乙酰胆碱对离体豚鼠心室肌的直接作用机制探讨

目的 :研究乙酰胆碱 （ACh）对离体豚鼠心室肌的直接负性作用及机制。方法 :采用标准玻璃微电极细胞内记录技术记录动作电位 （AP）及肌力换能器记录心肌收缩力 （FC）的方法观察 ACh对离体豚鼠心室肌的作用 ,并观察几种受体或通道水平的阻断剂阿托品、氯化铯 （Cs Cl）、氯化镉 （Cd Cl2 ）对 ACh直接作用的影响。结果 :10 - 5 mol/LACh对心室肌动作电位持续时间 （APD）及 FC的抑制率分别为 7.31%和 37.5 7% （P<0 .0 5 ） ,10 - 5 mol/L阿托品和 2 0 m mol/L Cs Cl可阻断该作用 ,0 .1m mol/L Cd Cl2 对该作用无影响。结论 :10 - 5 m ol/L ACh对离体豚鼠心室肌有直接负性作用 ,ACh的作用与毒蕈碱型胆碱受体及 K+电流有关 ,而与 Ca2 +电流的关系可能不大。     

电针四白穴对神经阻断大鼠胃肌电的影响

目的:探讨电针四白穴,对大鼠胃肌电兴奋途径．方法:大鼠32只,随机分为4组．选用ip抗胆碱能M受体阻断剂阿托品、交感神经节阻断剂六羟季胺和肾上腺素能神经阻断剂利血平,观察电针四白穴对神经阻断大鼠胃肌电的影响．结果:大鼠腹腔注射阿托品、六羟季胺后,慢波高活动相平均振幅、慢波高活动相时程／慢波周期比值以及快波平均峰簇数下降(P<0．01, P<0．05,P<0．01);注射利血平后,以上三种参数分别升高(P<0．01,P>0．05,P<0．01)．针刺四白穴能部分取消阿托品、六羟季胺对大鼠胃肌电的抑制效应(P<0．05或P>0．05)．结论:电针足阳明经四白穴对胃调控作用的外周通路既有胆碱能神经、交感神经系统的参与,又有肾上腺素能神经系统的参与．     

快速刺激对豚鼠心房肌动作电位的影响及地尔硫卓、艾司洛尔的干预作用

研究钙离子拮抗剂、β受体阻断剂对豚鼠心房肌电生理性质的影响及对快速刺激引起的心房肌动作电位的变化的干预作用。采用玻璃微电极技术 ,对比 1.1,3.3μmol/L地尔硫卓和 4 ,12 μmol/L艾司洛尔灌流前后三种不同刺激频率 (5 0 0 ,10 0 0 ,15 0 0ms)下豚鼠离体心房肌动作电位的变化 ,然后给予 2 0min 15 0ms快速刺激 ,比较对照组和四个药物灌流组的恢复过程。结果 :地尔硫卓和艾司洛尔对基础状态的心房肌电生理性质无明显作用。快速刺激后对照组复极 90 %动作电位时程 (APD90 )、有效不应期 (ERP)在第 4分钟恢复 ,大剂量地尔硫卓组和艾司洛尔组在第 2分钟即恢复 ,两者均可改善短时间快速刺激后APD90 、ERP的恢复。结论 :细胞内Ca2 + 超载为电重构的发生机制之一 ,钙离子拮抗剂或 β受体阻断剂可减轻电重构的发生。     

胆碱对H2O2诱导的心肌细胞凋亡的保护作用

目的 探讨M3受体激动对H2O2诱导的大鼠培养心肌细胞凋亡的作用.方法 以 H2O2诱导大鼠培养心肌细胞损伤模型为基础,给予M3受体激动剂胆碱和M3受体阻断剂4DAMP进行干预.流式细胞仪检测细胞凋亡;RT-PCR检测凋亡抑制蛋白Bcl-2.结果 ①胆碱可显著降低 H2O2对心肌细胞的损伤,提高心肌细胞存活率,并降低细胞的凋亡率;②胆碱可增加凋亡心肌细胞Bcl-2的表达;③M3受体阻断剂4DAMP可逆转胆碱的上述作用(P＜0.01) .结论 激动M3受体对H2O2诱导的心肌细胞凋亡有保护作用,其机制可能与凋亡抑制蛋白Bcl-2有关.     

微电极阵芯片技术在心肌电生理研究中应用的可行性

目的探讨60极微电极阵芯片(MEA)技术在整体心脏、心肌组织片和培养心肌等电生理研究中的应用。方法①80只豚鼠,开胸取心脏并以2.5ml/min速度Langendorff灌流心脏20min,信号稳定后采样;②60只SD大鼠,开胸取心,剪取5mm×5mm大小的心脏组织片,置于MEA盘,台氏液间歇灌流5min,用5μV×1ms的刺激脉冲连续刺激,刺激间隔为1s,比较心房和心室组织片场电位(FPs)形态和传导时间;③20窝出生后3天以内的昆明小白鼠,消化分离心肌细胞,培养于MEA盘内,进行组织信号采样。结果①大鼠整体心脏灌流30～90min内能够记录到稳定的自主节律下的FPs信号,心室肌场电位时程(FPdur)210±78ms;心房肌FPdur164±58ms;房室传导时间320±150ms;并能记录到FPs激动顺序图。②心肌组织靶点取样,台氏液间歇灌流和电刺激下,组织的兴奋性可以稳定保持2h。心室肌组织片FPdur115.80±11.61ms,心房组织片FPdur83.71±6.48ms,刺激信号在心房组织片的传导时间66.46±6.73ms,心室组织片传导时间47.40±5.62ms;③小鼠乳鼠心脏原代培养心肌24h时后开始有散在、不同步的细胞克隆搏动和点状FPs信号,72h后细胞融合,开始记录到基本同步的群动和多位点FPs信号,培养心肌自发搏动频率150±100次/分。结论 MEA技术可以稳定记录小动物整体灌流心脏,心脏定点取样组织片,培养心肌细胞60极场电位和电传导特性。     

人心肌三磷酸腺苷敏感性钾通道的结构异质性及其与心房扩大的关联

目的探讨人心房肌和心室肌细胞膜上三磷酸腺苷敏感性钾通道(KATP)的结构差异性,及其主要调节亚单位磺酰脲类受体(SUR1和SUR2A)两者mRNA表达量与心房扩大的关系。方法应用逆转录聚合酶链式反应分析正常个体心房肌和心室肌组织中KATP主要配基SUR1和SUR2A mRNA表达量的差异(共7例,左房/左室),对比正常个体左右心房(左房7例,右房6例)SUR1和SUR2A mRNA表达量的差异,并比较病人组扩大心房(8例)和正常心房(29例)两种配基的mRNA表达量差异。结果 KATP通道配基SUR1在正常个体心房中mRNA的表达高于心室(0.438 00±0.197 42 vs 0.219 7±0.077 11,P<0.05),SUR2A则在心室的表达明显高于心房(0.543 7±0.091 61 vs 0.331 9±0.087 35,P<0.05)。正常个体左房和右房中两种调节亚基其mRNA的表达量无差异,P>0.05。病人组扩大心房中SUR1表达明显增加(0.595 9±0.081 56 vs 0.331 8±0.051 08,P<0.05;心房扩大后SUR2A的表达量也有增加(0.556 1±0.175 76 vs 0.380 1±0.108 94,P<0.05)。结论正常人心房肌和心室肌细胞膜上的KATP通道存在结构异质性,心房肌的主要配基为SUR1,而心室肌主要是SUR2A,两种配基其mRNA的表达量随心房的扩大而改变。     

U50,488H对大鼠肺动脉的舒张作用及机制

目的 :观察κ阿片受体选择性激动剂U5 0 ,4 88H对大鼠肺动脉的舒张作用并探讨其机制。方法 :分离正常大鼠肺动脉 ,采用离体血管灌流实验 ,观察U5 0 ,4 88H对大鼠肺动脉血管环舒缩功能的影响。结果 :①U5 0 ,4 88H在30～ 14 0 μmol/L范围内对大鼠肺动脉呈现明显的剂量依赖性舒张效应 ,该作用可被κ阿片受体选择性阻滞剂nor BNI所阻断 ;②经去内皮处理后 ,U5 0 ,4 88H对肺动脉的舒张效应显著减弱 ;③预先用NO合成酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯 （L NAME）处理可显著降低U5 0 ,4 88H对肺动脉的舒血管效应 ;而 β受体阻断剂心得安、M受体阻断剂 （阿托品 ）、KATP通道阻断剂 （优降糖 ）、前列腺素合成抑制剂 （消炎痛 ）等对U5 0 ,4 88H舒张肺动脉的作用无明显影响。结论 :本研究首次证明κ阿片受体激动剂U5 0 ,4 88H可内皮依赖性地舒张大鼠肺动脉 ,其舒张肺动脉的效应可能与NO途径有关。     

家兔心肌细胞的形态和电生理特征在膜片钳实验中的应用

本文研究家兔不同部位的单个心肌细胞形态和电生理特征在膜片钳全细胞钳制技术中的应用。方法 :采用胶原酶酶解法分离家兔不同部位单个心肌细胞。结果 :①心房肌细胞细长 ,两端尖细 ,横纹清楚 ;心室肌细胞粗短 ,呈柱状 ,横纹清楚 ,折光性强 ;房室结细胞呈椭圆形 ,细胞一般无横纹 ,胞体小。②心房肌和心室肌细胞动作电位(AP)的最大舒张电位 (MDP)均低于房室结细胞 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,而两者AP其他指标均高于房室结细胞 (P<0 .0 5或P <0 .0 1)。心室肌细胞复极 5 0 %时程和 90 %时程均长于心房肌细胞 (P <0 .0 1)。③心房肌和心室肌细胞INa最大峰值均明显高于房室结细胞 (P <0 .0 1) ,而心房肌和心室肌细胞INa最大峰值无差别 (P >0 .0 5 )。各细胞ICa最大峰值无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :心房肌和心室肌细胞易分离得到 ,横纹清晰 ,形态特征强 ,AP各参数典型 ,容易引出所需钳制电流。对于房室结细胞 ,分离难度大 ,没有清晰横纹 ,AP各参数和钳制电流不典型。     

P2X受体对豚鼠胃窦环行肌自发性收缩运动的影响

目的:探讨P2X受体激动剂α,β-methylene ATP (α,β-MeATP)对豚鼠胃窦环行肌运动的影响及其离子通道机制.方法:采用EWG/B豚鼠,制备去黏膜胃窦环行肌条(10×1.5 mm),并将其固定于恒温灌流槽内(37℃),用碳酸氢钠缓冲液连续灌流并通氧(950 mL/L O_2,50 mL/L CO_2).利用SMUP-E生物信号处理系统记录胃窦平滑肌自发性收缩活动,Ⅱ型胶原酶消化法分离豚鼠胃窦环行肌单细胞,传统全细胞膜片钳技术记录急性分离的胃窦平滑肌细胞膜电位和离子电流,包括钙激活钾电流、延迟整流型钾电流及电压依赖性钙电流.结果:嘌呤能P2X受体激动剂α,β-MeATP明显抑制豚鼠胃窦环行肌自发性收缩,并有明显的量效倚赖关系:5,10,20,40,100μmol/Lα,β-MeATP作用下,环行肌收缩幅度分别由对照组的100%下降到90%±2%.81%±4%,68%±4%,59%±7%和29%±4%(P<0.05).用神经阻断剂Tetrodotoxin (TTX)预处理后,α,β-MeATP对胃窦环行肌自发性收缩的抑制作用仍不受影响;在传统全细胞膜片钳电流钳模式下,500μmol/Lα,β-MeATP不影响细胞膜电位,也对两种外向钾电流,即延迟整流型钾电流和钙激活钾电流没有影响;不同浓度的α,β-MeATP对电压依赖性钙电流没有影响.结论:P2X受体激动剂抑制豚鼠胃窦环行肌自发性收缩,其作用机制不依赖内在神经,也不依赖细胞膜离子通道以及膜电位改变.     

微电极阵芯片技术在整体心脏、心肌组织片和培养心肌中的应用研究

目的 探讨微电极阵芯片技术(mieroelectrode arrays,MEA)在整体心脏、心肌组织片和培养心肌电活动的应用.方法 用MEA技术记录豚鼠整体心脏、SD大鼠心脏组织片和小鼠乳鼠心脏培养心肌的组织场电位变化规律.结果 (1)豚鼠整体心脏灌流30～90 min,记录到稳定的自主节律(120±90)次/min;心室和心房肌的场电位时程为(210±78)ms和(164±58)ms,房室传导时间为(320±150)ms.(2)SD大鼠心脏组织片兴奋性可以保持2 h,心室和心房组织的场电位时程为(115.80±11.61)ms和(83.71±6.48)ms.(3)小鼠乳鼠心脏原代培养自发搏动频率为(150±100)次/min,培养2～72 h,记录到同步的多位点场电位,并能随刺激频率同步显示场电位变化.结论 MEA技术是一个敏感、低噪音和长时间稳定的记录整体动物心脏、心脏靶点取样组织和培养心肌细胞的场电位、细胞间电活动传导和激动起源规律的研究工具.     

妊娠时间与肺结核复发的相关性研究及诊治对策

目的 分析肺结核史患者妊娠时间和肺结核复发间相关性.方法 选取我院收治的有肺结核史的妊娠妇女576例作为研究对象,对其妊娠前肺结核治疗、治愈后妊娠时间、妊娠后复发肺结核等进行分析,总结有肺结核史育龄女性的妊娠时间和肺结核复发之间的关系.结果 肺结核治愈后不同时间段妊娠者的结核复发率比较,差异具有显著性（P＜0.05）,停药后间隔时间越久妊娠,肺结核复发的几率越小.结论 加强孕期痰菌检查,及早发现复发肺结核,提高母婴安全.     

我国骨关节结核诊治的回顾与展望

骨关节结核是危害人们健康的严重感染性疾病,近95％由他处结核病继发而来.罹患骨关节结核疾病后几乎均将致残,严重影响人们的健康、工作和生活.建国以来在党和国家的关心和支持下,骨关节结核的诊治水平取得了长足进步.时至今日,由于多种原因,学科发展和被重视程度受到一定的制约,同整个医疗行业的发展不相适应.回顾过去,展望未来,我们需要重新审视骨关节结核的诊治方法,努力推进骨关节结核诊疗技术的科学发展.     

Replication and Inhibitors of Enteroviruses and Parechoviruses

The Enterovirus (EV) and Parechovirus genera of the picornavirus family include many important human pathogens, including poliovirus, rhinovirus, EV-A71, EV-D68, and human parechoviruses (HPeV). They cause a wide variety of diseases, ranging from a simple common cold to life-threatening diseases such as encephalitis and myocarditis. At the moment, no antiviral therapy is available against these viruses and it is not feasible to develop vaccines against all EVs and HPeVs due to the great number of serotypes. Therefore, a lot of effort is being invested in the development of antiviral drugs. Both viral proteins and host proteins essential for virus replication can be used as targets for virus inhibitors. As such, a good understanding of the complex process of virus replication is pivotal in the design of antiviral strategies goes hand in hand with a good understanding of the complex process of virus replication. In this review, we will give an overview of the current state of knowledge of EV and HPeV replication and how this can be inhibited by small-molecule inhibitors.     

Effect of phosphorylation of MAPK and Stat3 and expression of c-fos and c-jun proteins on hepatocarcinogenesis and their clinical significance

AIM To study the effect of phosphorylation ofMAPK and Stat3 and the expression of c-fos andc-jun proteins on hepatocellular carcinogenesisand their clinical significance.METHODS SP immunohistochemistry was usedto detect the expression of p42/44~(MAPK), p-Stat3,c-fos and c-jun proteins in 55 hepatocellularcarcinomas (HCC) and their surrounding livertissues.RESULTS The positive rates and expressionlevels of p42/44~(MAPK), p-Stat3, c-fos and c-junproteins in HCCs were significantly higher thanthose in pericarcinomatous liver tissues (PCLT).A positive correlation was observed between theexpression of p42/44~(MAPK) and c-fos proteins, andbetween p-Stat3 and c-jun, but there was nosignificant correlation between P42/44~(MAPK) and p-Stat3 in HCCs and their surrounding livertissues.CONCLUSION The abnormalities of Ras/Raf/MAPK and JAKs/ Stat3 cascade reaction maycontribute to malignant transformation ofhepatocytes. Hepatocytes which are positive forp42/ 44~(MAPK), c-fos or c-jun proteins may bepotential malignant pre-cancerous cells.Activation of MAPK and Stat3 proteins may be anearly event in hepatocellular carcinogenesis.     

心电图、心电向量图与冠状动脉造影结果对比分析

目的:通过分析心电图(Electrocardiogram,ECG)和心电向量图(Vectorcardiogram,VCG)的改变与冠脉造影（CAG）结果进行对比,探讨ECG、VCG在冠状动脉病变中的诊断价值。方法: 选择2008年1月~2009年12月临床拟诊断为冠心病患者108例,行常规ECG、VCG检查,并于1周内进行CAG,对检查结果依据各自的诊断标准进行判定,以CAG为标准诊断法,利用四格表法,计算相关评价真实性的指标并进行比较。结果: ①VCG检测的灵敏度、特异度、准确度显著高于ECG(P<0.05,P<0．01)。②ECG、VCG阳性率与冠脉病变支数组间比较:在单支病变、双支病变中,VCG阳性率明显高于ECG(P<0.05),左主干或三支病变无统计学意义;组内比较:ECG组左主干或三支病变组较单支病变、双支病变阳性率高(P<0.05,P<0.01);VCG组左主干或三支病变组较单支病变阳性率高(P<0.05);与双支病变阳性率比较无统计学意义;③ECG、VCG阳性率与冠脉病变程度组间比较:冠脉病变狭窄50%～69%的VCG阳性率明显高于ECG (P<0.05),其他两组阳性率比较无统计学意义;组内比较:ECG组冠脉病变狭窄≥90%较50%～69%、70%～89%的阳性率高(P<0.05,P<0.01); VCG组狭窄≥90%较50%～69%阳性率高（P<0.01),其他无统计学意义。结论: VCG对冠心病检测价值显著高于ECG。     

Detection and characterization of the product of hydroethidine and intracellular superoxide by HPLC and limitations of fluorescence

Here we report the structural characterization of the product formed from the reaction between hydroethidine (HE) and superoxide (O(2)(.-)). By using mass spectral and NMR techniques, the chemical structure of this product was determined as 2-hydroxyethidium (2-OH-E(+)). By using an authentic standard, we developed an HPLC approach to detect and quantitate the reaction product of HE and O(2)(.-) formed in bovine aortic endothelial cells after treatment with menadione or antimycin A to induce intracellular reactive oxygen species. Concomitantly, we used a spin trap, 5-tert-butoxycarbonyl-5-methyl-1-pyrroline N-oxide (BMPO), to detect and identify the structure of reactive oxygen species formed. BMPO trapped the O(2)(.-) that formed extracellularly and was detected as the BMPO-OH adduct during use of the EPR technique. BMPO, being cell-permeable, inhibited the intracellular formation of 2-OH-E(+). However, the intracellular BMPO spin adduct was not detected. The definitive characterization of the reaction product of O(2)(.-) with HE described here forms the basis of an unambiguous assay for intracellular detection and quantitation of O(2)(.-). Analysis of the fluorescence characteristics of ethidium (E(+)) and 2-OH-E(+) strongly suggests that the currently available fluorescence methodology is not suitable for quantitating intracellular O(2)(.-). We conclude that the HPLC/fluorescence assay using HE as a probe is more suitable [corrected] for detecting intracellular O(2)(.-).     

大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养和外源基因的导入

目的探讨绿色荧光蛋白基因转染骨髓间质干细胞的可行性。方法采用F icoll-PaqueTMP lus淋巴细胞分离液,根据细胞密度梯度原理,分离大鼠骨髓间充质干细胞(rM SC s)并进行体外原代培养和传代扩增,倒置相差显微镜观察细胞生长情况,免疫细胞化学法对其初步鉴定。流式细胞仪分析转染效率。结果原代和传代培养的细胞呈现梭形外观,具有较强的生长增殖能力;细胞均一表达CD44、CD54、CD106、CD29抗原。电穿孔法转染rM SC s转染率为32.8%±3%。结论采用比重为1.077 g/L的F icoll-PaqueTMP lus能分离获得大鼠骨髓间充质干细胞,经原代培养和传代培养能够迅速扩增。电穿孔法具有较高的介导外源基因表达于rM SC s的效率。     

Effect of phosphorylation of MAPK and Stat3 and expression of c-fas and c-jun proteins on hepatocarcinogenesis and their clinical significance

AIM To study the effect of phosphorylation ofMAPK and Stat3 and the expression of c-fos andc-jun proteins on hepatocellular carcinogenesisand their clinical significance.METHODS SP immunohistochemistry was usedto detect the expression of p42/44MAPK, p-Stat3,c-fos and c-jun proteins in 55 hepatocellularcarcinomas (HCC) and their surrounding livertissues.RESULTS The positive rates and expressionlevels of p42/44MAPK, p-Stat3, c-fos and c-junproteins in HCCs were significantly higher thanthose in pericarcinomatous liver tissues (PCLT).A positive correlation was observed between theexpression of p42/44MAPK and c-fos proteins, andbetween p-Stat3 and c-jun, but there was nosignificant correlation between p42/44MAPK and p-Stat3 in HCCs and their surrounding livertissues.CONCLUSION The abnormalities of Ras/Rat/MAPK and JAKs/ Stat3 cascade reaction maycontribute to malignant transformation ofhepatocytes. Hepatocytes which are positive forp42/ 44MAPK, c-fos or c-jun proteins may bepotential malignant pre-cancerous cells.Activation of MAPK and Stat3 proteins may be anearly event in hepatocellular carcinogenesis.     

医源性消化道出血常见病因及其防治

目的分析医源性消化道出血的常见病因,并探讨防治措施。方法就临床所见的69例医源性消化道出血进行分析。结果医源性消化道出血分布于临床各科室,病因各不相同,但以外科手术、外伤、脑血管意外、。肾功能衰竭、呼吸功能衰竭、激素治疗、阿司匹林治疗等为主,临床上多以黑便为主要症状;对于已发生的医源性消化道出血,及时予制酸剂和胃黏膜保护剂治疗,能及时止血,大出血时经积极止血及抗休克治疗,甚至内镜治疗效果良好。结论医源性消化道出血各个临床科室均常见,病因各异,经积极、合理的治疗多预后良好。     

Overweight and Obesity and Progression of ADPKD

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