他克莫司滴眼液的抑菌效力测定研究

摘 要 目的：建立测定他克莫司滴眼液抑菌效力的方法。方法: 参照中国药典2015年版抑菌效力检查法,以金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、白色念珠菌和黑曲霉为试验菌株,对他克莫司滴眼液样品进行菌落计数方法适用性试验。按验证的方法测定各时间点存活的菌数,计算1 ml供试品中各试验菌所加的菌数及各间隔时间的菌数,并换算成lg值。结果:他克莫司滴眼液中抑菌剂的抑菌效力能达到中国药典2015年版“A”的标准。结论:采用该方法可有效测定他克莫司滴眼液的抑菌效力。     

氟康唑滴眼液抑菌剂浓度筛选和抑菌效力研究

摘 要 目的：探讨氟康唑滴眼液中抑菌剂的合理添加剂量。方法: 按照中国药典2015年版抑菌剂效力检查法,以金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、白色念珠菌和黑曲霉为试验菌株,对分别含4个不同浓度抑菌剂（5%,1%,0.3%,0.1%苯扎氯铵）的氟康唑滴眼液进行抑菌剂效力测定。结果: 含5%,1%,0.3%苯扎氯铵的氟康唑滴眼液对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、白色念珠菌和黑曲霉5种试验菌的抑菌效力均符合规定,0.1%苯扎氯铵对铜绿假单胞菌抑菌效力不符合规定,0.3%为苯扎氯铵的最低抑菌浓度。结论: 确定苯扎氯铵的最佳抑菌浓度为1%。     

四磨汤合剂中抑菌剂的抑菌效力评价

目的 对四磨汤合剂中抑菌剂的抑菌效力进行评价。方法 采用HPLC对四磨汤合剂中抑菌剂对羟基苯甲酸乙酯的含量进行测定,并以金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、黑曲霉和白色念珠菌为试验菌株,分别加入四磨汤合剂中进行微生物试验,考察在不同时间点样品中微生物的存活情况。结果 四磨汤合剂中对羟基苯甲酸乙酯的含量为0.04%,四磨汤合剂中抑菌剂对细菌的抑制能力较强,而对真菌的抑制能力较弱。结论 四磨汤合剂中抑菌剂的抑菌效力符合中国药典2010年版的要求,不符合中国药典2015年版的要求,现有的抑菌剂处方需进一步优化。     

吡诺克辛滴眼液的抑菌效力评价

目的 分别按中国药典2010年版和中国药典2015年版通则公示稿1121抑菌效力检查法测定吡诺克辛滴眼液的抑菌效力。方法 以金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、黑曲霉和白色念珠菌为试验菌株,进行菌落计数方法学验证,然后进行微生物的挑战试验,按验证方法测定各时间点的菌落数。结果 吡诺克辛滴眼液中抑菌剂的抑菌效力符合中国药典2010年版的规定,但不符合中国药典2015年版通则公示稿1121抑菌效力检查法的规定。结论 中国药典2010年版和中国药典2015年版通则公示稿1121抑菌效力判断标准差异较大,部分已上市品种的抑菌剂效力达不到中国药典2015年版抑菌效力的要求。     

10%水合氯醛溶液抑菌效力测定和评价

摘 要 目的：对10%水合氯醛溶液的抑菌效力进行测定和评价。方法: 按《中国药典》2015 年版抑菌效力检查法,对两家生产单位的10%水合氯醛溶液的抑菌效力进行测定。结果: 两家生产单位的10%水合氯醛溶液的抑菌效力符合药典的规定。结论:10%水合氯醛溶液具有充分的抑菌效力。     

珍珠明目滴眼液抑菌剂效力评价

摘 要 目的： 评价国产珍珠明目滴眼液抑菌剂效力是否符合《中国药典》2010年版要求。方法: 结合2014年度国家药品抽验计划,参照《中国药典》2010年版附录《抑菌剂效力检查法指导原则》,并增加6h和24h两个检测点,对国内7家企业各1批产品进行抑菌剂效力检查。结果:细菌计数,企业e的产品对于金黄色葡萄球菌的抑菌效力为7 d菌数下降值为0.6lg,14 d菌数下降值为1.0lg;其他6个厂家的产品7 d细菌数下降值均大于1.0 lg,14 d菌数下降值均大于3.0 lg,14 ～28 d菌数未增加。真菌计数,7家企业的产品与初始值比较均未增加。结论: 尽管国产珍珠明目滴眼液使用的抑菌剂相同,含量基本一致,但是其抑菌效力存在差异,其中1家企业生产的产品抑菌剂效力不符合《中国药典》2010年版Ⅰ类产品的判断标准,其他6个厂家的产品符合规定。     

一株样品分离菌-洋葱伯克霍尔德菌对抑菌效力评价体系的启示

目的：通过对一株样品分离菌株洋葱伯克霍尔德菌耐受力的考察及其对苯扎氯铵防腐体系的挑战,对产品抑菌效力评价体系的一些思考和建议,以供业内借鉴和参考。方法：采用微量稀释法测定质控菌株（洋葱伯克霍尔德菌）、样品中及其分离传代后的洋葱伯克霍尔德菌对苯扎溴铵的MIC值,并通过活菌计数法考察了回接到未受污染样品中的存活状态;在《中国药典》2015年版第四部1121抑菌效力检查法的基础上,增加洋葱伯克霍尔德菌作为挑战菌,对三种含不同浓度苯扎氯铵的玻璃酸钠滴眼液的抑菌效力进行评价。结果：苯扎溴铵对未经传代培养的野生型洋葱伯克霍尔德菌MIC值为128μg·mL^-1,高于分离传代后的洋葱伯克霍尔德菌和质控菌株的MIC值（均为64μg·mL^-1）;回接试验表明,在接种后24 h内,菌量下降,24 h后菌量逐渐回升,28天菌量回升至初始水平;洋葱伯克霍尔德菌能耐受0.03 g·L^-1和0.05 g·L^-1苯扎氯铵防腐体系,只有最高浓度的的苯扎氯铵防腐体系（0.10g·L^-1）抑菌效力符合药典规定。结论：环境或样品中分离出来的野生菌株对抑菌剂的耐受性有可能会高于实验室培养菌株或标准菌株,提示我们在进行产品的防腐剂抑菌效力评价时,企业应考虑环境和样品中的常见分离菌株,并针对相应的添加菌株建立相对完善的文件体系,以保障抑菌效力评价体系的有效性和完整性。     

3厂家复方门冬维甘滴眼液中抑菌剂的抑菌效力考察

目的:考察3厂家复方门冬维甘滴眼液中抑菌剂的抑菌效力。方法:采用菌落计数法,以pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液为对照,测定3厂家复方门冬维甘滴眼液抑菌剂对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌及黑曲霉作用不同时间(0、7、14、28d)后的活菌数,以菌落的对数下降值为指标,评价抑菌效力。结果:3厂家复方门冬维甘滴眼液中上述各菌第7天的菌落对数下降值均在5.00～5.94范围内,第14、28天均在5.68～5.94范围内。结论:3厂家复方门冬维甘滴眼液抑菌剂的抑菌效力均符合《中国药典》标准眼用制剂要求。     

氧氟沙星滴眼液的抑菌效力测定

目的:建立测定氧氟沙星滴眼液抑菌效力的方法。方法:按照2015年版《中国药典》"抑菌效力检查法"项下要求,以金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、黑曲霉和白色念珠菌为试验菌,对氧氟沙星滴眼液样品进行菌落计数方法适用性试验,并按该试验确定的方法测定不同时间点的存活菌数,计算1 mL供试品中各试验菌所加的菌数及各间隔时间的菌数,并换算成lg值。结果:氧氟沙星滴眼液样品能达到"B"的抑菌效力标准。结论:采用该方法可有效判定氧氟沙星滴眼液的抑菌效力是否达标。     

3种方法测定玻璃酸钠的分子量比较

摘 要 目的： 比较3种方法测定玻璃酸钠注射液中玻璃酸钠分子量的结果。方法: 采用黏度法测定玻璃酸钠注射液中玻璃酸钠的分子量,并采用体积排阻色谱法（SEC）及多角度激光光散射仪与体积排阻色谱法联用（MALLS SEC）对其分子量及分子量分布（Mw/Mn）进行测定。结果: MALLS-SEC法与黏度法的测定结果较为接近,且同时可测定样品的Mw/Mn。3批样品分子量 4次测定的平均值分别为991 962,1 007 438,990 232;RSD分别为6.5%,4.6%,2.2%（n=4）。分子量分布4次测定的平均值为1.6,1.6,1.6;RSD为7.2%,3.2%,3.2%（n=4）。 结论: MALLS SEC法测定准确度及精密度较好,可用于玻璃酸钠样品的质量控制。     

两性霉素B阴道泡腾片微生物限度检查方法探讨

目的：探讨并建立两性霉素B阴道泡腾片微生物限度检查方法。方法：采用薄膜过滤－培养基稀释法,用６株阳性试验菌验证其抑菌性是否消除。结果：所建方法回收率≥70.0%,并且３株阳性试验菌检出率为100%。结论：采用本文探讨的方法消除该药品的抑菌作用是有效的,该法适用于两性霉素B阴道泡腾片的微生物限度检查。     

苯妥英钠羧甲基壳聚糖缓释微球的制备及其对牙周常见致病菌的抑菌效果研究

目的 采用正交试验法优化制备苯妥英钠羧甲基壳聚糖微球（PHT-CMCS-MS）的处方,观察其组分对2种牙周常见致病菌的抑菌效果。方法 采用乳化化学交联固化法制备PHT-CMCS-MS,以载药量、包封率为指标,采用正交试验设计优化制备工艺,观察载药微球表面形态,测定微球的释药性能及初步稳定性。并采用洞-平板法对牙周常见致病菌牙龈卟啉单胞菌和伴放线放线杆菌进行抑菌实验对比,以抑菌圈直径作纵横向比较,分析药物影响。结果 制备的PHT-CMCS-MS外观形态圆整,粒径分布较均匀,粒径分布范围为0.8~12µm,载药量为8.2%,包封率为48.9%,PHT-CMCS-MS在PBS（pH=7.3）的溶液中具有明显缓释效果。体外抑菌试验结果显示较高浓度的羧甲基壳聚糖、苯妥英钠及其缓释微球对Pg、Aa生长均有不同程度的抑菌作用。结论 结合苯妥英钠及羧甲基壳聚糖良好的生物活性及抑菌作用,制备载药微球缓释作用良好,可结合手术或局部注射辅助应用于牙周治疗,达到促进牙周组织再生的目的。     

自制复方酮康唑软膏的药效学和安全性研究

目的 评价自制复方酮康唑软膏的药效学和安全性。方法 采用纸片扩散法,选取6种真菌和2种细菌,考察自制软膏及3种市售制剂对抑菌圈直径的影响。另外,采用单次和多次给药的皮肤刺激性,及皮肤变态反应,评价自制软膏的安全性。结果 自制软膏与含酮康唑的市售制剂类似,均对6种真菌产生了显著的抑菌圈。对铜绿假单胞菌,各制剂均未产生抑菌圈;对金黄色葡萄球菌,自制软膏与市售莫匹罗星软膏的抑菌圈相似,且显著大于其他市售制剂。给予自制软膏后,皮肤刺激反应评分均小于0.5,致敏率为0,组织结构与正常皮肤无差异。结论 自制的复方酮康唑软膏的抑菌性能优于多数市售制剂,且具有良好的皮肤安全性,有望用于皮肤浅部真菌感染的治疗。     

多黏菌素联合替加环素对多重耐药鲍曼不动杆菌的作用

目的 探讨多黏菌素联合替加环素（tigecyclin）对多重耐药鲍曼不动杆菌体外抗菌的效果。方法 收集临床分离的50株多重耐药鲍曼不动杆菌,采用微量肉汤稀释法、棋盘法分别检测替加环素、多黏菌素单独及联合使用的最低抑菌浓度（MIC）,并计算药物联合使用抑菌浓度（FIC）指数,利用FIC指数判定替加环素和多黏菌素联用时对多重耐药鲍曼不动杆菌体外抗菌的效果。荧光定量PCR检测外排泵基因表达水平。结果 替加环素联合多黏菌素能显著降低各自MIC值,表现为协同作用的菌株占70%,表现为相加作用的占14%,表现为无关作用的占6%,拮抗作用则为10%。对联合用药不敏感的菌株,其外排泵基因（abeB,abeJ,abeG,abeM）表达水平显著高于敏感型（P<0.05）。结论 替加环素联合多黏菌素可对多重耐药鲍曼不动杆菌的感染进行治疗。     

枇芩颗粒剂体外抑制金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的作用

目的 研究枇芩颗粒剂对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的体外抑制作用。方法 采用滤纸片或牛津杯的琼脂扩散法观察枇芩颗粒剂对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的体外抑菌作用,同时定量测定枇芩颗粒剂对这2种菌的最低抑菌浓度。结果 枇芩颗粒剂对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌均有明显抑菌作用,对金黄色葡萄球菌最低抑菌浓度为0.05 g·mL^-1,对痤疮丙酸杆菌最低抑菌浓度为0.10 g·mL^-1。结论 枇芩颗粒剂对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌均具有明显的抑制作用。     

中国药典2020年版抑菌效力检查法修订介绍

目的 介绍中国药典（Chinese Pharmacopoeia，ChP）2020年版抑菌效力检查法修订情况。方法 对比ChP 2020年版与ChP 2015年版抑菌效力检查法内容的主要差异，同时分析ChP、美国药典（USP）、欧洲药典（EP）、英国药典（BP）、日本药局方（JP）等主要药典相关内容的区别与联系。结果 ChP 2020年版抑菌效力检查法在培养体系、测试菌种等方面都做了修订，更适合指导药物制剂中抑菌剂的筛选和抑菌体系的建立。结论 ChP 2020年版抑菌效力检查法进一步获得提高，成为更加完善的方法，既可用于指导药品研发阶段抑菌剂的筛选，也可用于上市药品抑菌剂添加是否科学合理的评价，有利于保证药品安全有效。     

复方特比萘芬软膏微生物限度检查方法适用性试验研究

目的 建立复方特比萘芬软膏微生物限度检查方法。方法 根据《中国药典》2015年版四部通则1105、1106、1107具体规则作为检测依据。对薄膜过滤冲洗液体积、供试液稀释级、中和剂的含量等进行考察。结果 该产品对5种试验菌种均有抑制作用。加入适量聚山梨酯80作为中和剂,同时采用薄膜过滤法可有效去除其抗菌性。需氧菌总数计数采用1∶100稀释级供试液10 ml,冲洗量300 ml。霉菌及酵母菌采用1∶20稀释级供试液10 ml,冲洗量800 ml。5种试验菌株的回收比值均在0.5～2.0之间。控制菌中金黄色葡萄球菌采用1∶10稀释级供试液10 ml （冲洗量1 000 ml/膜）合并培养基稀释法（600 ml）进行检测,铜绿假单胞菌采用1∶10稀释级供试液10 ml/膜（冲洗量300 ml/膜）进行检测。结论 该方法可作为复方特比萘芬软膏微生物限度的检查方法。     

国产乳酸环丙沙星滴眼液中抑菌剂使用合理性分析

目的通过调查国产乳酸环丙沙星滴眼液抑菌剂的使用情况,对本品抑菌剂使用的合理性进行分析。方法参考ChP2015四部通则1105,采用菌数计数法,通过方法适用性试验确定各时间各浓度点的存活菌数。参照ChP2015四部通则1121,评价各企业样品的抑菌效力是否满足控制要求。结合抑菌效力结果及各企业处方,讨论抑菌剂使用的合理浓度。结果 3个企业提供的处方中,2家企业使用苯扎溴铵,1家企业使用羟苯乙酯。抑菌剂含量均达标80.0%~120.0%的要求。使用苯扎溴铵为抑菌剂两企业抑菌效力均能达到A级,但存在添加过量的问题,使用羟苯乙酯作为抑菌剂的企业抑菌效力仅能达到B级,存在安全隐患。结论国产乳酸环丙沙星滴眼液中的抑菌剂存在处方不合理问题,有较大的优化空间,抑菌剂的使用应满足最低有效原则。     

养阴清肺口服液抑菌效力研究及其抑菌剂使用情况分析

目的：对2020年国家药品抽检品种养阴清肺口服液的抑菌效力及其抑菌剂使用情况进行分析, 评价其抑菌体系对微生物污染的控制能力。方法：依据《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》) 2020年版四部通则1121抑菌效力检查法,对抽样自16个省、市、自治区的31批次养阴清肺口服液的抑菌效果进行考察,评价产品抑菌体系是否满足要求;并构建方法对样品中添加的抑菌剂含量进行检测, 分析添加的抑菌剂种类和用量情况是否合理。结果：抽样自16个省、市、自治区的31批次养阴清肺口服液均达到《中国药典》中口服制剂的抑菌效力判断标准;抑菌剂种类及浓度均在《中国药典》要求范围内,31批次均使用山梨酸,浓度在0.061%~0.069%之间。结论：国家药品抽检品种养阴清肺口服液是按法定处方工艺进行生产的,未存在违规添加抑菌剂的情况,添加的抑菌剂种类和用量合理,在保质期内的防腐体系是有效的。     

非氘代溶剂在氟核磁共振定量中的应用

目的 建立使用非氘代溶剂的氟核磁共振定量方法。方法 以氟化钠为内标、恩曲他滨为样品、去离子水为溶剂,测定氟核磁共振谱,进行线性关系考察、精密度试验、稳定性试验、耐用性试验;平行配制5份样品,进样测定,通过样品响应信号与内标响应信号面积比值,计算恩曲他滨含量;同时利用质量平衡法测定恩曲他滨的含量,两种方法进行比较。结果 非氘代溶剂的氟核磁共振谱图中氟化钠与恩曲他滨响应信号分离较远,互不干扰;方法线性关系良好,精密度、稳定性、耐用性均符合要求;氟核磁共振测定样品中恩曲他滨平均质量分数为100.1%,RSD值为0.57%,与质量平衡法测定结果99.7%基本一致。结论 建立的氟核磁定量方法无需使用氘代溶剂,准确快速,可以有效降低试验成本及环境污染。