昆虫细胞表达重组人胰岛素样生长因子1的研究

目的 利用杆状病毒ＡｃＭＮＰＶ载体在昆虫细胞中表达重组人胰岛素样生长因子１（ｒｈＩＧＦ－１）。方法 含有胰岛素样生长因子１（ＩＧＦ－１）ｅＤＮＡ的重组ＡｃＭＮＰＶ感染昆虫细胞株Ｓｆ不及Ｓｆ２１后,采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测被重组病毒感染的昆虫细胞表达产生的ｒｈＩＧＦ－１,以野生型ＡｃＭＮＰＶ感染的昆虫细胞及空白细胞的细胞培养液、细胞裂解物作对照。结果 （１）重组ＡｃＭＮＰＶ感染的昆虫细     

睾丸间质细胞胰岛素样生长因子－ⅠmRNA表达的调控

作者报道胰岛素样生长因子－Ⅰ（ＩＧＦ－Ⅰ）ｍＲＮＡ在大鼠睾丸中的基因表达。用１５％～６０％Ｐｅｒｃｏｌｌ密度梯度离心，可将粗制间质细胞分成三条带，ＩＧＦ－ⅠｍＲＮＡ主要位于富含Ｌｅｙｄｉｇ细胞的组分（带３）中，带１和带２组分几乎不含ＩＧＦ－ⅠｍＲＮＡ。Ｌｅｙｄｉｇ细胞ＩＧＦ－ⅠｍＲＮＡ具有碱基从０．８～７．５ｋｂ的多种型，在２５～５５日龄大鼠中均存在ＩＧＦ－ⅠｍＲＮＡ，用Ｋｌｉｎｅｆｅｌｔｅｒ等方法高度纯化Ｌｅｙｄｉｇ细胞，发现大多数ＩＧＦ－ⅠｍＲＮＡｆｔ于这些Ｌｅｙｄｉｇ细胞中，而在整个睾丸组织或其它间质细胞检测不到ＩＧＦ－ⅠｍＲＮＡ。大鼠予以生长激素（ＧＨ）后，Ｌｅｙｄｉｇ细胞中ＩＧＦ－ⅠｍＲＮＡ增加２倍以上，提示Ｌｅｙｄｉｇ细胞中的ＩＧＦ－ⅠｍＲＮＡ亦依赖ＧＨ，Ｌｅｙｄｉｇ细胞产生的ＩＧＦ－Ⅰ在睾丸中可能具有自分泌和旁分泌作用。     

不同肝病患者肝细胞中胰岛素样生长因子及其受体的表达

作者通过对慢性活动性肝炎（ｃｈｒｏｎｉｃａｃｔｉｖｅｈｅｐａｔｉ－ｔｉｓＣＡＨ）、肝炎后肝硬化（ｌｉｖｅｒｃｉｒｒｈｏｓｉｓＬＣ）、不典型肝细胞增生（ｄｙｓｐｌａｓｉａｌｉｖｅｒｃｅｌｌＤＬＣ）患者中人胰岛素样生长因子Ｉ（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒＩＩＧＦ－Ｉ）和ＩＧＦ－ａ受体基因转录水平表达的观察，结合不同肝病乙型肝炎病毒（ＨＢｖ）感染的背景资料，探讨ＩＧＦ－及其受体基因在肝细胞癌变演化过程中的作用及意义，试图为肝癌的早期诊断和基因治疗提供一定的理论依据。一、材料与方法１…     

胰岛素样生长因子在生长迟缓儿童诊断中的意义

为探讨胰岛素样生长因子在生长迟缓诊断中的意义,我们用免疫放射计量（ＩＲＭＡ）方法以及放射免疫（ＲＩＡ）方法测定身材矮小患儿２２例药物激发试验和１９３例运动激发试验血清中ＩＧＦ－１、ＩＧＦＢＰ－３和ＧＨ水平。结果：①正常对照组ＩＧＦ－１水平在不同年龄不同性别间有显著意义（Ｐ＜００１）ＩＧＦＢＰ－３水平在各年龄组之间差异无显著性意义。②ＧＨＤ组病人ＧＨ、ＩＧＦ－１、ＩＧＦＢＰ－３水平均是降低的。结论：ＩＧＦ－１和ＩＧＦＢＰ－３水平可以反映体内ＧＨ的分泌情况。     

表皮生长因子对Ⅰ型胰岛素样生长因子基因表达的影响

①目的研究表皮生长因子（ＥＧＦ）对胰岛素样生长因子（ＩＧＦ）基因表达的影响。②方法以Ⅰ型胰岛素样生长因子为探针，以ＥＧＦ刺激小鼠正常胚胎成纤维细胞及３Ｈ－ＴｄＲ转化的小鼠胚胎成纤维细胞后应用斑点杂交技术检测其ｍＲＮＡ水平的改变。③结果经ＥＧＦ作用后这两种细胞中ＩＧＦ－ＩｍＲＮＡ转录水平有所增高。④结论ＥＧＦ可诱导ＩＧＦ－Ｉ基因表达，但其诱导机制及二者协同作用对肿瘤的发生、发展有何影响有待于进一步研究     

转化生长因子—β1对活化巨噬细胞杀伤阿米巴原虫的作用

活化巨噬细胞产生的一氧化氮（ＮＯ）是抗阿米巴原虫的主要效应分子，转化生长因子（ＴＧＦ－β１）能够调节巨噬细胞的许多机能，包括ＮＯ产量，本文探讨了ＴＧＦ－β１对活化巨噬细胞体外杀伤溶组织内阿米巴滋养体的效力和ＮＯ产量及其合酶（ｍａｃ－ＮＯＳ）ｍＲＮＡ的表达与其相互关系。方法Ｂａｌｂ／ｃ小鼠骨髓巨噬细胞（ＢＭＭ）的ＮＯ产量用Ｇｒｉｅｓｓ方法检测ｍａｃ－ＮＯＳｍＲＮＡ表达水平（１）ＴＧＦ－β１本身不能直     

牛初乳短链IGF—1制剂对STZ糖尿病大鼠肾小球基底膜影响的研究

胰岛素样生长因子～１（ＩＧＦ～１）的结构有４５％与胰岛素相似，具有胰岛素样生理作用．短链ＩＧＦ～１（ｔｒｕｎｃａｔｅｄ ＩＧＦ－１）是普通ＩＧＦ－１（ｉｎｔａｃｔ ＩＧＦ－１）的变异体，生物活性更强，人们一直在尝试将其应用于治疗糖尿病、胰岛素抵抗综合征等病。国外学者已应用重级人ＩＧＦ－１制剂对此进行了大量的动物及临床实验，至今尚无定论。而应用牛初乳短链ＩＧＦ－１进行此类研究的报道尚未见到，国内也未     

碱性成纤维细胞生长因子受体的调节

检测转化生长因子β１，ＡＣＴＨ对碱性成纤维细胞生长因子受体的影响作用。方法：肾上腺皮质束网状带细胞的基础培养：＾１２５－Ｉ－ｂＦＧＦ－受体特异性结合标记；Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析。结果；２ｎｇ／ｍｌ ＴＧＦβ１处理细胞２４ｈ，每个细胞上高亲和力受体６５００个，低亲和力受体数１４００００个。     

转化生长因子β1在cos—7细胞中的短暂表达

本文将人转化生长因子β１（ｈＴＧＦβ１）全长ｃＤＮＡ克隆至真核表达载体ｐＭＡＭｎｅｏ的ＮｈｅＩ位点，利用ＤＥＡＥ－Ｄｅｘｔｒａｎ法将ｈＴＧＦβ１载体导入ｃｏｓ－７细胞中。实验结果表明：所构建的表达载体在ｃｏｓ－７细胞内有转录水平的表达，这为我们进一步研究ｈＴＧＦβ１在其它细胞内的表达与调控之间的关系奠定了基础。     

胰岛素样生长因子-1拮抗高浓度葡萄糖对人腹膜间皮细胞的毒性作用

目的：比较胰岛素样生长因子１（ｉｎｓｕｌｉｎｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ１，ＩＧＦ１）和表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）对高浓度葡萄糖的腹膜间皮细胞毒性作用的影响。方法：体外培养人腹膜间皮细胞，在上清中加入８３．３ｍｍｏｌ·Ｌ－１葡萄糖和不同浓度ＩＧＦ１或ＥＧＦ，培养２４、４８和７２ｈ后，测定３Ｈ胸腺嘧啶核苷（３ＨＴｄＲ）掺入率和上清中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）水平。结果：５０μｇ·Ｌ－１的ＩＧＦ１作用７２ｈ后，８３．３ｍｍｏｌ·Ｌ－１葡萄糖溶液中培养间皮细胞的３ＨＴｄＲ掺入率较高糖抑制组增加（７５±１５）％（Ｐ＜０．０１），作用２４ｈ，上清中ＬＤＨ水平较高糖抑制组减少（３４±８）％（Ｐ＜０．０１）；ＥＧＦ对高糖细胞毒性无明显影响（Ｐ＞０．０５）。结论：ＩＧＦ１能拮抗高浓度葡萄糖对人腹膜间皮细胞的毒性作用。     

胰岛素样生长因子—1拮抗高浓度葡萄糖对人腹膜间皮细胞的毒 …

目的 比较胰岛素样生长因子－１（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ－１，ＩＧＦ－１）和表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）对高浓度葡萄糖的腹膜间皮细胞毒性作用的影响。方法 体外培养人腹膜间皮细胞，在上清中加入８３．３ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１葡萄糖和不同浓度ＩＧＦ－１或ＥＧＦ，培养２４，４８和７２ｈ，测定＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入率和上清中乳酸脱     

上皮细胞生长因子的~（125）I标记及其放射性比活度的测定

采用氯甘脲（Ｉｏｄｏｇｅｎ）法对人上皮细胞生长因子（ＥＧＦ）进行￣（１２５）Ｉ标记。用放射免疫替代法测定￣（１２５）Ｉ－ＥＧＦ的放射性比活度为１１０μｃｉ／μｇ，以￣（１２５）Ｉ－ＥＧＦ作配基测定鼻咽癌细胞株ＣＮＥ＿１的ＥＧＦ受体，其特异性结合占总结合率的８８．６％。表明ＥＧＦ标记保持完好的生物学特性，可作为ＥＧＦ受体分析的高灵敏探针，亦可用于ＥＧＦ的放射免疫分析。     

胰岛素与类胰岛素生长因子 1 对多囊卵巢综合征患者雄激素产生的作用

目的研究胰岛素（ＩＮＳ）及胰岛素样生长因子－１（ＩＧＦ－１）在多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）中对卵巢雄激素产生的促进作用。方法根据体重指数将４８例ＰＣＯＳ患者分为肥胖组和非肥胖组；正常对照组１０例。测定上述对象的血促卵泡生成素（ＦＳＨ）、促黄体生成素（ＬＨ）及睾酮（Ｔ）。对４８例ＰＣＯＳ患者中的４０例动态观察口服糖耐量实验后ＩＮＳ、ＩＧＦ－１及雄稀二酮（Ａ）的水平。并对１０例ＰＣＯＳ患者及５例对照者在高ＩＮＳ条件下做卵巢间质组织培养，测定培养液中ＩＧＦ－１及Ａ。结果ＰＣＯＳ患者均存在高胰岛素血症及高雄激素血症；ＰＣＯＳ非肥胖组较肥胖组血ＩＧＦ－１衡定增高（Ｐ＜０．０１）。高浓度ＩＮＳ能明显提高卵巢间质培养液中的ＩＧＦ－１浓度及Ａ浓度（均Ｐ＜０．０５），两者呈正相关（Ｐ＜０．０５）。结论ＰＣＯＳ患者均存在高胰岛素血症，ＩＮＳ在卵巢局部参与调节ＩＧＦ－１系统，在高雄激素血症形成中起重要作用。     

转化生长因子β1基因修饰的小鼠树突状细胞在移植体内的迁移？…

目的 观察β型转化生长因子（ＴＧＦβ１）基因修饰的Ｂ１０小鼠骨髓树突关细胞（ＤＣ）在Ｃ３Ｈ小鼠体内的迁移和存活,以探讨ＤＣ生物学特性与移植耐受性的关系。方法 从Ｂ１０小鼠骨髓分离ＤＣ前体细胞,在粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子＋β型转化生长因子（ＧＭ－ＣＳＦ＋ＴＧＦβ）条件下培养增殖（ＧＣ１）并转导Ａｄ－ＬａｃＺ（Ｄｃ２）或Ａｄ－ＴＧＦβ１（ＤＣ３）,每组５×１０＾５个细胞注入Ｇ３Ｈ小鼠后掌皮下,分别     

胰岛素样生长因子结合蛋白－3基因在乳腺癌中的表达

我们应用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ法、组织原位分子杂交、细胞生长曲线和ＤＮＡ合成等技术，检测９例人类乳腺癌细胞株和２０例乳腺癌标本中胰岛素样生长因子结合蛋白－３（ＩＧＦＢＰ－３）基因的蛋白质和ｍＲＮＡ水平的表达，研究其生物学作用。结果：①在乳腺癌细胞株中，雌激素受体阴性（ＥＲ－）者，分泌大量的ＩＧＦＢＰ－３，而雌激素受体阳性（ＥＲ＋）者不分泌ＩＧＦＢＰ－３；②在乳腺癌病人标本中，ＥＲ（－）者ＩＧＦＢＰ－３ｍＲＮＡ的定量表达明显高于ＥＲ（＋）者（Ｐ＜０．００５）；③ＩＧＦＢＰ－３能明显增强乳腺癌ＭＣＦ－７细胞株胰岛素样生长因子－Ⅰ（ＩＧＦ－Ⅰ）所致的细胞生长和ＤＮＡ合成作用。结论：我们认为ＩＧＦＢＰ－３基因蛋白质和ｍＲＮＡ的表达水平有可能成为乳腺癌患者的预后指标。     

自由基促进猪内皮细胞c－sis mRNA／PDGF－B链蛋白表达的实验研究

采用免疫组织化学和原位杂交方法，研究自由基（ＦＲ）对猪主动脉内皮细胞（ＥＣ）的ｃ－ｓｉｓｍＲＮＡ及血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）Ｂ链蛋白表达的影响。结果显示，ＦＲ促进ｃ－ｓｉｓｍＲＮＡ和ＰＤＧＦ－Ｂ链蛋白的表达。ＥＣ暴露于ＦＲ２０ｍｉｎ，ｃ－ｓｉｓｍＲＮＡ和ＰＤＧＦ－Ｂ链蛋白的表达较对照组分别增加１．０和２．２倍。提示，ＦＲ损伤ＥＣ所诱导的ＰＤＧＦ合成增多在动脉粥样硬化的发病过程中可能起重要作用。     

肺癌组织表皮生长因子及其受体的检测

本文应用免疫组化ＡＢＣ法检测了５８例肺癌和１５例正常肺组织中表皮生长因子（ＥＧＦ）与表皮生长因子受体（ＥＧ－Ｒ）的表达情况。正常片组织ＥＧＦ阳性率２０％（３／１５），ＥＧＦ－Ｒ１阳性率１３％（２／１５），主要着色于支气管上皮刷状缘，均为弱阳性。肺癌中ＥＧＦ主要着色于胞浆区，ＥＧＦ－Ｒ主要分布于胞膜和胞浆区，ＥＧＦ阳性率５５．２％（３２／５８），ＥＧＦ－Ｒ阳性率５１．７％（３０／５８），明显高于正常对照组织（Ｐ＜０．０５），有淋巴结转移或直径大于５ｃｍ的肺癌中ＥＧＦ和ＥＧＦ－Ｒ阳性率明显高于淋转阴性或直径小于５ｃｍ者；高分化癌中ＥＧＦ和ＥＧＦ－Ｒ阳性率也较高。ＥＧＦ和ＥＧＦ－Ｒ表达与年龄、性别、吸烟史无明显相关。本文结果提示部分肺癌可过度表达ＥＧＦ或ＥＧＦ－Ｒ　ＥＧＦ／ＥＧＦ－Ｒ自分泌可能在肺癌生长中起一定的促进作用。     

胰岛素样生长因子1促许旺细胞生长的实验研究

目的 探索促进许旺细胞增殖的方法。方法 将原代大鼠许旺细胞进行体外培养，并在培养基中加入不同浓度的胰岛素样生长因子１（ＩＧＦ－１）。通过绘制细胞生长曲线及＾３Ｈ－ＴｄＲ渗入等方法，观察ＩＧＦ－１对许旺细胞的作用。结果 ＩＧＦ－１能使培养的许旺细胞增殖加快，提前进入平台期。许旺细胞的增殖与ＩＧＦ－１的浓度在一定范围内呈现量效关系，同时ＩＧＦ－１的作用并不导致许旺细胞的肥大。结论 ＩＧＦ－１对许旺细胞     

人结肠癌中EGFR、EGF及TGF－α的基因表达

本文报道了人结肠癌细胞系（ＬＳＴ１７４、ＨＴ１０、Ｌｏｖｏ）中表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）及其配体即表皮生长因子（ＥＧＦ）和转化生长因子（ＴＧＦα）的基因表达。从人结肠癌细胞系细胞提取总ＲＮＡ，经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ吸印转移后，用［α－３２Ｐ］－ｄＣＴＰ标记的ＥＧＦ、ＴＧＦα及ＥＧＦＲｃＤＮＡ探针进行杂交，放射自显影结果表明三个结肠癌细胞系中均有ＥＧＦｍＲＮＡ及ＥＧＦＲｍＲＮＡ的表达。ＬＳＴ１７４ＨＴ１０中亦有ＴＧＦα的基因表达，Ｌｏｖｏ无ＴＧＦα的表达。结果说明人结肠癌存在生长因子自泌循环。这些癌细胞系中自泌的生长因子作用于自身的ＥＧＦＲ，不断地刺激其自身增殖，这可能是癌细胞自主无休止生长的主要原因之一。     

细胞因子TGF－β_1、PDGF－BB、bFGF在人肝纤维化中的作用

研究和探讨转化生长因子（ＴＧＦ）－β１、血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）－ＢＢ、碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）在人肝纤维化中的作用，进一步阐明人体慢性肝病纤维化发生机制。外科切除的肝细胞标本按病变活动程度分为活动性、非活动性或轻度活动性以及对照组，以Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分子杂交法测肝组织ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ，以免疫组化法显示组织原位ＰＤＧＦ－ＢＢ，ｂＦＧＦ及其相关细胞，并作半定量分析。结果：（１）肝病组织内ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ含量随肝病活动程度而增高（Ｐ＜０．０１）；（２）组织原位ＰＤＧＦ－ＢＢ、ｂＦＧＦ多肽定位及阳性细胞半定量显示，活动性肝病时两者均增高，阳性细胞所在部位与单核巨噬细胞以及胶原生成细胞一致，与Ⅰ、Ⅲ型胶原沉积也有密切关系。结论：本实验提示细胞因子ＴＧＦ－β１、ＰＤＧＦ－ＢＢ、ｂＦＧＦ在人肝纤维化中起着关键的调节作用。