姜黄素对氯化铝染毒的NG108 - 15细胞凋亡及PKC - NMDAR通路表达的影响

目的 探讨姜黄素对氯化铝染毒所致NG108 - 15细胞凋亡的影响及其机制,为铝致学习记忆损伤的治疗提供参考。方法 取对数生长期NG108 - 15细胞,随机分为空白对照组、DMSO组（溶剂对照）、姜黄素组（16 μmol/L姜黄素）、铝组（160 mg/L氯化铝染毒 ）、铝+姜黄素组（160 mg/L氯化铝染毒24 h后,给予16 μmol/L姜黄素处理24 h）。收集各组细胞,采用吖啶橙/嗅化乙锭（AO/EB）双荧光染色观察细胞凋亡形态,计数凋亡细胞数并计算凋亡率;流式细胞术检测细胞凋亡率, qRT - PCR检测细胞中PKC、NMDAR1、NMDAR2B 的mRNA表达水平,western blot检测细胞中凋亡相关蛋白（caspase3、Bax）和PKC、NMDAR1、NMDAR2B的蛋白表达水平。多组间均数的比较采用单因素方差分析（one - way ANOVA）,组间两样本均数的比较采用LSD法。结果 与空白对照组相比,铝染毒组的caspase3、Bax蛋白表达水平升高（t = - 5.547、 - 4.948,P＜0.001）,PKC、NMDAR1、NMDAR2B的mRNA（t = 4.926,P = 0.003;t = 6.330,P＜0.001;t = 4.224,P = 0.019）和蛋白（t = 20.638,P＜0.001;t = 4.509,P＜0.001;t = 17.388,P = 0.002）表达水平降低, AO/EB染色和流式细胞术结果均表明细胞凋亡率升高（t = - 5.153、 - 7.390,P＜0.001）;加入姜黄素处理后,与铝染毒组相比,铝+姜黄素组的caspase3、Bax蛋白表达水平降低（t = 2.930,P = 0.006;t = 4.907,P＜0.001）,PKC、NMDAR1、NMDAR2B 的mRNA（t = - 10.337、 - 6.621、 - 6.847,P＜0.001）和蛋白（t = - 30.551、 - 7.451、 - 26.294,P＜0.001）表达水平升高,AO/EB染色和流式细胞术结果均表明细胞凋亡率降低（t = 2.707,P = 0.01;t = 4.632,P＜0.001）。结论 上调PKC - NMDAR信号通路表达,可能是姜黄素减轻氯化铝染毒所致NG108 - 15细胞凋亡的机制之一。     

雷公藤红素抑制MGC - 823细胞增殖和迁移及诱导凋亡

目的 探索雷公藤红素对MGC - 823细胞的增殖，迁移及诱导凋亡的作用，并探讨其作用机制。方法 0、1、2、4、6、8、12 μM雷公藤红素作用于MGC - 823细胞，采用MTT法检测增殖比率。0、1、2和4 μM雷公藤红素作用于MGC - 823细胞0、24、48和72 h，显微镜下观察细胞形态，采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力，流式细胞术检测细胞凋亡，western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白Bcl - 2、Bax、Akt、p - Akt等的表达水平。结果 经雷公藤红素作用后，MGC - 823细胞的增殖率均下降（P＜0.05）；细胞数量减少，体积缩小，皱缩变圆，部分不再贴壁，细胞核缩小；细胞迁移率减小（P＜0.05）；早期凋亡率增加（P＜0.05）；MGC - 823细胞中Bax表达升高，Bcl - 2和p - Akt表达降低（P＜0.05）。结论 雷公藤红素对MGC - 823细胞的增殖和迁移有抑制作用，并诱导其凋亡。     

高碘对甲状腺损伤调控机理的研究

以高碘水喂养豚鼠180天复制出高碘甲状腺肿模型,应用流式细胞术及免疫荧光染色方法检测高碘对甲状腺细胞凋亡、细胞周期的影响,对Bcl-2,Bax表达的影响及与细胞凋亡的相关性,探讨高碘对甲状腺损伤的调控机理。结果显示：（1）高碘可引起甲状腺细胞周期改变诱导其细胞凋亡的发生。（2）高碘可引起甲状腺bcl-2表达下调,Bax过度及Bcl-2/Bax比值降低（P＜0．01）。（3）高碘所引起的Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值改变与细胞凋亡有明显的相关性（P＜0．05）。结果表明,高碘可能通过引起Bcl-2,Bax表达及Bcl-2/Bax比值的改变而诱导甲状腺细胞过度凋亡,进而对其结构及功能造成损伤。     

内质网蛋白加工通路关键信号分子在镉致胰岛β细胞凋亡过程中的变化研究

目的 观察内质网蛋白加工通路关键信号分子在镉致胰岛β细胞凋亡过程中的变化规律。方法 以4 μmol/L硫酸镉（CdSO4）处理小鼠胰岛素瘤细胞（NIT - 1细胞）,CCK - 8实验检测细胞存活率,Hoechst染色法观察细胞凋亡情况,酶联免疫法测定胰岛素分泌水平;为进一步明确镉致NIT - 1细胞凋亡的机制,我们基于课题组前期的KEGG信号通路分析结果,对富集排在首位的信号通路内质网蛋白加工通路的关键信号分子Bax、Bcl - 2、Xbp1、Chop、Hsp90aa1进行蛋白免疫印记实验验证。结果 在4 μmol/L CdSO4处理之后,细胞凋亡率为37.17%（t = - 9.24,P＜0.05）;细胞分泌的胰岛素浓度为2.84 mIU/L,低于对照组（t = - 3.68,P＜0.05）;蛋白免疫印记实验证实,4 μmol/L CdSO4处理后,Bax、Bcl - 2、Xbp1、Chop、Hsp90aa1蛋白相对表达量分别为对照组的1.82倍（t = - 6.14,P＜0.05）、0.6倍（t = 9.39,P＜0.05）、0.48倍（t = 14.77,P＜0.05）、1.71倍（t = - 5.35,P＜0.05）和1.77倍（t = - 5.70,P＜0.05）,差异均具有统计学意义,且变化趋势与基因芯片筛选结果一致。结论 在镉暴露诱导NIT - 1细胞发生凋亡过程中,内质网蛋白加工通路的关键信号分子Bax、Bcl - 2、Xbp1、Chop、Hsp90aa1水平发生改变。     

萝藦果壳多糖诱导人肺癌A549细胞凋亡的研究

目的 探究萝藦果壳多糖（MJP-1’）诱导人肺癌A549细胞凋亡的作用。方法 采用CCK8法检测萝藦果壳多糖对A549细胞活力的影响;采用比色法检测A549细胞内乳酸脱氢酶的释放量变化情况;通过TUNEL实验探究萝藦果壳多糖对A549细胞凋亡的影响;通过JC - 1荧光探针探究萝藦果壳多糖对A549细胞线粒体膜电位的影响;通过蛋白质分子印迹法探究萝藦果壳多糖作用后A549细胞凋亡相关蛋白表达的变化。结果 CCK8法显示萝藦果壳多糖抑制A549细胞的增殖,并呈剂量依赖趋势（125 μg/ml组:t = 3.092,P = 0.015;250 μg/ml组:t = 3.929,P = 0.004;500 μg/ml组:t = 5.626,P＜0.001;1 000 μg/ml组:t = 7.512,P＜0.001;2 000 μg/ml组:t = 9.677,P＜0.001;4 000 μg/ml组:t = 12.290,P＜0.001;8 000 μg/ml组:t = 16.000,P＜0.001）;比色法显示A549细胞乳酸脱氢酶释放量增加（2 mg/ml组:t = 8.233,P = 0.001;4 mg/ml组:t = 12.640,P＜0.001;8 mg/ml组:t = 27.530,P＜0.001）;TUNEL实验显示萝藦果壳多糖可促进A549细胞凋亡（2 mg/ml组:t = 7.803,P＜0.001;4 mg/ml组:t = 12.460,P＜0.001;8 mg/ml组:t = 39.340,P＜0.001）;JC - 1探针实验结果显示萝藦果壳多糖导致A549细胞线粒体膜电位降低（2 mg/ml组:t = 24.120,P＜0.001;4 mg/ml组:t = 28.530,P＜0.001;8 mg/ml组:t = 31.600,P＜0.001）;蛋白质分子印迹法结果显示萝藦果壳多糖可以下调Bcl - 2蛋白表达（2 mg/ml组:t = 3.790,P = 0.019;4 mg/ml组:t = 6.598,P = 0.003;8 mg/ml组:t = 12.840,P＜0.001）,并使Bax、cleaved - caspase - 3蛋白表达增加（Bax组:2 mg/ml组:t = 17.280,P＜0.001;4 mg/ml组:t = 36.040,P＜0.001;8 mg/ml组:t = 22.520,P＜0.001;cleaved - caspase - 3组:2 mg/ml组:t = 6.487,P = 0.003;4 mg/ml组:t = 9.326,P＜0.001;8 mg/ml组:t = 22.380,P＜0.001）。结论 本研究发现萝藦果壳多糖可以诱导人肺癌A549细胞凋亡,为进一步开发利用萝藦果壳多糖奠定了基础。     

菌灵诱导小鼠睾丸支持细胞凋亡及周期阻滞的研究

目的 观察多菌灵对小鼠睾丸支持细胞系（TM4）周期及凋亡的影响,并探讨其凋亡机制。方法 不同浓度(0.25、0.5、1、2、4、8 μg/ml)的多菌灵体外作用TM4细胞48 h,运用MTT法检测OD值及计算细胞存活率,PI染色法检测TM4细胞周期的分布变化,Annexin V/PI双标识标记法检测TM4细胞的凋亡情况,应用荧光探针DCFH - DA法检测TM4细胞内活性氧（Reactive Oxygen Species,ROS）的相对荧光强度,qRT - PCR法检测TM4细胞内Bax和Bcl - 2 mRNA的表达水平。结果 随着多菌灵浓度的升高,TM4细胞的增殖受到抑制,细胞周期分布发生变化,G2/M期的细胞呈现增加的趋势（P＜0.01）,胞内Bax mRNA和ROS表达水平也逐步升高（P＜0.05,P＜0.01）,而Bcl - 2 mRNA表达则逐步下降（P＜0.01）。结论 多菌灵可诱导TM4细胞凋亡并发生G2/M期阻滞,其作用机制可能与Bax、Bcl - 2 mRNA及ROS的异常表达有关。     

Gadd45β和Gadd45γ在亚砷酸钠所致的MIHA细胞周期改变中的作用

目的 探索Gadd45β和Gadd45γ在亚砷酸钠所致的MIHA细胞周期改变中的作用,为砷中毒的人群防治提供依据。方法 收集贵州省兴仁县雨樟镇交乐病区砷中毒人群以及格沙屯正常人群分别作为砷中毒组和对照组,实时荧光定量PCR检测各组人群Gadd45β和Gadd45γ基因mRNA表达水平。同时,分别以不同剂量亚砷酸钠、不同时间处理MIHA细胞,流式细胞术测定细胞周期改变情况,实时荧光定量PCR和免疫印迹法分别检测Gadd45β和Gadd45γ基因mRNA表达水平和蛋白表达情况。在上述实验基础上,针对Gadd45β和Gadd45γ基因分别设计的siRNA作用于染砷的MIHA细胞,反向验证Gadd45β和Gadd45γ基因在砷致细胞周期改变过程中的影响。统计学分析采用独立样本t检验比较两组间差异,采用单因素方差比较多组间差异。结果 人群实验研究发现,与对照组相比,砷中毒患者Gadd45β和Gadd45γ基因mRNA表达水平升高（t = 2.576,P = 0.011;t = 2.312,P = 0.022）;MIHA细胞中,随亚砷酸钠染毒剂量、染毒时间增加,细胞G2/M期比例明显升高（F剂量 = 340.136,P＜0.001;F时间 = 49.194,P＜0.001）;在相对较低亚砷酸钠浓度（低于20 μmol/L）、一定时间内（低于48 h）Gadd45β和Gadd45γ基因mRNA和蛋白表达水平随染砷剂量、染砷时间升高而升高,超过该浓度范围和作用时间后,出现表达下降的现象（Gadd45β:F剂量-蛋白 = 37.568,P＜0.001;F剂量- mRNA = 9.771,P＜0.001;F时间-蛋白 = 61.144,P＜0.001;F时间- mRNA = 46.366,P = 0.001;Gadd45γ:F剂量-蛋白 = 12.989,P = 0.001;F剂量- mRNA = 23.613,P＜0.001;F时间-蛋白 = 27.425,P＜0.001;F时间- mRNA = 37.969,P＜0.001）。转染siRNA分别下调Gadd45β和Gadd45γ的表达后,细胞周期都出现G2/M期比例下调（t = 3.053,P = 0.038;t = 14.47,P＜0.001）。结论 砷致Gadd45β和Gadd45γ基因表达水平升高在其诱导MIHA细胞出现G2/M期阻滞过程中发挥重要作用。     

Bcl-2和Bax蛋白及基因在铝致神经细胞毒性作用中的表达

目的 通过研究Bcl-2和Bax蛋白及基因在铝致神经细胞毒性作用中的表达,以探讨铝对体外培养大鼠神经元细胞的神经毒性作用.方法 用不同浓度氯化铝体外培养大鼠神经元细胞染毒,用原位缺口末端标记（TUNEL）法和扫描电镜观察检测细胞凋亡,免疫组化法测定Bcl-2和Bax蛋白含量,RT-PCR法测定Bcl-2和Bax基因表达量.结果 （1）TUNEL法检测DNA碎片随染铝剂量的加大而增加,扫描电镜观察到了凋亡细胞典型的出芽现象和细胞裂解及凋亡小体的释放.（2）免疫组化和RT-PCR法检测Bcl-2蛋白含量及基因表达量随染铝剂量的加大而减少（P＜0.01,r=-0.695;P＜0.05,r=-0.647）,反之,Bax蛋白含量及基因表达量随染铝剂量的加大而增加（P＜0.01,r=0.676;P＜0.01,r=0.794）.Bcl-2/Bax与铝的作用剂量有关（P＜0.01,r=-0.655;P＜0.01,r=-0.777）.结论 低剂量铝暴露能够诱导神经元凋亡,Bcl-2和Bax蛋白及基因表达在铝致神经细胞凋亡的过程中发挥了重要的调控作用.     

肾癌Fas和FasL蛋白表达异常对其免疫逃避机制的影响

目的探讨肾癌系统表达异常对其免疫逃避机制的影响。方法采用免疫组化方法分析44例肾癌组织及相邻正常肾组织Fas、FasL表达情况;用TUNEL法检测44例肾癌标本中浸润性T淋巴细胞的凋亡。体外培养786-0肾癌细胞株,流式细胞仪(FCM)分析肾癌细胞株Fas、FasL的表达及肿瘤细胞的凋亡;体外培养Fas+的Jurkat细胞,FCM检测其凋亡情况。结果肾癌细胞Fas表达率为22.8%,显著低于其在正常肾组织中表达率(53.8%,P<0.01)。而FasL表达率(46.5%)显著高于其在相邻正常肾组织在的表达(23.2%)。肾癌组织Fas、FasL表达呈负相关(r=-0.46,P<0.05);肾癌浸润性T淋巴细胞凋亡率(33.1%)与肾癌FasL表达呈正相关(r=0.96,P<0.01)。化疗药物5-Fu能上调肾癌细胞株786-0Fas的表达,并增强肾癌细胞对Fas抗体的细胞毒效应,通过抑制肾癌细胞株786-0FasL表达而降低其攻击JurkatT淋巴细胞的能力。讨论肾癌细胞免疫逃避机制包括两方面:一方面通过Fas低表达,能逃避Fas单克隆抗体介导的凋亡;另一方面通过FasL高表达,具有主动攻击免疫淋巴细胞的能力。临床化疗药物5-Fu就Fas系统而言通过上调Fas、抑制FasL的表达发挥一定的疗效。     

STAT5基因对人膀胱癌细胞顺铂化疗敏感性的影响及作用机制

目的研究STAT5基因高表达及沉默对人膀胱癌细胞系5637和T24顺铂化疗敏感性的影响及分子机制。方法冲击诱导方法构建顺铂耐药细胞株T24-cisplatin和5637-cisplatin,Western bolt法检测STAT5的表达;构建STAT5过表达载体,应用脂质体转染5637和5637-cisplatin细胞,用针对STAT5基因的特异性sh RNA转染T24和T24-cisplatin细胞,MTT法和流式细胞凋亡法检测转染前后膀胱癌细胞顺铂化疗的细胞生存率和凋亡率,及Western blot法检测细胞凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Caspase-3表达。结果顺铂耐药细胞株5637-cisplatin和T24-cisplatin STAT5表达明显高于顺铂敏感株5637和T24(P=0.004;P=0.001),而5637-cisplatin和T24-cisplatin细胞沉默STAT5其化疗敏感性显著升高(P=0.003,P=0.001)。5637细胞过表达STAT5其化疗敏感性显著下降(P=0.021),顺铂化疗的细胞凋亡率明显下降(P=0.002),Bax、Caspase-3表达水平显著降低(P=0.014;P=0.033),Bcl-2表达水平显著升高(P=0.001)。T24细胞STAT5被沉默后其化疗敏感性显著增强(P=0.011),顺铂化疗的细胞凋亡率明显上升(P=0.001),Bax、Caspase-3表达水平显著升高(P=0.001;P=0.007),Bcl-2表达水平显著降低(P=0.020)。结论STAT5表达情况与膀胱癌细胞顺铂化疗敏感性具有相关性,其可能分子机制为调控凋亡基因Bax、Bcl-2、Caspase-3介导细胞顺铂耐药。     

蛋白激酶抑制剂对青石棉诱导肺成纤维细胞的细胞周期调控蛋白表达的影响

目的 探讨青石棉致人胚肺成纤维细胞（ＨＥＰＦ）增殖的细胞周期变化的机制。方法 用流式细胞技术检测青石棉诱导ＨＥＰＦ的细胞周期调控蛋白表达的改变,观察酷氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）和蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的抑制剂对其表达的影响。结果 青石棉可诱导ＨＥＰＦ的Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１、Ｃｙｃｌｉｎ Ｅ、ＰＣＮＡ、Ｃｙｃｌｉｎ Ａ、Ｃｙｃｌｉｎ Ｂ１和Ｐ３４ｃｄｃ２激酶等蛋白的阳性表达率发生改变。在青石棉组,ＰＫＣ抑制剂使表达的阳性率较未加入ＰＫＣ抑制剂组明显降低,对Ｐ３４ｃｄｃ２激酶影响不大（Ｐ〉０．０５）;而ＴＰＫ抑制剂使ＰＣＮＡ表达的阳性率增高;Ｐ３４ｃｄｃ２激酶表达的阳性率降低（Ｐ〈０．０１）。结论 这几种蛋白可能均了青石棉致ＨＥＰＦ增殖,ＰＣＮＡ（和Ｐ３４ｃｄｃ２激酶）表达的改变可能与上游的ＰＫＣ（和ＴＰＫ）信号通路有关。     

姜黄素通过上调miR-637抑制肾癌786-O细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 探讨姜黄素对肾癌786-O细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及其可能的分子机制。方法 体外培养人正常肾小管上皮细胞HK-2和肾癌786-O细胞,将786-O细胞分为对照组、低剂量姜黄素组、中剂量姜黄素组、高剂量姜黄素组、miR-NC组、miR-637组、高剂量姜黄素+anti-miR-NC组、高剂量姜黄素+anti-miR-637组。分别进行实时荧光定量PCR（qRT-PCR）、MTT、Transwell和蛋白质印迹（Western blot）实验来检测各组的miR-637表达量、细胞活力、迁移侵袭能力和相关蛋白表达水平。结果 与人正常肾小管上皮细胞HK-2比较,肾癌786-O细胞中miR-637的表达水平降低（P<0.05）。与对照组比较,中、高剂量姜黄素组786-O细胞的活力、迁移和侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2及MMP-9表达水平均显著降低,p21表达显著升高,miR-637的表达水平均显著升高（均P<0.05）。与miR-NC组比较, miR-637组的miR-637表达水平提高,miR-637组的细胞活力、迁移和侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2和MMP-9表达均显著降低,p21表达升高（均P<0.001）。与高剂量姜黄素+anti-miR-NC组比较,高剂量姜黄素+anti-miR-637组的miR-637表达水平降低,786-O细胞的活力、迁移和侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2和MMP-9表达均升高,p21表达降低（均P<0.05）。结论 姜黄素可能通过上调miR-637发挥肾癌抑制作用。     

Aqueous Extracts of Toona sinensis Leaves Inhibit Renal Carcinoma Cell Growth and Migration Through JAK2/stat3, Akt,MEK/ERK,and mTOR/HIF-2α Pathways

Toona sinensis (TS) is a type of deciduous tree, which is distributed widely in Asia and used as a traditional herb medicine. Previously, we demonstrated that aqueous extracts of TS leaves (TSL-1) induce apoptosis in two clear types of human renal carcinoma cells (ccRCC) via mitochondria-dependent pathway. In this study, we further investigated the more detailed mechanism of TSL-1-induced antitumor effects on ccRCCs. TSL-1 treatment arrested ccRCC cells in G0/G1 phase through the decrease of cyclin D1, cyclin-dependent kinase (CDK)2, and CDK4 as well as induction of p53 and FOXO3a protein expressions. On the other hand, the inhibitory effects of TSL-1 on migration were also observed in 786-O and A-498 cells. Mechanically, we presented that TSL-1 could suppress cell cycle progression and motility via inhibiting the phosphorylation of JAK2/stat3, Akt, MEK/ERK, and mTOR in a concentration- and time-dependent manner. Moreover, we found that TSL-1 inhibited p21, HIF-2α, c-Myc, VEGF, and MMP9 protein expressions in both cell lines. In conclusion, these findings suggested that TS-induced apoptosis and its antimigration activity in ccRCC cells were accompanied by inactivation of several oncogenic pathways.     

蜈蚣提取液体外抗肝癌Bel-7404细胞作用机制的研究

目的研究蜈蚣提取液（ECP）对肝癌Bel-7404细胞株的作用机制。方法采用不同浓度ECP作用于体外培养的肝癌细胞Bel-7404，流式细胞仪检测治疗组与对照组的细胞周期及其凋亡率；免疫组化法检测两组细胞内凋亡相关基因X染色体连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）及Bax的表达情况。结果ECP在不同浓度下，Bel-7404细胞内G0／G1期所占的比例、细胞增殖指数（PI）和细胞凋亡率是不同的，且差异有统计学意义（P〈0．05）。在相同浓度组下，24h的细胞凋亡率明显低于48h的，差异有统计学意义（P〈0．01）；随ECP浓度加大，XIAP在Bel-7404细胞中表达逐步减少，Bax表达逐步增多。结论ECP作用Bel-7404细胞的G1／G0期，抑制其增殖。通过上调Bax和抑制XIAP的表达，诱导并促进肝癌细胞凋亡，其作用呈剂量和时间依赖效应。     

Trans-10,cis-12, not cis-9,trans-11, conjugated linoleic acid inhibits G1-S progression in HT-29 human colon cancer cells

Commercial preparations of conjugated linoleic acid (CLA) contain both positional and geometric isomers of octadecadienoic acid, with cis-9,trans-11 CLA (c9t11) and trans-10,cis-12 CLA (t10c12) as the principal isomers. We showed previously that CLA reduced the incidence of colon tumors in rats treated with 1,2-dimethylhydrazine. In addition, our previous in vitro studies showed that t10c12 inhibited the growth of HT-29 and Caco-2 human colon cancer cells, whereas c9t11 had no effect on cell growth. In the present study, to examine the effects of the CLA isomers on cell cycle and cell cycle regulatory proteins, we treated HT-29 cells with various concentrations (0-4 micromol/L) of the individual CLA isomers. A DNA flow cytometric analysis revealed that t10c12 induced a G1 arrest, whereas c9t11 had no effect on the cell cycle. Western blot analysis of total cell lysates revealed no alteration in the protein expression of cyclin A, cyclin D, cyclin E, cyclin-dependent kinase (CDK) 2, or CDK4 due to t10c12 treatment. However, t10c12 substantially increased the protein expression and mRNA accumulation of the CDK inhibitor p21(CIP1/WAF1). The t10c12 isomer increased the association of p21(CIP1/WAF1) with CDK2 and proliferating cell nuclear antigen, but decreased the levels of phosphorylated retinoblastoma protein (Rb), with an increase in the levels of hypophosphorylated Rb protein. An in vitro kinase assay using histone H1 as a substrate showed that the activities of CDK2 were significantly decreased by t10c12. These results indicate that t10c12 exerts its growth inhibitory effects in colon cancer cells through the induction of G1 cell cycle arrest. The induction of p21(CIP1/WAF1) may be one of the mechanisms by which t10c12 inhibits cell cycle progression in HT-29 cells.     

无机砷暴露对人脐带间充质干细胞的增殖及分化的影响

目的 探究无机砷(iAs)暴露对人脐带间充质干细胞的增殖及分化的影响,为iAs的发育毒性研究提供实验依据。方法 以具有多向分化潜能的人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)为细胞模型,用不同浓度的亚砷酸盐(NaAsO₂)染毒hUCMSCs 24 h,检测细胞活力;用5μmol/L的NaAsO₂染毒hUCMSCs 24 h,做细胞生长情况检测、多能性标志蛋白CD45、CD105及多能性标志基因Oct4、Nanog的检测,彗星实验检测DNA损伤情况、细胞分化实验检测;染毒后hUCMSCs的向成脂、成骨和成软骨分化及其特异性基因PPARγ、ALP、COMP表达量的检测。采用独立样本t检验进行两组间均数差异的比较,采用单因素方差分析进行多组间均数的比较。结果 随着NaAsO₂浓度的升高,hUCMSCs存活率逐渐降低(F=13.650,P<0.001);5μmol/L的NaAsO₂染毒hUCMSCs,对其细胞增殖的没有显著影响(t=0.507,P=0.615);多能性标志蛋白CD45、CD105仍有表达,多...