红景天苷通过NF-κB/TGF-β1信号通路抑制哮喘小鼠气道重塑的实验研究

目的探讨红景天苷对支气管哮喘小鼠气道重塑及核因子-κB(NF-κB)和转化生长因子-β1(TGF-β1)信号通路的影响。方法 40只清洁级雌性BABL/c小鼠,随机分为4组,每组10只,分别为对照组、模型组、红景天苷低剂量组、红景天苷高剂量组。以卵蛋白(OVA)致敏、激发制备小鼠哮喘模型,在末次激发24 h后取小鼠左肺组织行苏木精-伊红(HE)染色、PAS染色、Masson染色;取右肺组织分别用酶联免疫吸附法(ELISA)、RT-PCR和Western blotting检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13水平以及TGF-β1 mRNA、蛋白和NF-κB p65蛋白表达。结果模型组与对照组比较,小鼠BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平增高;肺组织TGF-β1 mRNA、蛋白和NF-κB p65蛋白表达水平均显著升高(P<0.05、0.01)。红景天苷组与模型组比较,小鼠BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平,TGF-β1 mRNA、蛋白和NF-κB p65蛋白表达水平均显著降低(P<0.05、0.01),不同剂量红景天苷组间上述各指标间差异无统计学意义(P>0.05)。结论红景天苷可抑制哮喘小鼠气道重塑的发生,其部分机制可能是通过抑制NF-κB/TGF-β1信号通路而实现的。     

当归补血汤总苷联合水蛭治疗大鼠肺纤维化

目的研究当归补血汤总苷联合水蛭对大鼠肺纤维化的治疗作用及其机制。方法选取120只雄性SD大鼠,18只作为正常组(生理盐水),其余102只建立肺纤维化模型。72只造模大鼠随机分为模型组(生理盐水)、当归补血汤总苷组(13 mg/kg)、水蛭组(水蛭粉,4 g/kg)、联合组(当归补血汤总苷,13 mg/kg;水蛭粉,4 g/kg),每组18只,灌胃给药。结果造模后第7、14、28天,模型组肺泡炎性评分、肺纤维化程度评分、肺组织中转化生长因子β1(TGF-β1)和纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)、肺泡灌洗液中白细胞介素-4(IL-4)和白介素-17(IL-17)表达水平、肺组织中羟脯氨酸(HYP)含有量均显著高于正常组(P0.05);当归补血汤总苷组、水蛭组和联合组肺泡炎性评分、肺纤维化程度评分、TGF-β1、PAI-1、IL-4、IL-17表达水平、羟脯氨酸含有量均显著低于模型组(P0.05);联合组肺泡炎性评分、肺纤维化程度评分、TGF-β1、PAI-1、IL-4、IL-17表达水平、HYP含有量显著低于当归补血汤总苷组、水蛭组(P0.05)。结论当归补血汤总苷联合水蛭治疗大鼠肺纤维化的效果较好,主要是通过降低肺组织中TGF-β1、PAI-1表达水平、HYP含有量所致。     

疏肝平喘方通过转化生长因子-β1/Smad信号通路对哮喘小鼠免疫平衡的影响

目的：阐明疏肝平喘方对哮喘小鼠维甲酸相关核孤儿受体γt（RORγt）/叉头框蛋白P3（Foxp3）以及辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）平衡的干预作用,对转化生长因子-β1（TGF-β1）/Smad信号通路的影响。方法：建立空白对照组、哮喘模型组、疏肝平喘组及地塞米松组实验动物模型。酶联免疫吸附试验检测肺组织匀浆中白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-17A（IL-17A）和TGF-β1水平,流式细胞仪检测肺组织中Th17/Treg细胞量,蛋白质印迹法检测肺组织中RORγt、Foxp3的蛋白表达,以及逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7的mRNA表达水平。结果：疏肝平喘方能够降低哮喘小鼠肺组织IL-6、TGF-β1,与地塞米松比较,差异均有统计学意义（均P<0.05）,调节IL-10、IL-17A,与地塞米松组相当（均P>0.05）;Th17/Treg细胞量,RORγt、Foxp3的蛋白表达量,与地塞米松相当（均P>0.05）。与哮喘模型组比较,疏肝平喘方组、地塞米松组的TGF-β1、Smad2、Smad3的mRNA表达水平下降,而Smad7的mRNA表达水平升高,差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论：疏肝平喘方在改善气道炎症方面,和地塞米松疗效相当,是通过TGF-β1/Smad信号通路,从而调节哮喘小鼠的Th17/Treg免疫平衡。     

咳喘康对博莱霉素A5致肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β_1及其受体mRNA表达的影响

目的:研究咳喘康对博莱霉素A5致肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β1及其受体mRNA表达的影响。方法:将60只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药咳喘康组和激素组。除正常组外,其余3组大鼠经气管注入博莱霉素A5复制肺纤维化大鼠模型,各组于造模后第1天分组予以给药,于给药7、14、28天分批处死各组大鼠,每次每组5只。利用ELISA法检测肺组织中TGF-β1的含量、RT-PCR法检测肺组织中TGF-β1mRNA的表达水平。结果:模型组在不同时段TGF-β1含量及TGF-β1mRNA表达较正常对照组均明显增高,具有显著的统计学意义(P<0.01)。咳喘康组大鼠肺组织匀浆中TGF-β1含量、TGF-β1mRNA的表达水平与模型组对照降低,且有随给药天数增加而降低的趋势,具有统计学意义(P<0.01)。结论:中药复方咳喘康具有显著抑制博莱霉素A5致大鼠肺纤维化的作用,通过降低TGF-β1的含量及抑制TGF-β1mRNA的表达是其可能的机制之一。     

参七虫草胶囊对肺纤维化大鼠TGF-β_1mRNA表达的影响

目的探讨参七虫草胶囊对肺纤维化大鼠TGF-β1mRNA表达的影响。方法采用博莱霉素致肺纤维化大鼠模型,大鼠处死后分离大鼠肺组织,应用RT-PCR半定量及图像分析方法,对空白组、模型组、参七虫草胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组及泼尼松组大鼠肺组织TGF-β1mRNA表达水平进行观察。结果参七虫草胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组及泼尼松组大鼠肺组织TGF-β1mRNA表达水平明显低于模型组。结论参七虫草胶囊高、中、低剂量及泼尼松均可调控博莱霉素致肺纤维化大鼠TGF-β1mRNA表达水平,从而减轻肺纤维化的程度。     

三拗汤对咳嗽变异性哮喘小鼠Th17/Treg免疫平衡的影响

目的 研究三拗汤对咳嗽变异性哮喘小鼠Th17/Treg免疫平衡的影响。方法 小鼠通过腹腔注射卵蛋白、氢氧化铝致敏，并吸入卵蛋白激发法建立咳嗽变异性哮喘模型，随机分为空白组，模型组，孟鲁司特钠组，三拗汤低、中、高剂量组，HE、F4/80荧光染色观察肺及支气管组织病理变化、巨噬细胞聚集情况，流式细胞术分析脾脏组织Th17、Treg细胞比例，RT-qPCR检测肺组织TGF-β、IL-6、IL-23、IL-10、IL-17A、IL-17F、IL-4、IL-13 mRNA表达。结果 与模型组比较，三拗汤各剂量组小鼠气管、支气管及血管周围炎性细胞浸润量减少，杯状细胞化减轻，上皮下纤维化和平滑肌体积增加现象缓解，F4/80荧光强度减弱；肺组织TGF-β、IL-17A、IL-17F、IL-4、IL-6、IL-13 mRNA表达降低(P<0.05);脾脏Th17细胞比例、Th17/Treg比值降低(P<0.05)。结论 三拗汤可改善咳嗽变异性哮喘小鼠气管及肺组织炎性病理变化及气道痉挛状态，其机制与调节Th17/Treg免疫平衡及相关细胞因子有关。     

小青龙汤对哮喘小鼠气道重塑过程中TGF-β1和IL-13表达的影响

目的探讨小青龙汤对哮喘小鼠肺组织气道重塑干预作用及对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)及白细胞介素-13(Interleukin 13,IL-13)表达的影响。方法 40只雌性小鼠随机分成正常对照组、哮喘模型组、小青龙汤组和强的松组。采用卵蛋白(OVA)致敏2周及OVA滴鼻(共18次)激发6周建立哮喘小鼠模型。小青龙汤组和强的松组分别于每次激发前30 min采用小青龙汤和强的松干预,共6周。HE染色观察各组小鼠肺组织病理变化,Image-Pro Plus 6.0彩色图像分析系统测定支气管壁及平滑肌厚度,免疫组化法和实时定量PCR检测肺组织中TGF-β1和IL-13表达。结果哮喘模型组发生支气管管壁增厚、炎症细胞浸润、平滑肌增生等气道重塑的特征性改变。小青龙汤组和强的松组支气管壁及平滑肌厚度低于哮喘模型组(P0.05)。免疫组化结果显示:正常组肺组织TGF-β1和IL-13阳性较弱,主要分布在支气管壁;与正常组比较,哮喘模型组TGF-β1和IL-13呈强阳性表达于支气管壁。与哮喘模型组相比较,小青龙汤组和强的松组显著抑制TGF-β1和IL-13基因表达(P0.05)。结论 TGF-β1和IL-13高表达可能在哮喘气道重塑中起重要作用。小青龙汤改善哮喘小鼠气道重塑可能通过抑制肺组织TGF-β1和IL-13表达而实现。     

扁蒴藤素对肺纤维化模型小鼠肺组织形态及转化生长因子-β1、α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的观察扁蒴藤素对肺纤维化模型小鼠肺组织形态及转化生长因子(TGF)-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,探讨其作用机制。方法采用气管内注射博来霉素溶液制备小鼠肺纤维化模型。将32只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、扁蒴藤素组及吡非尼酮组,每组8只。正常组和模型组给予等量生理盐水腹腔注射,扁蒴藤素组给予1 mg/kg扁蒴藤素溶液腹腔注射,吡非尼酮组给予50 mg/kg吡非尼酮溶液腹腔注射。给药体积10 mL/kg,每日1次,连续28 d。取肺组织行HE及Masson染色,评估小鼠肺组织病理学变化及胶原沉积;免疫组化和Western bot检测小鼠肺组织TGF-β1及α-SMA蛋白的表达。结果HE及Masson染色显示,扁蒴藤素组小鼠肺泡炎及肺纤维化评分低于模型组(P<0.05,P<0.01);免疫组化及Western blot结果显示,与正常组比较,模型组小鼠TGF-β1及α-SMA蛋白表达明显升高;与模型组比较,扁蒴藤素组和吡非尼酮组小鼠肺组织TGF-β1及α-SMA蛋白表达显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论扁蒴藤素可改善模型小鼠肺纤维化,其机制可能与抑制TGF-β1及α-SMA蛋白表达有关。     

复方麻芩汤对慢性气道重建过程中TGF-β1的影响

目的:探讨TGF-β1、Smad2在慢性哮喘大鼠肺组织中的定位表达及其含量和mRNA变化情况,以反映其在哮喘大鼠气道重建过程的作用。方法:实验设正常组、模型组、复方麻芩汤和地塞米松组。肺组织病理切片(HE染色法);苦味酸酸性复红染色法测定支气管组织胶原纤维含量;荧光免疫组化法测定TGF-β1、Smad2蛋白家族在肺组织中的定位;ELIEA法测TGF-β1的含量;RT-PCR测定TGF-β1、Smad2蛋白家族mRNA的变化情况。结果:HE染色显示模型组有较明显出血,肺泡均有一定程度扩张,有慢性炎细胞浸润;荧光免疫组化法显示TGF-β1、Smad2蛋白家族均在支气管壁和肺泡壁上表达;苦味酸酸性复红染色法显示模型组肺组织胶原纤维较正常组含量显著增高(P<0.05),复方麻芩汤组胶原纤维含量明显下降(P<0.05);ELIEA法显示模型组较正常组TGF-β1含量明显增高(P<0.05),而复方麻芩汤组、地塞米松组较模型组相比具有明显的下降(P<0.05);RT-PCR测定显示模型组的TGF-β1、Smad2的mRNA与正常组相比表达明显增加,而地塞米松能明显降低TGF-β1、Smad2的mRNA的含量,复方麻芩汤的改善效果并不明显。结论:TGF-β1蛋白与慢性哮喘关系密切,复方麻芩汤对哮喘气道重建有良好的治疗作用,能调节TGF-β1的水平,改善气道功能。     

丹龙定喘汤对哮喘小鼠肺组织HMGB1、α-SMA、IL-4、IFN-γ、TGF-β1表达的影响

目的研究丹龙定喘汤对哮喘小鼠肺组织HMGB1、α-SMA、IL-4、IFN-γ、TGF-β1表达的影响。方法180只小鼠随机分为空白对照组、模型组、强的松组、丹龙定喘汤高剂量组、丹龙定喘汤中剂量组、丹龙定喘汤低剂量组,每组30只。除空白对照组外各组小鼠用卵清蛋白+氢氧化铝建立哮喘气道重塑模型,连续灌胃给予相应药物42 d(空白对照组灌胃给予生理盐水)。小鼠肺组织HE染色后,观察其病理组织学变化,ELISA法检测IL-4、IFN-γ、TGF-β1表达,Western blot法检测α-SMA、HMGB1表达。结果与空白对照组比较,模型组小鼠有明显气道重塑现象;与模型组比较,各给药组小鼠气道重塑均有所改善。与空白对照组比较,模型组HMGB1升高(P<0.05),IL-4、TGF-β1表达升高(P<0.01),IFN-γ表达降低(P<0.05);与模型组比较,丹龙定喘汤中、低剂量组及强的松组HMGB1表达降低(P<0.05),丹龙定喘汤中剂量组α-SMA表达降低(P<0.05),强的松组、丹龙定喘汤低剂量组IL-4、TGF-β1表达降低(P<0.01),强的松组及丹龙定喘汤中、低剂量组IFN-γ表达升高(P<0.01,P<0.05)。结论丹龙定喘汤可抑制哮喘小鼠肺组织IL-4释放,减少HMGB1表达,促进IFN-γ分泌,调节IL-4/IFN-γ失衡,使Th1/Th2趋向平衡;减少炎性因子释放,减轻气道炎性反应;降低肺组织TGF-β1、α-SMA水平,减少气道胶原及基质沉积,减轻气道纤维化,改善气道重塑。     

黄芪桂枝五物汤对肥胖小鼠棕色脂肪组织产热的优化作用

目的：研究黄芪桂枝五物汤对肥胖小鼠棕色脂肪组织（BAT）产热的干预作用。方法：采用高脂饮食诱导肥胖小鼠模型。40只小鼠随机分为空白组、模型组、β3激动剂组和β3激动剂+中药组,每组10只。HE染色及透射电镜观察小鼠BAT形态变化;RT-qPCR检测BAT中解耦连蛋白1(UCP-1)、PR结构域蛋白16(PRDM16)、精氨酸酶1(Arg-1)及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达;ELISA法检测BAT中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素（IL）-1β、IL-10水平。结果：第18周,两药物干预组体质量均较模型组显著减轻（P<0.05）。与模型组比较,BAT中脂滴缩小,线粒体数量增加,UCP-1、PRDM16 mRNA表达均显著增加（P<0.05,P<0.01）,β3激动剂组iNOS mRNA及TNF-α、IL-1β水平显著升高（P<0.01）,β3激动剂+中药组iNOS mRNA及TNF-α、IL-1β水平显著降低（P<0.05,P<0.01）,Arg-1 mRNA及IL-10、TGF-β水平显著升高（P&...     

蒙药平喘灵胶囊防治支气管哮喘过程中的相关因子分析研究

目的:探讨蒙药平喘灵胶囊对哮喘模型小鼠气道炎症及白细胞介素17A (IL-17A)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Smad2/3和Smad7的影响。方法:清洁级雌性BALB/c小鼠60只,随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松片组及平喘灵胶囊1、2、4 g/kg组,采用鸡蛋清白蛋白(OVA)建立实验性哮喘小鼠模型,激发第21 d开始灌胃给予相应药物,模型对照组和正常对照组以生理盐水代替,连续给药8 w。末次给药后24 h内,眼球取血处死,细胞计数器计数肺泡灌洗液(BALF)中白细胞分类数目;HE染色观察小鼠肺组织病理变化;免疫组织化学法(IHC)检测肺组织Smad2/3、Smad7蛋白相对表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠BALF及血清IL-17A、TGF-β1、TNF-α的含量。结果:与正常对照组比较,模型对照组BALF白细胞分类、BALF及血清IL-17A、TNF-α及TGF-β1含量显著升高、哮喘小鼠肺组织smad2/3蛋白表达水平显著下调(P<0.01);小鼠肺组织Smad7蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。与模型对照组比较,蒙药平喘灵胶囊各组BALF白细胞分类、BALF及血清中IL-17A、TNF-α及TGF-β1含量显著降低、哮喘小鼠肺组织Smad2/3蛋白表达水平显著下调,小鼠肺组织Smad7蛋白表达水平显著上调(P<0.01)。结论:蒙药平喘灵胶囊对哮喘小鼠气道炎症有较好的改善作用,其机制可能与降低BALF及血清IL-17A、TNF-α、TGF-β1含量及下调小鼠肺组织smad2/3蛋白表达水平和上调小鼠肺组织smad7蛋白表达水平有关。     

清金益肺汤对痰热蕴肺型特发性肺纤维化大鼠病理及免疫功能的影响

目的:通过检测痰热蕴肺型特发性肺纤维化大鼠应用清金益肺汤后肺组织IL-8、TGF-β1的表达水平及光镜下的病理变化,探讨清金益肺汤对痰热蕴肺型特发性肺纤维化大鼠病理及免疫功能的影响。方法:清洁级健康雄性SD大鼠40只,随机分为5组:空白对照组、痰热蕴肺型特发性肺纤维化模型组(模型组)、中药治疗组(中药组)、激素治疗组(激素组)、中药加激素治疗组(综合治疗组)。采用气管内滴入博来霉素的方法建立肺纤维化模型。造模结束后第2天气管内滴加脂多糖建立痰热蕴肺证模型。ELISA法检测各组大鼠肺组织IL-8、TGF-β1的表达水平,光镜下观察各组大鼠肺组织的病理改变。结果:模型组、中药组、激素组、综合治疗组大鼠肺组织在光镜下均有肺纤维化的特征性病理改变,但程度有所不同。与空白对照组相比,其余各组大鼠IL-8及TGF-β1的表达水平均明显增高;模型组表达水平明显高于中药组、激素组和综合治疗组;综合治疗组明显低于中药组和激素组;中药组和激素组IL-8的表达水平差异无统计学意义;激素组TGF-β1水平明显高于中药组。结论:清金益肺汤可改善痰热蕴肺型特发性肺纤维化大鼠的呼吸功能、结构改变,并能调节免疫,与激素联合可增强抗纤维化力度。     

清气化痰汤对急性肺损伤小鼠水通道蛋白5表达的影响

目的:研究探讨清气化痰汤治疗ALI的机制,为临床治疗ALI开辟新的治疗措施提供理论和实践方向。方法:24只昆明小鼠随机分成3组(每组8),即空白对照组(NS组)、造模组(ALI组)、清气化痰汤组,观察6h后测定肺湿干重比值(W/D),并采用HE染色观察炎症变化,RTPCR检测AQP5 mRNA、TNF-αmRNA、IL-1βmRNA的表达变化。结果:ALI组小鼠的肺部炎症反应显著,以中性粒细胞浸润为主,伴明显的肺泡充血、水肿。清气化痰汤组肺组织炎症、充血明显改善,ALI组的W/D的比值与其它3组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与NS组相比,ALI组AQP5 mRNA的表达显著降低(P<0.05),而清气化痰汤组的AQP5 mRNA的表达显著高于ALI组(P<0.05)。与NS组相比,ALI组TNF-αmRNA的表达显著升高(P<0.05),而清气化痰汤组的TNF-αmRNA的表达显著低于ALI组(P<0.05)。IL-1βmRNA表达的变化与TNF-αmRNA的变化相似,肺损伤炎症减轻。结论:清气化痰汤可通过上调AQP5的表达减轻肺损伤时肺水肿。可能是通过抑制炎症因子TNF-α、IL-1β的表达实现的。     

乌梅丸对乳腺癌小鼠肺转移微环境免疫抑制性细胞因子的影响

目的 观察乌梅丸对乳腺癌小鼠肺转移微环境免疫抑制性细胞因子表达的影响。方法 选择8只Balb/c雌性小鼠作为正常组；另选择16只Balb/c雌性小鼠，采用4T1乳腺癌细胞于小鼠第2对乳腺脂肪垫内注射方法构建乳腺癌模型，将造模成功的16只小鼠随机分为乌梅丸组和模型组，每组8只。乌梅丸组给予乌梅丸16.44 g/kg灌胃，正常组和模型组给予等量灭菌饮用水灌胃，均干预1个月。干预完成后处死各组小鼠，分离肺组织，采用免疫荧光组织化学法观察肺组织中环氧化酶2(COX-2)、白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子-β(TGF-β)和血管内皮生长因子(VEGF)表达情况，分别采用RT-qPCR和Western blot法检测肺组织中COX-2、IL-6、TGF-β、VEGF mRNA和蛋白表达情况。结果 模型组肺组织中COX-2、IL-6、TGF-β、VEGF呈强阳性表达，乌梅丸组COX-2、IL-6、TGF-β、VEGF的荧光强度低于模型组。模型组肺组织中COX-2、IL-6、TGF-β、VEGF mRNA和蛋白相对表达量均明显高于正常组(P均<0.05),乌梅丸组COX-2、IL-6、T...     

基于焦亡途径研究香青兰总黄酮对博来霉素诱导的肺纤维化小鼠的作用机制北大核心CSCD

探讨香青兰总黄酮(TFDM)在博来霉素(BLM)所致肺纤维化小鼠的作用机制,并探究其针对焦亡途径的作用机制。肺纤维化小鼠模型使用气管内滴注博来霉素(4 mg·kg^(-1))药液的方法建立,在相同条件下,正常组使用等量的生理盐水。造模次日,将纯水灌胃于正常组以及博来霉素组,香青兰总黄酮组和地塞米松组灌胃对应药物治疗,连续28 d。28 d后测定肺纤维化小鼠肺组织中羟脯氨酸(HYP)的含量,HE和Masson染色观察肺部炎症和纤维化的程度,ELISA检测肺纤维化小鼠血清中白细胞介素-18(IL-18)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量。采用Western blot法检测肺纤维化小鼠肺组织中蛋白的表达情况。HE染色显示,博来霉素组小鼠肺组织结构异常,并出现较多炎性细胞浸润;Masson染色显示,博来霉素组小鼠肺组织出现较多被染成蓝色的胶原纤维化组织。与正常组相比,博来霉素组小鼠肺组织中HYP含量以及血清中IL-18和IL-1β的水平显著上调(P<0.01);肺组织中Col-1、FN1、α-SMA、caspase-1、GSDMD、NLRP3、p62、ASC蛋白的表达显著升高(P<0.01);ATG5和Beclin1蛋白的表达显著降低(P<0.01)。与博来霉素组相比,香青兰总黄酮组和地塞米松组小鼠肺组织结构正常,炎性细胞浸润减少;蓝色的胶原纤维组织较少,肺组织纤维化程度得到缓解;HYP含量以及IL-18、IL-1β的水平显著下调(P<0.05,P<0.01);肺组织中Col-1、FN1、α-SMA、caspase-1、GSDMD、NLRP3、p62、ASC蛋白的表达显著降低(P<0.01),ATG5和Beclin1蛋白表达显著升高(P<0.01)。结果表明,香青兰总黄酮可以通过下调炎性因子及相关蛋白水平,并通过调控焦亡途径,同时有可能影响自噬,来有效缓解博来霉素所致的肺纤维化进程。     

复方苦参注射液对放射性肺损伤的肺保护作用

目的:观察复方苦参注射液对放射性肺损伤模型模型小鼠转化生长因子-β_1(TGF-β_1),Smad3蛋白(Smad3),糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β),β-连环蛋白(β-catenin)表达的影响,并探讨其作用机制。方法:使用美国XStrahl小动物精准放疗辐照研究平台(SARRP),实施单次20 Gy双侧肺野照射建立放射性肺损伤小鼠模型,将32只小鼠随机分为正常组、模型组、复方苦参注射液组(5 g·kg~(-1)),地塞米松注射液组(0.5 mg·kg~(-1))。正常组和模型组给予等体积0.9%氯化钠溶液,连续腹腔注射4周。苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理;免疫组化(IHC)检测小鼠肺组织E-钙粘蛋白(E-cadheren),波形蛋白(Vimentin)表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测组小鼠肺组织中TGF-β_1,Smad3,GSK-3β和β-catenin mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测组小鼠肺组织中TGF-β_1,Smad3,GSK-3β和β-catenin通道蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠肺系数显著升高(P0.01),且小鼠肺脏出现炎症细胞浸润,肺间质水肿、充血,肺泡结构破坏,部分肺泡萎缩。与模型组比较,复方苦参注射液组小鼠肺脏炎症细胞浸润及肺间质病变减轻,小鼠肺组织E-cadheren的水平显著升高(P0.01),小鼠肺组织Vimentin的水平显著降低(P0.01),TGF-β_1,Smad3,GSK-3β和β-catenin表达水平显著降低(P0.01)。与地塞米松注射液组比较,复方苦参注射液小鼠肺部病理形态学改变相仿,E-cadheren,Vimentin,TGF-β_1,Smad3,GSK-3β和β-catenin表达水平未见明显差异。结论:复方苦参注射液能够改善放射性肺损伤模型小鼠肺纤维化,其机制可能与抑制上皮间质转化(EMT)相关的TGF-β_1,Smad3,GSK-3β和β-catenin mRNA及通道蛋白表达,进而促进E-cadheren表达、抑制Vimentin蛋白表达,最终抑制EMT的发生有关。     

扶正通络消积三方对肺纤维化大鼠肺组织上皮间质转化的影响

目的:探讨扶正通络消积三方(养清抗纤方、保肺化纤方、金水缓纤方)对肺纤维化大鼠肺组织上皮-间质转化(EMT)的影响。方法:180只雄性SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、吡非尼酮组、养清抗纤组、保肺化纤组及金水缓纤组,每组30只,采用气管内滴注博来霉素(5mg/kg)的方法制备肺纤维化模型。以造模日为第0天,各组于造模后第1~13天、15~27天、29~41天采用上述药物灌胃,第14、28、42天每组取10只取材。采用Masson染色检测肺组织病理变化和评分;免疫组化测定肺组织Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)和Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)表达;分子生物学技术检测肺组织转化生长因子(TGF)-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cad)mRNA和蛋白表达。采用R值综合评价法评价扶正通络消积三方对肺纤维化大鼠EMT的影响。结果:在各个时间点,与空白组比较,模型组大鼠肺组织纤维化评分、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ及TGF-β1、α-SMA mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.01),E-cad表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,各治疗组在各个时间点均不同程度改善,第14天,养清抗纤组肺纤维化评分降低(P<0.05),肺组织TGF-β1、α-SMA mRNA和蛋白表达较金水缓纤组和保肺化纤组显著降低(P<0.05,P<0.01);第28天,保肺化纤组Col-Ⅰ和Col-Ⅲ表达较吡菲尼酮组显著降低(P<0.05),α-SMA mRNA较养清抗纤组和金水缓纤组显著降低(P<0.05);第42天,金水缓纤组肺纤维化评分显著降低(P<0.05),α-SMA mRNA、TGF-β1蛋白表达较养清抗纤组显著降低(P<0.01)。结论:扶正通络消积三方在不同疾病发展阶段均能改善肺纤维化,保肺化纤方和金水缓纤方在中、晚期改善纤维化尤为显著。     

中药复方咳喘康干预大鼠肺纤维化的实验研究

目的:探讨中药复方咳喘康对博莱霉素致肺纤维化大鼠的干预作用及其机理。方法:将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、咳喘康组和激素组。除正常组外,其余3组用博莱霉素A5经气管注入大鼠制作肺纤维化模型,各组于造模后第1天给予相应药物,分别于第7、14、28天分批处死各组大鼠,每次每组5只,比较各组的肺系数、肺组织病理学变化、ELISA法测定肺组织匀浆中TGF-β1含量、RT-PCR法检测TGF-1βmRNA的表达。结果:咳喘康组大鼠肺组织病理学改变较模型组改善,其肺系数、肺组织匀浆中TGF-β1含量、TGF-1βmRNA的表达水平与模型组对照降低,且有随给药天数增加而降低的趋势(P<0.01)。结论:咳喘康可以有效的降低TGF-β1含量及抑制TGF-1βmRNA的表达从而起到拮抗肺纤维化的作用。     

从肺论治法和从肠论治法对克罗恩病大鼠肺与结肠TGF-β1含量的影响比较

目的:观察从肺论治法和从肠论治法对克罗恩病(CD)大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)含量的影响。方法:采用三硝基苯磺酸(TNBS)水溶液+无水乙醇一次灌肠法建立大鼠克罗恩病模型后分别灌喂从肺论治方(黄芪桔梗汤)、从肠论治方(黄芪黄连汤)和西药柳氮磺胺吡啶(SASP)进行实验性治疗,然后于0周、第3周两个时间点测定肺和结肠TGF-β1蛋白表达、TGF-β1 mRNA转录水平变化及血清中TGF-β1水平。结果:模型组大鼠0周时,结肠及肺组织中TGF-β1蛋白和TGF-β1 mRNA转录水平均较正常组显著升高(P<0.01),血清TGF-β1水平显著性高于正常组(P<0.01);3周后,模型组仍较正常组显著性性升高,各治疗组均较模型组显著性下调(P<0.01,P<0.05)。在下调结肠组织TGF-β1蛋白水平上,西药组虽然较模型组降低(P<0.05),但与正常组之间亦存在差异(P<0.01);且效果低于与中药从肠论治组(P<0.05)。而中药从肺论治组和从肠论治组与正常组之间没有明显差异。在下调肺组织TGF-β1 mRNA转录水平上,西药组与从肠论治组虽然较模型组降低(P<0.01),但与正常组之间亦存在差异(P<0.01)。而从肺论治组与正常组之间没有明显差异,但与从肠论治与西药组间存在差异(P<0.05)。在下调血清TGF-β1水平上,各治疗组虽较模型组下降但与正常组亦存在差异(P<0.01,P<0.05),而且从肠论治组较从肺论治组显著性降低(P<0.01)。结论:中西药物均能下调CD肺、肠组织、及血清中过度表达的TGF-β1,起到抗炎、促进修复、预防纤维化的作用;从肠论治方在减轻CD结肠组织的炎症反应、预防和减轻结肠组织纤维化方面效果突出;从肺论治方减轻肺内炎症和损伤,防止肺纤维化形成方面效果突出。