从酵母中分离纯化谷胱甘肽(GSH)的新方法

使用适用于分离纯化还原型谷胱甘肽的005×7强酸型阳离子交换树脂,该树脂是一种适合分离纯化小肽的强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂,通过L9(33)正交实验对渗透法抽提GSH与对羟基苯甲酸丙酯法进行了对比研究。渗透法抽提的最佳条件为:pH3.2,50℃保温4h,其GSH含量为63.49mg/100mL,而对羟基苯甲酸丙酯法的GSH含量仅为46.32mg/100mL。同时将两种抽提液分别用005×7离子交换柱分离纯化,浓缩冷冻干燥,产品经DTNB法测含量,其结果表明,渗透法抽提液经分离后得到的产品中的GSH含量为0.27mg/g,明显高于对羟基苯甲酸丙酯法的0.19mg/g,而且高效液相色谱图显示的峰面积渗透法也大于对羟基苯甲酸丙酯法。     

酱油、食醋等调味品中对羟基苯甲酸丙酯的高效液相色谱分析方法的研究

试验建立了一种测定酱油和食醋中对羟基苯甲酸丙酯含量的高效液相色谱法,以甲醇-乙酸铵溶液为流动相,紫外检测器检测波长为256nm,柱温为35℃。结果表明:对羟基苯甲酸丙酯检测的线性关系良好,线性回归系数为0.9989,检出限为1mg/L,相对标准偏差为0.89%,加标回收率为104%~118%。该方法快速简便,适合于酱油和食醋中对羟基苯甲酸丙酯(PP)的定量测定。     

优化气相色谱法测定酱油中对羟基苯甲酸酯类含量的方法

目的:优化气相色谱法测定酱油中对羟基苯甲酸酯类含量的分析方法。试样先后经饱和氯化钠溶液洗涤,盐酸酸化,无水乙醚提取,碳酸氢钠溶液洗涤后浓缩近干,无水乙醇溶解的条件下以外标法定量,通过5种不同极性的色谱柱与柱温箱温度的系列变化进行测试,最终确定最佳分离柱为Inert Cap 1301,柱温箱的初始温度为90℃。结果:对羟基苯甲酸酯类的加标回收率在91%～103%之间,相对标准偏差在0.6%～0.8%之间,对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯与对羟基苯甲酸丁酯的方法检出限分别为0.528mg/kg、0.497mg/kg、0.473mg/kg与0.440mg/kg。结论:优化仪器分析方法后,测定酱油中对羟基苯甲酸酯类含量的灵敏度明显提高,分析时间明显缩短,加标回收良好,这有利于提高检测分析效率,减小分析时间成本。     

生物炭萃取-高效液相色谱法测定对羟基苯甲酸酯类

目的:建立4种对羟基苯甲酸酯类(甲酯、乙酯、丙酯、丁酯)同时测定的生物炭萃取-高效液相色谱分析方法。方法:样品中的对羟基苯甲酸酯类经生物炭吸附-甲醇脱附,0.45μm有机微孔滤膜过滤后,用高效液相色谱法进行检测。结果:采用外标法测定,4种对羟基苯甲酸酯在0~200μg/mL范围内线性相关系数(r)≥0.997,检出限为0.9μg/mL^2.1μg/mL,加标回收率为87.1%~98.2%,相对标准偏差为2.3%~7.1%。采用本方法对3个厂家的小苏打水进行检测,均检出对羟基苯甲酸甲酯,其含量分别为16.82μg/mL、14.09μg/mL、24.18μg/mL,符合国家标准。结论:本方法适用于饮料中4种对羟基苯甲酸酯类的同时快速测定。     

高压液相色谱法检测酸性乳饮料及酸奶中对羟基苯甲酸酯类

目的 建立酸性乳饮料及酸奶中对羟基苯甲酸甲、乙、丙、丁酯含量的高压液相色谱分析方法。方法 样品去蛋白后, 用甲醇提取, 提取液用高压液相色谱仪进行检测。结果 对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯在 0～10 μg/kg 范围内, 相关系数大于 0.999, 检出限分别为 0.48、0.45、0.47、0.49 mg/kg; 在 1、2、5 mg/kg 3 个加标水平下,样品中对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲 酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯的加标平均回收率分别为 95.59%~104.52%、93.21%~108.05%、 97.75%~107.98%、97.48%~103.67%, 相对标准偏差均小于 10%。结论 本方法适用于乳与乳制品中对羟基苯 甲酸(尼泊金)甲、乙、丙、丁酯含量的测定需要。     

快速气相色谱法测定中药合剂和糖浆中的常见防腐剂

建立一种分离测定药品中6种常见防腐剂(山梨酸、苯甲酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯)简单、准确的快速气相色谱法,采用10 m长,100 μm内径的HP-5熔融石英毛细管柱,在快速程序升温条件下,6种常见防腐剂的分析时间为1.3 min.各组分平均回收率(n=3)为96.45%,最低检测限为1.2～10 μg/mL,线性相关系数大于0.994.     

毛细柱气相色谱法测定食品中对羟基苯甲酸酯类

对羟基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯、丁酯经HP-5毛细柱分离,FID检测,四种酯化物能达到良好分离效果。当标准溶液在0~300μg/mL浓度范围时,标准曲线线性良好,相关系数分别为0.9998、0.9999、0.9998、0.9998;四种酯化物均能达到1.0 mg/kg最低检出限;同时,该法具有良好稳定性,变异系数均小于1.5%;四种酯化物加标回收率为85%~90%。     

毛细管气相色谱法直接测定食品中4种对羟基苯甲酸酯

建立一种毛细管气相色谱法直接测定槟榔、酱腌菜等食品中4种对羟基苯甲酸酯(对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯)含量的检测方法.样品用乙酸乙酯直接提取,不需浓缩,直接进样,用毛细管柱气相色谱法测定.4种对羟基苯甲酸酯在0～500 μg/mL范围内呈良好的线性关系,检出限分别为0.01 mg/kg(S/N=3),添加平均回收率88. 5% ～103.5%,RSD＜10%.方法前处理简单、快速、准确,灵敏度高,选择性好,回收率高,简单快捷, 能满足常规检测及食品安全控制的需要.     

分散液液微萃取-气相色谱法测定复杂食品基质中对羟基苯甲酸酯类

建立复杂食品基质中对羟基苯甲酸酯类及其钠盐的分散液液微萃取(Dispersive Liquid-Liquid Microextraction,DLLME)-气相色谱(Gas Chromatography,GC)检测方法。样品浸泡在水中,经煮沸和超声两个步骤提取目标物质。取4 mL待测液,调节p H后分别加入0.6 g氯化钠,0.3 mL四氯化碳和0.6 mL丙酮,手动和涡旋萃取,离心后取下层有机相分析,外标法定量。该方法在25 mg/kg~1 000 mg/kg范围内线性良好,r2为0.997 2~0.999 0,回收率为95.6%~99.2%,相对标准偏差均小于4.0。对羟基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯和丁酯的定量下限为1.2 mg/kg~3.2 mg/kg。     

气相色谱法及气相色谱-质谱法测定调味品中的对羟基苯甲酸酯

建立了调味品中对羟基苯甲酸乙酯及对羟基苯甲酸丙酯的气相色谱及气相色谱-质谱联用的测定方法。比较了四种不同气相色谱柱的分离效果,最终确定了气相色谱法使用SE-30毛细柱,气质联用法使用DB-5ms毛细柱对提取物进行分析,并对两种结果进行比较。结果表明:运用气相色谱法和气相色谱-质谱联用法测定调味品中的对羟基苯甲酸酯的含量,气相法的回收率在85.9%~94.7%之间,气质法的回收率在84.5%~92.3%之间;两种方法的RSD值均小于10%,方法检出限均在0.001g/kg以下;实际检测中准确度高,重现性好,具有很好的应用效果,是调味品中对羟基苯甲酸酯检测的有效方法。     

乳清分离蛋白纤维和典型抗氧化剂对罗伊氏乳杆菌TMW 1.656在常温贮藏胁迫下存活的影响

为研究新型纳米材料乳清分离蛋白纤维（whey protein isolate fibrils,WPIF）和典型抗氧化剂对益生菌常温贮藏氧胁迫的保护影响,采用乳清分离蛋白（whey protein isolate,WPI）和WPIF为壁材,添加不同质量浓度的典型抗氧化剂表没食子酸儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin gallate,EGCG）和谷胱甘肽（glutathione,GSH）,采用喷雾干燥法制备干态菌粉。结果表明,在常温贮藏期间,益生菌的贮藏稳定性按照WPIF≈WPI>WPI+0.5 mg/mL EGCG>WPI+0.5 mg/mL GSH>WPI+5.0 mg/mL EGCG>WPI+5.0 mg/mL GSH的顺序下降。WPIF保护菌体的效果与WPI相差不大,其原因可能是高温使得纤维发生分解和聚集,从而导致没有发挥纤维优越的效果;抗氧化剂EGCG和GSH在抑菌实验和贮藏实验中都显著加速了益生菌的死亡,且具有质量浓度依赖性,这可能与其本身的抗菌活性或氧化产物的细胞毒性有关。     

骨蛋白酶解物的抗氧化作用

研究了骨胶原蛋白酶解物的总抗氧化能力、羟自由基(·OH)清除作用和抑制超氧阴离子自由基的能力.通过与谷胱甘肽(GSH)的比较发现,溶液质量浓度在100～150 mg/mL时,该骨胶原多肽的总抗氧化能力为GSH的71.92%.溶液质量浓度在2.5～20 mg/mL时,该多肽羟自由基清除作用为谷胱甘肽的1.36倍.溶液质量浓度为10～150 mg/mL时,多肽抑制超氧阴离子自由基的能力低于谷胱甘肽.     

金属螯合亲和层析分离纯化谷胱甘肽(GSH)初探

从啤酒废酵母中分离纯化谷胱甘肽，通过对啤酒废酵母的预处理及细胞的破碎，得到富含谷胱甘肽的酵母抽提液，用自行制备的以壳聚糖为载体，Cu^2 为配基的螯合亲和吸附剂分离纯化谷胱甘肽。试验结果表明，上柱谷胱甘肽抽提液浓度为1．659mg／100mL，上柱pH为3．0时谷胱甘肽回收率可达61．39％。氢氧化钠洗脱浓度为0．25mol／L时，谷胱甘肽洗脱回收率达到65．59％。初步显示出较好的分离纯化效果。     

金华火腿粗肽液的体外抗氧化活性

在金华火腿长期加工过程中,蛋白质在内源酶作用下产生了大量不同长短的肽段.提取金华火腿粗肽液,通过测定不同质量浓度粗肽液清除自由基、螯合金属离子、抑制脂质过氧化和蛋白质氧化的能力,并与相应质量浓度的丁基羟基甲苯(BHT)和谷胱甘肽(GSH)作比较,衡量金华火腿粗肽液的抗氧化能力.结果表明:随着质量浓度的增加,金华火腿粗肽液的抗氧化能力显著增加.在质量浓度为1.5mg/mL时,金华火腿粗肽液清除羟基自由基能力达到90％;质量浓度为5mg/mL时,金华火腿粗肽液清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基能力与BHT和GSH相当,高达95％;金华火腿粗肽液螯合金属离子的能力显著高于BHT和GSH;当质量浓度为4mg/mL时,金华火腿粗肽液具有和BHT和GSH相当的抑制脂质过氧化能力,并能一定程度抑制蛋白质氧化.结论:金华火腿粗肽液的抗氧化能力与BHT与GSH相当.     

产谷胱甘肽面包酵母的选育及发酵条件优化研究

本文以面包酵母BV54为出发菌株,镉盐抗性为筛选标记,经紫外和硫酸二乙酯复合诱变,筛选出一株高镉盐抗性面包酵母菌株BV54-11-11,经摇瓶发酵其谷胱甘肽产量迭98.8 mg/L,胞内含量为15.22 mg/g.借助于SAS软件,用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,再利用Box-Behnken实验设计及响应面分析法进行回...     

Short communication: Combined antimicrobial activity of reuterin and diacetyl against foodborne pathogens

Reuterin (β-hydroxypropionialdehyde) is a broad-spectrum antimicrobial substance produced by some strains of Lactobacillus reuteri during anaerobic fermentation of glycerol. Some of these strains are able to survive and produce reuterin in cheese and yogurt when added as adjuncts to the starter. Similarly, in fermented dairy foods, other inhibitory compounds such as lactic acid and diacetyl are produced during fermentation. In this work, we studied the combined effect of reuterin and diacetyl under different pH conditions against Escherichia coli O157:H7, Salmonella Enteritidis, and Listeria monocytogenes. Results from agar spot assays showed that the antimicrobial activity of reuterin-producing strains against the gram-negative bacteria tested was enhanced as the concentration of diacetyl increased to 50 mg/kg, and was higher under acidic conditions (pH 5.0) for the 3 pathogenic strains. The combination of reuterin and diacetyl had an additive effect against L. monocytogenes only at diacetyl concentrations of 50 mg/kg and pH 5.0. In addition, growth kinetics studies showed that the combination of 1 activity unit (AU)/mL of reuterin with 100 mg/kg diacetyl increased the lag time of the 3 pathogens. In milk, synergistic antimicrobial activity was observed with the combination of 1 AU/mL reuterin and 50 or 100 mg/kg of diacetyl on the gram-negative strains tested, and with 1 AU/mL reuterin and 100 mg/kg of diacetyl on L. monocytogenes. The greatest inhibition of the 3 pathogens was achieved in acidified milk at pH 5.0 with reuterin (1 AU/mL) and diacetyl (100 mg/kg). Based on these results, the combination of reuterin and diacetyl in acidified dairy products could be a promising strategy to control food pathogens in these products.     

紫苏油在乙醇诱导氧化损伤模型小鼠体内的抗氧化作用

探索紫苏油作为抗氧化功能性食品的潜力,研究紫苏油在小鼠体内的抗氧化作用。给昆明小鼠每日灌胃不同剂量的紫苏油,饲养30 d后,除空白对照组外,其他实验组灌胃乙醇造成小鼠氧化损伤模型,并对小鼠肝脏丙二醛（malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）、蛋白质羰基（protein carbonyl,PC）含量和血清超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力进行测定。结果表明：与模型组比较,空白对照组,100、200、400 mg/（kg•d）紫苏油剂量组小鼠肝脏的MDA含量分别降低了46.08%（P＜0.01）、17.28%（P＜0.05）、25.12%（P＜0.05）、48.16%（P＜0.01）;100 mg/（kg•d）紫苏油剂量组小鼠血清的SOD活力极显著增强（P＜0.01）;100、200 mg/（ k g • d）紫苏油剂量组小鼠肝脏的GSH含量极显著升高（P＜0.01）;100 mg/（kg•d）紫苏油剂量组小鼠肝脏的PC含量显著降低（P＜0.05）。因此,紫苏油在乙醇诱导氧化损伤模型小鼠的体内具有抗氧化作用,其通过降低小鼠肝脏内MDA、PC含量,提高GSH含量,升高血清SOD活力发挥作用,其中100 mg/（kg•d）为紫苏油推荐剂量,应进一步对其进行研究。     

茶枝柑皮多糖对H2O2诱导人神经细胞U251的保护作用

本论文研究了茶枝柑皮多糖H2O2诱导人神经细胞U251的保护作用。采用酸提法、经纯化后得到茶枝柑皮多糖。建立人神经细胞U251细胞损伤模型,测定细胞增殖率,采用0.30 mg/mL、0.60 mg/mL、1.25 mg/mL、2.50 mg/mL茶枝柑皮多糖干预,计算细胞存活率,检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)的含量水平。茶枝柑皮多糖CPA-Ⅰ相对分子质量为7.96×10^4,20、50、180、375μmol/L H2O2细胞增殖率分别为91.60%、84.40%、60.00%、37.40%、12.30%与对照组比较,具有统计学差异(p<0.05)。180.0μmol/L H2O2导致人神经细胞U251损伤的最佳浓度。0.30、0.60、1.25、2.50mg/mL茶枝柑皮多糖细胞存活率分别为64.30%、76.10%、93.40%、98.20%与模型组53.00%比较,具有统计学差异(p<0.05)。2.50mg/mL茶枝柑皮多糖对细胞损伤模型干预的效果最明显,抗氧化作用最强。茶枝柑皮多糖对H2O2诱导人神经细胞U251具有一定的保护作用,通过调控SOD、GSH-Px、GSH、MDA水平起到抗氧化作用。     

中国主要水果抑制肝癌HepG2细胞和结肠腺癌Caco-2细胞增殖活性评价

分别采用Folin-Ciocalteu法测定了水果提取物的总酚含量,采用亚甲基蓝法测定了其抗人肝癌细胞Hep G2和人结肠腺癌细胞Caco-2增殖的活性,分析了总酚含量与抗Hep G2和Caco-2细胞增殖活性之间的相关性。结果显示,25种水果中李子的总酚含量最高(1686.08±96.94μmol GAE/100鲜果),西瓜(83.54±2.10μmol GAE/100 g鲜果)和哈密瓜(79.35±0.76μmol GAE/100 g鲜果)的总酚含量最低;在可测出抗增殖EC50值的水果中,李子(18.99±0.06 mg/m L)和番石榴(20.94±0.09 mg/m L)抗Hep G2细胞增殖的活性最强,梨的活性最弱(389.63±10.82 mg/m L)。李子抗Caco-2细胞增殖的活性最强(8.73±0.11 mg/m L),火龙果的活性最弱(388.07±7.04 mg/m L)。水果的抗Hep G2和Caco-2细胞增殖活性与其总酚含量相关性显著(R2=0.4147,p0.01;R2=0.4071,p0.05),该相关性表明水果中的多酚具有良好的抗肿瘤细胞增值的活性。     

紫山药多糖对D-半乳糖衰老模型大鼠肝、脑的影响

目的:探讨紫山药多糖对D-半乳糖所致衰老模型大鼠的抗衰老作用及其作用机理。方法:以D-半乳糖建立大鼠衰老模型,灌胃紫山药多糖(20、100、500 mg/(kg·d))45 d后,检测大鼠肝、脑组织中总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力,检测谷胱甘肽(glutathione,GSH)及过氧化终产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,应用免疫印迹实验评价肝、脑中p53、p21蛋白的表达。结果:100 mg/(kg·d)紫山药多糖可显著提高D-半乳糖衰老模型大鼠肝、脑中T-AOC、GSH-Px活力、GSH含量,降低过氧化产物MDA含量,抑制衰老基因p53、p21的蛋白表达。结论:紫山药多糖具有显著的抗大鼠肝、脑衰老损伤的作用,作用机理可能与p53/p21信号通路有关。