常肝组织中HIF-1α、VEGF的表达，并计数MVD值。结果 HIF-1α在肝细胞癌中的阳性表达率为50．0％，显著高于癌旁（16．1％）和正常肝组织的（8．3％）（P=0．001）；VEGF在肝细胞癌中的阳性表达率为81）％，显著高于癌旁（59．4％）和正常肝组织（41．7％）（P=0．044）；肝细胞癌组织中MVD值显著高于癌旁和正常肝组织（P=0．001）。HIF-1α蛋白表达与有无门静脉或胆管癌栓及肿瘤分化程度有关（P〈0．05）；VEGF蛋白的表达与有无肝内或淋巴结转移及有无门静脉或胆管癌栓有关（P〈0．05）。HF-1α与VEGF表达有关（P=0．005）；HF-1α与VEGF共同表达阳性组的MVD值显著高于共同表达阴性组MVD值（P=0．001）。结论 HF-1α可能通过调节VEGF的表达促进肝细胞癌血管新生，从而促使肝细胞癌侵袭转移。     

西妥昔单抗联合顺铂对荷食管鳞癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的 探讨西妥昔单抗联合顺铂对人食管鳞癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 将食管鳞癌Eca-109细胞株接种于裸鼠皮下,制备裸鼠移植瘤模型.将裸鼠随机分成对照组、西妥昔单抗组、顺铂组和两药联合组.动态测量各组移植瘤体积,给药结束后取出瘤体称瘤体质量,计算抑瘤率.取血标本检测肿瘤标志CEA.采用蛋白质印迹法检测肿瘤组织中MAPK蛋白磷酸化水平.结果 对照组、西妥昔单抗组、顺铂组和联合用药组平均肿瘤体积分别为(2 056.3±787.3)、(1 642.0±850.3)、(1 540.7±427.7)和(1 299.3±583.8) mm3.析因分析显示,单药作用后肿瘤大小变化差异无统计学意义,P＞0.05,两药间无交互作用,F=0.160,P=0.691.对照组、西妥昔单抗组、顺铂组和联合用药组平均瘤质量分别为(1.84±0.75)、(1.70±0.90)、(1.27±0.51)和(0.95±0.25)g;西妥昔单抗处理后瘤体质量减轻,差异无统计学意义,F＝1.21,P=0.279;而顺铂组差异有统计学意义,F=10.382,P＝0.003;两药间无交互作用,F=0.211,P=0.649.对照组、西妥昔单抗组、顺铂组和联合用药组的抑瘤率分别为0、7.6％、31.0％和48.4％.西妥昔单抗和顺铂单药各自均能降低CEA表达水平,差异有统计学意义,P＜0.05;两药间无交互作用,F=0.601,P=0.443.药物干预后对照组、西妥昔单抗组、顺铂组和联合用药组P-MAPK蛋白表达量分别为1.530±0.77、0.791±0.08、1.705±0.12和0.901±0.85,西妥昔单抗明显下调了P-MAPK蛋白表达水平,F=669.332,P＜0.001;而顺铂上调了P-MAPK蛋白的表达,F=23.000,P＜0.001;两药联用后P-MAPK蛋白表达水平下降,两药之间无交互作用,F=1.207,P=0.279.结论 顺铂上调EGFR下游蛋白P-MAPK的活化,西妥昔单抗与顺铂联用表现为相加作用,抑制移植瘤生长作用优于单药组.     

Ad．VEGF．siRNA抑制荷人骨肉瘤裸鼠血管生成的形态学研究

背景与目的：血管内皮生长因子是骨肉瘤血管形成重要的促进因子,本研究通过抗血管生成方法,观察其抑制荷人骨肉瘤裸鼠血管生成的形态学表现。方法：取4～8周龄的Balb／c裸鼠作为实验动物,人骨肉瘤细胞株MG63皮下接种法构建骨肉瘤的动物模型。建模成功后将荷人骨肉瘤的裸鼠随机分为3组,每组15只。A组使用自行构建的Ad—VEGF-siRNA干扰新生血管形成;B、C组分别使用等剂量的Ad-EGFP或PBS作为对照。实验维持19d,药物使用后隔日测量肿瘤体积和体重．绘制肿瘤生长曲线：采用常规HE染色、VEGF和CD31相关抗原免疫组化染色观察各组肿瘤标本：各组随机抽取一个标本在透射电镜下观察仿血管发生的超微结构。结果：实验结束时,A组裸鼠瘤体体积为（0．31±0．18）cm^3,重量为（0．75±0．21）g,微血管密度（microvessed density,MVD）为5．79±0．34,VEGF表达为235228．09±123244．41,B、C照组裸鼠瘤体积分别为（1．21±1．29）cm^3、（1．43±0．95）cm^3;瘤重分别为（1．19±0．27）g、（1．19±0．35）g;MVD分别为11．00±0．68、10．42±0．10：VEGF表达分别为9641992．40±90479．62、981298．00±213590．50。A组肿瘤体积、重量、MVD和VEGF表达均显著低于B、C组。MVD和VEGF呈正相关关系,相关系数为0．9989。Ad-VEGF—siRNA组仿血管发生数量1．4000±0．5477,明显小于Ad—EGFP和PBS对照组。透射电镜可见肿瘤细胞形成的仿血管。结论：通过宏观和微观的形态学观察,证实Ad—VEGF-siRNA介导的以VEGF为靶向的抗血管生成能够抑制荷人骨肉瘤裸鼠的血管生成。     

三氧化二砷联合TNP-470对裸鼠人肝癌移植瘤的影响

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）联合烟曲霉的提取物烟曲霉醇（TNP-470）对裸鼠人肝癌移植瘤生长的影响及其作用机制。方法：人肝癌转移模型（HCC）-LCI—D20原位移植瘤裸鼠32只，随机分4组（每组8只）给药：As2O3联合TNP-470组、As2O3组、TNP-470组、生理盐水（Ns）对照组，给药21天后，对裸鼠移植瘤大小、肿瘤微血管密度（MVD）、免疫组化、透射电镜结果进行观察。结果：As2O3组、TNP-470组及联合组的平均瘤重及平均瘤体积均低于对照组（P〈0．05）；计算两药相互作用系数（CDI）值：瘤重CDI（0．95）〈1，体积CDI（0．89）〈1，两药有协同抑制移植瘤生长的作用。As2O3组抑制移植瘤VEGF、EGFR的表达；TNP-470组抑制移植瘤EGFR的表达，对移植瘤VEGF的表达无影响；联合组明显抑制移植瘤EGFR的表达，抑制移植瘤VEGF的表达作用等同As2O3组。裸鼠原位移植瘤的光镜、电镜下观察结果有意义；各用药组裸鼠原位移植瘤的MVD值均低于对照组（P〈0．05）。结论：As2O3联合TNP-470协同抑制裸鼠人肝癌移植瘤的血管新生，能有效抑制移植瘤生长。     

胃癌组织中微血管密度的测定及其临床意义

[目的]探讨胃癌组织中微血管密度（MVD）与临床病理因素及预后的关系。[方法]应用免疫组织化学技术检测118例胃癌组织中CD34蛋白的表达，以CD34阳性血管数作为微血管密度（MVD），以镜下200倍视野范围内任选不重复的5个视野，计数阳性血管数。[结果]所有胃癌组织中的平均MVD为54．90±2．61个／mm^2；浸润性生长的肿瘤组织中MVD值明显高于膨胀性生长者（t=3．91，P〈0．001），MVD值与浸润深度（t=6．41，P〈0．001）、血管侵犯（t=7．96，P〈0．001）、淋巴结转移（t=8．45，P〈0．001）、远处肝转移（t=7．65，P〈0．001）和腹膜转移（t=-10．46，P〈0．001）显著相关：MVD值≥54．9个／mm^2患者的平均生存时间为24．48±2．42个月，显著低于MVD值〈54．9个／mm^2患者的44．70±4．68个月（t=-2．83，P〈0．01），MVD值≥54．9个／mm^2患者的5年生存率6.2％（17／47）显著低于MVD值〈54．9个／mm^2患者的38．5％（6／71）（x^2=12．14，P〈0．001）。[结论]MVD与胃癌浸润转移及预后显著相关，可以作为反映胃癌生物学行为和判断预后的生物学指标。