汤湖热矿泥泥浴对湿热证大鼠血浆内皮素和降钙素基因相关肽的影响

目的 :研究汤湖热矿泥泥浴对湿热证大鼠模型血浆ET和CGRP含量的调节 ;方法 :以湿热证造模方法造模 ,设汤湖热矿泥治疗组、湿热证模型组、普通黄泥治疗组、正常对照组 ,用放射免疫法测定各组大鼠血浆内皮素和降钙素基因相关肽含量 ;结果 :湿热证大鼠血浆ET升高而CGRP水平降低 ,汤湖热矿泥泥浴后ET、CGRP含量接近正常水平 ,普通黄泥对其影响不大 ;结论 :湿热证的病理状态及病情与体内ET和CGRP水平相关 ,汤湖热矿泥泥浴对湿热证大鼠模型血浆ET和CGRP有较好的调节作用 ,基本使其恢复至正常水平。     

湿热证大鼠肾内髓及尿液中水通道蛋白AQP2含量的变化

目的：探讨湿热证大鼠肾内髓AQP2和尿液AQP2与湿热证中“湿”的形成的关系。方法：复制湿热证大鼠模型。检测各组肾内髓及尿液AQP2的含量。结果：湿热证模型组AQP2水平较明显降低。尿液AQP2蛋白的排出量与肾脏AQP2蛋白的表达量有着良好的相关性。结论：模型组大鼠肾脏AQP2的减少与湿热因素造模有着密切联系。尿液AQP2含量可以反映肾内髓AQP2蛋白的水平。AQP2可作为湿热证与湿热因素造模有着密切联系，尿液AQP2含量可以反映肾内髓AQP2蛋白的水平。AQP2可作为湿热证湿偏重与否的重要检测指标之一。     

三仁汤对脾胃湿热证、湿偏重证大鼠尿液中AQP2的影响

目的:探讨三仁汤对脾胃湿热证、湿偏重证大鼠模型尿液中AQP2的调控作用。方法:选用清洁级SD大鼠32只,将其随机分成4组,每组各8只;正常对照组:正常温度、湿度下予以普通饲料喂养;湿热组:在湿热环境下予以肥甘饮食饲料喂养;湿偏重组:在湿热组饲养的基础上灌服北京产二锅头;三仁汤组:在湿偏重组饲养的基础上予以三仁汤;采用Bradford方法测定各组动物尿液中AQP2的含量。结果:AQP2含量湿热组、湿偏重组分别与正常对照组、三仁汤组比较均有非常显著性差异(P<0.01);湿偏重组与湿热组比较也有非常显著性差异(P<0.01);三仁汤组与正常对照组比较则无显著性差异(P>0.05)。结论:三仁汤对湿热证、湿偏重证大鼠尿液中AQP2的降低有调节作用,能较好地恢复AQP2在机体内的含量至正常水平。     

水通道蛋白2在脾胃湿热证大鼠湿、热偏重模型中表达的研究

目的:观察脾胃湿热证大鼠湿、热偏重模型及在三仁汤、白虎加苍术汤的干预下大鼠尿液中水通道蛋白2(aquaporin2,AQP2)的变化,以探讨脾胃湿热证湿、热偏重型之间尿液中AQP2的变化规律及三仁汤、白虎加苍术汤的作用机理。方法:将40只大鼠随机分成5组各8只:正常对照组、湿偏重组、热偏重组、三仁汤组、白虎加苍术汤组,采用肥甘饮食、湿热环境及病原微生物等复合因素建立脾胃湿热证湿、热偏重型的动物模型。分别用三仁汤、白虎加苍术汤对湿偏重、热偏重型大鼠模型进行干预,采用双抗夹心ELISA法检测各组大鼠尿液中AQP2的变化。结果:湿偏重组、热偏重组大鼠胃窦尿液中AQP2含量较正常对照组明显增高;湿偏重组AQP2水平较热偏重组增高更明显;三仁汤组、白虎加苍术汤组分别与湿偏重组、热偏重组比较,AQP2的含量降低,三仁汤组、白虎加苍术汤组与正常对照组比较,无显著性意义。结论:脾胃湿热证大鼠湿、热偏重模型存在AQP2含量增高;三仁汤、白虎加苍术汤对大鼠尿液中的AQP2含量具有调节作用,能降低已增高的AQP2的含量。     

温病湿热证动物模型中炎症因子与水通道蛋白表达的实验研究

目的:采用复合多因素造模法,给予小鼠肥甘饮食、酒伤、劳役等方法并加以湿热外环境以建立湿热证小鼠模型,探讨湿热证中炎症反应与AQP之间的关系。方法:将40只雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、脂多糖(LPS)组、湿热组、脾虚组,观察小鼠日常活动以及体征,测量小鼠每周体质量变化,采用HE染色检测舌部病理形态学变化。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中LPS和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度;免疫组化法检测结肠组织中核转录因子κBp65(NF-κBp65)、Toll样受体4(TLR4)、水通道蛋白质(AQP)3和水通道蛋白质(AQP)4的阳性表达。结果:与正常组相比,LPS组、湿热组、脾虚组中LPS、TNF-α、NF-κBp65、TLR4、AQP3的表达升高(P0.001),AQP4的表达下降(P0.001);与LPS组相比,湿热组、脾虚组LPS、TNF-α的含量下降(P0.001),湿热组NF-κBp65、AQP4的表达升高(P0.05),脾虚组TLR4、AQP3、AQP4的表达升高。结论:湿热证小鼠LPS、TNF-α、NF-κBp65、TLR4的水平增高与水通道蛋白AQP3、AQP4关系密切,而LPS的在其中的机制有待进一步深入研究。     

消化性溃疡与浊毒相关研究

目的:探讨大鼠消化性溃疡与浊毒相关研究,制造浊毒证溃疡模型,寻找浊毒致病机理,为浊毒理论临床研究提供实验根据。方法:30只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组(A组)、湿热证溃疡组(B组)、模拟浊毒证溃疡组(C组)。对照组正常饲养,另两组采用湿热环境加高脂高糖饮食和白酒的综合造模,并用乙酸侵蚀胃壁制造胃溃疡方法,制造消化性溃疡湿热证和模拟浊毒证模型。分别测定各组大鼠溃疡指数、肛温变化、血浆PAF、ET、CGRP及血清NO水平。结果:前17天各造模组肛温波动不大,与A组比较差异无显著性(P0.05),各造模组进入造模箱后,与A组比较肛温均升高(P0.01),C组较B组升高(P0.01);溃疡指数C组较B组为高(P0.05);血浆PAF、ET水平:与A组比较B、C组均升高(P0.01),C组较B组为高(P0.05);血浆CGRP及血清NO水平:与A组比较B、C组均降低(P0.01),C组较B组为低(P0.05)。结论:浊毒证的形成可能与大鼠血浆PAF、ET水平升高,及血浆CGRP、血清NO水平降低有关。     

回回甘松饮对温病湿热证大鼠G-CSF和NO的影响

目的:探讨回医芳香类药回回甘松饮治疗湿温病的作用机制,为扩大回医香药的临床应用提供依据。方法:采用吴仕九方法建立温病湿热证大鼠模型,使用回回甘松饮治疗,比较各组量化指标。结果:与空白组比较,模型组大鼠血清G-CSF水平显著增高,NO水平显著降低;与模型组比较,治疗组大鼠血清G-CSF水平显著降低,NO水平显著升高,并且与空白组无显著差异。结论:回回甘松饮能够显著降低湿热证大鼠血清G-CSF水平,升高NO水平,其芳香宣透,清利湿热作用的机理可能和G-CSF、NO密切相关。     

脾胃湿热证大鼠湿偏重、热偏重模型尿液AQP_2的变化及其在肾组织的表达

目的:研究脾胃湿热证湿、热偏重型之间AQP2在尿液中的变化及在肾脏组织中表达的变化规律,揭示清香散、白虎加苍术汤分别治疗脾胃湿热证湿、热偏重型的作用机制。方法:采用Bradford方法测定尿液中AQP2含量,采用SABC免疫组化法检测肾脏内外髓集合管、远曲小管管壁上AQP2的表达。结果:湿偏重组尿液AQP2含量明显减少,热偏重组尿液AQP2含量明显增加,而且热偏重组尿液AQP2含量更高。AQP2在肾脏的表达中,湿偏重组肾脏内外髓集合管、远曲小管管壁上AQP2表达明显比正常组、白虎加苍术汤组及清香散组减少,热偏重组表达最多。结论:AQP2对于脾胃湿热证"湿"的形成,湿、热的量化,判断湿、热的偏重具有重要的作用。白虎加苍术汤及清香散祛湿的作用可能是通过调节AQP2对细胞内外体液平衡的功能而达到的。     

清香散对脾胃湿热模型大鼠尿液中AQP_2的影响

目的:探讨清香散对脾胃湿热模型大鼠尿液中AQP2的影响。方法:选用清洁级SD大鼠24只随机分成3组:正常对照组、脾胃湿热模型组、清香散组,每组8只。采用肥甘饮食、湿热环境及病原微生物等复合因素建立脾胃湿热证的动物模型。采用Bradford方法测定各组动物尿液中AQP2的含量。结果:脾胃湿热模型组AQP2含量明显低于正常对照组和清香散组,差异均有非常显著性意义(P<0.01);清香散组与正常对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:清香散可以调节脾胃湿热模型大鼠尿液中AQP2的降低水平,能较好地恢复AQP2在机体内的含量至正常水平。     

活血通脉灵对心肌缺血大鼠血浆内皮素、降钙素基因相关肽的影响

目的探讨活血通脉灵(HXTML)对异丙肾上腺素(ISO)所致心肌缺血大鼠心肌血浆内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)的影响。方法将50只Wistar雄性大鼠随机分为空白组、模型组、药物组及活血通脉灵大剂量组(HXTMLmax)和活血通脉灵小剂量组(HXTMLmin),采用ISO复制心肌缺血模型,通过放射免疫法检测ET和CGRP水平。结果模型组血浆ET水平较空白组升高(P0.01),药物组及HXTMLmax组和HXTMLmin组较模型组水平明显降低(P0.05或0.01)。模型组血浆CGRP水平较空白组降低,与模型组比较,HXTMLmax组和HXTMLmin组CGRP水平较高。结论活血通脉灵能降低心肌缺血损伤大鼠血浆ET含量,升高CGRP,对血管内皮功能有一定改善作用。     

慢性浅表性胃炎(脾胃湿热证)与水通道蛋白4表达关系的研究

目的:从水液代谢来研究脾胃湿热证与水通道蛋白4(AQP4)表达的关系.方法:慢性浅表性胃炎患者32例,其中脾胃湿热证20例,脾气虚证12 例;另10例正常人为对照.胃镜下取胃体上部粘膜,观察粘膜炎症情况,用免疫组化法、图像分析系统半定量AQP4的蛋白表达量.结果:脾胃湿热证胃粘膜的炎症明显要重于脾虚证和正常人组(P<0.05,P<0.01);脾胃湿热证AQP4蛋白表达量强于脾虚证组(P<0.01)和正常人组(P<0.05);脾虚证蛋白表达量低于正常人组,但两组差异无显著性(P>0.05).结论:AQP的异常表达可能是脾胃湿热证的发生机制之一.     

慢性浅表性胃炎脾胃湿热证与水通道蛋白3基因表达的相关性研究

目的:探讨慢性浅表性胃炎脾胃湿热证与水通道蛋白3(AQP3)基因表达的相关性.方法:随机选取88例慢性浅表性胃炎患者,其中脾胃湿热证75例,脾虚证组13例,另选择健康的本校学生10人作为正常对照组,采用荧光定量PCR法检测患者胃粘膜AQP3表达.结果:正常人与慢性浅表性胃炎患者AQP3阳性表达率差异有显著性(P＜0.01),正常人、脾胃湿热证患者AQP3阳性表达率差异有显著性(P＜0.05),脾胃湿热证、脾虚证患者AQP3阳性表达率差异无显著性(P＞0.05).慢性浅表性胃炎脾胃湿热证中AQP3阳性患者出现口渴少饮、大便溏而不爽的比例要明显高于AQP3阴性患者(P＜0.05或P＜0.01),出现口干口苦、恶心、纳呆、腹胀或痛的比例两组无明显差异(P＞0.05).慢性浅表性胃炎脾胃湿热证中AQP3阳性患者辨证为湿重于热的比例要明显高于AQP3阴性患者(P＜0.05).结论:AQP3与水液代谢关系密切,AQP3在脾胃湿热证发生中起着某种作用.     

清热化湿方对脾胃湿热证患者胃黏膜AQP3、AQP4蛋白表达的影响

目的:探讨脾胃湿热证与胃黏膜水通道蛋白(AQP3)、AQP4表达的关系及中药清热化湿方的作用机制.方法:选择慢性浅表性胃炎患者68例,其中脾胃湿热证53例(湿重于热19例,热重于湿14例,湿热并重20例),脾虚证15例;另选正常健康体检者10例为正常对照组.脾胃湿热证患者予中药清热化湿方,并采用免疫组化方法检测入选者胃黏膜AQP3、AQP4表达情况.结果:AQP3、AQP4在脾胃湿热证组的表达明显强于正常对照组(P＜0.05);脾虚证组与正常组比较差异无显著性(P＞0.05);各亚型之间呈湿重于热＞湿热并重＞热重于湿的趋势,但差异无显著性(P＞0.05).治疗后,脾胃湿热证组AQP3、AQP4表达水平显著下降(P＜0.01),与正常对照组及脾虚证组比较差异无显著性(P＞0.05).结论:AQP3、AQP4的异常表达可能是脾胃湿热证的发生机制之一,中药清热化湿方可能通过影响AQP3、AQP4的表达而发挥治疗作用.     

脑脉泰对高血脂症大鼠血管内皮功能的影响

目的观察中药脑脉泰对高血脂症大鼠血脂水平和血管内皮功能相关指标的影响。方法取健康Wistar大鼠30只,随机分为模型组、治疗组和正常组,分别给予高脂饲料、高脂饲料加脑脉泰和基础饲料喂养。8周后取血检测各组动物血脂水平指标TG和TC及内皮功能相关指标血浆内皮素(ET)、内皮细胞表达黏附因子(ICAM-1)、NO和降钙素基因相关肽(CGRP)。结果8周后模型组大鼠血脂水平较正常组显著升高,而治疗组较模型组血脂水平明显下降。8周后,模型组大鼠血清ET和ICAM-1含量比正常组明显升高,治疗组相对模型组降低(P<0.01);大鼠血清NO和CGRP水平在模型组明显降低,而治疗组相对模型组升高(P<0.01)。结论中药脑脉泰能降低高血脂症大鼠血脂水平,改善血管内皮功能和血管舒张状态。     

温通针法对血管性痴呆模型大鼠血浆降钙素基因相关肽、内皮素含量的影响

目的:探讨温通针法对血管性痴呆(VD)大鼠的疗效机制。方法:健康Wistar大鼠50只,随机分为正常组、模型组、药物组、温通针法组和捻转针法组。采用反复夹闭双侧颈总动脉-再灌注方法造成VD大鼠模型,并给予相应的针刺("大椎"合谷"等)及药物(尼莫地平)治疗15d,采用放射免疫学方法检测大鼠血浆中降钙素基因相关肽(CGRP)及内皮素(ET)含量的变化。结果:VD模型组大鼠CGRP含量较正常组显著降低(P<0.01),ET含量较正常组显著升高(P<0.01);温通针法组、捻转针法组和药物组分别与模型组比较,均能明显升高CGRP含量(P<0.05,0.01),降低ET含量(P<0.01);温通针法组与药物组相比差异无显著性意义(P>0.05),且温通针法组升高CGRP含量、降低ET含量的作用优于捻转针法组(P<0.01)。结论:温通针法能使血浆中ET含量降低、CGRP含量升高,因而温通针法能有效改变机体中舒缩血管物质的含量,从而改善脑组织血液供应。     

AQP2、HSP70在痛风湿热蕴结证模型中表达的意义＊

目的 采用多因素复合的造模方法，先建立湿热模型，采用改良Coderre^［1］法痛风造模，以复制痛风湿热蕴结证病证结合动物模型^［2］，探明水通道蛋白-2（AQP2）、热休克蛋白70（HSP70）在痛风湿热蕴结证中表达的意义，为模型建立指标评估及临床药物疗效判定指标做进一步实验验证。方法 实验对象为SPF级雄性SD大鼠，将40只大鼠按随机数字表分为4组，分别为正常对照组、痛风模型组、湿热模型组、痛风湿热模型组，每组10只。对各组分别造模（方法详见正文造模部分），造模期间观察大鼠外观、精神状态、食饮量、体重变化等一般情况，测定受试踝关节炎症指数、造模72 h各组大鼠的步态情况、血尿酸、尿液AQP2、血浆HSP70等指标。结果 4组模型尿液AQP2含量具有显著差异；与正常对照组比较，湿热模型组、痛风湿热模型组尿液AQP2明显升高（P < 0.05；P < 0.05）；与痛风模型组对比，湿热模型组、痛风湿热模型组尿液AQP2明显升高（P < 0.05；P < 0.05）。四组模型尿液HSP70含量具有显著差异；与正常对照组比较，湿热模型组、痛风湿热模型组血浆HSP70明显升高（P < 0.05；P < 0.05）；与痛风模型组对比，湿热模型组、痛风湿热模型组血浆HSP70明显升高（P < 0.05；P < 0.05）。结论 通过多因素（饮食+气候环境+致病因子+局部用药+全身用药）复合造模方法可以复制出痛风湿热蕴结证病证结合模型，而且AQP2、HSP70两个指标在判断痛风湿热蕴结证型时有着重要作用，AQP2和HSP70含量变化可作为痛风湿热蕴结证模型建立成功与否的评价参考指标。     

电针"丰隆"穴对高脂血症大鼠NO、ET及CGRP的影响

目的：探讨电针“丰隆”穴对高脂血症大鼠血脂的调节作用及作用机制。方法：将80只Wistar大鼠随机分为正常组（喂基础饲料）、模型组（喂高脂饲料）、电针组（喂高脂饲料＋电针“丰隆”）、西药组（喂高脂饲料＋普伐他汀钠灌胃）。检测各组大鼠治疗前后血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）、内皮素（ET）、一氧化氮（NO）以及降钙素基因相关肽（CGRP）的含量变化。结果：①与正常组比较，模型组大鼠体重、TC、TG、LDL-C、ET水平显著升高（P〈0．01，P〈0．05），HDL-C、NO和CGRP水平明显降低（P〈0．05）。②与模型组比较，西药组、电针组大鼠体重、TC、TG、LDL-C水平明显降低（P〈0．01），NO和CGRP水平显著升高（P〈0．01，P〈0．05）。③与电针组比较，西药组HDL-C水平显著升高（P〈0．01），ET水平降低但两组之间差异没有显著性意义（P〉0．05）。结论：①电针组和西药组均对高脂血症大鼠TC、TG、LDL-C、N0以及CGRP具有较好的良性调节作用，并可在一定程度上降低ET水平。     

黄芎汤对脑出血急性期大鼠血浆内皮素及降钙素基因相关肽的影响

目的探讨黄芎汤对脑出血急性期大鼠血浆中内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)的影响,寻求黄芎汤治疗脑出血急性期的实验依据。方法以放免法测定急性期血浆ET、CGRP含量。结果与正常对照组相比,模型组ET及CGRP含量升高,差异有极显著性(P<0.01)。黄芎汤大剂量组与模型组比较,ET含量明显降低,差异有极显著性(P<0.01);CGRP含量升高,但差异无显著性。结论黄芎汤能降低急性脑出血大鼠血浆中ET的含量,据此及有关ET生物活性的研究可知,黄芎汤能减轻由于脑出血造成的脑血管痉挛,调节脑出血大鼠血管舒缩功能,改善缺血脑组织的供血供氧。     

黄角汤对脑梗塞急性期患者血浆内皮素及降钙素基因相关肽的影响

目的观察黄角汤对脑梗塞急性期患者血浆内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)的影响。方法运用黄角汤治疗脑梗塞急性期患者121例(治疗组),与尼莫地平治疗者37例作比较(对照组),观察治疗前后两组ET、CGRP水平的变化及临床疗效。结果治疗前两组ET水平显著高于正常值,CGRP水平显著低于正常值。经治疗后两组CT、CGRP水平均有改善,以治疗组更为明显;临床疗效以治疗组为佳。结论黄角汤对脑梗塞急性期的疗效优于尼莫地平,其作用机制与改善ET/CGRP平衡失调有关。     

慢性浅表性胃炎脾胃湿热证与胃黏膜水通道蛋白3、4基因表达的相关性研究

目的探讨慢性浅表性胃炎脾胃湿热证不同程度与胃黏膜水通道蛋白3、4（AQP3、AQP4）基因表达的相关性。方法胃镜下取胃体上部黏膜,液氮罐保存,荧光定量PCR法检测胃黏膜AQP3、AQP4的基因表达。结果脾胃湿热中度组、重度组AQP3、AQP4基因表达水平均高于对照组和脾胃湿热轻度组（P〈0．05,P〈0．01）;脾胃湿热重度组AQP3高于脾胃湿热中度组（P〈0．05）。结论脾胃湿热程度不同,胃黏膜AQP3、AQP4基因表达不同,脾胃湿热程度与胃黏膜AQP3、AQP4基因表达相关,它随着湿热程度的加重而增加。