胃瘤安不同组方对人胃癌SGC-7901增殖、细胞周期和凋亡的影响

目的:通过观察胃瘤安(全方、三棱莪术方、无三棱莪术方)小、中、大3个剂量作用于人胃癌SGC-7901细胞24、48h,探讨其对胃癌细胞的生长抑制作用及细胞周期和凋亡的影响,并对3种组方的胃瘤安进行比较。方法:用RPMI1640培养液对人胃癌细胞SGC-7901进行传代培养,采用MTT法检测胃瘤安不同组方对SGC-7901的生长抑制作用,采用流式细胞术检测胃瘤安不同组方对SGC-7901细胞凋亡及周期的影响。结果:胃瘤安3种不同组方均可抑制SGC-7901细胞增殖;3种不同组方的胃瘤安均可促进正常的SGC-7901细胞凋亡,细胞周期分析提示胃瘤安(全方)、胃瘤安(无三棱、莪术)将细胞SGC-7901阻滞于S期,胃瘤安(三棱、莪术)将SGC-7901细胞阻滞于G0/G1期,效应均呈浓度和时间依赖性。结论:胃瘤安3种不同组方均能抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖,可将细胞阻滞在S和G0/G1期,其中以胃瘤安(全方)、胃瘤安(无三棱、莪术)效果最为明显。     

特异性阻断Shh信号通路对胃癌细胞系SGC-7901增殖和凋亡的影响

目的:研究Sonic Hedgehog(Shh)信号通路对胃癌细胞系SGC-7901增殖和凋亡的影响。方法:用四唑蓝(MTT)比色试验检测Shh信号通路特异性抑制剂cyclopamine对胃癌细胞系SGC-7901增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞增殖指数(PI)和凋亡指数(AI)。结果:Cyclopamine对SGC-7901细胞株增殖的抑制作用呈剂量和时间依赖性;Cyclopamine作用后使胃癌细胞周期阻滞在G0/G1期,细胞凋亡增加。结论:Shh信号分子对胃癌细胞的增殖起维持作用;通过特异性阻断该信号通路,可以抑制胃癌细胞增殖,并促进细胞凋亡。     

茯苓对胃癌细胞株SGC-7901的侧群细胞增殖的影响

目的:探讨含茯苓药物血清对胃癌细胞SGC-7901侧群细胞(side population,SP)的增殖能力的影响。方法:首先制作含茯苓药物血清。之后应用流式细胞仪技术分选体外培养的胃癌SGC-7901细胞株中的SP细胞。应用CCK-8法观察含茯苓药物血清干预SP细胞后细胞增殖能力的变化。之后利用流式细胞仪技术检测含茯苓药物血清干预SP细胞后细胞周期的变化。结果:胃癌SGC-7901细胞株中SP细胞比例为4.4%±0.6%。含茯苓药物血清干预后,胃癌SGC-7901细胞株SP细胞的增殖能力受到明显抑制(P<0.01)。此外,含茯苓药物血清干预后,SP细胞的细胞周期被阻滞于G0、G1期,而S、G2/M期细胞减少,并且随着干预时间的延长,此种趋势更加明显,同时也就验证了细胞增殖实验的实验结果。结论:研究结果表明,胃癌SGC-7901细胞株中存在且能成功分选出SP细胞。含茯苓药物血清通过对细胞周期的改变,来抑制胃癌SGC-7901细胞株SP细胞的增殖能力。     

海莲叶提取物对胃癌细胞增殖的抑制作用及对小鼠急性毒性试验

目的 研究海莲叶提取物（BSLE）对人胃癌细胞增殖的抑制作用及其对小鼠的急性毒性。方法 先以CCK-8细胞增殖抑制试验测试BSLE对人胃癌细胞SGC-7901和MGC80-3的抑制作用。再以流式细胞术观察BSLE对人胃癌细胞周期的影响。然后建立人胃癌细胞SGC-7901和MGC80-3的裸小鼠皮下移植瘤模型,观察BSLE对胃癌细胞皮下移植瘤的抑制作用。最后将BSLE以9.6 g/kg剂量对小鼠单次给药,观察其急性毒性大小。结果 BSLE在细胞实验中剂量依赖性地抑制两种常见的胃腺癌细胞SGC-7901和MGC80-3的增殖,对这两种细胞的IC50分别为31.02 μg/mL和35.23 μg/mL。在裸小鼠抑瘤试验中,BSLE随着剂量增加对胃癌细胞皮下移植瘤生长的抑制作用逐渐增强,相对肿瘤增殖率（T/C）均低于40%。流式细胞术的结果显示BSLE能增加肿瘤细胞进入G0/G1期的细胞比率,提示它可能作用于G0/G1期。BSLE的急性毒性反应主要为腹泻和体重增长缓慢。结论 BSLE对胃癌细胞增殖有抑制作用,其作用机理可能与阻滞细胞G0/G1期有关。BSLE对小鼠的急性毒性反应较少且症状轻。     

芦荟大黄素抑制人胃癌细胞株SGC-7901增殖研究

目的：研究芦荟大黄素对人胃癌细胞株SGC-7901的增殖抑制机制。方法：采用MTT方法观察芦荟大黄素对人胃癌细胞株SGC-7901的增殖抑制作用；采用流式细胞仪技术检测细胞周期和DNA含量；应用免疫组化方法观察PCNA的表达。结果：芦荟大黄素能抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖（P〈0．05）；使G0／G1期细胞增多，使S期和G2／M期的细胞明显减少，细胞增殖抑制率明显增高，DNA指数明显降低（P〈0．05）；芦荟大黄素能抑制PCNA的表达（P〈0．05）。结论：芦荟大黄素抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖，可能是通过抑制PCNA的表达而影响细胞周期的结果。     

(±)2-(7,8,3,′4,′5′-五甲氧基)黄烷通过诱导周期阻滞和细胞凋亡抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖

目的研究(±)2-(7,8,3′,4′,5′-五甲氧基)黄烷(PMF)体外对人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制作用及机制。方法MTT法检测不同浓度PMF体外对SGC-7901细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测PMF对细胞周期分布的影响;Western blot法检测PMF对凋亡相关蛋白PARP、caspase-3表达的影响。结果不同浓度的PMF作用72 h可剂量依赖性地抑制SGC-7901细胞增殖;PMF作用12 h可使SGC-7901细胞周期阻滞于G2/M期;PMF作用24 h细胞周期检测可见亚二倍体峰(SubG1),并可诱导细胞凋亡相关蛋白PARP、caspase-3的活化。结论PMF体外可抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖,其增殖抑制作用与诱导G2/M周期阻滞和细胞凋亡有关。     

淫羊藿苷对胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响

目的观察中药提取成分淫羊藿苷(ICA)对人胃癌细胞株(SGC-7901)增殖的影响。方法用低、中、高3个浓度淫羊藿苷(ICA)干预处于对数分裂期的胃癌细胞,在12、24、36、48h,用MTT法检测各组细胞的OD值,计算抑制率;流式细胞仪(PI法)检测各组的细胞周期。结果与对照组比较,低、中、高浓度组均对SGC-7901细胞有抑制作用,且呈一定的量效、时效关系,在同一浓度组中,随时间延长ICA的抑制作用逐渐增强,于24h达到高峰。其中中浓度24h的抑制作用最为显著。ICA使胃癌细胞G0/G1期的比例明显升高,中浓度时细胞增殖周期变化最明显。结论ICA对胃癌细胞SGC-7901有一定的抑制作用,并为胃癌的治疗提供新的策略。     

告达庭对人胃癌细胞株SGC-7901细胞增殖和凋亡的调节作用

目的研究告达庭(caudatin)对SGC-7901胃癌细胞增殖与凋亡的调节作用及可能的分子机制。方法 MTT法检测告达庭对SGC-7901细胞增殖的影响;流式细胞术分析SGC-7901细胞周期的变化;细胞形态学、琼脂糖凝胶电泳及FITC-AnnexinⅤ/PI双标记检测对胃癌细胞凋亡的影响,免疫印迹实验检测细胞凋亡相关蛋白表达水平。结果可明显抑制SGC-7901细胞的增殖,且抑制作用呈时间和剂量依赖性;SGC-7901细胞经告达庭作用24h后,处于G1期的细胞数目增加,而G2期和S期的细胞数目明显减少,并发生明显的凋亡;调节Bcl-2家族相关因子的表达水平和活化caspase-9、caspase-3与告达庭诱导SGC-7901细胞凋亡相关。结论告达庭可抑制SGC-7901胃癌细胞的增殖并诱发凋亡,其分子机制可能与调节Bcl-2与Bax的平衡以及释放CytC,进而促进caspase-9、caspase-3和PARP的降解密切相关。     

黄芪多糖对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制作用的体外研究

目的研究黄芪多糖对人胃癌SGC-7901细胞株的增殖的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察黄芪多糖对胃癌SGC-7901细胞株的抑制作用。结果黄芪多糖能抑制人胃癌SGC-7901细胞株的增殖,并呈浓度及时间依赖性。结论黄芪多糖在体外对胃癌细胞株SGC-7901细胞的增殖有明显的抑制作用。     

阿司匹林对人胃癌细胞SGC-7901、BGC-823生长和自噬的影响

目的:研究阿司匹林对人胃癌细胞SGC-7901、BGC-823生长和自噬的影响。方法:以SGC-7901、BGC-823细胞为研究对象,磷酸盐缓冲液(PBS)为阴性对照组,作用时间为48 h,采用MTT法检测1、2、4、6、8、10 mmol/L阿司匹林以及5 mmol/L阿司匹林单用和分别与2.5μmol/L氯喹、2.5μmol/L 3-甲基腺嘌呤(3-MA)联用对胃癌细胞存活率的影响;采用流式细胞术检测2、5mmol/L阿司匹林以及5 mmol/L阿司匹林单用和分别与2.5μmol/L氯喹、2.5μmol/L 3-MA联用对胃癌细胞凋亡率和细胞周期分布的影响;采用Hoechst33258染色观察5 mmol/L阿司匹林对胃癌细胞核形态学的影响;采用Transwell小室试验检测5 mmol/L阿司匹林对胃癌细胞迁移的影响;采用激光共聚焦扫描显微镜观察5 mmol/L阿司匹林对胃癌细胞内自噬体形成的影响;采用Western blot法检测2、5 mmol/L阿司匹林对胃癌细胞内自噬标志物LC3-Ⅱ蛋白表达的影响。结果:与阴性对照组比较,阿司匹林能明显抑制SGC-7901、BGC-823细胞的存活率,且呈浓度依赖性,但对SGC-7901、BGC-823细胞的凋亡率没有明显影响,能够诱导细胞周期阻滞在G_1期。与阿司匹林单用组比较,阿司匹林+氯喹和阿司匹林+3-MA作用后SGC-7901、BGC-823细胞存活率明显升高,G_1期细胞分布率明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与阴性对照组比较,阿司匹林作用后SGC-7901、BGC-823细胞均未见明显的DNA裂解片段、凋亡小体以及碎块状的浓密亮蓝色,迁移数量明显减少(P<0.001),自噬体明显增加,LC3-Ⅱ蛋白表达明显增强(P<0.05)。结论:阿司匹林能够显著抑制胃癌细胞SGC-7901、BGC-823的生长,使其细胞周期停滞在G_1期,其作用机制可能与激活细胞自噬有关。     

RXRγ、RARβ在9-cis-RA抑制人胃癌SGC7901细胞生长中的作用

目的:探讨维甲类X受体(RXR)γ、RARβ在RXR激动剂9-顺维甲酸(9-cis-RA)抑制人胃癌SGC7901细胞生长中的作用.方法:体外培养SGC7901细胞给予9-cis-RA干预,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术、HE染色、免疫组化染色、Western-blot检测9-cis-RA作用后SGC7901细胞生长情况、凋亡率、细胞周期的改变、RXRγ及RARβ表达情况.结果:SGC7901细胞与9-cis-RA共同培养48 h后,肿瘤细胞生长受到抑制,其作用具有浓度及时间依赖性.流式细胞仪检测显示处于G0/G1期的细胞增多,凋亡率增高,免疫组化及Western-blot 检测显示20 μmol/L 的9-cis-RA 作用72 h后,RXRγ、RARβ蛋白表达增加.结论:9-cis-RA可通过上调RXRγ、RARβ蛋白表达诱导细胞凋亡从而抑制人胃癌SGC7901细胞生长.     

川陈皮素对人胃癌细胞SGC-7901抑制作用的实验研究

目的研究川陈皮素的体外抗人胃癌细胞SGC-7901作用。方法以不同浓度（1.25、2.5、5、10、20、40、80、160mg/L）的川陈皮素作用于SGC-7901细胞,分别用MTT法、细胞生长曲线研究其对SGC-7901的增殖抑制作用。结果MTT显示川陈皮素浓度在2.5～80mg/L时,对SGC-7901细胞的抑制率为19%～90%,IC50值为（21.28±4.17）mg/L。生长曲线提示川陈皮素对SGC-7901细胞的抑制作用呈明显时效和量效关系。结论川陈皮素对人胃癌细胞SGC-7901有较强的增殖抑制作用。     

莱菔硫烷对SGC-7901细胞周期及ALP、LDH活性的影响

目的研究莱菔硫烷（sulforaphane，SFN）对人胃腺癌SGC-7901细胞周期及分化标志酶碱性磷酸酶（ALP）、乳酸脱氢酶（LDH）活性的影响。方法通过不同剂量SFN处理体外培养的SGC-7901细胞株，采用SRB法检测SFN对细胞增殖的影响；荧光染色法观察细胞形态，流式细胞仪测定细胞周期；酶标仪检测ALP及LDH活性变化。结果SFN可明显抑制SGC-7901细胞增殖．其G150为1805μM；细胞形态发生明显改变：作用48h后细胞周期出现G0／G1期阻滞的特征性动力学改变；细胞内ALP和LDH活性随给药剂量的增加而显著降低（P〈001）。结论SFN可抑制SGC-7901细胞的增殖．将细胞阻滞于G0／G1期并降低ALP和LDH的活性．提示其可能具有诱导SGC-7901细胞分化的作用。     

Effect of curcumin on multidrug resistance in resistant human gastric carcinoma cell line SGC7901/VCR

AIM: To investigate the reversal effects of curcumin on multidrug resistance (MDR) in a resistant human gastric carcinoma cell line. METHODS: The cytotoxic effect of vincristine (VCR) was evaluated by MTT assay. The cell apoptosis induced by VCR was determined by propidium iodide (PI)-stained flow cytometry (FCM) and a morphological assay using acridine orange (AO)/ethidium bromide (EB) dual staining. P-glycoprotein (P-gp) function was demonstrated by the accumulation and efflux of rhodamine123 (Rh123) using FCM. The expression of P-gp and the activation of caspase-3 were measured by FCM using fluorescein isothiocyanate (FITC)-conjugated anti-P-gp and anti-cleaved caspase-3 antibodies, respectively. RESULTS: Curcumin, at concentrations of 5 micromol/L, 10 micromol/L, or 20 micromol/L, had no cytotoxic effect on a parent human gastric carcinoma cell line (SGC7901) or its VCR-resistant variant cell line (SGC7901/VCR). The VCR-IC50 value of the SGC7901/VCR cells was 45 times more than that of the SGC7901cells and the SGC7901/VCR cells showed apoptotic resistance to VCR. SGC7901/VCR cells treated with 5 micromol/L, 10 micromol/L, or 20 micromol/L curcumin decreased the IC50 value of VCR and promoted VCR-mediated apoptosis in a dose-dependent manner. Curcumin (10 micromol/L) increased Rh123 accumulation and inhibited the efflux of Rh123 in SGC7901/VCR cells, but did not change the accumulation and efflux of Rh123 in SGC7901 cells. P-gp was overexpressed in SGC7901/VCR cells, whereas it was downregulated after a 24-h treatment with curcumin (10 micromol/L). Resistant cells treated with 1 mumol/L VCR alone showed 77% lower levels of caspase-3 activation relative to SGC7901 cells, but the activation of caspase-3 in the resistant cell line increased by 44% when cells were treated with VCR in combination with curcumin. CONCLUSION: Curcumin can reverse the MDR of the human gastric carcinoma SGC7901/VCR cell line. This might be associated with decreased P-gp function and expression, and the promotion of caspase-3 activation in MDR cells.     

奥曲肽联合奥美拉唑体外对胃癌细胞株SGC-7901生长的影响

目的探讨联合奥曲肽与奥美拉唑在体外对人胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响及其可能的作用机制。方法采用MTT法检测奥曲肽和奥美拉唑对SGC-7901细胞生长的影响,根据中效原理判断联合用药的效果;流式细胞仪检测联合用药对SGC-7901细胞的细胞周期、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。结果奥曲肽联合奥美拉唑在体外能显著抑制SGC-7901细胞的生长,联合用药对SGC-7901细胞的抑制作用强于单独用药,两药联合应用在高水平效应合用指数小于1,具有明显的协同作用;联合用药能使SGC-7901细胞周期停滞于G0/G1期,下调Bcl-2且上调Bax蛋白的表达。结论奥曲肽联合奥美拉唑在体外可以抑制SGC-7901细胞的生长,具有协同效应,其机制可能与下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白表达有关。     

紫杉醇联合miR-200b对胃腺癌SGC-7901细胞增殖侵袭能力的影响

【摘要】目的 体外观察紫杉醇联合应用miR-200b模拟物（miR-200b mimics）对抑制胃癌SGC-7901细胞增殖侵袭能力的影响。方法 分别单独应用miR-200b转染细胞（200b组）及50 nmol/L紫杉醇单独处理胃癌SGC-7901细胞（紫杉醇组）,并联合应用上述两者（联合组）,同时设转染无义序列组和对照组。通过流式细胞技术检测细胞的凋亡水平和周期分布情况,克隆形成实验检测细胞的增殖能力,Transwell侵袭实验和细胞划痕实验观测细胞的侵袭迁移能力,Western-blot检测E2F3蛋白的表达水平。结果 与单药组相比,联合组早期凋亡率显著升高;克隆形成率显著降低,穿过Transwell小室的细胞数目显著减少;划痕48 h后的细胞迁移能力明显降低;E2F3蛋白在200b组及联合组中表达水平降低（均P< 0.001）。联合组阻滞于G2/M期细胞的比例高于200b组、无义序列组及对照组,但和紫杉醇组比较差异无统计学意义。结论 miR-200b可能通过降低E2F3表达增强紫杉醇对胃癌SGC-7901细胞增殖侵袭能力的抑制作用。     

5杂-氮-2′-脱氧胞苷对顺铂耐药胃癌SGC-7901细胞14-3-3σ基因甲基化的影响

目的观察5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对顺铂耐药胃癌SGC-7901细胞14-3-3σ基因甲基化的影响;探讨14-3-3σ基因甲基化与顺铂耐药胃癌SGC-7901细胞耐药的关系。方法建立人胃癌顺铂耐药细胞株SGC-7901/CDDP,并用特异性甲基化抑制物5-Aza-CdR干预。MSP法检测14-3-3σ基因甲基化状态,蛋白质印迹法检测14-3-3σ蛋白表达,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术分析细胞周期与凋亡。结果 SGC-7901/CDDP细胞的14-3-3σ基因高度甲基化并沉默,经过5、10μmol.L-15-Aza-CdR处理后,14-3-3σ蛋白重新表达,细胞发生顺铂耐药逆转,细胞活性抑制、在G0/G1期出现阻滞以及凋亡率明显增加。结论 5-Aza-CdR具有抑制顺铂耐药胃癌SGC-7901细胞14-3-3σ基因甲基化的作用,同时,顺铂作用与耐药机制部分依赖于14-3-3σ基因。