告达庭对人胃癌细胞株SGC-7901细胞增殖和凋亡的调节作用

目的研究告达庭(caudatin)对SGC-7901胃癌细胞增殖与凋亡的调节作用及可能的分子机制。方法 MTT法检测告达庭对SGC-7901细胞增殖的影响;流式细胞术分析SGC-7901细胞周期的变化;细胞形态学、琼脂糖凝胶电泳及FITC-AnnexinⅤ/PI双标记检测对胃癌细胞凋亡的影响,免疫印迹实验检测细胞凋亡相关蛋白表达水平。结果可明显抑制SGC-7901细胞的增殖,且抑制作用呈时间和剂量依赖性;SGC-7901细胞经告达庭作用24h后,处于G1期的细胞数目增加,而G2期和S期的细胞数目明显减少,并发生明显的凋亡;调节Bcl-2家族相关因子的表达水平和活化caspase-9、caspase-3与告达庭诱导SGC-7901细胞凋亡相关。结论告达庭可抑制SGC-7901胃癌细胞的增殖并诱发凋亡,其分子机制可能与调节Bcl-2与Bax的平衡以及释放CytC,进而促进caspase-9、caspase-3和PARP的降解密切相关。     

舒尼替尼与Combretastatin A-4联合用药体外抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖作用研究

目的 对舒尼替尼与Combretastatin A-4(CA-4)联合用药的抗肿瘤活性进行研究。方法 SRB法测定比较舒尼替尼、CA-4及联合用药对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制作用。PI染色法、DAPI染色法及Western blot法检测舒尼替尼联合应用CA-4诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡作用。结果 联用舒尼替尼和CA-4在体外能协同抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖。舒尼替尼联用CA-4能够诱导SGC-7901肿瘤细胞凋亡,并且伴随着caspase-3的激活和PARP的裂解。结论 舒尼替尼与CA-4联合用药在体外能协同诱导人胃癌SGC-7901肿瘤细胞增殖。     

特异性阻断Shh信号通路对胃癌细胞系SGC-7901增殖和凋亡的影响

目的:研究Sonic Hedgehog(Shh)信号通路对胃癌细胞系SGC-7901增殖和凋亡的影响。方法:用四唑蓝(MTT)比色试验检测Shh信号通路特异性抑制剂cyclopamine对胃癌细胞系SGC-7901增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞增殖指数(PI)和凋亡指数(AI)。结果:Cyclopamine对SGC-7901细胞株增殖的抑制作用呈剂量和时间依赖性;Cyclopamine作用后使胃癌细胞周期阻滞在G0/G1期,细胞凋亡增加。结论:Shh信号分子对胃癌细胞的增殖起维持作用;通过特异性阻断该信号通路,可以抑制胃癌细胞增殖,并促进细胞凋亡。     

丙泊酚对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响及其机制研究

摘要：目的:探究麻醉药丙泊酚对人胃癌SGC-7901细胞体外增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:体外培养人胃癌SGC-7901细胞,分别使用不同浓度(0,2,4,6μg·ml-1)的丙泊酚干预SGC-7901细胞(其中0μg·ml-1为对照组),采用克隆形成实验测定丙泊酚对SGC-7901细胞克隆形成能力的影响,噻唑蓝（MTT）法检测丙泊酚对SGC-7901细胞活力的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测增殖细胞核抗原、凋亡相关蛋白以及Wnt/β-连环蛋白（Wnt/β-catenin）信号转导途径相关蛋白水平。在4μg·ml-1的丙泊酚处理的SGC-7901细胞组施加Wnt/β-catenin信号转导途径特异性激活剂氯化锂（Li Cl）,检测对SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响。结果:与对照组比较,丙泊酚组SGC-7901细胞克隆形成数目、光密度（OD）值、增殖细胞核抗原（PCNA）和Ki-67、β-连环蛋白（β-catenin）、c-myc和细胞周期蛋白D1（cyclin D1）蛋白水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,凋亡率、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved caspase-3）蛋白水平明显升高（P<0.01）。而Wnt/β-catenin激活剂LiCl可减弱丙泊酚对SGC-7901细胞的增殖抑制的作用,部分逆转丙泊酚对SGC-7901细胞凋亡诱导的作用。结论:丙泊酚抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,促进细胞凋亡,其潜在分子机制是通过抑制Wnt/β-catenin信号转导途径来实现的。     

七叶皂苷体外抗SGC-7901细胞的作用及机制研究

目的研究七叶皂苷体外抗SGC-7901肿瘤细胞的作用及其机制。方法采用MTT法观察药物对SGC-7901肿瘤细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞仪检测SGC-7901肿瘤细胞周期的变化;FITC-AnnexinⅤ/PI双标记检测SGC-7901肿瘤细胞的凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。结果七叶皂苷可明显抑制SGC-7901肿瘤细胞的增殖,并抑制细胞周期和诱导细胞发生凋亡,可下调凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。结论七叶皂苷体外对SGC-7901肿瘤细胞具有良好的抑制作用,并可诱导细胞发生凋亡。     

胃瘤安不同组方对人胃癌SGC-7901增殖、细胞周期和凋亡的影响

目的:通过观察胃瘤安(全方、三棱莪术方、无三棱莪术方)小、中、大3个剂量作用于人胃癌SGC-7901细胞24、48h,探讨其对胃癌细胞的生长抑制作用及细胞周期和凋亡的影响,并对3种组方的胃瘤安进行比较。方法:用RPMI1640培养液对人胃癌细胞SGC-7901进行传代培养,采用MTT法检测胃瘤安不同组方对SGC-7901的生长抑制作用,采用流式细胞术检测胃瘤安不同组方对SGC-7901细胞凋亡及周期的影响。结果:胃瘤安3种不同组方均可抑制SGC-7901细胞增殖;3种不同组方的胃瘤安均可促进正常的SGC-7901细胞凋亡,细胞周期分析提示胃瘤安(全方)、胃瘤安(无三棱、莪术)将细胞SGC-7901阻滞于S期,胃瘤安(三棱、莪术)将SGC-7901细胞阻滞于G0/G1期,效应均呈浓度和时间依赖性。结论:胃瘤安3种不同组方均能抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖,可将细胞阻滞在S和G0/G1期,其中以胃瘤安(全方)、胃瘤安(无三棱、莪术)效果最为明显。     

阿司匹林-烟酰胺-锌络合物对胃癌细胞SGC-7901的生长抑制作用

目的：探讨阿司匹林-烟酰胺-锌络合物（商品名：佛立沙,WUY）对人胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制作用。方法：用MTT法考察WUY对人胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制作用,用流式细胞技术检测WUY对胃癌细胞周期的影响。结果：WUY在2、4、8、16mmol/L剂量时对胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制率分别为9.95%、19.28%、37.36%、63.47%（P〈0.05）,平均IC50为11.06mmol/L。增殖抑制曲线表明,WUY对胃癌细胞有抑制作用且呈明显的量效和时效关系。流式细胞仪检测显示,WUY对胃癌细胞作用24h后,呈浓度依赖性改变细胞周期的分布,G0/G1期细胞比例下降,S期细胞比例和G2/M期细胞比例升高。结论：WUY能显著抑制人胃癌细胞SGC-7901的增殖,其作用可能与影响细胞周期有关。     

葫芦素E通过诱导G_2/M周期阻滞抑制人肝癌细胞增殖

目的研究葫芦素E(cucurbitacin E,CuE)体外对人肝癌BEL7402和HepG2细胞的增殖抑制作用及机制。方法MTT法检测不同浓度CuE体外对BEL7402和HepG2细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测CuE对细胞周期分布的影响;Western blot法检测CuE对细胞周期调节蛋白cy-clinB1、Cdc25C、Cdk1及p21表达的影响。结果CuE作用72 h可剂量依赖性地抑制BEL7402和HepG2细胞增殖;CuE(100 nmo.lL-1)作用12、24 h后可使BEL7402和HepG2细胞周期阻滞于G2/M期,并可下调Cdk1蛋白的表达,上调p21蛋白的表达。结论CuE体外可抑制人肝癌BEL7402和HepG2细胞的增殖,其增殖抑制作用与诱导G2/M周期阻滞有关。     

雷酚萜甲醚抑制人胃癌细胞AGS增殖及诱导凋亡作用研究

目的研究雷酚萜甲醚(TME)在体外对人胃癌AGS细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法采用MTT法观察TME对人胃癌AGS细胞、正常人胃黏膜上皮细胞GES-1的增殖抑制作用;克隆形成实验观察细胞克隆的形成;光镜下及AO/EB染色观察细胞形态;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;JC-1染色和DCFH-DA荧光探针分别检测TME对AGS细胞线粒体膜电位的改变和活性氧产生的影响;Western blot检测凋亡蛋白caspase-3、caspase-8和Bcl-2、Bax表达情况,以及caspase广谱抑制剂z-VAD-fmk对caspase-3、caspase-8蛋白表达的影响。结果 TME可明显抑制人胃癌AGS细胞的增殖,并诱导其凋亡,作用48 h时IC50为23.85μmol·L-1,而对正常人胃黏膜上皮细胞GES-1的抑制作用明显低于AGS。TME能够抑制AGS细胞克隆形成,并使细胞出现明显的凋亡形态改变。Annexin V-FITC/PI双染实验表明,随TME剂量的增加,细胞凋亡百分数也增加。JC-1和DCFH-DA结果显示,TME使细胞内线粒体膜电位降低、细胞内活性氧水平增加。Western blot结果显示,TME增加了Bax/Bcl-2的比例,激活caspase-8和caspase-3,并且加入z-VAD-fmk后,caspase-3、caspase-8蛋白的表达降低。TME可使AGS细胞周期阻滞于G0/G1期。结论 TME能抑制人胃癌AGS细胞增殖和诱导凋亡,抗肿瘤作用机制与激活凋亡通路、影响细胞周期及Bcl-2蛋白家族相关。     

D-氨基葡糖盐酸盐对胃癌细胞SGC-7901细胞周期及相关蛋白表达的影响

目的 研究D-氨基葡萄糖盐酸盐诱导人胃癌细胞SGC-7901的凋亡作用,并探讨其作用机制.方法 分别采用SRB法测定D-氨基葡萄糖盐酸盐对SGC-7901细胞的生长抑制作用,流式细胞仪观察对细胞周期及细胞色素C表达的影响,激光共聚焦显微镜检测细胞内Ca2+浓度的变化,Western Blot法测定周期蛋白B1、钙调神经磷酸酶表达的变化.结果 D-氨基葡萄糖盐酸盐能够引起SGC-7901细胞周期产生S期阻滞,细胞内Ca2+浓度增加,周期蛋白B1表达下降、钙调神经磷酸酶及细胞色素C的表达升高.结论 D-氨基葡萄糖盐酸盐使SGC-7901细胞周期发生阻滞并诱导细胞凋亡.     

蜂毒素对SGC-7901细胞生长及G_2/M期阻滞的影响

目的研究蜂毒素(Melittin)对胃上皮癌细胞SGC-7901细胞生长及细胞周期阻滞的影响。方法采用罗丹明B(SRB)染色法观察Melittin对SGC-7901细胞株生长曲线的影响;用流式细胞仪检测Melittin对该细胞周期阻滞的影响;RT-PCR检测细胞周期相关基因mRNA的表达。结果Melittin(1、2、4、8×10-3μg·L-1)体外给药24h,能抑制SGC-7901细胞的增殖活性(P<0.05orP<0.01);Melittin(4、8×10-3μg·L-1)作用SGC-790124h后,能明显阻滞该细胞株于G2/M期;并且降低G2/M期相关基因CylinB1-CDK1-Cdc25c mRNA的表达。结论Melittin具有抑制胃上皮癌细胞SGC-7901增殖的作用,其机制可能与干扰该细胞G2/M期相关基因的转录有关。     

凋亡抑制蛋白在TRAIL诱导胃癌细胞凋亡中的作用

目的探讨凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis pro-teins,IAP)在调节胃癌细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)敏感性方面的作用。方法 PI染色流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测caspase-3、PARP、XIAP、Survivin、cIAP1和cIAP2的表达。结果 TRAIL能诱导胃癌细胞凋亡,BGC-823细胞较SGC-7901细胞对TRAIL更敏感。caspase-3的活化及PARP的裂解在TRAIL作用早期即出现,且BGC-823细胞较SGC-7901细胞发生得更快。4种IAP蛋白在两株胃癌细胞中都组成性地高表达,Survivin和cIAP1在TRAIL处理前后无变化。而XIAP在BGC-823细胞中明显下降,在SGC-7901细胞中无改变。cIAP2在TRAIL作用后两株细胞中均有所降低。结论 TRAIL诱导胃癌细胞凋亡可能在活化的caspase-3水平受调控,XIAP能保护胃癌细胞免于凋亡。     

绞股蓝皂苷对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制

目的 探索绞股蓝皂苷对人胃癌细胞SGC-7901和AGS增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 不同浓度的绞股蓝皂苷分别处理SGC-7901和AGS细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖活性并计算得到IC₅₀;细胞克隆实验检测集落形成情况;流式实验检测细胞凋亡;caspase活性检测实验检测细胞内caspase-9和caspase-3的活性;Western blot实验检测细胞内凋亡相关蛋白的表达。结果 CCK-8和细胞克隆实验结果显示,绞股蓝皂苷能抑制SGC-7901和AGS细胞的增殖。流式结果表明,绞股蓝皂苷能够促进细胞的凋亡。caspase活性检测结果表明,绞股蓝皂苷能增加细胞内caspase-9和caspase-3的活性。Western blot结果表明,绞股蓝皂苷主要通过上调人胃癌细胞cleaved-PARP、caspase-9和caspase-3蛋白的表达,同时下调Bcl-2蛋白的表达,诱导细胞凋亡。结论 绞股蓝皂苷能抑制SGC-7901和AGS细胞的增殖,并调控凋亡途径所涉及的cleaved-PARP、caspase-9、caspase-3和Bcl-2等相关...     

杨梅素诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡及凋亡通路的研究

目的研究杨梅素体外对人宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡及凋亡通路的影响。方法体外培养人宫颈癌HeLa细胞,MTT和SRB法检测细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡,计算机分析细胞周期;Western Blot法检测caspase-3、caspase-9和survivin含量。结果杨梅素对HeLa细胞的体外增殖具有抑制作用,并具有浓度和时间依耐性;杨梅素体外诱导HeLa细胞凋亡,并将细胞周期阻滞在S期;杨梅素促进caspase-3和caspase-9蛋白表达,抑制survivin蛋白表达。结论杨梅素可抑制HeLa细胞的增殖,诱导其凋亡,其凋亡途径同时涉及细胞内途径和细胞外途径。     

DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷的抗胃肠道肿瘤机制研究

目的观察DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对胃癌细胞生长的影响。方法将野生型P53人胃癌细胞株AGS细胞,加入不同浓度的5-Aza-CdR,体外培养至不同时间。MTT法检测细胞增殖活性;平板细胞克隆形成实验检测细胞长期增殖活性(0~2.5μM);流式细胞仪检测细胞周期变化(25μM,0、12、48、96 h);Annexin V/PI双染实验检测细胞凋亡情况(2.5μM,0、12、48、96 h);比色法检测Caspase-3活力、Western blot检测Caspase-3前体蛋白及PARP(poly ADPribose polymerase,PARP)蛋白的含量(2.5μM,0、12、48、96 h)。结果随着5-Aza-CdR浓度增加,对肿瘤细胞的抑制作用亦增强,在50μM作用72 h时,细胞存活率达最低值(31.9%);随着药物处理时间的延长,胃癌AGS细胞凋亡增多,96 h的2.5μM 5-Aza-CdR作用下,细胞的生长抑制达到了最高峰(44.4%),且其抑制作用表现为浓度和时间依赖性。5-Aza-CdR对肿瘤细胞长期生长有影响,克隆形成抑制率呈线性增加。流式细胞仪分析结果显示,随5-Aza-CdR作用时间延长,G2期细胞比例从0 h的(5.7±0.2)%增加到96h的(28.5±0.2)%。随着药物作用时间的累加,其凋亡率逐渐增加,各时间组的细胞凋亡率与空白对照组之间的差异均具有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,Caspase-3活力在药物处理48、96 h后显著提高(P<0.05),但12 h AGS细胞的Caspase-3活力无变化;48 h Caspase-3前体比12 h和未用5-Aza-CdR时明显减少,96 h减少最为明显;PARP在AGS细胞内经5-Aza-CdR作用48 h后亦被活化,96 h后几乎检测不到PARP的存在。结论 5-氮杂-2’-脱氧胞苷,能增强肿瘤细胞对化疗药的敏感性,可作为一种有效的抗胃肠道肿瘤药,。     

5杂-氮-2′-脱氧胞苷对顺铂耐药胃癌SGC-7901细胞14-3-3σ基因甲基化的影响

目的观察5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对顺铂耐药胃癌SGC-7901细胞14-3-3σ基因甲基化的影响;探讨14-3-3σ基因甲基化与顺铂耐药胃癌SGC-7901细胞耐药的关系。方法建立人胃癌顺铂耐药细胞株SGC-7901/CDDP,并用特异性甲基化抑制物5-Aza-CdR干预。MSP法检测14-3-3σ基因甲基化状态,蛋白质印迹法检测14-3-3σ蛋白表达,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术分析细胞周期与凋亡。结果 SGC-7901/CDDP细胞的14-3-3σ基因高度甲基化并沉默,经过5、10μmol.L-15-Aza-CdR处理后,14-3-3σ蛋白重新表达,细胞发生顺铂耐药逆转,细胞活性抑制、在G0/G1期出现阻滞以及凋亡率明显增加。结论 5-Aza-CdR具有抑制顺铂耐药胃癌SGC-7901细胞14-3-3σ基因甲基化的作用,同时,顺铂作用与耐药机制部分依赖于14-3-3σ基因。     

虎杖苷通过蛋白激酶 B信号通路影响胃癌细胞增殖凋亡

目的 研究虎杖苷对胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影响和机制.方法 虎杖苷处理胃癌细胞SGC-7901,MTT法检测增殖,平板克隆实验检测克隆形成能力,碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期分布,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)双染法检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、Bcl-2相关X(Bax)、剪切型胱天蛋白酶-3(Cleaved-caspase-3)、磷酸化-蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达.用蛋白激酶B(Akt)信号激活剂和虎杖苷联合处理胃癌细胞SGC-7901,检测细胞增殖、克隆、周期、凋亡变化.结果 虎杖苷处理以后的胃癌细胞SGC-7901增殖能力下降[(0.58±0.06)比(0.20±0.01)],细胞克隆形成数目减少[(118.54±10.65)个比(69.52±7.91)个],细胞凋亡增多[(2.97±0.32)％比(17.45±1.69)％],细胞G0/G1比例升高[(50.47±3.25)％比(67.13±3.84)％],cyclin D1、CDK4蛋白表达减少,Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达水平升高,p-Akt蛋白水平降低[(0.51±0.05)比(0.24±0.03)].Akt信号激活剂处理可以逆转虎杖苷对胃癌细胞SGC-7901增殖、克隆抑制和周期阻滞、凋亡促进作用.结论 虎杖苷通过抑制Akt信号通路阻碍胃癌细胞增殖并诱导细胞凋亡.     

NF-κβp65反义寡核苷酸诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的实验研究．

目的：研究NF-κβp65反义寡核苷酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用。方法人工合成NF-κβp65A-SODN,通过脂质体转染法转染人胃癌细胞系SGC-7901,在转染后不同时间不同浓度,采用MTT法测定NF-κβp65 ASODN对胃癌细胞增殖的影响;光镜观察药物作用后细胞凋亡的形态学变化;通过免疫细胞化学技术检测NF-κβp65蛋白的表达。结果（1）MTT法检测显示：不同浓度的NF-κβp65 ASODN均可抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,呈时间-剂量依赖性;（2）HE染色显示：NF-κβp65 ASODN处理SGC-7901细胞48h后,光镜下可见细胞缩小变圆,呈凋亡改变。（3）免疫细胞化学结果显示：NF-κβp65 ASODN处理SGC-7901细胞48h后,NF-κβp65蛋白的表达水平较对照组显著下降（P＜0.05）。结论 NF-κβp65 ASODN在体外可以较明显的抑制SGC-7901细胞的增殖、诱导SGC-7901细胞凋亡。     

姜黄素与顺铂联合应用对胃癌SGC-7901的体外抑制作用

目的观察姜黄素、顺铂对胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用,并探究其机制。方法体外培养胃癌SGC-7901细胞,姜黄素、顺铂分别单独应用及联合应用后,采用MTT法检测细胞凋亡情况;RT-PCR检测T-Akt、p-Akt、p53 mRNA表达水平的变化;Western blot检测Bcl-2蛋白表达水平变化。结果 MTT结果显示,姜黄素、顺铂均可抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05),且联合组肿瘤细胞的凋亡率明显高于单药组(P<0.01);RT-PCR检测显示,与单独给药组相比,联合用药在显著上调T-Akt和p53 mRNA表达的同时,降低p-Akt mRNA的表达(P<0.01)。Western blot结果显示,单独给药、联合用药均能降低SGC-7901细胞中Bcl-2蛋白的表达。结论姜黄素与顺铂均能通过诱导细胞凋亡,抑制胃癌SGC-7901细胞生长,联合用药抑制SGC-7901细胞的增殖可能是通过抑制p-Akt基因、Bcl-2蛋白表达,同时上调T-Akt和p53基因的表达来实现的。     

甘草甜素对胃癌细胞株SGC-7901凋亡影响的体外研究

目的探讨甘草甜素（GL）抗肿瘤的机制,为GL在抗肿瘤方面的应用提供理论依据。方法采用流程式细胞仪检测胃癌细胞株SGC-7901凋亡。结果50,100,200μmol/LGL能够诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡,凋亡率与剂量呈正相关,SGC-7901的凋亡随药物浓度及作用时间变化,细胞周期分布呈现G1期细胞比例逐渐增高,并出现典型的凋亡峰。结论GL能诱导胃癌细胞凋亡,并明显抑制癌细胞增殖,具有抗肿瘤作用。